Name: virwatest, a point-of-use method for the detection of viruses in water samples
Uploaded: 2019-05-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about VirWaTest, A Point-of-Use Method for the Detection of Viruses in Water Samples at JoVE.com

كان VirWaTest مشروع بحثي ممول من برنامج صناديق الابتكار الإنساني التابع لـ ELHRA (تعزيز التعلم والبحث من أجل المساعدة الإنسانية). ويعترف المؤلفون بأفرقة المياه والصرف الصحي والنظافة الصحية التي تكرمت بالتعاون في هذه الدراسة. ومولت تحليل العينات في إكوادور منظمة أوكسفام في إكوادور وإدارة بحوث جامعة الأمريكتين. BRT.17.01. S. Bofill-Mas هو زميل سيرا هنتر في جامعة برشلونة.

1. إعداد والتعبئة والتغليف
ملاحظة: ترد في الجدول 1المواد/المعدات التي يتعين تعبئتها. استخدام القفازات للتعامل مع الكواشف اللازمة للسيطرة على العملية، والكواشف التركيز، الكواشف استخراج الحمض النووي والكواشف الكشف. ارتداء نظارات واقية للتعامل مع الكواشف اللازمة لاس...

<ol>
	<li>The Sphere Project. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Sphere Project: Humanitarian Charter and Minimum Standards in Humanitarian Response. , (2011).</li><li>Bartram, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Water Safety Plan Manual:Step-by-step risk management for drinking-water suppliers. , (2009).</li><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidelines for Drinking-water Quality. , (2011).</li><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 25 Years Progress on Sanitation and Drinking Water. , (2015).</li><li>Girones, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+detection+of+pathogens+in+water+-+The+pros+and+cons+of+molecular+techniques.">Molecular detection of pathogens in water - The pros and cons of molecular techniques.</a> Water Research. 44 (15), 4325-4339 (2010).</li><li>Rodriguez-Manzano, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+and+new+fecal+indicators+and+pathogens+in+sewage+treatment+plants,+microbiological+parameters+for+improving+the+control+of+reclaimed+water.">Standard and new fecal indicators and pathogens in sewage treatment plants, microbiological parameters for improving the control of reclaimed water.</a> Water Science and Technology. 66 (12), 2517-2523 (2012).</li><li>Puig, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+adenoviruses+and+enteroviruses+in+polluted+waters+by+nested+PCR+amplification.">Detection of adenoviruses and enteroviruses in polluted waters by nested PCR amplification.</a> Applied and Environmental Microbiology. 60 (8), 2963-2970 (1994).</li><li>Carter, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enterically+infecting+viruses:+Pathogenicity,+transmission+and+significance+for+food+and+waterborne+infection.">Enterically infecting viruses: Pathogenicity, transmission and significance for food and waterborne infection.</a> Journal of Applied Microbiology. 98 (6), 1354-1380 (2005).</li><li>Bofill-Mas, S., Pina, S., Girones, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Documenting+the+epidemiologic+patterns+of+polyomaviruses+in+human+populations+by+studying+their+presence+in+urban+sewage.">Documenting the epidemiologic patterns of polyomaviruses in human populations by studying their presence in urban sewage.</a> Applied and Environmental Microbiology. 66 (1), 238-245 (2000).</li><li>Bofill-Mas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+and+stability+of+human+adenoviruses+and+polyomavirus+JCPyV+in+wastewater+matrices.">Quantification and stability of human adenoviruses and polyomavirus JCPyV in wastewater matrices.</a> Applied and Environmental Microbiology. 72 (12), 7894-7896 (2006).</li><li>Rames, E., Roiko, A., Stratton, H., Macdonald, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+aspects+of+using+human+adenovirus+as+a+viral+water+quality+indicator.">Technical aspects of using human adenovirus as a viral water quality indicator.</a> Water Research. 96, 308-326 (2016).</li><li>Calgua, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+application+of+a+one-step+low+cost+procedure+to+concentrate+viruses+from+seawater+samples.">Development and application of a one-step low cost procedure to concentrate viruses from seawater samples.</a> Journal of Virological Methods. 153 (2), 79-83 (2008).</li><li>Bofill-Mas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost-effective+method+for+microbial+source+tracking+using+specific+human+and+animal+viruses.">Cost-effective method for microbial source tracking using specific human and animal viruses.</a> Journal of Visualized Experiments. 58, 5-9 (2011).</li><li>International Organization for Standardization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ISO 10705-1:1995: Water quality - Detection and enumeration of bacteriophages - Part 1: Enumeration of F-specific RNA bacteriophages. , (1995).</li><li>Hernroth, B. E., Conden-Hansson, A. C., Rehnstam-Holm, A. S., Girones, R., Allard, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+factors+influencing+human+viral+pathogens+and+their+potential+indicator+organisms+in+the+blue+mussel,+Mytilus+edulis:+the+first+Scandinavian+report.">Environmental factors influencing human viral pathogens and their potential indicator organisms in the blue mussel, Mytilus edulis: the first Scandinavian report.</a> Applied and Environmental Microbiology. 68 (9), 4523-4533 (2002).</li><li>Pecson, B. M., Martin, L. V., Kohn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+PCR+for+determining+the+infectivity+of+bacteriophage+MS2+upon+inactivation+by+heat,+UV-B+radiation,+and+singlet+oxygen:+Advantages+and+limitations+of+an+enzymatic+treatment+to+reduce+false-positive+results.">Quantitative PCR for determining the infectivity of bacteriophage MS2 upon inactivation by heat, UV-B radiation, and singlet oxygen: Advantages and limitations of an enzymatic treatment to reduce false-positive results.</a> Applied and Environmental Microbiology. 75 (17), 5544-5554 (2009).</li><li>Calgua, B., Barardi, C. R. M., Bofill-Mas, S., Rodriguez-Manzano, J., Girones, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantitation+of+infectious+human+adenoviruses+and+JC+polyomaviruses+in+water+by+immunofluorescence+assay.">Detection and quantitation of infectious human adenoviruses and JC polyomaviruses in water by immunofluorescence assay.</a> Journal of Virological Methods. 171 (1), 1-7 (2011).</li><li>Bofill-Mas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost-effective+method+for+microbial+source+tracking+using+specific+human+and+animal+viruses.">Cost-effective method for microbial source tracking using specific human and animal viruses.</a> Journal of Visualized Experiments. (58), e2820 (2011).</li><li>Gonzales-Gustavson, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+efficiency+and+uncertainty+of+skimmed+milk+flocculation+for+the+simultaneous+concentration+and+quantification+of+water-borne+viruses,+bacteria+and+protozoa.">Characterization of the efficiency and uncertainty of skimmed milk flocculation for the simultaneous concentration and quantification of water-borne viruses, bacteria and protozoa.</a> Journal of Microbiological Methods. 134, 46-53 (2017).</li></ol>

طريقة VirWaTest تمكن من تركيز الفيروسات واستخراج الحمض النووي من عينات المياه في نقطة الاستخدام من قبل المستخدمين غير ذوي الخبرة. وهو بروتوكول بأسعار معقولة وسريعة وبسيطة. ويستند التركيز على مبدأ التفلح العضوي باستخدام الحليب منزوع الدسم، والتي من خلالها انخفاض درجة الحموضة وظروف الموصلية ا...

وخلال المراحل الأولى من أي حالة طوارئ إنسانية، فإن الحصول على إمدادات المياه النظيفة والمرافق الصحية والنظافة الصحية أمر بالغ الأهمية لبقاء المتضررين. ولذلك، فإن رصد نوعية المياه يمثل أولوية لمنع تفشي الأمراض المنقولة بالمياه. ومن المعروف جيدا أن المياه الملوثة هي في كثير من الأحيان أصل الأمراض، ولكن من الصعب في كثير من الأحيان تحديد مصادر الفاشيات الفيروسية مثل فيروس التهاب الكبد E (HEV)، حتى مع توافر الأساليب المختبرية التقليدية. ويستند التحكم في نوعية المياه على القياسالكمي لFIB 1،2،3،4. ومع ذلك، فقد تم توثيق على نطاق واسع أنه لا يوجد ارتباط بين عدم وجود FIB ووجود مسببات الأمراض الفيروسية المنقولة بالمياه مثل فيروس الروتا (RoV)، نوروفيروس (NoV)، أو HEV5،6. وبالتالي، فإن استخدام معايير نوعية المياه استناداً إلى FIB قد يؤدي إلى التقليل من تقدير المخاطر المرتبطة بوجود مسببات الأمراض الفيروسية المنقولة بالمياه. مراقبة فيروسات المؤشر، مثل الفيروسات الغدية البشرية (HAdV)، أو مسببات الأمراض المحددة ستكون مفيدة في تحديد التعرض للأمراض الفيروسية وتحديد المصدر المحتمل للعدوى البشرية7،8، 9و10 وفي التحقق من فعالية تدابير الصرف الصحي11.
وحتى الآن، كان الكشف عن الفيروسات في هذه السيناريوهات يعتمد على موظفين مهرة ولوجستيات معقدة. يهدف VirWaTest (virwatest.org) إلى تطوير طريقة بسيطة وميسورة التكلفة ومحمولة لتركيز الفيروسات من عينات المياه والكشف عنها لاحقاً عند نقطة الاستخدام.
ويستند تركيز الفيروس على مبدأ التذليل العضوي لعينات المياه 10 لتر، والتي يتم من خلالها استرداد الفيروسات في أحجام أصغر12،13. يتم جمع flocs وإضافتها إلى المخزن المؤقت الذي يتحلل الفيروسات ويمنع الأحماض النووية من التدهور عند تخزينها في درجة حرارة الغرفة لمدة لا تزيد عن 2 أسابيع.
ويستند أسلوب استخراج الأحماض النووية على استخدام الجسيمات المغناطيسية التي تحصل على الأحماض النووية الناضسة. ويمكن نقلها من مخزن للغسيل إلى آخر وأخيرا إلى المخزن المؤقت elution باستخدام ماصة المغناطيسية التي تعلق الجسيمات. يمكن شحن تعليق الأحماض النووية الفيروسية التي تم الحصول عليها إلى مختبر مرجعي حيث يمكن إجراء الكشف باستخدام الطرق الجزيئية على أساس PCR. لكل استخراج الحمض النووي، يتم اختبار اثنين من كميات مختلفة لاستبعاد تثبيط الأنزيمية التي نشأت من قبل العينة. وبدلاً من ذلك، مع الحد الأدنى من توافر المعدات، يمكن إجراء اختبارات PCR عند نقطة الاستخدام. تم تصميم العملية برمتها ليتم تنفيذها بشكلمستقل عن إمدادات الطاقة (الشكل 1).
وقد تم تكييف فحص كمية لـ PCR للكشف عن HAdV، الذي يفرزه البشر والموجود في عينات مياه الصرف الصحي بتركيزات عالية، ليتم تشغيله عند نقطة الاستخدام. يتم استخدام HAdV كمؤشرات فيروسية البراز البشري. كما تم تكييف PCR للقياس الكمي للبكتيريا MS2 منذ استخدام MS2 في VirWaTest كمراقبة العملية. يمكن تخصيص الأسلوب للكشف عن أي فيروس ذي أهمية.
وبعد التطوير، طبق المستعملون طريقة VirWaTest في مكانين مختلفين في جمهورية أفريقيا الوسطى وإكوادور، مما يوفر تغذية مرتدة بشأن تطبيق البروتوكول في حالات حقيقية.
على حد علمنا، هذا هو الإجراء الأول الذي يسمح بتركيز وكشف الفيروسات في نقطة الاستخدام، بغض النظر عن أي إمدادات الطاقة، والمعدات الكبيرة، وظروف التجميد / التبريد. من المستحسن جمع نسختين من كل عينة من عينات المياه من أجل الحصول على نتائج قوية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1677px;" width="1677">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">5x HOT FIREPol Probe qPCR Mix Plus (ROX)</td>
			<td style="width:195px;">Solis BioDyne</td>
			<td style="width:123px;">08-14-00001</td>
			<td style="width:989px;">Includes Solis Biodyne&#39;s 5x HOT FIREPol Probe qPCR Mix Plus (qPCR Mix), 50 Reactions</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">8-Microtube Strips with Caps</td>
			<td style="width:195px;">dD Biolab</td>
			<td style="width:123px;">840637</td>
			<td>Low Profile, Thin Walls, Adapted for Quantitative and Qualitative PCR</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Aquagenx CBT E. coli Kit</td>
			<td style="width:195px;">Aquagenx, LLC</td>
			<td style="width:123px;">ECCBT10</td>
			<td>10 Tests per Kit</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Batteries and Power Adapters for Magnetic Stirrer</td>
			<td style="width:195px;">GenIUL</td>
			<td style="width:123px;">900011674</td>
			<td>Includes 12V car power adapter</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Bucket Support</td>
			<td style="width:195px;">GenIUL</td>
			<td style="width:123px;">900011648</td>
			<td>Aluminium support</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Bucket, 10 L</td>
			<td style="width:195px;">Cater4You</td>
			<td style="width:123px;">10LTR</td>
			<td>Polypropilene, Tamperproof, Clear color</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Centrifuge Tube, 50 mL</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">CTSP-E50-050</td>
			<td>Polypropylene, Sterile, Graduated, With Skirt</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Citric Acid 1-Hydrate, 500 g</td>
			<td style="width:195px;">PanReac AppliChem</td>
			<td style="width:123px;">1410181211</td>
			<td>Pure, Pharma Grade, 1 Kilogram</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Clear PET Bottle</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">FPET-500-088</td>
			<td style="width:989px;">Clear Color, PET, Cap Not Included</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Difco Skim Milk, 500 g</td>
			<td style="width:195px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:123px;">232100</td>
			<td>Dehydrated</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">DNA/RNA Shield, 250 mL</td>
			<td style="width:195px;">Zymo Research</td>
			<td style="width:123px;">R1100-250</td>
			<td>DNA/RNA Preservation Medium, 250 mL</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Easy9 Pipette Controller</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">EAS9-001-001</td>
			<td>0.3 &#956;m filter, Pipettes from 0.1 to 100 mL, Autoclavable silicone pipette holder</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Eppendorf Tube, 0.5 mL</td>
			<td style="width:195px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:123px;">0030121023</td>
			<td>Polypropilene, Safe-Lock</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Eppendorf Tube, 2 mL</td>
			<td style="width:195px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:123px;">0030120094</td>
			<td>Polypropilene, Safe-Lock</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Eppendorf Tube, 5 mL</td>
			<td style="width:195px;">dD Biolab</td>
			<td style="width:123px;">999542</td>
			<td>Polypropylene, Sterile, Graduated</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Ethanol 96% V/V, 1 L</td>
			<td style="width:195px;">Panreac AppliChem</td>
			<td style="width:123px;">361085-1611</td>
			<td>For UV, IR&#160; and HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Laboratory Tweezers</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">FORS-007-002</td>
			<td>Thin, Curved End, L= 120 mm</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Magnetic Stirrer</td>
			<td style="width:195px;">GenIUL</td>
			<td style="width:123px;">900017000</td>
			<td>Battery-powered</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Marker</td>
			<td style="width:195px;">dD Biolab</td>
			<td style="width:123px;">929203</td>
			<td style="width:989px;">Black, Extra fine Tip, Water Resistant, Fast Drying, For Plastic and Glassware</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Micro Rota-Rack for Microtubes</td>
			<td style="width:195px;">dD Biolab</td>
			<td style="width:123px;">37782</td>
			<td>4 Modules, L x W x H= 208 x 100 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Mini8 Real-Time PCR Cycler</td>
			<td style="width:195px;">Coyote Biosciences, China</td>
			<td style="width:123px;">Mini-8</td>
			<td>Portable, Works with 12V Power Supplies or External Batteries, Two channels, Capacity for 8 Tubes</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">NucliSens Lysis Buffer</td>
			<td style="width:195px;">Biomerieux</td>
			<td style="width:123px;">200292</td>
			<td>Reagents for up to 48 Isolations, Store at Ambient Temperature</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Open Tip Serological Pipette, 10 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">900136N</td>
			<td>Sterile, Individually Wrapped (Paper/Plastic)</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">PE Screw Cap PP28</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">TP28-004-020</td>
			<td style="width:989px;">For PET Bottles</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">pH Indicator Strip</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">WSPH-001-001</td>
			<td>Range pH 2.8 to pH 4.4, 50 Strips per Pack</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Plastic Test Tube</td>
			<td style="width:195px;">Quimikals</td>
			<td style="width:123px;">300913</td>
			<td>Includes Cap</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Polyethylene Pasteur Pipette</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">PIPP-003-500</td>
			<td>Graduated, 7 mL Overall Volume, Non-Sterile</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Polypropylene Screw Flask With Screw Cap, 150 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">409726</td>
			<td>Screw cap, Sterile, graduated up to 100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Polypropylene Screw Flask With Screw Cap, 60 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">409526G</td>
			<td>Screw cap, Sterile, Graduated up to 50 mL</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Powder Powder Detergent</td>
			<td style="width:195px;">-</td>
			<td style="width:123px;">-</td>
			<td>Regular Powder Soap for washing clothes</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Power Cables for Magnetic Stirrer</td>
			<td style="width:195px;">GenIUL</td>
			<td style="width:123px;">900011692</td>
			<td>Connection between batteries and magnetic stirrers</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">QuickPick Magnetic Tool</td>
			<td style="width:195px;">BioNobile</td>
			<td style="width:123px;">24001</td>
			<td>Hand-held tool for magnetic particles</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">QuickPick Tips in Box</td>
			<td style="width:195px;">BioNobile</td>
			<td style="width:123px;">24296</td>
			<td>RNase-Free, Autoclaved, 96 Units</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">QuickPick XL gDNA Magnetic Particles</td>
			<td style="width:195px;">BioNobile</td>
			<td style="width:123px;">SN51100</td>
			<td>3.2 mL</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Sea Salts</td>
			<td style="width:195px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">S9883-500G</td>
			<td>An artificial salt mixture closely resembling the composition of the dissolved salts of ocean water</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Silicone Tubing</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">SILT-006-005</td>
			<td>Roll of 5 Meters, Inner&#160; &#248; x Outer&#160; &#248;= 6 x 10 mm</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Sodium Hydroxide Pellets, 98.5 - 100.5%</td>
			<td style="width:195px;">VWR Chemicals</td>
			<td style="width:123px;">28244295</td>
			<td>Pellets, 1 Kg</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Solar Rotary Platform</td>
			<td style="width:195px;">SOL-EXPERT Group</td>
			<td style="width:123px;">70020</td>
			<td>Acrylic Plate, 10 RPM, Supports up to 300 Grams</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">SOLIScript 1-step Probe Kit</td>
			<td style="width:195px;">Solis BioDyne</td>
			<td style="width:123px;">08-57-00250</td>
			<td>Includes Solis Biodyne&#39;s 5x One-Step Probe Mix (qPCR Mix) and 40x One-Step SOLIScript Mix (Reverse Transcriptase Enzyme), 250 Reactions</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">SPEEDTOOLS RNA Virus Extraction Kit</td>
			<td style="width:195px;">BioTools</td>
			<td style="width:123px;">21.141-4197</td>
			<td>Includes BioTools&#39;s BAW Buffer (Washing Buffer 1), BAV3 Buffer (Washing Buffer 2 and 3) and BRE Buffer (Elution Buffer).</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">SpinBar Octhaedral Stirring Magnet</td>
			<td style="width:195px;">dD Biolab</td>
			<td style="width:123px;">045926</td>
			<td>Pivot Ring, L x&#160; &#248; = 38 x 8 mm, Blue</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Tape-End Serological Pipette, 10 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">PN10E1</td>
			<td>Sterile, Individually Wrapped (Paper/Plastic)</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Tape-End Serological Pipette, 50 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">900043</td>
			<td>Sterile, Individually Wrapped (Paper/Plastic)</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Termi-DNA-Tor - Nucleic Acid Remover</td>
			<td style="width:195px;">BioTools</td>
			<td style="width:123px;">22001-4291</td>
			<td>Remover of nucleic acids, bacteria, fungi and mycoplasma from material and surfaces, 450 mL</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Water Molecular Biology Reagent, 1L</td>
			<td style="width:195px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">W4502-1L</td>
			<td>Nuclease and Protease Free, 0.1 &#956;m Filtered</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Whirl-Pak Bag, 540 mL</td>
			<td style="width:195px;">Deltalab</td>
			<td style="width:123px;">200361</td>
			<td>Stable bottom</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:371px;">Zip Lock Plain Bag</td>
			<td style="width:195px;">LabBox</td>
			<td style="width:123px;">BZIP-080-100</td>
			<td>Polyethylene, L x W= 120 x 80 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

virwatest, a point-of-use method for the detection of viruses in water samples

وقد تلوث الفيروسات التي يفرزها البشر والحيوانات مصادر المياه وتشكل خطرا على صحة الإنسان عندما تستخدم هذه المياه للشرب والري الغذائي والغسيل وما إلى ذلك. مؤشر البكتيريا البرازية الكلاسيكية لا يتحقق دائما من وجود مسببات الأمراض الفيروسية وبالتالي فإن الكشف عن مسببات الأمراض الفيروسية والمؤشرات الفيروسية هو ذات الصلة من أجل اعتماد تدابير التخفيف من المخاطر، وخاصة في السيناريوهات الإنسانية وفي المناطق حيث الفاشيات الفيروسية المنقولة بالمياه متكررة.
وفي الوقت الحاضر، تتوفر عدة اختبارات تجارية تسمح بالقياس الكمي لبكتيريا مؤشرات البراز (FIB) للاختبار عند نقطة الاستخدام. غير أن هذه الاختبارات التجارية غير متاحة للكشف عن الفيروسات. يتطلب الكشف عن الفيروسات في عينات المياه البيئية تركيز عدة لترات في أحجام أصغر. وعلاوة على ذلك، فإن الكشف عن الفيروسات، بمجرد تمركزه، يعتمد على أساليب مثل استخراج الأحماض النووية والكشف الجزيئي (مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل ( اختبار مضاد للفيروسات الكلى) للجينوم الفيروسي.
الطريقة الموصوفة هنا تسمح بتركيز الفيروسات من عينات المياه 10 L، فضلا عن استخراج الأحماض النووية الفيروسية في نقطة الاستخدام، مع معدات بسيطة ومحمولة. ويسمح ذلك باختبار عينات المياه عند نقطة الاستخدام لعدة فيروسات وهو مفيد في السيناريوهات الإنسانية، وكذلك في أي سياق لا يتوفر فيه مختبر مجهز. وبدلاً من ذلك، تسمح هذه الطريقة بتركيز الفيروسات الموجودة في عينات المياه وشحن المركز إلى مختبر في درجة حرارة الغرفة لمزيد من التحليل.

تطوير الأسلوب
وقد تم تطوير هذا الإجراء في مختبر الفيروسات الملوثة من المياه والغذاء بالتعاون مع GenIUL وأوكسفام Intermón. وهو يتألف من ثلاث خطوات مختلفة. أول واحد، تركيز الجسيمات الفيروسية، هو التكيف مع طريقة حليب منزوع الدسم flocculation و...

Watch this Scientific Journal Video about VirWaTest, A Point-of-Use Method for the Detection of Viruses in Water Samples at JoVE.com

VirWaTest, A Point-of-Use Method for the Detection of Viruses in Water Samples

هنا نقدم VirWaTest، وهو طريقة بسيطة وبأسعار معقولة والمحمولة لتركيز وكشف الفيروسات من عينات المياه في نقطة الاستخدام.

VirWaTest، طريقة نقطة الاستخدام للكشف عن الفيروسات في عينات المياه

Viruses excreted by humans and animals may contaminate water sources and pose a risk to human health when this water is used for drinking, food ...

توجد الفيروسات المعوية في الغالب في الخزانات المائية المختلفة، بما في ذلك المياه الجوفية والمياه الثابتة والجداول والأنهار ومياه الينابيع. وهي ترتبط بالمخاطر الصحية وهي مسؤولة عن العدوى في البشر. الفيروسات المعوية عادة ما تسبب التهاب المعدة والأمعاء وتنتقل في الغالب عن طريق البراز عن طريق الفم.وتتسبب الأمراض الأخرى المنقولة بالمياه في التهاب الكبد الحاد بفيروس التهاب الكبد A وفيروسات التهاب الكبد E، مع نسبة وفيات كبيرة مرتبطة به، خاصة فيما يتعلق بالتهاب الكبد E لدى النساء الحوامل. وقد تم تصميم البروتوكولات الفعلية لمراقبة جودة المياه المقترحة للسياقات الإنسانية للحفاظ على البكتيريا مثل كولاي كمؤشر على تلوث البراز. ولكن من المعروف بالفعل أنه لا يوجد ارتباط مع الكائنات الحية الدقيقة الأخرى مثل الفيروسات التي تكون أكثر مقاومة للعديد من عمليات التنشيط.وحتى الآن، تم الكشف عن الفيروسات في حالات الأزمات الإنسانية عن طريق تكييف البروتوكولات القائمة مع ظروف تلك السياقات، وشحن عينات إلى المختبرات المرجعية للكشف الجزيئي عن الفيروسات. وهناك حاجة إلى أساليب للكشف عن مسببات الأمراض الفيروسية والمؤشرات الفيروسية في وجهات النظر للحد من مخاطر الصحة العامة، ومنع تفشي الأمراض وزيادة كفاءة التدخلات الإنسانية. نقترح طريقة للكشف عن الفيروسات في 10 لتر عينات المياه التي تنقسم إلى ثلاث خطوات: تركيز الفيروسية, استخراج الحمض النووي, والكشف الفيروسية.وقد تم تكييف جميع هذه الخطوات من الأساليب المستخدمة حاليا في مختبرنا، ويمكن تنفيذها في نقطة من وجهات النظر باستخدام الكواشف والمعدات المحمولة، وإنتاج المعالين من إمدادات الطاقة والمجمدات. كما أضيف إلى الطريقة محلول حافظ لضمان ثبات الأحماض النووية للشحن إلى المختبرات المرجعية إذا لزم الأمر. وتسمى الطريقة التي نقترحها VirWaTest وقد تم تطويرها بالتعاون مع GenIUL وIntermon Oxfam.قبل البدء، ينبغي النظر في عدد العينات التي سيتم اختبارها لإعداد الكواشف والمواد. ويوصى بجمع نسختين متماثلتين لكل عينة مياه من أجل الحصول على نتائج تمثيلية. يمكن اختبار عدة عينات في نفس الوقت إذا كان المبلغ المناسب من المواد المتاحة.يجب إعداد الكواشف والمواد وتعبئته قبل نقلها أو شحنها إلى المكان الذي تحتاج إليه الطريقة. ويرد في الجدول الأول وصف قائمة المواد والمعدات الصغيرة التي ينبغي تعبئتها. إعداد bacteriophage MS2 الأسهم التي تضاف إلى كل عينة المياه كتحكم عملية باتباع أسلوب ISO المقابلة.ثم توزيع 10 ميكرولترات من تعليق تحتوي على 10 إلى 10 وحدات platforming قبل صنعها في أنابيب 10 مل والسماح للماء الجاف. وسوف تكون هناك حاجة إلى أنبوب واحد لعينة المياه. بالإضافة إلى ذلك، قم بإعداد أنبوب واحد يحتوي على 10 mLs من الماء المقطر المعقم لكل عينة تم جمعها.بالنسبة لمحلول الحليب منزوع الدسم مسبقًا ، قم بإعداد أنبوب يحتوي على الحليب منزوع الدسم ، وكيس بلاستيكي سستة يحتوي على ملح البحر ، وزجاجة بلاستيكية تحتوي على الماء المقطر. لتعديل درجة الحموضة، قم بإعداد أنبوب يحتوي على حمض الستريك، وأنبوب يحتوي على هيدروكسيد الصوديوم، وحاويات بلاستيكية 25 و50 م. لكل عينة مياه ليتم اختبارها ، قم بإعداد كيس تكييف عن طريق إضافة أملاح البحر وحمض الستريك إلى كيس بلاستيكي سستة ، ومحلول الحفاظ عن طريق إضافة العازلة ، والمواد الحافظة للحمض النووي ، إلى أنبوب 5 مل.وأخيرا، إعداد أربعة أكياس تحييد، إضافة المنظفات السلطة إلى أربعة أكياس بلاستيكية سستة. لكل عينة مياه يتم استخراجها، قم بإعداد أنبوب واحد يحتوي على خمس ملليلتر يحتوي على جزيئات مغناطيسية وإيثانول، وثلاث أنابيب 2 مل تحتوي على 500 و600 و200 ميكرولترات من مخازن الغسيل واحد واثنين وثلاثة على التوالي، وأنبوب واحد يحتوي على عازلة للمياه. ويمكن تحليل اثنين من استخراج الحمض النووي مختلفة في وقت واحد في كل اختبار PCR إذا تم استخدام ثيرسيكول نيويل.لجميع المقايسات PCR، وإعداد المياه البيولوجيا الجزيئية. إعداد خلطات تحتوي على 2 التمهيدية وإثبات واحد محدد لكل فيروس الهدف وفقا للأحجام والتركيزات الموصوفة في البروتوكول. لكل فيروس، إضافة وحدات التخزين المشار إليها في أنابيب واحد إلى ثمانية من علبة أنابيب.قطع الشريط، وتقسيمه إلى شريطين. أنابيب من واحد إلى خمسة وأنابيب من ستة إلى ثمانية. لكل فيروس، والهواء الجاف تعليق الحمض النووي تحتوي على 10 إلى 5، 10 إلى 7، و 10 إلى 9 ونسخ معروفة مسبقا في أنابيب ستة وسبعة وثمانية.ويستند هذا البروتوكول تركيز على مبدأ flocculation العضوية التي انخفاض درجة حَسّيّة الجسم وارتفاع الموصلية شرط يدفع بروتينات الحليب الخالي من الدسم لتنظيمها في flocs الفيروسات تمتص إلى. بمجرد تسوية flocs ، يمكن جمعها بسهولة. جمع عينة ماء 10 لتر في دلو مسطحة القاع المقدمة مع غطاء.إذا جمع من أنبوب، والسماح للمياه تشغيل لبضع ثوان قبل جمع المياه. من المهم استخدام دلاء واضحة لتصور الكريات. ابحث عن مساحة مسطحة في مكان جديد بعيدًا عن ضوء الشمس المباشر ضع مُحركًا مغناطيسيًا متصلاً ببطارية تحت دعم الدلو ووضع الدلو الذي يحتوي على عينة الماء على كل دعم.إعادة النظر في حمض الستريك وهيدروكسيد الصوديوم ويهز حتى يتم حلها تماما. صب 500 مل من الماء المقطر في كيس الوقوف المتابعة ووضع الحقيبة على مُحرك مغناطيسي. تُضاف محتويات كيس ملح البحر الواحد ومحتويات أنبوب حليب مُقلّف واحد ويُحرّك لمدة خمس دقائق بسرعة متوسطة.ضبط درجة الحموضة من الحليب الخالي من السكّان باستخدام حمض الستريك وهيدروكسيد الصوديوم إلى درجة الحموضة بين 3.4 و 3.6. إيقاف المُحرك المغناطيسي والتأكد من أن الفلوكات مرئية. قد يساعد مصباح يدوي في تصور flocs.إسقاط المغناطيس اثارة في الماء. تعيين الستيرير المغناطيسي في أقصى سرعة وتشغيله. أضف 10 mLs من الماء المقطر إلى أنبوب يتم التحكم فيه.عكس ذلك عدة مرات وصب الحل في الماء. صب محتويات عينة واحدة تكييف كيس في الماء ويحرك لمدة خمس دقائق. تأكد من درجة الـ PH لعينة الماء، والتي يجب أن تكون بين 3.4 و 3.6.ضبط درجة الـ PH إذا لزم الأمر. إضافة 100 mLs من محلول الحليب الخالي من الدسم قبل flocculated، وختم دلو مع الغطاء وترك الماء اثارة لمدة ثماني ساعات في الحد الأدنى من السرعة. بعد ثماني ساعات، إيقاف المحرك المغناطيسي والسماح flocs لتسوية لمدة خمس ساعات إضافية على الأقل.مع نظام يقوم على استخدام وحدة تحكم ماصة، أنبوب من البلاستيك، واثنين من الماصات، والتخلص من المصات، مع الحرص على عدم إزعاج flocs على أسفل دلو. عندما يكون مستوى الماء على وشك الوصول إلى المغناطيس التحريك، والضغط على أنبوب من البلاستيك لوقف تدفق المياه والابتعاد عن الماصات من دلو. يهز دلو لإعادة تعليق flocs وصبها في كيس من البلاستيك الوقوف المتابعة.السماح لflocs لتسوية لمدة ساعة إضافية واحدة. pirate بعناية عظمى المياه باستخدام ماصة تجنب لإزعاج flocs. التعرق flocs باستخدام ماصة ونقلها إلى أنبوب مخروطي.لاحظ أسفل الحجم النهائي من العينة التركيز ونقل 1 مل إلى أنبوب يحتوي على محلول حافظ. ويمكن استخدام التعليق إما لإجراء استخراج الحمض النووي في الحقل، أو الشحن إلى مختبر مرجعي لمزيد من التحليل. يجب معالجة المياه التي يتم التخلص منها أثناء جمع النفايات قبل التخلص منها.إضافة محتويات كيس وكيل تحييد إلى دلو يحتوي على المياه المهملة. اخلطي الماء واتركيه لمدة ثلاثين دقيقة. ثم تخلص من المياه المعالجة كنفايات عامة.يمكن نقل الجسيمات المغناطيسية من أنبوب إلى آخر باستخدام ماصة مغناطيسية. تعتاد على عملية ماصة مغناطيسية قبل إجراء الاستخراج. ترتيب الأنابيب التي تحتوي على الكاشف المطلوب لاستخراج في رف.وهذا يعني، من اليسار إلى اليمين: المخزن المؤقت ملزم، وغسل المخازن المؤقتة، ومخزنة عازلة elution. نقل 1 مل من العينة التركيز إلى أنبوب يحتوي على العازلة ملزمة باستخدام ماصات بلاستيكية المتاح. عكس أنبوب عشر مرات لتحسين الحل.احتضان الحل في درجة حرارة الغرفة لمدة عشر دقائق مع خلط مستمر إما باستخدام مداري منفرد أو يدويا. جمع الجسيمات المغناطيسية باستخدام ماصة المغناطيسية وطرف نظيفة التي يمكن إعادة استخدامها لمخازن الغسيل الثلاثة والافراج عن الجسيمات المغناطيسية في أنبوب يحتوي على غسل العازلة واحد. غسلها عن طريق هز بلطف الحل مع طرف لمدة ثلاثين ثانية وجمعها.كرر هذا الإجراء غسل لغسل مخازن اثنين وثلاثة. جمع الجسيمات المغناطيسية في العازلة الغسيل ثلاثة والإفراج عنهم في أنبوب يحتوي على عازلة elution. ثم تجاهل الطرف.احتضان الحل في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق في حين خلط مستمر باستخدام المدار منفردا. استبدال طرف على ماصة المغناطيسية من قبل أي واحد وجمع كل الجزيئات المغناطيسية من العازلة elution. تجاهل الطرف مع الجزيئات المرفقة.يبقى حمض النووي في عازلة elution، والتي ينبغي تخزينها لمزيد من التحليل أو الشحن. استخدم خمسة أنابيب وشريط ثلاثي الأنابيب معد للكشف عن الفيروسات الغدية البشرية. إضافة الماء، ومزيج PCR، و extration الحمض النووي إلى أنابيب واحد من خلال خمسة وفقا للبروتوكول.بعد ذلك، إضافة الماء ومزيج PCR إلى الأنابيب من ستة إلى ثمانية. وضع كلا شرائط في thermocycler وحدد تشغيل المناسبة. بمجرد الانتهاء من تشغيل، وجمع النتائج وتحليل البيانات التي تم الحصول عليها.فقط عندما تكون الاختبارات الفيروسية قد أسفرت عن السلبية، ينبغي أن يتم الكشف MS2. استخدم شرائط أنبوب أعدت للكشف MS2 وتحديد الملف الحراري المناسب لPCR. تمت مقارنة استخراج الحمض النووي المغناطيسي VirWaTest إلى الحمض النووي QIAGEN الفيروسية الجيش الملكي النيبالي ، وتقليده عن طريق اختبار عينات المياه ارتفعت مع الفيروسات الغدية البشرية وMS2.انخفاض اختبار ف قيمة يظهر أعلى بكثير من عمليات استرداد الفيروسية باستخدام VirWaTest من QiAgen كأسلوب استخراج لكلا الفيروسات اختبارها. وقد تم اختبار الطريقة المطورة لتركيز الفيروس في الميدان بالتعاون مع فرق غسل أوكسفام الموجودة في بانغي، جمهورية أفريقيا الوسطى، وفي بيدرناليس، إكوادور، التي جمعت عينات من المياه، وركزتها بتطبيق طريقة التركيز المتقدمة، وأرسلتها إلى المختبر في برشلونة لاستخراج الحمض النووي والتحصين الفيروسي. وفي إكوادور، تم الكشف عن الفيروسات الغدية البشرية في جميع العينات التي تم اختبارها، في حين أن واحدة من كل خمس عينات تم جمعها وتركيزها في بانغي كانت إيجابية بالنسبة للفيروسات الغدية البشرية.وقد أثبتت الطريقة المطورة فائدتها عندما قامت بتقييمها أفرقة غسل من أوكسفام إنترمون في بانغي، بجمهورية أفريقيا الوسطى، وفريق آخر في بيدرناليس، إكوادور. قد يكون VirWaTest جزءاً من نظام الإنذار المبكر أو قد يستخدم في استقصاء الفاشية من قبل المنظمات العاملة في مجال الصرف الصحي للمياه. وتيسر هذه المعدات تحليل مسببات الأمراض الفيروسية في المياه وتحسين إدارة سلامة المياه بهدف الحد من حوادث الأمراض الفيروسية في سياقات الأزمات الإنسانية.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Use of Fluorescent Immuno-Chemistry for the detection of Edwardsiella ictaluri in channel catfish (I. punctatus) samples

Use of Fluorescent Immuno-Chemistry for the detection of Edwardsiella ictaluri in channel catfish I. punctatus samples

نيون استخدام الكيمياء المناعية للكشف عن الإدواردسيلة ictaluri في سمك السلور قناة ( أولا punctatus) عينات

While Edwardsiella ictaluri is a major pathogen of channel catfish Ictalurus punctatus and has been discovered nearly 
three decades ago 1,2, so far, to ...

Cost-effective Method for Microbial Source Tracking Using Specific Human and Animal Viruses

طريقة فعالة من حيث التكلفة لتعقب مصدر الميكروبات عن طريق محددة الفيروسات البشرية والحيوانية

Microbial contamination of the environment represents a significant health risk. Classical bacterial fecal indicators have shown to have significant ...

Glass Wool Filters for Concentrating Waterborne Viruses and Agricultural Zoonotic Pathogens

مرشحات الصوف الزجاجي للفيروسات التي تنتقل عن طريق التركيز ومسببات الأمراض الحيوانية المنشأ الزراعي

The key first step in evaluating pathogen levels in suspected contaminated water is concentration.  Concentration methods tend to be specific for a ...

A Modified EPA Method 1623 that Uses Tangential Flow Hollow-fiber Ultrafiltration and Heat Dissociation Steps to Detect Waterborne Cryptosporidium and Giardia spp.

A Modified EPA Method 1623 that Uses Tangential Flow Hollow-fiber Ultrafiltration and Heat Dissociation Steps to Detect Waterborne Cryptosporidium and Giardia spp.

والطريقة وكالة حماية البيئة معدلة 1623 يستخدم تماسي تدفق الجوف الألياف الترشيح الفائق والحرارة خطوات تمييز لكشف تنتقل عن طريق الماء<em&gt; الكريبتوسبوريديوم</em&gt; و<em&gt; الجيارديات النيابة.</em

Cryptosporidium and Giardia species are two of the most prevalent protozoa that cause waterborne diarrheal disease outbreaks worldwide. To better ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

إرساء ثقافة السائل المغطاة من مجرى الهواء الإنسان المستقطب طلائي Calu-3 خلايا لدراسة استجابة الخلية المضيفة لمسببات الأمراض التنفسية<em&gt; في المختبر</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Intranasal Administration of Recombinant Influenza Vaccines in Chimeric Mouse Models to Study Mucosal Immunity

إدارة الأنف المؤتلف لقاحات الأنفلونزا في همي ماوس نماذج لدراسة الأغشية المخاطية الحصانة

Vaccines are one of the greatest achievements of mankind, and have saved millions of lives over the last century. Paradoxically, little is known about the ...

Qualitative and Quantitative Assays for Detection and Characterization of Protein Antimicrobials

فحوصات النوعية والكمية للكشف وتوصيف مضادات الميكروبات البروتين

Initial evaluations of large microbial libraries for potential producers of novel antimicrobial proteins require both qualitative and quantitative methods ...

Rapid Molecular Detection and Differentiation of Influenza Viruses A and B

سرعة الكشف الجزيئي والتمايز من فيروسات الأنفلونزا A و B

Influenza is a contagious respiratory illness caused by influenza viruses A and B in humans and causes a significant amount of morbidity and mortality ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

مسحة طريقة أخذ العينات للكشف عن نوروفيروس الإنسان على السطوح

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Magnetic Stirrer Method for the Detection of Trichinella Larvae in Muscle Samples

Magnetic Stirrer Method for the Detection of Trichinella Larvae in Muscle Samples

الطريقة النمام المغناطيسي للكشف عن<em&gt; الخيطيات</em&gt; يرقات في عينات العضلات

Trichinellosis is a debilitating disease in humans and is caused by the consumption of raw or undercooked meat of animals infected with the nematode ...