Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
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本研究は、文部科学省(NRF-2015R1A5A2008833、NRF-2016R1D1D1A1B03934279)の助成を受け、韓国国立研究財団(NRF)を通じて基礎科学研究プログラム(IHS)の助成を受けました。GNU-2016-02) 慶南国立大学

すべての実験プロトコルと動物ケアは、慶南国立大学動物研究のための大学動物ケア委員会(GLA-100917-M0093)のガイドラインに従って行われました。
1. 材料
<ol><li>マウス<ol>
<li>出生後第7週で22-24gのC57BL/6株の背景の男性を使用してください。実験の1週間前に飼育室で習慣化する。 注:すべてのマウスは、実験動物会社から購入しました。</li>
		<li>12時間の光/暗いサイクル(...

脳の複雑さとMDDの不均一性は、完全に状態を再現する動物モデルを作成することは困難です。多くの研究者は、アンヘドニア(刺激に対する関心の欠如)と絶望が進化的に保存され、動物モデルで定量化可能な行動と考えられている内方線型ベースのアプローチ32を使用して、この困難を克服しました。うつ病33の患者にも見られる。本論文では,CISとMDDの翻訳...

大うつ病性障害(MDD)は、世界的な精神障害の主な原因であり、発生率は予想よりも速く増加しています。2001年、世界保健機関(WHO)は、MDDが2020年までに世界で2番目に一般的な疾患になると予測しました。しかし、それはすでに2013年1で2番目に一般的でした.さらに、現在の抗うつ薬には、遅延効果、薬剤耐性、再発、および様々な副作用2、3を含む多くの制限がある。したがって、研究者は、より効果的な抗うつ薬を開発する必要があります。しかし、MDDのあいまいな病態生理学は、新規抗うつ薬の開発に障害を提示する。
長期ストレスはMDDの主な危険因子です。それはまた、MDD病因4、5に関連している視床下部下垂体副腎(HPA)軸で機能不全を誘発することができます。前述したように、HPA軸は、コルチコステロンレベル6、7、8を増加させることにより、うつ病や不安障害を含むストレス誘発性精神病態生理学において重要な役割を果たしている。9.多くの動物モデルは、MDD4の患者で観察されるHPA軸の持続的な活性化に基づいている。さらに、慢性的なストレスによって誘発される高いグルココルチコイドと皮下注射されたグルココルチコイドは、神経細胞死、神経過程の萎縮、げっ歯類の脳における成人神経新生の減少と共にうつ病行動を引き起こす10,11.うつ病に関連するもう一つの重要な脳領域は、中間前頭前皮質(mPFC)である。mPFCは、視床下部や扁桃体などの脳のサブ領域を制御する上で重要な役割を果たし、感情的な行動およびストレス応答8,9を制御する。例えば、後部mPFCにおける病変は、拘束ストレス12、13に起因するHPA軸機能障害および増強コルチコステロン分泌を誘発した。最近の研究はまた、繰り返し拘束ストレスがコルチコステロンレベルを増加させ、これはmPFC9のニューロンとアストロサイト間のグルタミン-グルタミンサイクルを介してグルタミン補充によって減少させることができることを示した。
MDDの病因を研究するために使用される最初の慢性ストレスパラダイムは、Katz14によって示唆された。ウィルナーらは、カッツの所見に基づいて慢性軽度ストレス(CMS)モデルを提案した。彼らは、抗うつ薬がCMS誘発性非ヘドニック様挙動15,16を回復したことを観察することによって、モデルが予測的妥当性を持っていることを確認した。一般的に、CMSモデルは、軽度の騒音、ケージの傾き、濡れた寝具、変化した明暗サイクル、ケージの揺れ、強制水泳、社会的敗北などの様々な軽度のストレスの組み合わせで構成されています。CMSモデルは研究者によって広く利用されている;ただし、このモデルは再現性が低く、時間とエネルギー効率が低下します。したがって、うつ病を評価するためのうつ病様行動および生理学的分析の誘導のための標準化された簡素化されたプロトコルの需要が高まっています。CMSモデルと比較して、慢性固定化ストレス(CIS;慢性拘束ストレスとも呼ばれる)モデルは、より簡単かつ効率的です。したがって、CISモデルは、慢性ストレス研究17、18、19、20、21、22、23、および、 24.さらに、CISは、うつ病行動25、26を開発するために、雄と雌の両方のマウスで使用することができる。CISの間、動物は2または4週間9、27、28のために1日あたり1〜8時間のボディフィットサイズのシリンダーに置かれる。このうち、1日2時間の拘束ストレス状態は、マウス9、28における痛みを最小限に抑えたうつ病行動を引き起こすのに十分である。拘束条件下では、血中コルチコステロンレベルは9、28、29と急速に増加した。いくつかの研究は、CISモデルが予測的な妥当性を有することを示しており、CIS誘発うつ病様症状が抗うつ薬19、20、30、31によって回復することを確認した。本明細では、CISの詳細な手順、ならびにマウスにおけるCIS後のいくつかの行動および生理学的結果を報告する。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

うつ病はまだ完全に理解されていないが、様々な原因要因が報告されている。最近、うつ病の有病率が増加している。しかし、うつ病の治療法やうつ病の研究は少ない。そこで本論文では、運動制限によるうつ病のマウスモデルを提案する。慢性軽度ストレス(CMS)は、うつ病のような行動を誘発するよく知られている技術です。しかし、それは様々な軽度のストレスの組み合わせからなる複雑な手順を必要とする。対照的に、慢性固定化ストレス(CIS)は、容易にアクセス可能な慢性ストレスモデルであり、一定期間の拘束を用いて動きを制限することによって抑うつ行動を誘発する拘束モデルから改変される。うつ病様挙動を評価するために、ショ糖優先試験(SPT)、テールサスペンション試験(TST)、およびストレスマーカーコルチコステロンレベルを測定するELISAアッセイを組み合わせた実験である。記載されたプロトコルは、CISの誘導およびうつ病の検証のための行動および生理学的要因の変化の評価を示す。

代表的な実験では、全てのデータを1群あたり6〜8匹のマウスから得た。代表的な材料と、マウスを自発的に拘束者に挿入する方法を図1に示す。
CIS誘導後の行動試験及び採血を行うために、マウスを図2Aに要約した実験手順に供した。図2および図3に示すように、CISはうつ病様の行動...

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A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

この記事では、拘束を用いて慢性固定化されたマウスにおける抑うつ様行動の誘導のための簡略化された標準化されたプロトコルを提供する。また、うつ病の誘導を検証する行動や生理学的手法について説明する。

マウスにおけるうつ病様行動を誘導する慢性固定化ストレスプロトコル

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

デジタルルクスメーターを使用して200ルクスで点灯する部屋を設定することで始めます。テストの少なくとも1週間前にマウスを別のケージに入れ、実験の少なくとも30分間は検査室にマウスを置きます。マウスの尻尾を軽く持ってマウスを引き張らないようにし、粗い表面に慎重に置きます。小さな白いタオルで拘束剤を覆い、マウスが自発的に拘束者に入るように、拘束器の開口部にマウスをそっと置きます。次に、閉じ込めを配置して、尾、足、睾丸などの身体への損傷を避けるように注意して、マウスをできるだけしっかりと拘束します。最後に、拘束剤への暴露の間に、体重および食物摂取を48時間ごとに測定する。試験の前に、マウスを2つの飲用ボトル(1つは0.1モルスクロースを含み、もう1つはプレーンウォーターを含む)の存在を48時間習慣付けます。サイドバイアスによって生成される任意の交位を減らすために24時間後に2本のボトルの位置を切り替えます。3日目にマウスの水を24時間奪う。その後、実験の日に6時間2つの飲用ボトルにマウスを露出させます。3時間後、水筒の位置を切り替えます。消費されたスクロース溶液と水のミリリットルで体積を記録し、次に動物のショ糖への親和性を計算します。最後に、テスト中の総流体消費量に対するスクロース消費量の割合として、スクロースの好みを計算します。尾の懸濁液試験を開始する少なくとも30分前に、慢性拘束ストレス誘発マウスを試験室に持ち込むことから始める。部屋のライトを50ルクスの状態を薄暗くするように設定します。次に、マウスから約40センチメートルのカメラを置きます。粘着テープを使用して、水平バーからしっかりとマウスを吊り下げます。マウスがサスペンションボックスの中央に配置された後、記録を開始し、6分間連続的に動作変化を観察します。マウスが尾を登ろうとする場合は、スティックを使用するか、ストップを登って停止しないようにします。実験の最後にマウスをホームケージに移動し、テープを尾部から慎重に取り外します。最後に、ビデオトラッキングソフトウェアを使用して、不動の期間の累積時間を分析します。結果は、CIS群の体重の減少と4日目の食物摂取量の有意に減少を示す。対照と比較して、CIS群におけるスクロース好みの減少が示されたが、不動時間およびコルチコステロンの有意な増加があった。また、グルタミンサプリメントダイエットは、体重、食物摂取、スクロース嗜好、不動性、コルチコステロンに対して示されるように、うつ病のような行動を改善する。

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

げっ歯類の授乳でモデル産後うつ病への慢性的社会的ストレスを使用

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

アウェイク行動マウスにおける慢性神経録音のためにマイクロドライブアレイの構築

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

豊かな環境の住宅マウス用のプロトコル

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

トリーアの社会ストレステストにおけるソーシャルサポートと社会的アイデンティティの実験操作：ストレスの社会的側面

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

げっ歯類での抑うつ症状を扇動、行動の変化と負の健康アウトカムのための予測不可能な慢性的な軽度のストレスプロトコル

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

人間にセンセーションと痛みを測定するために、手動テストのプロトコル

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

マウスで無快感を誘導するため予測不可能な慢性的な軽度ストレス プロトコル

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

新規オブジェクト認識と行動の予算上のマウスでテスト オブジェクトの場所

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

・ フット プリント分析とマウスのテスト ボックスをぶら下げの低コスト プロトコル適用慢性拘束応力

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...