Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

وقد تم دعم هذا البحث من قبل برنامج بحوث العلوم الأساسية من خلال المؤسسة الوطنية للبحوث الكورية (NRF) الممولة من وزارة التعليم (NRF-2015R1A5A2008833 و NRF-2016R1D1A3B03934279) ومنحة معهد العلوم الصحية (IHS) ومنحة من معهد العلوم الصحية (IHS) غنو-2016-02) في جامعة جيونغسانغ الوطنية.

وقد أجريت جميع البروتوكولات التجريبية ورعاية الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة الجامعة لرعاية الحيوانات للبحوث الحيوانية من جامعة جيونغسانغ الوطنية (GLA-100917-M0093).
1 - المواد
<ol><li>الفئران<ol>
<li>استخدام الذكور من C57BL/6 خلفية سلالة وزنها 22-24 غرام في الأسبوع 7 بعد الولادة. التع...

تعقيد الدماغ وعدم تجانس MDD تجعل من الصعب لخلق نماذج الحيوان التي تستنسخ تماما الشرط. وقد تغلب العديد من الباحثين على هذه الصعوبة باستخدام نهج يستند إلى النمط الإندوفينتيبي32، حيث أن hedonia (عدم الاهتمام في المحفزات مجزية) واليأس تعتبر السلوكيات المحفوظة التطورية وقابلة للقياس ا?...

اضطراب الاكتئاب الرئيسي (MDD) هو السبب الرئيسي للإعاقة العقلية في جميع أنحاء العالم، مع حدوث الذي يتزايد أسرع مما كان متوقعا. وفي عام 2001، توقعت منظمة الصحة العالمية أن يكون مرض الـ MDD ثاني أكثر الأمراض شيوعا في العالم بحلول عام 2020. ومع ذلك، كان بالفعل ثاني الأكثر شيوعا في عام 20131. وبالإضافة إلى ذلك، مضادات الاكتئاب الحالية لديها العديد من القيود، بما في ذلك تأخر التأثير، ومقاومة المخدرات، والانتكاس، والآثار الجانبية المختلفة2،3. لذلك يجب على الباحثين تطوير مضادات الاكتئاب أكثر فعالية. ومع ذلك، فإن الفيزيولوجيا المرضية الغامضة من MDD يمثل عقبة أمام تطوير مضادات الاكتئاب رواية.
الإجهاد على المدى الطويل هو عامل الخطر الرئيسي لMDD. يمكن أن يسبب خلل وظيفي في محور الغدة النخامية الغدة النخامية (HPA)، والذي يرتبط أيضا إلى مسببات MDD4،5. كما هو موضح سابقا، محور HPA يلعب دورا حاسما في الفيزيولوجيا المرضية النفسية الناجمة عن الإجهاد بما في ذلك الاكتئاب واضطرابات القلق عن طريق زيادة مستويات الكورتيكوستيوستيرون6،7،8، 9.وقد استند العديد من النماذج الحيوانية على التنشيط المستمر لمحور HPA، والذي لوحظ في المرضى الذين يعانون من MDD4. وعلاوة على ذلك، فإن الكورتيزون العالي الناجم عن الإجهاد المزمن والحقن تحت الجلد الكورتيزون يسبب سلوكيات الاكتئاب جنبا إلى جنب مع موت الخلايا العصبية، ضمور العمليات العصبية، وانخفاض تكوين الأعصاب الكبار في الدماغ من القوارض10 , 11.منطقة الدماغ الهامة الأخرى المرتبطة بالاكتئاب هو القشرة الأمامية الوسطى (mPFC). يلعب mPFC دورا حاسما في السيطرة على المناطق دون الإقليمية الدماغ، مثل تحت المهاد واللوزة، التي تتحكم في السلوك العاطفي والاستجابات الإجهاد8،9. على سبيل المثال، الآفات في mPFC الظهرية الناجمة عن خلل محور HPA وتعزيز إفراز الكورتيكوستيرون بسبب الإجهاد ضبط النفس12،13. وأظهرت دراسة حديثة أيضا أن الإجهاد ضبط النفس المتكررة زيادة مستويات الكورتيكوستيوستيرون, التي يمكن أن تنخفض عن طريق مكملات الجلوتامين عن طريق دورة الجلوتاميت الجلوتامين بين الخلايا العصبية والخلايا النجمية في mPFC9.
أول نموذج الإجهاد المزمن المستخدمة لدراسة مسببات MDD اقترح من قبل كاتز14. ثم اقترح ويلنر وآخرون نموذج الإجهاد الخفيف المزمن (CMS) استناداً إلى النتائج التي توصل إليها كاتز. وأكدوا أن النموذج له صلاحية تنبؤية من خلال ملاحظة أن مضادات الاكتئاب استعادة CMS الناجمة عن السلوك مثل anhedonic15,16. عادة، يتكون نموذج CMS من مزيج من الضغوط الخفيفة المختلفة، مثل الضوضاء الخفيفة، وإمالة القفص، والفراش الرطب، ودورات الضوء الداكن ة المعدلة، وهز القفص، والسباحة القسرية، والهزيمة الاجتماعية. ويستخدم الباحثون على نطاق واسع نموذج نظام إدارة المحتوى؛ ومع ذلك، فإن هذا النموذج هو من التكرار الفقراء، والوقت والطاقة غير فعالة. ولذلك، هناك طلب متزايد على بروتوكول موحد ومبسط للحث على السلوك مثل الاكتئاب والتحليل الفسيولوجي لتقييم الاكتئاب. وبالمقارنة مع نموذج نظام إدارة المحتوى، فإن نموذج الإجهاد المزمن الناجم عن التعطيل (رابطة الدول المستقلة؛ والمعروف أيضا باسم الإجهاد المزمن لضبط النفس) هو نموذج أبسط وأكثر كفاءة؛ لذلك، يمكن استخدام نموذج رابطة الدول المستقلة على نطاق واسع في دراسات الإجهاد المزمن17،18،19،20،21،22،23، 24.وبالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام رابطة الدول المستقلة في كل من الفئران الذكور والإناث لتطوير السلوكيات الاكتئابية25،26. خلال رابطة الدول المستقلة، يتم وضع الحيوانات في اسطوانة الحجم تناسب الجسملمدة 1-8 ساعات يوميا لمدة 2 أو 4 أسابيع 9،27،28. من هذه، حالة الإجهاد ضبط النفس لمدة 2 ساعة يوميا لمدة 2 أسابيع كافية للتسبب في سلوكيات الاكتئاب مع الحد الأدنى من الألم في الفئران9،28. في ظل ظروف ضبط النفس، تم زيادة مستويات الكورتيكوستوستيرون الدم بسرعة9،28،29. وقد أظهرت العديد من الدراسات أن نموذج رابطة الدول المستقلة له صلاحية تنبؤية، مما يؤكد أن الأعراض الشبيهة بالاكتئاب الناجمة عن رابطة الدول المستقلة يتم استعادتها من قبل مضادات الاكتئاب19،20،30،31. هنا، نبلغ عن الإجراءات التفصيلية لرابطة الدول المستقلة، فضلا عن بعض النتائج السلوكية والفسيولوجية بعد رابطة الدول المستقلة في الفئران.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

الاكتئاب لم يفهم بعد بشكل كامل، ولكن تم الإبلاغ عن عوامل سببية مختلفة. وفي الآونة الأخيرة، ازداد انتشار الاكتئاب. ومع ذلك، فإن العلاجات العلاجية للاكتئاب أو البحوث على الاكتئاب نادرة. وهكذا، في هذه الورقة، نقترح نموذج الماوس من الاكتئاب الناجم عن تقييد الحركة. الإجهاد الخفيف المزمن (CMS) هو تقنية معروفة للحث على السلوك مثل الاكتئاب. ومع ذلك، فإنه يتطلب إجراء معقد يتكون من مزيج من مختلف الضغوط الخفيفة. وعلى النقيض من ذلك، فإن الإجهاد المزمن الناجم عن التعطيل (CIS) هو نموذج إجهاد مزمن يسهل الوصول إليه، تم تعديله من نموذج ضبط النفس الذي يحفز السلوك الاكتئابي عن طريق تقييد الحركة باستخدام مقيد لفترة معينة. لتقييم السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب، يتم الجمع بين اختبار تفضيل السكروز (SPT)، واختبار التعليق الخلفي (TST)، واختبار ELISA لقياس مستويات الكورتيكوستيوستيرون علامة الإجهاد في التجربة الحالية. توضح البروتوكولات الموصوفة تحريض رابطة الدول المستقلة وتقييم التغيرات في السلوك والعوامل الفسيولوجية للتحقق من الاكتئاب.

وفي التجربة التمثيلية، تم الحصول على جميع البيانات من 6-8 فئران لكل مجموعة. وترد في الشكل 1المواد التمثيلية وطريقة إدخال الماوس طوعاً في التقييد.
لإجراء الاختبار السلوكي وأخذ عينات الدم بعد تحريض رابطة الدول المستقلة، تعرضت الفئران للإجراء التجريبي كما هو م?...

Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

توفر هذه المقالة بروتوكول مبسط وموحد للحث على السلوك الشبيه بالاكتئاب في الفئران المعطلة بشكل مزمن باستخدام مقيد. وبالإضافة إلى ذلك، يتم شرح السلوك والتقنيات الفسيولوجية للتحقق من تحريض الاكتئاب.

بروتوكول الإجهاد تجميد المزمن لتحفيز السلوك مثل الاكتئاب في الفئران

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

تبدأ من خلال وضع الغرفة على ضوء في 200 لوكس باستخدام متر لوكس الرقمية. ضع الفأرة في قفص منفصل قبل أسبوع على الأقل من الاختبار، ووضع الماوس في غرفة الاختبار لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل التجربة. أمسك ذيل الماوس بلطف لتجنب الشد الماوس، ثم ضعه بعناية على سطح خشن.تغطية القيود مع منشفة بيضاء صغيرة ثم ضع بلطف الماوس في افتتاح الكبح، بحيث يدخل الماوس المُقيد طوعاً. بعد ذلك، ضع الإغلاق لكبح جماح الماوس كما ضيق قدر الإمكان، مع الحرص على تجنب تلف الجسم، مثل الذيل والقدمين والخصيتين. وأخيراً، أثناء التعرض للقيد، قياس وزن الجسم وتناول الطعام كل 48 ساعة.قبل الاختبار ، تعود الفئران إلى وجود زجاجتين للشرب ، تحتوي إحداهما على 0.1 من السكروز الضرس والأخرى تحتوي على مياه عادية لمدة 48 ساعة. تبديل مواقف من الزجاجتين بعد 24 ساعة للحد من أي الخلط التي تنتجها التحيز الجانب. في اليوم الثالث حرمان الفئران من الماء لمدة 24 ساعة.ثم في يوم التجربة يعرض الفئران لزجاجتين للشرب لمدة ست ساعات. بعد ثلاث ساعات، قم بالتبديل في موضع زجاجات المياه. سجل حجم في ملليلتر من محلول السكروز والمياه المستهلكة، ومن ثم حساب تقارب الحيوان إلى السكروز.وأخيراً، حساب تفضيل السكروز كنسبة مئوية من حجم استهلاك السكروز على إجمالي استهلاك السوائل أثناء الاختبار. تبدأ من خلال جلب الإجهاد المزمن تقييد الماوس الناجمة عن في غرفة الاختبار على الأقل 30 دقيقة قبل بدء اختبار تعليق الذيل. تعيين ضوء الغرفة إلى ظروف قاتمة في 50 لوكس.بعد ذلك، ضع الكاميرا على بعد حوالي 40 سنتيمترًا من الماوس. تعليق الماوس بقوة من الشريط الأفقي باستخدام شريط لاصق. بعد وضع الماوس في منتصف مربع تعليق بدء التسجيل، ومراقبة التعديلات السلوكية بشكل مستمر لمدة ست دقائق.إذا كان الماوس يحاول تسلق ذيله استخدام عصا أو تسلق سدادة لمنعها من القيام بذلك. في نهاية التجربة نقل الماوس إلى قفص المنزل وإزالة الشريط بعناية من ذيله. وأخيرا ، استخدم برامج تتبع الفيديو لتحليل الوقت المتراكم من الفترات غير متحركة.وتشير النتائج إلى انخفاض في وزن الجسم لمجموعة رابطة الدول المستقلة وأقل بكثير من تناول الطعام في اليوم الرابع. مقارنة بالضوابط، تم إظهار انخفاض لتفضيل السكروز في مجموعة رابطة الدول المستقلة، في حين كانت هناك زيادة كبيرة في وقت الجمود والكورتيكوستيرون. علاوة على ذلك، النظام الغذائي المكمل الجلوتامين يخفف من الاكتئاب مثل السلوكيات، كما هو مبين لوزن الجسم، وتناول الطعام، وتفضيل السكروز، والجمود، والكورتيكوستيرون.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

استخدام الضغط الاجتماعي المزمن لنموذج اكتئاب ما بعد الولادة في المرضعات القوارض

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

بناء صالحة ميكرودريفي للتسجيلات العصبية المزمنة في الفئران يتصرفون استيقظ

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

بروتوكول لالفئران الإسكان في بيئة المخصب

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

بالبعد الاجتماعي للالإجهاد: التجريبية التلاعب من الدعم الاجتماعي والهوية الاجتماعية في ترير الاجتماعية اختبار الإجهاد

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

والمزمن بروتوكول الإجهاد الخفيف لا يمكن التنبؤ بها لأعراض الاكتئاب تحريض، السلوكية التغييرات والنتائج الصحية السلبية في القوارض

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

بروتوكول الاختبارات دليل لقياس الإحساس والألم في البشر

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

طريقة جديدة لحمل مثل الاكتئاب وسلوك في الفئران

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

البروتوكول لا يمكن التنبؤ بها من الإجهاد المزمن المعتدل لحمل أنهيدونيا في الفئران

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

الاعتراف برواية كائن ومكان الكائن السلوكية اختبار في الفئران على الميزانية

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

تطبيق البروتوكول منخفضة التكلفة لتحليل البصمة والمعلق اختبار مربع للفئران الإجهاد المزمن من ضبط النفس

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...