Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי תוכנית המחקר הבסיסי המדע באמצעות קרן המחקר הלאומי של קוריאה (NRF) ממומן על ידי משרד החינוך (NRF-2015R1A5A2008833 ו-NRF-2016R1D1A3B03934279) ואת המענק של המוסד למדעי הבריאות (IHS גנו-2016-02) באוניברסיטה הלאומית Gyeongsang.

כל הפרוטוקולים הניסיוניים והטיפול בבעלי חיים נערכו על פי ההנחיות של ועדת הטיפול בבעלי חיים באוניברסיטה לחקר בעלי חיים של האוניברסיטה הלאומית Gyeongsang (גלה-100917-M0093).
1. חומרים
<ol><li>עכברים<ol>
<li>השימוש זכרים של C57BL/6 רקע מאמץ שקילה 22 – 24 g ב לידה שבוע 7. Habituate בחדר הרבייה במשך. שבוע לפנ...

המורכבות של המוח והטרוגניות של MDD להפוך אותו מאתגר ליצור מודלים בעלי חיים אשר לחלוטין לשכפל את המצב. חוקרים רבים להתגבר על הקושי הזה באמצעות גישה endophenotype מבוססי32, שבו אנהדוניה (חוסר עניין בגירויים מתגמלת) והייאוש נחשבים שמרו והתנהגויות אבולוציונית וכמותית במודלים של בעלי חיי?...

הפרעת דיכאון מרכזית (MDD) היא הגורם המוביל לנכות מנטלית ברחבי העולם, עם שכיחות ההולכת וגוברת מהר יותר מהצפוי. ב 2001, ארגון הבריאות העולמי ניבא כי MDD תהיה המחלה השנייה ביותר הנפוצה בעולם על ידי 2020. עם זאת, זה היה כבר השני השכיח ביותר ב 20131. בנוסף, נוגדי דיכאון הנוכחיים יש מגבלות רבות, כולל השפעה מושהית, עמידות לסמים, התדרדרות ותופעות לוואי שונות2,3. לפיכך, על החוקרים לפתח נוגדי דיכאון יעילים יותר. עם זאת, פתופסיולוגיה רב-משמעי של MDD מהווה מכשול להתפתחות של תרופות נגד דיכאון.
מתח ארוך טווח הוא גורם הסיכון העיקרי עבור MDD. זה יכול לגרום לתפקוד של היפותלמי-יותרת הכליה-האדרנל (hpa) ציר, אשר קשורה גם mdd האטיולוגיה4,5. כפי שמתואר קודם לכן, ציר hpa משחק תפקיד קריטי ב פתופסיולוגיה פסיכיאטרית הנגרמת כולל דיכאון והפרעות חרדה על ידי הגדלת רמות corticosterone6,7,8, 9. דגמים רבים של בעלי חיים התבססו על הפעלה מתמשכת של ציר hpa, אשר נצפתה בחולים עם mdd4. יתר על כן, גלוקוקורטיקואידים גבוהה הנגרמת על ידי מתח כרוני תת-עורי מוזרק גלוקוקורטיקואידים לגרום התנהגויות דיכאון יחד עם מוות תאים עצביים, ניוון של תהליכים עצביים, ומופחתת נוירוגנזה למבוגרים במוח של מכרסמים10 , 11. אזור מוחי חשוב נוסף הקשור לדיכאון הוא קליפת המוח הקדם-חזיתית (mpfc). ה-mpfc ממלאת תפקיד מכריע בשליטה באזורי המוח, כגון ההיפותלמוס והאמיגדלה, ששולטים בהתנהגות הרגשית ובתגובות הסטרס8,9. למשל, נגעים הנגרמת על ידי הצירים המושרה של הציר hpa והפרשת corticosterone מוגברת עקב לחץ ריסון12,13. מחקר שנערך לאחרונה הראה גם כי לחץ ריסון חוזרות גדל רמות corticosterone, אשר ניתן להפחית על ידי תוספי גלוטמין באמצעות גלוטמט-גלוטמין מחזור בין נוירונים ו אסטרוציט ב-mpfc9.
הפרדיגמה הראשונה להדגיש כרונית השתמשו ללמוד את האטיולוגיה של MDD הוצע על ידי כץ14. וילנר ואח ' הציע מודל מתח מתון כרוני (CMS) המבוסס על ממצאי כץ. הם אישרו כי המודל היה תוקף ניבוי על ידי התבוננות כי נוגדי דיכאון משוחזר CMS המושרה התנהגות אנהדאית15,16. בדרך כלל, מודל CMS מורכב משילוב של מתחים קלים שונים, כגון רעש קל, הטיית כלוב, מצעים רטובים, מחזורי אור כהה שונה, טלטול כלוב, שחייה כפויה, ותבוסה חברתית. מודל CMS מנוצל באופן נרחב על ידי חוקרים; עם זאת, מודל זה הוא של הכפיל העני, זמן ואנרגיה לא יעיל. לפיכך, קיימת דרישה הולכת וגוברת לפרוטוקול מתוקננת ופשוט לאינדוקציה של התנהגות כמו דיכאון וניתוח פיזיולוגי להערכת הדיכאון. לעומת מודל CMS, המתח הכרוני השתק (CIS; הידוע גם בשם מתח ריסון כרוני) מודל הוא פשוט ויעיל יותר; לכן, מודל CIS יכול לשמש באופן נרחב במחקרים כרוניים מאמץ17,18,19,20,21,22,23, 24. בנוסף, העמים יכולים לשמש הן עכברים זכר ונקבה לפתח התנהגויות דיכאון25,26. במהלך חבר העמים, בעלי חיים ממוקמים גליל התאמה בגודל גוף עבור 1-8 שעות ביום עבור 2 או 4 שבועות9,27,28. של אלה, מצב לחץ ריסון עבור 2 שעות ביום עבור 2 שבועות מספיק כדי לגרום להתנהגויות דיכאון עם כאב מינימלי עכברים9,28. בתנאי ריסון, דם corticosterone רמות גדלו במהירות9,28,29. מספר מחקרים הראו כי המודל של cis יש תוקף ניבוי, מאשרת כי המושרה cis סימפטומים כמו דיכאון משוחזרים על ידי נוגדי דיכאון19,20,30,31. בזאת, אנו לדווח על הליכים מפורטים של CIS, כמו גם כמה תוצאות התנהגותיות ופיסיולוגיים אחרי CIS בעכברים.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

הדיכאון עדיין לא הובן לחלוטין, אך גורמי סיבתי שונים דווחו. לאחרונה, השכיחות של דיכאון גדל. עם זאת, הטיפולים הטיפוליים בדיכאון או במחקר בדיכאון נדירים. כך, בעיתון הנוכחי, אנו מציעים מודל העכבר של דיכאון הנגרמת על ידי הגבלת תנועה. מתח כרוני קל (CMS) היא טכניקה ידועה כדי לגרום דיכאון כמו התנהגות. עם זאת, היא מחייבת הליך מורכב המורכב משילוב של מתחים קלים שונים. לעומת זאת, מתח השתק כרוני (CIS) הוא מודל לחץ כרוני נגיש בקלות, שהשתנה ממודל ריסון הגורם להתנהגות דיכאונית על ידי הגבלת התנועה באמצעות הרחקה לתקופה מסויימת. כדי להעריך את התנהגויות כמו דיכאון, בדיקת העדפה הסוכות (SPT), מבחן ההשעיה הזנב (TST), ואת הבדיקה אליסה כדי למדוד לחץ סמן corticosterone רמות משולבים בניסוי הנוכחי. הפרוטוקולים המתוארים ממחישים את האינדוקציה של CIS והערכת השינויים בהתנהגות ובגורמים הפיזיולוגיים לאימות הדיכאון.

בניסוי המייצג, כל הנתונים נרכשו מ 6-8 עכברים לכל קבוצה. חומרים מייצגים ושיטה להכניס את העכבר בהתנדבות לתוך הרסן מוצגים באיור 1.
כדי לבצע את בדיקת ההתנהגות ואת דגימת הדם לאחר אינדוקציה CIS, עכברים היו חשופים להליך ניסיוני כפי מסוכם באיור 2A. כפי שמ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

מאמר זה מספק פרוטוקול פשוט ומתוקננת עבור השראה של התנהגות כמו דיכאון בעכברים כרוניים מקיבוע באמצעות הרסן. בנוסף, התנהגות וטכניקות פיסיולוגיים כדי לוודא אינדוקציה של דיכאון מוסברים.

פרוטוקול מאמץ משתק כרוני לגרימת התנהגות של דיכאון כמו עכברים

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

התחל על ידי הגדרת החדר לאור ב 200 לוקס באמצעות מד לוקס דיגיטלי. האוס את העכבר בכלוב נפרד לפחות שבוע לפני הבדיקה, והצב את העכבר בחדר הבדיקה לפחות 30 דקות לפני הניסוי. החזק בעדינות את זנב העכבר כדי להימנע מתיחת העכבר, ולאחר מכן בזהירות למקם אותו על משטח מחוספס.מכסים את המרסן במגבת לבנה קטנה ולאחר מכן מניחים בעדינות את העכבר בפתיחת המרסן, כך שהעכבר נכנס לרסן בהתנדבות. לאחר מכן, מניחים את הסגירה כדי לרסן את העכבר חזק ככל האפשר, נזהרים כדי למנוע נזק לגוף, כגון זנב, רגליים, אשכים. לבסוף, במהלך החשיפה לרסן, למדוד את משקל הגוף ואת צריכת המזון כל 48 שעות.לפני הבדיקה, הרגל את העכברים לנוכחות של שני בקבוקי שתייה, אחד המכיל 0.1 סוכרוז טוחנת והשני המכיל מים רגילים במשך 48 שעות. החלף את המיקומים של שני הבקבוקים לאחר 24 שעות כדי להפחית את כל ההתבלבלות המיוצרת על ידי הטיה צדדית. ביום השלישי לשלול את העכברים של מים במשך 24 שעות.ואז ביום הניסוי לחשוף את העכברים לשני בקבוקי שתייה במשך שש שעות. לאחר שלוש שעות, החלף את המיקום של בקבוקי המים. תקליט את הנפח במיליליטר של תות תות תפוקת סוכרוז ומים שנצרכו, ולאחר מכן חשב את זיקה החיה לסוגרוז.לבסוף, לחשב העדפת סוכרוז כאחוז מנפח צריכת סוכרוז על פני צריכת הנוזלים הכוללת במהלך הבדיקה. התחל על ידי הבאת מתח הריסון הכרוני המושרה עכברים לחדר הבדיקה לפחות 30 דקות לפני תחילת הבדיקה השעיית הזנב. הגדר את החדר אור לתנאים עמומים ב 50 לוקס.לאחר מכן, הנח את המצלמה על 40 ס"מ מהעכבר. השהה את העכבר בחוזקה מהבר האופקי באמצעות סרט הדבקה. לאחר העכבר ממוקם באמצע תיבת ההשעיה להתחיל להקליט, ולצפות בשינויים התנהגותיים ברציפות במשך שש דקות.אם העכבר מנסה לטפס על הזנב שלו להשתמש במקל או לטפס פקק כדי למנוע ממנו לעשות זאת. בסוף הניסוי להעביר את העכבר לכלוב הבית שלה בזהירות להסיר את הקלטת תכלתו. לבסוף, השתמש בתוכנת מעקב וידאו כדי לנתח את הזמן המצטבר של תקופות חסרות תנועה.התוצאות מצביעות על ירידה במשקל הגוף של קבוצת חבר העמים ופחות צריכת מזון באופן משמעותי ביום הרביעי. בהשוואה לפקדים, הוצגה ירידה בהעדפת סוכרוז בקבוצת חבר העמים, בעוד שבזמן חוסר התנועה ובקורטיקוסטרון חלה עלייה משמעותית בזמן חוסר התנועה ובקורטיקוסטרון. כמו כן, גלוטמין בתוספת דיאטה ameliorates דיכאוני כמו התנהגויות, כפי שמוצג עבור משקל הגוף, צריכת מזון, העדפת סוכרוז, חוסר תנועה, קורטיקוסטרון.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

שימוש בלחץ חברתי כרוני לדיכאון לאחר לידה בדגם מניקות מכרסמים

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

בנייה של מערכי Microdrive להקלטות עצביות כרוניות בעכברים מתנהגים ערים

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

פרוטוקול לעכברי שיכון בסביבה מועשרת

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

הממד החברתי של מתח: ניסיון מניפולציות של תמיכה החברתית וזהות חברתית בחברת טרייר מתח מבחן

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

פרוטוקול מתח מתון כרוני בלתי צפוי לתסמיני דיכאון ייזום, שינויים התנהגותיים ותוצאות בריאותיות שליליות במכרסמים

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

פרוטוקול של בדיקות ידניות למדוד Sensation וכאב בבני אדם

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

שיטה חדשה עבור גרימת התנהגות כמו דיכאון אצל חולדות

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון להשראת אנהדוניה בעכברים

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

הרומן וראייה ומיקום אובייקט ההתנהגותי בוחן בעכברים על תקציב

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

פרוטוקול נמוכים של ניתוח טביעת רגל ותלייה תיבת הבדיקה עבור עכברים חלה הלחץ איפוק כרונית

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...