Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

Denne forskningen ble støttet av Basic Science Research program gjennom National Research Foundation of Korea (NRF) finansiert av utdanningsdepartementet (NRF-2015R1A5A2008833 og NRF-2016R1D1A3B03934279) og tildeling av instituttet av helsefag (IHS GNU-2016-02) ved Gyeongsang National University.

Alle eksperimentelle protokoller og dyr bekymre var gjennomført alt etter veiledningene av universitetet dyr bekymre komité for dyr forskning av Gyeongsang Nasjonaluniversitet (GLA-100917-M0093).
1. materialer
<ol><li>Mus<ol>
<li>Bruk menn av C57BL/6 belastnings bakgrunn som veier 22 – 24 g ved postnatal uke 7. Venne i avl rommet for 1 uke før eksperimentene. Merk: alle mus ble kjøpt fra et laboratorium dyr selskap.</li>
		<li>Huset mus individuelt i en temperatur-kontrollerte vivar...

Kompleksiteten i hjernen og heterogenitet av maksimal reduksjon gjør det vanskelig å lage dyremodeller som gjengir tilstanden helt. Mange forskere har overvunnet denne vanskeligheten ved hjelp av en endophenotype tilnærming32, der anhedonia (mangel på interesse for givende stimuli) og fortvilelse anses evolutionarily bevart og målbare atferd i dyremodeller, som også er sett hos pasienter med depresjon33. I dagens papir, har vi presentert en metode der CIS var tilstrek...

Alvorlig depressiv lidelse (maksimal reduksjon) er den ledende årsaken til mental funksjonshemming over hele verden, med en forekomst som øker raskere enn forventet. I 2001 spådde verdenshelseorganisasjon at maksimal reduksjon vil være den nest vanligste sykdommen i verden innen 2020. Men det var allerede den nest vanligste i 20131. Dessuten, aktuelle antidepressiva ha mange begrensninger, inkluderer forsinket effektiviteten, bedøve motstand, tilbakefall, og forskjellige side virkninger2,3. Forskere må derfor utvikle mer effektive antidepressiva. Den tvetydige patofysiologi av maksimal reduksjon utgjør imidlertid et hinder for utviklingen av nye antidepressiva.
Lang tids stress er den viktigste risikofaktoren for maksimal reduksjon. Det kan indusere dysfunksjon i hypothalamus-hypofysen-adrenal (HPA) aksen, som også er relatert til reduksjon etiologi4,5. Som beskrevet tidligere, spiller HPA aksen en avgjørende rolle i stress-indusert psykiatriske patofysiologi inkludert depresjon og angst lidelser ved å øke corticosterone nivåer6,7,8, 9. mange dyremodeller har vært basert på vedvarende aktivering av HPA-aksen, som er observert hos pasienter med maksimal reduksjon4. Videre høy glukokortikoider indusert av kronisk stress og subkutant injisert glukokortikoider forårsake depressiv atferd sammen med nevrale celle død, atrofi av neuronal prosesser, og redusert voksen neurogenesis i hjernen av gnagere10 , 11. en annen viktig hjerne område forbundet med depresjon er den midtre prefrontal cortex (mPFC). MPFC spiller en avgjørende rolle i å kontrollere hjernens regioner, slik som hypothalamus og amygdala, som kontrollerer følelsesmessig adferd og stress respons8,9. For eksempel, lesjoner i rygg mPFC indusert HPA aksen dysfunksjon og forbedret corticosterone sekresjon på grunn av tilbakeholdenhet stress12,13. En fersk studie viste også at gjentatt tilbakeholdenhet stress økte corticosterone nivåer, som kan bli redusert med glutamin tilskudd via glutamat-glutamin syklus mellom neurons og astrocytt i mPFC9.
Det første paradigmet for kronisk stress som ble brukt til å studere etiologi av maksimal reduksjon, ble foreslått av Katz14. Willner et al. deretter foreslo en kronisk mild stress (CMS) modell basert på resultatene av Katz. De bekreftet at modellen hadde prediktiv gyldighet ved å observere at antidepressiva restaurert CMS-indusert anhedonic-lignende oppførsel15,16. Vanligvis består CMS modellen av en kombinasjon av ulike milde påkjenninger, slik som mild støy, bur vippe, vått sengetøy, forandret lys-mørke sykluser, bur risting, tvang svømming, og sosialt nederlag. Den CMS modellen er mye utnyttet av forskere; Imidlertid er denne modellen av dårlig replicability, og tid-og energi-ineffektiv. Derfor er det en økende etterspørsel etter en standardisert og forenklet protokoll for induksjon av depressive-lignende atferd og fysiologisk analyse for å evaluere depresjon. Sammenlignet med CMS modellen, den kroniske immobilisering stress (CIS; også kjent som kronisk tilbakeholdenhet stress) modellen er enklere og mer effektiv; Derfor kan CIS-modellen bli mye brukt i kroniske stress studier17,18,19,20,21,22,23, 24. i tillegg kan CIS brukes i både mannlige og kvinnelige mus for å utvikle depressive adferd25,26. I løpet av CIS, dyrene er oppstilt inne en kropp-anfall tok mål sylinderen for 1-8 timene per dag for 2 eller 4 ukens9,27,28. Av disse er tilbakeholdenhet stress condition for 2 timer per dag for 2 uker er tilstrekkelig til å forårsake depressive atferd med minimal smerte i mus9,28. Under tilbakeholdenhet betingelser, blod corticosterone nivåer ble raskt økt9,28,29. Flere studier har vist at CIS-modellen har prediktiv gyldighet, bekrefter at CIS-indusert depressive-lignende symptomer er gjenopprettet av antidepressiva19,20,30,31. Heri rapporterer vi detaljerte prosedyrer for CIS, samt noen atferdsmessige og fysiologiske utfall etter CIS i mus.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

Depresjon er ennå ikke fullt ut forstått, men ulike årsaksfaktorer har blitt rapportert. Nylig har utbredelsen av depresjon økt. Men terapeutiske behandlinger for depresjon eller forskning på depresjon er knappe. Således, i dagens papir, foreslår vi en mus modell av depresjon indusert av bevegelse begrensning. Kronisk mild stress (CMS) er en velkjent teknikk for å indusere depressiv-lignende oppførsel. Imidlertid nødvendiggjør det en kompleks prosedyre bestående av en kombinasjon av ulike milde påkjenninger. I kontrast, kronisk immobilisering stress (CIS) er en lett tilgjengelig kronisk stress modell, modifisert fra en tilbakeholdenhet modell som induserer depressiv atferd ved å begrense bevegelsen ved hjelp av en restrainer for en viss periode. Å vurdere depressive-lignende atferd, det sukrose preferanse test (SPT), halen suspensjon test (TST), og ELISA analysen å måle stress markør corticosterone nivåer kombineres i dagens eksperiment. De beskrevne protokollene illustrerer induksjon av CIS og evaluering av endringene i atferd og fysiologiske faktorer for validering av depresjon.

I det representative eksperimentet ble alle data anskaffet fra 6-8 mus per gruppe. Representative materialer og metoden for å sette inn musen frivillig inn i restrainer er vist i figur 1.
For å utføre atferds testen og blodprøve etter CIS-induksjon ble musene utsatt for den eksperimentelle prosedyren som oppsummert i figur 2a. Som vist i figur 2 og Figur 3, induserer CIS-...

Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Denne artikkelen gir en forenklet og standardisert protokoll for induksjon av depressiv-lignende adferd i kronisk immobilisert mus ved hjelp av en restrainer. I tillegg er atferd og fysiologiske teknikker for å verifisere induksjon av depresjon forklart.

En kronisk immobilisering stress Protocol for inducing depresjon-lignende oppførsel i mus

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

Begynn med å sette rommet til lys på 200 lux ved hjelp av en digital lux meter. Hus musen i et eget bur minst en uke før testing, og plasser musen i testrommet i minst 30 minutter før eksperimentet. Hold forsiktig musehalen for å unngå å spente musen, og plasser den forsiktig på en grov overflate.Dekk stativet med et lite hvitt håndkle og plasser deretter forsiktig musen ved åpningen av stativet, slik at musen kommer inn i stativet frivillig. Deretter plasserer du lukkingen for å holde musen så stram som mulig, vær forsiktig med å unngå skade på kroppen, for eksempel hale, føtter og testikler. Til slutt, under eksponeringen for begrensningshold, mål kroppsvekt og matinntak hver 48.Før testing, habituate musene til tilstedeværelsen av to drikkeflasker, en som inneholder 0,1 molar sukrose og den andre inneholder rent vann i 48 timer. Bytt posisjonene til de to flaskene etter 24 timer for å redusere eventuelle forvirrende produsert av en sidebias. På den tredje dagen frata musene av vann i 24 timer.Så på dagen for eksperimentet utsette musene til to drikkeflasker i seks timer. Etter tre timer, bytt posisjonen til vannflaskene. Registrer volumet i milliliter sukroseløsning og vann som forbrukes, og beregn deretter dyrets affinitet til sukrose.Til slutt beregner sukrose preferanse som en prosentandel av volumet av sukrose forbruk over det totale væskeforbruket under testen. Begynn med å bringe kronisk tilbakeholdenhet stress indusert mus inn i testrommet minst 30 minutter før du begynner halen suspensjon test. Sett rommet lys til dim forhold på 50 lux.Deretter plasserer du kameraet ca 40 centimeter fra musen. Suspender musen godt fra den horisontale linjen ved hjelp av tape. Etter at musen er plassert i midten av suspensjonsboksen, start opptak, og observere atferdsendringer kontinuerlig i seks minutter.Hvis musen forsøker å klatre halen bruke en pinne eller klatre stopper for å hindre det fra å gjøre det. På slutten av eksperimentet flytte musen til sitt hjem bur og forsiktig fjerne båndet fra halen. Til slutt bruker du videosporingsprogramvare for å analysere den akkumulerte tiden for immobile perioder.Resultatene indikerer reduksjon i kroppsvekt for CIS-gruppen og betydelig mindre matinntak på dag fire. Sammenlignet med kontroller ble det vist en reduksjon for sukrosepreferanser i CIS-gruppen, mens det var en signifikant økning i immobilitetstid og kortikosteron. Videre, en glutamin supplert diett lindrer depressiv som atferd, som vist for kroppsvekt, matinntak, sukrose preferanse, immobilitet, og kortikosteron.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Ved hjelp av kronisk sosialt stress å Model fødselsdepresjon i Diegivende Gnagere

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Bygging av Microdrive Arrays for Kroniske Neural Recordings i Awake Behaving Mus

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

En protokoll for boliger Mus i en Beriket miljø

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

Den sosiale dimensjonen av Stress: Eksperimentelle manipulasjoner av sosial støtte og sosial identitet i Trier sosialt stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

En Uforutsigbar Kronisk Mild Stress Protokoll for egge depressive symptomer, atferdsendringer og negative helseutfall hos gnagere

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

En protokoll av manuelle tester for å måle Sensation og smerte hos mennesker

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

En ny metode for å indusere en depresjon-lignende oppførsel i rotter

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Uforutsigbare kronisk Mild Stress protokollen for å indusere Anhedonia i mus

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Romanen objekt gjenkjenning og objektet plassering opptreden i mus på et budsjett

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Rimelig protokollen fotavtrykk analyse og hengende boks Test for mus brukes kronisk tilbakeholdenhet Stress

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...