Name: quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester
Uploaded: 2019-06-04T13:00:00
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Este trabajo fue apoyado por: The Juvenile Diabetes Research Foundation [JDRF 5-CDA-2014-210-A-N] (S. M.). El Consejo Nacional de Salud e Investigación Médica (NHMRC GNT123586) (S. M.), Diabetes Australia Research Trust Millennium Award (Y17M1-MANS) (S. M.), Programa de Apoyo a la Infraestructura Operacional del Gobierno Victoriano (S. M., A. D., E. T., M. S.) y NHMRC Beca de posgrado APP1094337 y Beca JDRF Ph-up (M. S.).

Todos los sujetos dieron su consentimiento informado antes de la recolección de sangre periférica. La aprobación ética para experimentos con PBMC fue dada por St. Vincent's Hosptial (HREC-A 135/08, y HREC-A 161/15).
1. Preparación de reactivos
<ol><li>
Medios de células T humanas
	<ol>
<li>Preparar medios RP-5 para el cultivo de PBMC, que consiste en RPMI 1640, 1x aminoácidos no esenciales, Dipéptido L-aanyl-L-glutamina (2 mM), penicilina (100 U/ml)/estreptomicina (0...

<ol>
	<li>Duque, A., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+effects+of+BrdU+and+3H-Thymidine+incorporation+into+DNA+on+cell+proliferation,+position+and+fate.">Different effects of BrdU and 3H-Thymidine incorporation into DNA on cell proliferation, position and fate.</a> Journal of Neuroscience. 31, 15205-15217 (2011).</li><li>Mannering, S. I., Zhong, J. I. E., Cheers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+activation,+proliferation+and+apoptosis+in+primary+Listeria+monocytogenes+infection.">T-cell activation, proliferation and apoptosis in primary Listeria monocytogenes infection.</a> Immunology. 106, 87-95 (2002).</li><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry.">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> Journal of Immunological Methods. 171, 131-137 (1994).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+method+for+detecting+proliferation+of+rare+autoantigen-specific+human+T+cells.">A sensitive method for detecting proliferation of rare autoantigen-specific human T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283, 173-183 (2003).</li><li>Quah, B. J. C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Carboxyfluorescein+Diacetate+Succinimidyl+Ester+(CFSE)+to+Monitor+Lymphocyte+Proliferation.">The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation.</a> Journal of Visualized Experiments. , 4-7 (2010).</li><li>Ten Brinke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+T-cell+responses+in+translational+studies:+Optimization+of+dye-based+proliferation+assay+for+evaluation+of+antigen-specific+responses.">Monitoring T-cell responses in translational studies: Optimization of dye-based proliferation assay for evaluation of antigen-specific responses.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1-15 (2017).</li><li>Gillespie, G. M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strong+TCR+Conservation+and+Altered+T+Cell+Cross-Reactivity+Characterize+a+B*57-Restricted+Immune+Response+in+HIV-1+Infection.">Strong TCR Conservation and Altered T Cell Cross-Reactivity Characterize a B*57-Restricted Immune Response in HIV-1 Infection.</a> Journal of Immunolgy. 177, 3893-3902 (2006).</li><li>Tynan, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Resolution+Structures+of+Highly+Bulged+Viral+Epitopes+Bound+to+Major+Histocompatibility+Complex+Class+I:+Implications+for+t-cell+receptor+engagement+and+t-cell+immunodominance.">High Resolution Structures of Highly Bulged Viral Epitopes Bound to Major Histocompatibility Complex Class I: Implications for t-cell receptor engagement and t-cell immunodominance.</a> Journal of Biological Chemistry. 280, 23900-23909 (2005).</li><li>Blanchard, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoplasmic+reticulum+aminopeptidase+associated+with+antigen+processing+defines+the+composition+and+structure+of+MHC+class+I+peptide+repertoire+in+normal+and+virus-infected+cells.">Endoplasmic reticulum aminopeptidase associated with antigen processing defines the composition and structure of MHC class I peptide repertoire in normal and virus-infected cells.</a> Journal of Immunology. 184, 3033-3042 (2010).</li><li>Glanville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+specificity+groups+in+the+T+cell+receptor+repertoire+repertoire.">Identifying specificity groups in the T cell receptor repertoire repertoire.</a> Nature. 547, 94-98 (2017).</li><li>Wooldridge, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricks+with+tetramers:+how+to+get+the+most+from+multimeric+peptide+MHC.">Tricks with tetramers: how to get the most from multimeric peptide MHC.</a> Immunology. 126, 147-164 (2009).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+method+for+cloning+human+autoantigen-specific+T+cells.">An efficient method for cloning human autoantigen-specific T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298, 83-92 (2005).</li><li>So, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proinsulin+C-peptide+is+an+autoantigen+in+people+with+type+1+diabetes.">Proinsulin C-peptide is an autoantigen in people with type 1 diabetes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115, (2018).</li><li>Hui-Yuen, J., Mcallister, S., Koganti, S., Hill, E., Bhaduri-Mcintosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+Epstein-Barr+Virus+Growth-transformed+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. , 2-7 (2011).</li><li>Alexander-Miller, M. A., Leggatt, G. R., Berzofsky, J. A., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expansion+of+high+or+low+avidity+cytotoxic+T+lymphocytes+and+efficacy+for+adoptive+immunotherapy.">Selective expansion of high or low avidity cytotoxic T lymphocytes and efficacy for adoptive immunotherapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93, 4102-4107 (1996).</li></ol>

La proliferación basada en CFSE es un método simple y robusto para detectar y enumerar células CD4+ T humanas específicas del antígeno. Se ha demostrado previamente que el uso de la concentración óptima de CFSE es esencial para obtener resultados óptimos4. Demasiada CFSE abroga la proliferación, mientras que muy poco no permite distinguir las células divididas e indivisas. Por el contrario, se utilizan concentraciones relativamente altas (5,0 m)de CFSE ...

La capacidad de detectar y estudiar células T específicas del antígeno es importante en estudios de inmunidad mediada por células. Sin embargo, hacerlo es particularmente difícil para las respuestas CD4+ Células T específicas de autoantígenos, que son muy débiles y difíciles de detectar. Un método común utilizado para la detección de la proliferación de linfocitos específicos de antígenos es [3H]-timidina, que es un nucleótido radiomarcado incorporado en el ADN de las células que proliferan. Aunque el ensayo [3H]-timidina puede detectar la síntesis de ADN, este método es una medida indirecta de la división celular, porque la síntesis de ADN puede iniciarse independientemente de la mitosis (es decir, durante la duplicación de genes y la apoptosis1). Este problema se agrava por el hecho de que la proliferación específicade antígenos de las células puede resultar en una apoptosis considerable 2, lo que conduce a una posible sobreestimación de la proliferación específica de antígenos. Además, el método [3H]-timidina no proporciona información fenotípica para los linfocitos que proliferan, como CD4+ o CD8+ proliferación de linaje en PMC estimulado con péptidos antigénicos.
En 2003, publicamos el primer ensayo de dilución de colorante utilizando CFSE, denominado ensayo de proliferación basado en CFSE3,4. CFSE es un tinte fluorescente que se une establemente a las proteínas intracelulares mediante la formación de un enlace covalente a los residuos de lisina intracelular. Dado que las proteínas etiquetadas por CFSE se dividen equitativamente entre las células hijas3, las células que se han dividido se pueden distinguir de las células no divididas por la citometría de flujo, lo que también permite el fenotipado cuantitativo de las poblaciones de linfocitos. De hecho, el número de divisiones a las que ha sufrido una céluladesde el momento de la tinción CFSE se puede medir hasta cierto grado 5. Más recientemente, se han desarrollado muchos tintes similares como CellTrace Violet proliferation dye (VPD)y CytoTrack dye, que funcionan de una manera similar 6. Este protocolo se centra en la CFSE, pero los principios se aplican por igual a otros dedos relacionados.
La tinción de tetramer péptido-MHC es un método ampliamente utilizado para detectar y clonar células CD8+ T específicas de antígenos. Este es un método bien establecido7,8,9,10; sin embargo, la clonación basada en tetrameros requiere el conocimiento existente de la restricción del epítopo/MHC y cada epítopo requiere su propio tetramémero11,lo que limita el alcance del descubrimiento y clonación de células T nuevas específicas de epítopos. La proliferación basada en CFSE se puede utilizar con péptidos, proteínas o lisados celulares. El protocolo descrito en este documento es simple y robusto, y las células CD4+ T que responden se pueden clasificar para su uso en ensayos de caracterización funcional y bioquímica aguas abajo12,13.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-human CD4-AlexaFluor647</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317422</td>
			<td>RRID:AB_2716180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>71-7167-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Influenza A H1N1 (PR8) Matrix protein 1</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>40010-V07E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential amino acids (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/ Streptomycin (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pooled human serum</td>
			<td>Australian Red Cross</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proinsulin C-peptide PI33-63</td>
			<td>Purar Chemicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made synthetic peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetanus Toxoid protein</td>
			<td>Statens Serum Intitut</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester

Descrito es un método simple, in vitro, basado en la dilución de tinte para medir la proliferación de células CD4+ T específicas de antígenos en células mononucleares de sangre periférica humana (PPC). El desarrollo de tintes fluorescentes estables, no tóxicos, como el éster de carboxifluoresceína succinimidyl (CFSE) permite distinguir las células T raras específicas del antígeno de los transeúntes por la disminución de la tinción fluorescente, detectada por la citometría de flujo. Este método tiene las siguientes ventajas sobre los enfoques alternativos: (i) es muy sensible a las células T de baja frecuencia, (ii) no se requiere conocimiento del antígeno o epítopo, (iii) se puede analizar el fenotipo de las células que responden, y (iv) ser viable, responder, respondiendo, respondiendo, respondiendo, respondiendo, respondiendo células se pueden ordenar y utilizar para análisis adicionales, como clonación de células T.

Estimulación in vitro de PASTRO humanos con proteína toxoide del tétanos: los PBMU se mancharon con CFSE y se estimularon durante 7 días en presencia de toxoide de tétanos. Casi todos los donantes mostraron una fuerte respuesta de células T al toxoide del tétanos porque habían sido vacunados, lo que hace que el toxoide del tétanos sea un antígeno de control positivo útil. La Figura 2 demuestra en triplicado, que la proliferación CFSE de células C...

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Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Cuantificación de células CD4+ T específicas de antígenos humanos que utilizan éster de succinidilo de carboxifluoresceína

Aquí se presenta un protocolo para medir las células CD4+ T proliferantes en respuesta a proteínas antigénicas o péptidos mediante dilución de tinte. Este ensayo es particularmente sensible a las células T específicas del antígeno poco frecuente y se puede modificar para facilitar la clonación de células específicas del antígeno.

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

Este protocolo proporciona una plataforma para estudiar las respuestas de las células CD4T que a menudo son débiles y difíciles de detectar. Esta técnica permite la detección, enumeración y aislamiento de celdas CD4T sin conocimiento previo sobre la presentación de antígenos. La principal ventaja es el análisis de las células CD4T que son poblaciones bastante raras asociadas con enfermedades autoinmunes como la diabetes tipo uno.Al obtener la muestra de sangre periférica de un donante sano, diluya la sangre en PBS en al menos una o dos proporciones antes de colocar 35 mililitros de sangre en capas de 15 mililitros de gradiente de densidad medio en un tubo de 50 mililitros. Separe las células por centrifugación de gradiente de densidad y elimine aproximadamente 20 mililitros de la capa plasmática superior resultante. Luego recoger la capa de glóbulos blancos teniendo cuidado para evitar el pellet de glóbulos rojos y lavar las células tres veces en PBS fresco.Después de contar, diluir las células a una vez 10 a la sexta célula mononuclear de sangre periférica o PBMC por mililitro de concentración de PBS. Agregue 300 microlitros de células para cada control en tubos individuales de 10 mililitros. Después de encabezar cada tubo con PBS, sedimentar las células por centrifugación y resuspender las células en un uno por 10 a las sextas células por mililitro de concentración media RP5.A continuación, placa 100 microlitros de células por control a cada uno de los tres pozos de una placa de 96 pozos que contiene 100 microlitros de RP5 medio por pozo. Coloque la placa en la incubadora de cultivo celular durante siete días. A continuación, transfiera los PBMC restantes a un nuevo tubo de 50 mililitros y agregue un microlitro de solución de material de trabajo CFSE por mililitro de suspensión celular al lado del tubo.Invierta rápidamente el tubo varias veces para mezclar y colocar las células en una incubadora de cultivo celular durante cinco minutos. Al final de la incubación, detener la reacción con cinco mililitros de medio RP5 y recoger las células por centrifugación. Resuspender el pellet en un solo 10 a los sextos PBMC por mililitro de medio RP5 fresco y añadir un mililitro de células a un tubo de 10 mililitros por antígeno a probar.A continuación, añadir 100 microlitros de células por antígeno a cada uno de los tres pozos de un pozo de 96 pozos que contiene 100 microlitros de medio RP5 complementado con el antígeno diluido de interés por pozo. Coloque la placa en la incubadora de cultivo celular durante siete días. Para manchar las poblaciones de células CD4+T para el análisis citométrico de flujo, al final del cultivo transfiera todo el volumen de células de cada pozo a la clasificación celular activada por fluorescencia individual o a los tubos FACS.Lave cada muestra con un mililitro de PBS complementado con un suero de ternera fetal al 0,1%o FCS. Resuspender los pellets en un anticuerpo CD4 antihumano apropiado en 100 microlitros de PBS más FCS por tubo. Incubar las células a cuatro grados centígrados durante 20 minutos protegidos de la luz.Al final de la incubación, lave las muestras en un mililitro de PBS fresco más FCS por tubo y resuspendir los pellets en 100 microlitros de PBS fresco más FCS. Inmediatamente antes del análisis, agregue un microlitro de yoduro propidium a cada tubo para permitir la exclusión de las células muertas. Puerta de los linfocitos de acuerdo con sus áreas de dispersión hacia adelante y lado.Para excluir las células apoptóticas, atraque el área de dispersión hacia adelante frente a las células negativas de yoduro propidio y utilice las celdas no manchadas para establecer una línea base de voltaje para las celdas no fluorescentes. Establezca los voltajes para el fluoróforo de anticuerpos CD4 y la señal CFSE para que la señal fluorescente sea inferior a 1000 para cada uno. Utilice las muestras CFSE y CD4 de control de color único para confirmar una señal fluorescente positiva para cada color utilizando los voltajes establecidos con las celdas no manchadas.Como cfSE y yoduro propidium tienen cierta superposición espectral, ajuste la compensación para restar la fluorescencia de yoduro propidium de la fluorescencia CFSE hasta que la muestra CFSE sólo no produzca una señal en el canal de yoduro de propidium. Una vez analizadas todas las muestras, calcule el índice de división celular dividiendo el número de células divididas por 5000 células no divididas del grupo estimulado por el número medio de células divididas por 5000 células no divididas de las células cultivadas sin antígeno. Casi todos los donantes demuestran una fuerte respuesta de células T al toxoide del tétanos después de la estimulación in vitro porque los donantes han sido vacunados haciendo que el toxoide del tétanos sea un antígeno de control positivo útil.Sin embargo, la proliferación de células CD4+T a partir de PBMC no estimulados es mínima. Después de siete días de estimulación con péptido C pro-insulina humano, se pueden detectar células CD4+T específicas de pro-insulina C-péptido en la sangre periférica de un individuo con diabetes tipo uno. PbMC estimulado con proteína de matriz de virus de la gripe A también demuestran proliferación.En conjunto, estos datos demuestran que el ensayo se puede realizar utilizando proteínas de longitud completa, así como péptidos sintéticos cortos. El componente FACS de este método se puede realizar utilizando un citómetro de flujo de clasificación de celdas. Usando un clasificador de células, las células T específicas del antígeno se pueden aislar en el nivel de celda única para el análisis posterior.Este método ha permitido el descubrimiento de respuestas celulares CD4T en individuos con diabetes tipo uno de inicio temprano. El análisis de estas raras poblaciones de células T utilizando otros métodos presenta varios desafíos técnicos.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antígeno Específico de la En Vivo Matar ensayo utilizando CFSE células diana marcadas

Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) can be used to easily and quickly label a cell population of interest for in vivo investigation.  ...

Investigación

Inmunología e Infección

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

El uso de diacetato de carboxifluoresceína Ester succinimidil (CFSE) para controlar la proliferación de linfocitos

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  &#947;&#948; T Cells using Zoledronate

Expansión de la sangre periférica humana de células T γδ con zoledronato

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Adenoviral Transduction of Naive CD4 T Cells to Study Treg Differentiation

La transducción adenoviral de células T CD4 + naïve a estudiar la diferenciación Treg

Regulatory T cells (Tregs) are essential to provide immune tolerance to self as well as to certain foreign antigens. Tregs can be generated from naive CD4 ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of Na&#239;ve CD4 T Lymphocytes

Aislamiento y diferenciación de Th17 Naïve linfocitos T CD4

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

La evaluación de la innata de detección de VIH-1 CD4 infectados<sup&gt; +</sup&gt; Células T por las células dendríticas plasmocitoides Usando un<em&gt; Ex vivo</em&gt; Co-cultura del sistema.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial células presentadoras de antígenos (KaAPC) para la utilización eficiente<em&gt; In Vitro</em&gt; El agotamiento de células T humanas específicas de antígeno

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generando<em&gt; De Novo</em&gt; T humanas receptores de células específicas de antígeno por retroviral Transducción de Centric Hemichain

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

Desarrollo de derivados de células madre Las células T reguladoras específicas de antígeno contra la autoinmunidad

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

Diferenciación in vitro de las células CD4 + humano FOXP3 + células T reguladoras (Induced iTregs) de T naive CD4 + células utilizando un protocolo de TGF-β que contienen