Name: a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice
Uploaded: 2019-05-15T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

Bu araştırma, Eğitim Bakanlığı (NRF-2015R1A5A2008833 ve NRF-2016R1D1A3B03934279) tarafından finanse edilen Kore Ulusal Araştırma Vakfı (NRF) ile temel bilim araştırma programı tarafından destekleniyordu ve Sağlık Bilimleri Enstitüsü 'nün hibe (ıHS GNU-2016-02) Gyeongsang Ulusal Üniversitesi 'nde.

Tüm deneysel protokoller ve hayvan bakımı, Gyeongsang Ulusal Üniversitesi (GLA-100917-M0093) hayvan araştırmaları için üniversite Hayvansal bakım Komitesi 'nin yönergelerine göre yapılmıştır.
1. malzemeler
<ol><li>Fare<ol>
<li>Postnatal hafta 7 ' de 22 – 24 g tartım C57BL/6 gerinim arka planı kullanın. Deneylerden 1 hafta önce üreme odasında habituate. Not: tüm fareler bir laboratuar hayvan şirketi satın alındı.</li>
		<li>12 saatlik ışık/karanlık döngüs...

Beynin karmaşıklığı ve MDD heterojenliği tamamen durumu yeniden hayvan modelleri oluşturmak için zor hale. Birçok araştırmacı bir endophenotype tabanlı yaklaşım32kullanarak bu zorluk üstesinden gelmiştir, hangi Anhedoni (ödüllendirici uyaranlara ilgi eksikliği) ve umutsuzluk evrimsel olarak korunan ve ölçülebilir davranışlar hayvan modellerinde kabul edilir, Ayrıca depresyon33hastalarda görülür. Şu anda, BDT ve MDD arasında translasyonel alaka...

Major depresif bozukluk (MDD) dünya çapında zihinsel özürlülük önde gelen nedenidir, beklenenden daha hızlı artan bir insidansı ile. 2001 yılında, Dünya Sağlık Örgütü MDD 2020 tarafından dünyada ikinci en yaygın hastalık olacağını tahmin etmiştir. Ancak, zaten ikinci en yaygın 20131oldu. Buna ek olarak, mevcut antidepresanlar gecikme etkinliği, ilaç direnci, Relapse ve çeşitli yan etkileri2,3dahil olmak üzere birçok sınırlama vardır. Araştırmacılar bu nedenle daha etkili antidepresanlar geliştirmelidir. Ancak MDD 'nin belirsiz patofizyolojisi, yeni antidepresanların gelişmesine engel teşkil etmiştir.
Uzun vadeli stres MDD için ana risk faktörüdür. Aynı zamanda MDD etiyolojisi4,5ile ilgili Hipotalamik-hipofiz-adrenal (hPa) eksen, disfonksiyon neden olabilir. Daha önce açıklandığı gibi, hPa eksen stres kaynaklı psikiyatrik patofizyolojide depresyon ve anksiyete bozuklukları da dahil olmak üzere önemli bir rol oynar kortikoone seviyeleri artırarak6,7,8, 9. many hayvan modelleri, MDD4olan hastalarda gözlenen hPa ekseninin sürekli aktivasyonuna dayanmaktadır. Dahası, kronik stres ve subkutan enjekte glukokortikoidler tarafından indüklenen yüksek glukokortikoidler nöronal hücre ölümü ile birlikte depresif davranışlar neden, Nörojen süreçlerin atrofi, ve kemirgenler beynin azaltılmış yetişkin nörojenezi10 , 11. depresyon ile ilişkili başka bir önemli beyin alanı medial prefrontal korteks (MPFC). MPFC hipotalamus ve amigdala gibi beyin subregions kontrol önemli bir rol oynar, bu kontrol duygusal davranış ve stres tepkiler,8,9. Örneğin, dorsal MPFC kaynaklı hPa eksen disfonksiyonunda lezyonlar ve kısıtlama stresi nedeniyle Gelişmiş kortikoone salgılanması12,13. Yeni bir çalışmada aynı zamanda tekrarlanan kısıtlama stres artmış kortikosteron seviyeleri gösterdi, hangi glutamat ile glüamin takviyesi tarafından azalmış olabilir-glutamin döngüsü nöronlar ve astrosit arasında mPFC9.
MDD etiyolojisini incelemek için kullanılan ilk kronik stres paradigması Katz14tarafından önerilmiştir. Willner ve al. sonra Katz bulguları dayalı bir kronik hafif stres (CMS) modeli önerdi. Bu modelin, antidepresanların CMS kaynaklı anhedonik davranış gibi15,16' ya geri yüklendiğini gözlemleyerek öngörü geçerliliği olduğunu doğruladı. Tipik olarak, CMS modeli hafif gürültü, kafes eğme, ıslak yatak, değiştirilmiş ışık-karanlık döngüleri, kafes sallayarak, zorla yüzme ve sosyal yenilgi gibi çeşitli hafif gerilimlerin bir kombinasyonu oluşur. CMS modeli yaygın araştırmacılar tarafından kullanılmaktadır; Ancak, bu model kötü çoğaltabilirlik ve zaman ve enerji-verimsizdir. Bu nedenle, depresyon değerlendirmek için depresif benzeri davranış ve fizyolojik analiz indüksiyon için standardize ve basitleştirilmiş bir protokol için artan bir talep vardır. CMS modeline kıyasla, kronik immobilizasyon stres (BDT; Ayrıca kronik kısıtlama stres olarak da bilinir) modeli daha basit ve daha etkilidir; Bu nedenle, BDT modeli yaygın kronik stres çalışmaları kullanılabilir17,18,19,20,21,22,23, 24. Buna ek olarak, BDT hem erkek hem de kadın fareler depresif davranışlar geliştirmek için kullanılabilir25,26. BDT döneminde, hayvanlar 2 veya 4 hafta9,27,28için günde 1-8 saat boyunca vücut uygun boyutta bir silindir yerleştirilir. Bu, 2 hafta boyunca günde 2 saat için kısıtlama stres koşulu fareler en az ağrı ile depresif davranışlar neden yeterlidir9,28. Kısıtlama koşullarında kan kortikoone seviyeleri hızla arttı9,28,29. Çeşitli çalışmalar BDT modelinin öngörü geçerliliği olduğunu göstermiştir, BDT kaynaklı depresif belirtileri antidepresanlar tarafından restore edildiğini teyit19,20,30,31. Burada, BDT 'nin ayrıntılı prosedürlerini, ayrıca CIS 'den sonra bazı davranışsal ve fizyolojik sonuçları rapor ediyoruz.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml disposable syringes</td>
			<td>Sungshim Medical</td>
			<td>P000CFDO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>A&#38;D Company</td>
			<td>FX-2000i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball nozzle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCTV camera</td>
			<td>KOCOM</td>
			<td>KCB-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kits</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital lux meter</td>
			<td>TES</td>
			<td>TES-1330A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethovision XT 7.1</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>HANA PHARM CO., LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Ifran solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Koatech</td>
			<td></td>
			<td>C57BL/6 strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restrainer</td>
			<td>Dae-jong Instrument Industry</td>
			<td>DJ-428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharose (sucrose)</td>
			<td>DAEJUNG</td>
			<td>7501-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal isoflurane anaesthetic system</td>
			<td>Summit</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic bar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab for TST test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail suspension box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>The apparatus was made in the lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Electronics Tomorrow</td>
			<td>TL-2530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bottle</td>
			<td>Jeung Do B&#38;P</td>
			<td>JD-C-79</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a chronic immobilization stress protocol for inducing depression-like behavior in mice

Depresyon henüz tam olarak anlaşılmadı, ancak çeşitli etken faktörler bildirilmiştir. Son zamanlarda, depresyon prevalansı arttı. Ancak, depresyon veya depresyon araştırma için terapötik tedaviler az. Böylece, mevcut yazıda, biz hareket kısıtlaması ile indüklenen depresyon bir fare modeli öneriyoruz. Kronik hafif stres (CMS) depresif benzeri davranışları teşvik etmek için tanınmış bir tekniktir. Ancak, çeşitli hafif gerilimlerin bir kombinasyonundan oluşan karmaşık bir prosedür gerektirir. Buna karşılık, kronik immobilizasyon stres (BDT), belirli bir süre için bir kısıtlama kullanarak hareketi kısıtlayarak depresif davranışı tetikleyen bir kısıtlama modelinden değiştirilmiş, kolayca erişilebilen bir kronik stres modelidir. Depresif benzeri davranışları değerlendirmek için, sakaroz tercih testi (SPT), kuyruk süspansiyon testi (TST), ve stıtk tahlil stres Marker kortikosteron seviyeleri ölçmek için bu deney birleştirilir. Açıklanan protokoller, CIS indüksiyonu ve depresyon doğrulama için davranış ve fizyolojik faktörlerin değişikliklerin değerlendirilmesi göstermektedir.

Temsili denemede tüm veriler grup başına 6-8 fareler tarafından elde edilmiştir. Şekil 1' de temsili materyaller ve fareyi gönüllü olarak eklemek için yöntem gösterilir.
BDT indüksiyonunda davranış testini ve kan örneklemesini gerçekleştirmek için fare, Şekil 2a'da özetlenen deneysel prosedüre tabi tutulmuştur. Şekil 2 ve Şekil 3' te gösterildiği gi...

Watch this Scientific Journal Video about A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Bu makalede, bir kısıtlamacı kullanarak kronik immobilize fareler depresif benzeri davranış indüksiyon için Basitleştirilmiş ve standartlaştırılmış bir protokol sağlar. Buna ek olarak, depresyon indüksiyonu doğrulamak için davranış ve fizyolojik teknikler açıklanmıştır.

Farelerde depresyon benzeri davranışlar Inducing için kronik Immobilizasyon Stres Protokolü

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

Dijital lux metre kullanarak odayı 200 lux'ta ışığa ayarlayarak başlayın. Fareyi testten en az bir hafta önce ayrı bir kafese yerleştirin ve fareyi denemeden önce en az 30 dakika boyunca test odasına yerleştirin. Fareyi çekmemek için fare kuyruğunu hafifçe tutun ve ardından pürüzlü bir yüzeye dikkatlice yerleştirin.Ölçücünü küçük beyaz bir havluyla kapatın ve fareyi dikkatlice tutamacın açılışına yerleştirin, böylece fare dizginleyiciye gönüllü olarak girer. Daha sonra, kuyruk, ayak lar ve testisler gibi vücuda zarar vermemeye dikkat edin, fareyi mümkün olduğunca sıkı dizginlemek için kapatmayı yerleştirin. Son olarak, kısıtlayıcı maruz kalma sırasında, vücut ağırlığı ve gıda alımını ölçmek her 48 saatte bir.Testten önce, fareleri biri 0,1 azı sakaroz, diğeri de 48 saat boyunca sade su içeren iki içme şişesinin varlığına alışın. Bir yan önyargı tarafından üretilen herhangi bir şaşırtıcı azaltmak için 24 saat sonra iki şişe pozisyonları değiştirin. Üçüncü gün fareleri 24 saat boyunca sudan mahrum bırak.Sonra deney günü fareleri altı saat boyunca iki içme şişesine maruz bırak. Üç saat sonra, su şişeleri konumunu değiştirin. Sakaroz çözeltisi ve tüketilen su mililitre hacmi kaydedin ve sonra sakaroz için hayvanın yakınlık hesaplamak.Son olarak, sakaroz tercihini test sırasında ki toplam sıvı tüketimine göre sakaroz tüketiminin bir yüzdesi olarak hesaplayın. Kuyruk süspansiyon testi başlamadan en az 30 dakika önce test odasına kronik kısıtlama stresine bağlı fareler getirerek başlayın. OdaNın ışığını 50 lux'ta loş koşullara ayarlayın.Daha sonra, kamerayı fareden yaklaşık 40 santimetre uzakta yerleştirin. Yapışkan bant kullanarak fareyi yatay çubuktan sıkıca askıya alın. Fare süspansiyon kutusunun ortasına konumlandırıldıktan sonra kayıt başlatın ve davranışdeğişikliklerini altı dakika boyunca sürekli olarak gözlemleyin.Fare kuyruğuna tırmanmaya çalışırsa, bunu önlemek için bir sopa kullanın veya stoper tırmanın. Denemenin sonunda fareyi ev kafesine taşıyın ve bandı kuyruğundan dikkatlice çıkarın. Son olarak, hareketsiz dönemlerin birikmiş süresini analiz etmek için video izleme yazılımı kullanın.Sonuçlar BDT grubu için vücut ağırlığında azalma ve dördüncü gün önemli ölçüde daha az gıda alımı göstermektedir. Kontrollerle karşılaştırıldığında BDT grubunda sakaroz tercihinde azalma görülürken, hareketsizlik süresi ve kortikosteronda önemli bir artış görüldü. Ayrıca, bir glutamin destekli diyet davranışları gibi depresif iyileştirir, vücut ağırlığı için gösterildiği gibi, gıda alımı, sakaroz tercihi, hareketsizlik, ve kortikosteron.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Kemirgenler Emziren yılında Model Doğum Sonrası Depresyon Kronik Sosyal Stres Kullanımı

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Uyanık davranmak Fare Kronik Sinir Kayıtlar için Microdrive Diziler İnşaatı

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Bir Zenginleştirilmiş Ortamında Konut Fareler için Protokol

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

Stres Sosyal Boyutu: Trier Sosyal Sosyal Destek ve Sosyal Kimlik Deneysel manipülasyonları Testi Stres

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Tahrik Depresif Belirtiler, Davranış Değişiklikleri ve Kemirgenler Negatif Sağlık Kazanımları için Öngörülemeyen Kronik Hafif Stres Protokolü

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

Manuel Testler Protokolü İnsanlarda Sensation ve Ağrı Tedbir

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Bir depresyon gibi davranış Sıçanlarda Inducing için yeni bir yöntem

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Anhedonia farelerde Inducing için öngörülemeyen kronik hafif stres Protokolü

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Yeni nesne tanıma ve nesnenin konumunu bir bütçe farelerde test davranış

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress

Düşük maliyetli Protokolü ayak izi analizi ve kutu testi fareler için asılı kronik kısıtlama stres uygulanan

Gait disturbance is frequently observed in patients with movement disorders. In mouse models used for movement disorders, gait analysis is important ...