Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

Cette recherche a été soutenue par le Programme de recherche en sciences fondamentales par l'intermédiaire de la National Research Foundation of Korea (NRF) financé par le Ministère de l'éducation (NRF-2015R1A5A2008833 et NRF-2016R1D1A3B03934279) et la subvention de lnstitute of Health Sciences (IHS) GNU-2016-02) à l'Université nationale de Gyeongsang.

Tous les protocoles expérimentaux et les soins aux animaux ont été menés conformément aux lignes directrices du Comité universitaire de recherche animale pour la recherche animale de l'Université nationale de Gyeongsang (GLA-100917-M0093).
1. Matériaux
<ol><li>souris<ol>
<li>Utilisez des mâles de fond de souche C57BL/6 pesant de 22 à 24 g à la semaine postnatale 7. Habituez-vous dans la salle de reproduction pendant 1 semaine avant les expériences. REMARQUE : Toutes les souris...

La complexité du cerveau et l'hétérogénéité de la MDD rendent difficile la création de modèles animaux qui reproduisent complètement la maladie. De nombreux chercheurs ont surmonté cette difficulté en utilisant une approche basée sur l'endophenotype32, dans laquelle l'anhédonie (manque d'intérêt pour récompenser les stimuli) et le désespoir sont considérés comme des comportements évolutivement conservés et quantifiables dans les modèles animaux, qui sont également vus chez l...

Le trouble dépressif majeur (MDD) est la principale cause d'incapacité mentale dans le monde, avec une incidence qui augmente plus rapidement que prévu. En 2001, l'Organisation mondiale de la Santé a prédit que la MDD serait la deuxième maladie la plus courante dans le monde d'ici 2020. Cependant, il était déjà le deuxième plus commun en 20131. En outre, les antidépresseurs actuels ont de nombreuses limitations, y compris l'effectivité retardée, la résistance aux médicaments, la rechute, et divers effets secondaires2,3. Les chercheurs doivent donc mettre au point des antidépresseurs plus efficaces. Cependant, la pathophysiologie ambigue de MDD présente un obstacle au développement de nouveaux antidépresseurs.
Le stress à long terme est le principal facteur de risque de TDM. Il peut induire le dysfonctionnement dans l'axe hypothalamic-pituitaire-surrénalien (HPA), qui est également lié à l'étiologie de MDD4,5. Comme décrit précédemment, l'axe HPA joue un rôle critique dans la physiopathologie psychiatrique induite par le stress, y compris la dépression et les troubles anxieux en augmentant les niveaux de corticostérone6,7,8, 9. De nombreux modèles animaux ont été basés sur une activation soutenue de l'axe HPA, qui est observé chez les patients atteints de MDD4. En outre, les glucocorticoïdes élevés induits par le stress chronique et les glucocorticoïdes sous-cutanés causent des comportements dépressifs avec la mort de cellules neurales, l'atrophie des processus neuronaux, et la neurogenèse adulte réduite dans le cerveau des rongeurs10 , 11. Un autre secteur important de cerveau lié à la dépression est le cortex préfrontal médial (mPFC). Le mPFC joue un rôle crucial dans le contrôle des sous-régions du cerveau, telles que l'hypothalamus et l'amygdale, qui contrôlent le comportement émotionnel et les réponses au stress8,9. Par exemple, les lésions dans le dysfonctionnement d'axe induit de mPFC dorsal de MPFC et la sécrétion améliorée de corticosterone due à l'effort de contrainte12,13. Une étude récente a également montré que l'effort de contrainte répété a augmenté des niveaux de corticostérone, qui pourraient êtrediminués par la supplémentation de glutamine par l'intermédiaire du cycle de glutamate-glutamine entre des neurones et l'astrocyte dans le mPFC 9.
Le premier paradigme de stress chronique utilisé pour étudier l'étiologie du MDD a été suggéré par Katz14. Willner et coll. ont ensuite proposé un modèle de stress léger chronique (SMC) basé sur les résultats de Katz. Ils ont confirmé que le modèle avait une validité prédictive en observant que les antidépresseurs rétablissaient le comportement anhédonique induit par le SMC15,16. Typiquement, le modèle de CMS se compose d'une combinaison de divers contraintes douces, telles que le bruit doux, l'inclinaison de cage, la literie humide, les cycles lumière-obscurité altérés, la secousse de cage, la natation forcée, et la défaite sociale. Le modèle CMS est largement utilisé par les chercheurs; cependant, ce modèle est de mauvaise reproductibilité, et le temps et l'énergie-inefficaces. Par conséquent, il y a une demande croissante pour un protocole normalisé et simplifié pour l'induction du comportement dépressif-comme et de l'analyse physiologique pour évaluer la dépression. Par rapport au modèle CMS, le modèle de stress d'immobilisation chronique (CIS; aussi connu sous le nom de stress de contrainte chronique) est plus simple et plus efficace; par conséquent, le modèle CIS peut être largement utilisé dans les études sur le stress chronique17,18,19,20,21,22,23, 24. En outre, CIS peut être employé dans les souris mâles et femelles pour développer des comportements dépressifs25,26. Pendant la CEI, les animaux sont placés dans un cylindre de taille corps-fit pendant 1-8 heures par jour pendant 2 ou 4 semaines9,27,28. De ceux-ci, l'état de contrainte de contrainte pendant 2 heures par jour pendant 2 semaines est suffisant pour causer des comportements dépressifs avec la douleur minimale chez les souris9,28. Dans des conditions de retenue, les niveaux de corticostérone de sang ont été rapidement augmentés9,28,29. Plusieurs études ont montré que le modèle CIS a une validité prédictive, confirmant que les symptômes dépressifs induits par la CEI sont rétablis par les antidépresseurs19,20,30,31. Ici, nous rapportons les procédures détaillées de CeI, aussi bien que quelques résultats comportementaux et physiologiques après CIS chez les souris.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

La dépression n'est pas encore entièrement comprise, mais divers facteurs causatifs ont été rapportés. Récemment, la prévalence de la dépression a augmenté. Cependant, les traitements thérapeutiques pour la dépression ou la recherche sur la dépression sont rares. Ainsi, dans le présent document, nous proposons un modèle de souris de dépression induite par la restriction de mouvement. Le stress léger chronique (CMS) est une technique bien connue pour induire un comportement dépressif. Cependant, il nécessite une procédure complexe consistant en une combinaison de divers stress légers. En revanche, le stress d'immobilisation chronique (SIC) est un modèle de stress chronique facilement accessible, modifié à partir d'un modèle de retenue qui induit un comportement dépressif en limitant le mouvement à l'aide d'un dispositif de retenue pendant une certaine période. Pour évaluer les comportements dépressifs, le test de préférence de saccharose (SPT), le test de suspension de queue (TST), et l'essai d'ELISA pour mesurer des niveaux de corticosterone de marqueur de contrainte sont combinés dans la présente expérience. Les protocoles décrits illustrent l'induction de CIS et l'évaluation des changements de comportement et des facteurs physiologiques pour la validation de la dépression.

Dans l'expérience représentative, toutes les données ont été acquises à partir de 6 à 8 souris par groupe. Les matériaux représentatifs et la méthode d'insertion volontaire de la souris dans la prise de contrôle sont indiqués à la figure 1.
Pour effectuer le test comportemental et l'échantillonnage sanguin après l'induction du CEI, les souris ont été soumises à la procédure expérimentale telle que résumée dans la figure 2...

Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Cet article fournit un protocole simplifié et normalisé pour l'induction du comportement dépressif-comme dans les souris chroniquement immobilisées en utilisant un restrainer. En outre, le comportement et les techniques physiologiques pour vérifier l'induction de la dépression sont expliqués.

Un protocole de stress d'immobilisation chronique pour induire un comportement de dépression chez les souris

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

Commencez par mettre la pièce en lumière à 200 lux à l’aide d’un luxmètre numérique. Abritez la souris dans une cage séparée au moins une semaine avant le test et placez la souris dans la salle d’essai pendant au moins 30 minutes avant l’expérience. Maintenez doucement la queue de la souris pour éviter de crisper la souris, puis placez-la soigneusement sur une surface rugueuse.Couvrir le restrainer d’une petite serviette blanche, puis placer délicatement la souris à l’ouverture du restrainer, de sorte que la souris entre volontairement dans le restrainer. Ensuite, placez la fermeture pour retenir la souris aussi serré que possible, en prenant soin d’éviter les dommages au corps, tels que la queue, les pieds et les testicules. Enfin, pendant l’exposition au restrainer, mesurez le poids corporel et l’apport alimentaire toutes les 48 heures.Avant de les tester, habituez les souris à la présence de deux bouteilles à boire, l’une contenant 0,1 saccharose molaire et l’autre contenant de l’eau ordinaire pendant 48 heures. Changez les positions des deux bouteilles après 24 heures pour réduire toute confusion produite par un biais latéral. Le troisième jour, priver les souris d’eau pendant 24 heures.Puis le jour de l’expérience exposer les souris à deux bouteilles à boire pendant six heures. Après trois heures, changer la position des bouteilles d’eau. Enregistrez le volume en millilitres de solution saccharose et d’eau consommée, puis calculez l’affinité de l’animal avec le saccharose.Enfin, calculer la préférence du saccharose en pourcentage du volume de consommation de saccharose par rapport à la consommation totale de liquide pendant l’essai. Commencez par amener les souris induites par le stress de retenue chronique dans la salle d’essai au moins 30 minutes avant de commencer le test de suspension de la queue. Réglez la lumière de la pièce dans des conditions sombres à 50 lux.Ensuite, placez la caméra à environ 40 centimètres de la souris. Suspendre fermement la souris de la barre horizontale à l’aide de ruban adhésif. Après que la souris est positionnée au milieu de la boîte de suspension commencer l’enregistrement, et d’observer les modifications comportementales en continu pendant six minutes.Si la souris tente d’escalader sa queue, utilisez un bâton ou un bouchon de montée pour l’empêcher de le faire. À la fin de l’expérience déplacer la souris à sa cage d’origine et soigneusement enlever le ruban de sa queue. Enfin, utilisez un logiciel de suivi vidéo pour analyser le temps accumulé des périodes immobiles.Les résultats indiquent une diminution du poids corporel pour le groupe de la CEI et beaucoup moins d’apport alimentaire au quatrième jour. Comparé aux contrôles, une diminution a été montrée pour la préférence de saccharose dans le groupe de CIS, alors qu’il y avait une augmentation significative du temps d’immobilité et de la corticosterone. En outre, un régime complété par glutamine améthère les comportements dépressifs comme, comme indiqué pour le poids corporel, la prise de nourriture, la préférence de saccharose, l’immobilité, et la corticostérone.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Utiliser le stress social chronique au modèle dépression post-partum en lactation Rongeurs

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Recherche

Sciences du comportement

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Construction de tableaux Microdrive pour les enregistrements de neurones chroniques chez la souris Behaving Awake

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Un protocole pour souris Bricolage dans un environnement enrichi

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

La dimension sociale du stress: Manipulations expérimentales de soutien social et l&#39;identité sociale dans le Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Un protocole de stress chronique légère imprévisible pour avoir incité symptômes dépressifs, des changements de comportement et résultats négatifs sur la santé chez les rongeurs

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

Un protocole de tests manuels pour mesurer Sensation et la douleur chez les humains

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Une nouvelle méthode pour induire un comportement de type dépression chez le rat

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Le protocole d’effort doux chronique imprévisible pour induire l’anhédonie chez la souris

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Reconnaissance d’objets nouveaux et emplacement de l’objet comportementale essais chez la souris sur un Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Low-cost protocole d’analyse de l’empreinte et la pendaison de zone Test pour souris appliqué le Stress chronique retenue

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...