Name: shootward movement of cfda tracer loaded in the bottom sink tissues of arabidopsis
Uploaded: 2019-05-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Shootward Movement of CFDA Tracer Loaded in the Bottom Sink Tissues of Arabidopsis at JoVE.com

تم تمويل هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (31671257) ومركز هوبي للابتكار التعاوني لصناعه الحبوب (LXT-16-18).

1. Arabidopsis النمو الراسي في MS المتوسطة
<ol><li>الداخلية من خزانه تدفق الرقائقي يحتاج إلى ان تعامل مع 30 دقيقه ضوء الاشعه فوق البنفسجية و 15 دقيقه تدفق الهواء قبل الاستخدام. تاكد من إغلاق الباب الزجاجي عندما يكون ضوء الاشعه فوق البنفسجية علي. رش جميع الاداات واللوحات مع 70 ٪ الايثانول قبل وضعها ...

<ol>
	<li>Grignon, N., Touraine, B., Durand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=6(5)Carboxyfluorescein+as+a+tracer+of+phloem+sap+translocation.">6(5)Carboxyfluorescein as a tracer of phloem sap translocation.</a> American Journal of Botany. 76, 871-877 (1989).</li><li>Wright, K. M., Oparka, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fluorescent+probe+HPTS+as+a+phloem-mobile,+symplastic+tracer:+an+evaluation+using+confocal+laser+scanning+microscopy.">The fluorescent probe HPTS as a phloem-mobile, symplastic tracer: an evaluation using confocal laser scanning microscopy.</a> Journal of Experimental Botany. 47 (3), 439-445 (1996).</li><li>Oparka, K. J., Prior, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+of+Lucifer+Yellow+CH+in+potato+tuber+storage+tissues:+A+comparison+of+symplastic+and+apoplastic+transport.">Movement of Lucifer Yellow CH in potato tuber storage tissues: A comparison of symplastic and apoplastic transport.</a> Planta. 176 (4), 533-540 (1988).</li><li>Knoblauch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multispectral+Phloem-Mobile+Probes:+Properties+and+Applications.">Multispectral Phloem-Mobile Probes: Properties and Applications.</a> Plant Physiology. 167 (4), 1211-1220 (2015).</li><li>Oparka, K. J., Duckett, C. M., Prior, D. A. M., Fisher, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+imaging+of+phloem+unloading+in+the+root+tip+of+Arabidopsis.">Real-time imaging of phloem unloading in the root tip of Arabidopsis.</a> The Plant Journal. 6 (5), 759-766 (1994).</li><li>Viola, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tuberization+in+Potato+Involves+a+Switch+from+Apoplastic+to+Symplastic+Phloem+Unloading.">Tuberization in Potato Involves a Switch from Apoplastic to Symplastic Phloem Unloading.</a> The Plant Cell. 13 (2), 385-398 (2001).</li><li>Roberts, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phloem+Unloading+in+Sink+Leaves+of+Nicotiana+benthamiana:+Comparison+of+a+Fluorescent+Solute+with+a+Fluorescent+Virus.">Phloem Unloading in Sink Leaves of Nicotiana benthamiana: Comparison of a Fluorescent Solute with a Fluorescent Virus.</a> The Plant Cell. 9 (8), 1381-1396 (1997).</li><li>P&#233;ron, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+Insights+into+Phloem+Unloading+and+Expression+of+Sucrose+Transporters+in+Vegetative+Sinks+of+the+Parasitic+Plant+Phelipanche+ramosa+L+(Pomel).">New Insights into Phloem Unloading and Expression of Sucrose Transporters in Vegetative Sinks of the Parasitic Plant Phelipanche ramosa L (Pomel).</a> Frontiers in Plant Science. 7 (2048), (2017).</li><li>Spallek, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interspecies+hormonal+control+of+host+root+morphology+by+parasitic+plants.">Interspecies hormonal control of host root morphology by parasitic plants.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. 114 (20), 5283-5288 (2017).</li><li>Complainville, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nodule+initiation+involves+the+creation+of+a+new+symplasmic+field+in+specific+root+cells+of+medicago+species.">Nodule initiation involves the creation of a new symplasmic field in specific root cells of medicago species.</a> The Plant Cell. 15 (12), 2778-2791 (2003).</li><li>Bederska, M., Borucki, W., Znojek, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+of+fluorescent+dyes+Lucifer+Yellow+(LYCH)+and+carboxyfluorescein+(CF)+in+Medicago+truncatula+Gaertn.+roots+and+root+nodules.">Movement of fluorescent dyes Lucifer Yellow (LYCH) and carboxyfluorescein (CF) in Medicago truncatula Gaertn. roots and root nodules.</a> Symbiosis. 58 (1-3), 183-190 (2012).</li><li>Robards, A. W., Lucas, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmodesmata.">Plasmodesmata.</a> Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology. 41 (1), 369-419 (1990).</li><li>Roberts, A. G., Oparka, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmodesmata+and+the+control+of+symplastic+transport.">Plasmodesmata and the control of symplastic transport.</a> Plant, Cell &amp; Environment. 26 (1), 103-124 (2003).</li><li>Duckett, C. M., Oparka, K. J., Prior, D. A. M., Dolan, L., Roberts, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dye-coupling+in+the+root+epidermis+of+Arabidopsis+is+progressively+reduced+during+development.">Dye-coupling in the root epidermis of Arabidopsis is progressively reduced during development.</a> Development. 120 (11), 3247-3255 (1994).</li><li>Palevitz, B. A., Hepler, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+dye+coupling+of+stomatal+cells+of+Allium+and+Commelina+demonstrated+by+microinjection+of+Lucifer+yellow.">Changes in dye coupling of stomatal cells of Allium and Commelina demonstrated by microinjection of Lucifer yellow.</a> Planta. 164 (4), 473-479 (1985).</li><li>van Bel, A. J. E., Kempers, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symplastic+isolation+of+the+sieve+element-companion+cell+complex+in+the+phloem+of+Ricinus+communis+and+Salix+alba+stems.">Symplastic isolation of the sieve element-companion cell complex in the phloem of Ricinus communis and Salix alba stems.</a> Planta. 183 (1), 69-76 (1991).</li><li>Erwee, M. G., Goodwin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symplast+domains+in+extrastelar+tissues+of+Egeria+densa+Planch.">Symplast domains in extrastelar tissues of Egeria densa Planch.</a> Planta. 163 (1), 9-19 (1985).</li><li>Oparka, K. J., Prior, D. A. M., Wright, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symplastic+communication+between+primary+and+developing+lateral+roots+of+Arabidopsis+thaliana.">Symplastic communication between primary and developing lateral roots of Arabidopsis thaliana.</a> Journal of Experimental Botany. 46 (2), 187-197 (1995).</li><li>Christensen, N. M., Faulkner, C., Oparka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+Unidirectional+Flow+through+Plasmodesmata.">Evidence for Unidirectional Flow through Plasmodesmata.</a> Plant Physiology. 150 (1), 96-104 (2009).</li><li>Wr&#243;bel-Marek, J., Kurczy&#324;ska, E., P&#322;achno, B. J., Kozieradzka-Kiszkurno, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+symplasmic+domains+in+the+embryo+and+seed+of+Sedum+acre+L.+(Crassulaceae).">Identification of symplasmic domains in the embryo and seed of Sedum acre L. (Crassulaceae).</a> Planta. 245 (3), 491-505 (2017).</li><li>Liang, D., White, R. G., Waterhouse, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+silencing+in+Arabidopsis+spreads+from+the+root+to+the+shoot,+through+a+gating+barrier,+by+template-dependent,+non-vascular,+cell+to+cell+movement.">Gene silencing in Arabidopsis spreads from the root to the shoot, through a gating barrier, by template-dependent, non-vascular, cell to cell movement.</a> Plant Physiology. 159 (3), 984-1000 (2012).</li><li>Radford, J. E., White, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+tissue-preparation-induced+callose+synthesis+on+estimates+of+plasmodesma+size+exclusion+limits.">Effects of tissue-preparation-induced callose synthesis on estimates of plasmodesma size exclusion limits.</a> Protoplasma. 216 (1-2), 47-55 (2001).</li><li>Kollist, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Responses+to+Abiotic+Stress:+Priming+the+Landscape+for+the+Signal+Transduction+Network.">Rapid Responses to Abiotic Stress: Priming the Landscape for the Signal Transduction Network.</a> Trends in Plant Science. 24 (1), 25-37 (2019).</li><li>Haupt, S., Duncan, G. H., Holzberg, S., Oparka, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+Symplastic+Phloem+Unloading+in+Sink+Leaves+of+Barley.">Evidence for Symplastic Phloem Unloading in Sink Leaves of Barley.</a> Plant Physiology. 125 (1), 209-218 (2001).</li><li>Botha, C. E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+xylem+sap+retrieval+pathway+in+rice+leaf+blades:+evidence+of+a+role+for+endocytosis?.">A xylem sap retrieval pathway in rice leaf blades: evidence of a role for endocytosis?.</a> Journal of Experimental Botany. 59 (11), 2945-2954 (2008).</li></ol>

وقد أظهرت الدراسات الناشئة ان النباتات يمكن ان تستجيب بسرعة للمؤثرات الخارجية23، بما في ذلك التلاعب التي أدخلت علي الإجراءات التجريبية22. في تجربتنا الاوليه ، غالبا ما تؤدي مراقبتنا لهذه المعرفة إلى تلطيخ الفشل. مع هذه الدروس ، ونحن نقترح ان توضع في الاعتبار الاحت...

العديد من القصبات الفلورية مع مجموعه من الخصائص الطيفية ، مثل 5 (6)-كاربوكسيفلوريسسين (CF)1، 8-هيدروكسي برينيه-1 ، 3 ، 6-ثلاثي الفوسفات حمض2، إبليس الأصفر CH (lych)3، esculin و cter4، وقد وضعت و تطبيقها في النباتات لمراقبه حركه symplastic والنشاط لحاء. عموما ، يتم تحميل صبغه symplastic إلى قطع في الانسجه المستهدفة والتشتت متسلسلة من مراسل في أجزاء أخرى من النبات سوف تظهر الاتصالات بين الخلايا. علي الرغم من ان اليه امتصاص الصبغة غير مفهومه تماما ، فقد تم الاعتراف علي نطاق واسع بالمبدا الكامن وراء حركه CF داخل الخلايا الحية. شكل استر من CF (CF diacetate ، CFDA) غير فلوري ، ولكن غشاء نفاذيه. يسمح هذا خاصيه انتشار سريعة غشاء من الصبغ داخل خلايا. مره واحده داخل الخلايا الحية ، استراسيس في الخلايا أزاله مجموعات خلات في 3 ' و 6 ' موقف CFDA ، والإفراج عن CF وغشاء-غير نفاذه (الشكل 1، بدلا من ذلك الرجوع رايت وآخرون2) ؛ CF يمكن بعد ذلك التحرك من خلال الهيوليه إلى أجزاء أخرى من النباتات.
وهناك اجراء راسخ مع cfda هو انه يمكن تحميله في أوراق المصدر وتستخدم لمراقبه تدفق لحاء و لحاء تفريغ في الانسجه بالوعة من العديد من الأنواع ، علي سبيل المثال ، كما CF التفريغ في Arabidopsis الجذر5، لحاء تفريغ خلال البطاطا الدرني6، لحاء تفريغ في بالوعة نيكوتيانا يترك7، وهلم جرا. من خلال نهج التحميل مماثله ، اعتمدت دراسات أخرى هذه الصبغة لإثبات الاتصال symplastic بين المضيف والطفيلي8،9، أو للكشف عن العلاقات التكافلية10،11.
طريقه أخرى للاستفادة من هذه الصبغة هي لتحميلها في خلايا معينه أو خليه واحده عن طريق الحقن المجهري لتحديد نمط التوزيع الخاص به. وقد سهلت هذه التقنيات المتطورة إلى حد كبير فهمنا أعمق من الاتصالات الخلوية بوساطة plasmodesmata, لا سيما في تطوير مفهوم المجال symplastic12,13. علي سبيل المثال, الحقن المجهري لل cfda في الخلايا كوتيليدون من Arabidopsis أسفرت عن نمط اقتران صبغ في البشرة السويقه ولكن غير اقتران في الخلايا الاساسيه أو في البشرة الجذر, التالي فان البشرة السويقه تشكل symplastic المجال14. المجالات المماثلة ، مثل الخلايا الحرس المعدة15، غربال عنصر-رفيق الخلايا16، وخلايا الشعر الجذر14 والجذر كاب17، وقدتم تحديد18 من قبل تقنيه الحقن المجهري. والأكثر دهشة ان بعض المجالات تسمح لجزيئات التتبع بالتحرك في اتجاه معين. اتخاذ المجال [تريشم] علي سبيل المثال ، الحقن المجهري لمسبار الفلورسنت في خليه دعم البشرة يؤدي إلى تدفق المقتفي في مجال [تريشم] ، ومع ذلك ، لا يحمل الحقن العكسي صحيح19. وقد وجد تقرير صدر مؤخرا أيضا حالات مماثله في المجالات symplastic من الجنين Sedum 20. التالي ، فان جميع الحالات المذكورة أعلاه تعني ان مبادله مواقع التحميل قد تؤدي إلى رؤى جديده في الاتصالات البلاستيكية. تجربتنا السابقة تهدف إلى تشريح الطريق من الجذر إلى تبادل لإطلاق النار المحمول إسكات التعرف علي المجال الجديد symplastic ، أو HEJ (تقاطع سويق-ابيتوسيل) ، والتي تم التحقق كذلك من خلال تحميل الجذر (غير المتعارف عليها بالوعة التحميل) CFDA تجربه21. هنا ، ونحن أيضا وضع الجذر إلى تبادل لإطلاق النار CF الحركة باستخدام طريقه بسيطه واستعاده مجال symplastic المحتملة عن طريق تحويل مواقع التحميل. وعلاوة علي ذلك ، يمكن تكييف هذا الاجراء للتمييز بين الخلفيات الوراثية التي غيرت النقل البري البري إلى التصوير لمسافات طويلة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:705px;" width="705">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:223px;">KNO3&#160;&#160;</td>
			<td style="width:153px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">10017218</td>
			<td style="width:203px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">KH2PO4&#160;</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10017608</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10013018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>20011160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">MnSO4&#183;H2O&#160;</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10013418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Na2MoO4&#183;2H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10019818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Boric Acid</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10004818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10024018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">CuSO4&#183;5H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10008218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10007216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">KI</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10017160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">FeSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10012118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EDTA&#160;</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10009717</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaOH</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10019718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">KOH</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10017018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sucrose</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10021418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Myo-inositol&#160;&#160;</td>
			<td>MACKLIN</td>
			<td>I811835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nicotinic Acid&#160;</td>
			<td>MACKLIN</td>
			<td>N814565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pyridoxine HCl</td>
			<td>MACKLIN</td>
			<td>V820447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thiamine HCl</td>
			<td>MACKLIN</td>
			<td>T818865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycine</td>
			<td>MACKLIN</td>
			<td>G800880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Agar powder</td>
			<td>Novon</td>
			<td>ZZ14022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Zoom V16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dissecting microscope</td>
			<td>SDPTOP</td>
			<td>SRE-1030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">200&#956;l pipette</td>
			<td>Dragon Laboratory Instruments</td>
			<td colspan="2">713111110000-20-200ul</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.5&#956;l pipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3120000011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine forceps&#160;</td>
			<td>TWEEZERS</td>
			<td>ST-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Parafilm</td>
			<td>PARAFILM</td>
			<td>PM-996</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stainless steel double-sided blade</td>
			<td>Gillette</td>
			<td colspan="2">Platinum-Plus Double-Edge Blade</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

shootward movement of cfda tracer loaded in the bottom sink tissues of arabidopsis

وقد تم تطبيق الراسم symplastic 5 (6)-كاربوكسيفلوريسسين دياسيتات (cfda) علي نطاق واسع في النباتات الحية لإثبات الاتصال بين الخلوية ، لحاء النقل والاوعيه الدموية زخرفه. يظهر هذا البروتوكول حركه كاربوكسيفلوريسسين (CF) من أسفل إلى اعلي في Arabidopsis باستخدام قطع الجذر والاجراء سويق-معسر علي التوالي. ينتج هذا اثنان إجراءات مختلفه في فعاليه مختلفه من [سف] حركه: حوالي 91% مظهر من [سف] في اليقذف مع ال [سويق-معسر] اجراء, حيث ان فقط حوالي 70% مظهر من [سف] مع ال [رو-بتر] اجراء. تغيير بسيط من مواقع التحميل ، مما ادي إلى تغييرات كبيره في كفاءه المحمول من هذه الصبغة symplastic ، يوحي حركه CF قد تكون خاضعه للتنظيم symplastic ، علي الأرجح من قبل تقاطع سويق الجذر.

وغالبا ما تخضع حركه symplastic للتقلبات البيئية. اضطراب الحالة التي تنمو في النبات ، وحتى عمليه اعداد الانسجه سوف تؤثر علي الحد من حجم الاستبعاد من plasmodesmata ، التالي تؤثر علي النقل symplastic22. لتحسين كفاءه تلطيخ ، ونحن حصر عملياتنا في غرفه النمو ، حيث يتم التحكم في درجه...

Watch this Scientific Journal Video about Shootward Movement of CFDA Tracer Loaded in the Bottom Sink Tissues of Arabidopsis at JoVE.com

Shootward Movement of CFDA Tracer Loaded in the Bottom Sink Tissues of Arabidopsis

الهدف من هذا البروتوكول هو إظهار كيفيه تحميل CFDA إلى مواقع مختلفه من الأجزاء السفلية من Arabidopsis. ثم نقدم نمط التوزيع الناتج من CF في البراعم.

حركه إطلاق النار من الراسم CFDA المحملة في الانسجه بالوعة القاع من Arabidopsis

The symplastic tracer 5(6)-carboxyfluorescein diacetate (CFDA) has been widely applied in living plants to demonstrate the intercellular connection, ...

المسبار المستخدمة على نطاق واسع CFDA، أو قصيرة لsdiacetate carboxyfluorescein، غير فلورية. المجموعتين H3 وموقف 3'6'على هذا المركب جعله غشاء permeant. حيث مرة واحدة داخل الخلايا، خلات الخلوية الداخلية سوف إزالة مجموعات خلات والإفراج عن شكل جديد من CFDA.هذا هو carboxyfluorescein ، أو CF ، وهو الفلورسنت. ولأن هذا الشكل الجديد هو أقل غشاء permeant، والوزن، وجميع الخلايا هو التحرك من خلال المسام بين الخلايا، أو plasmodesmata في النباتات، وهذا يجعل هذا diacetate التحقيق المثالي لدراسة النقل بين الخلايا في نشاط الفليم. في فيديو اليوم، سنقوم بإثبات تحميل CFD في جذر و نقصcotyl من النباتات Arabidopsis على التوالي، وسوف نظهر كيف اثنين من الإجراءات المختلفة قليلا سوف تؤثر على أسفل إلى أعلى حركة هذا المسبار الفلورسنت.تحقيق نتائج تلطيخ باستمرار، ونحن تخزين بذور Arabidopsis حصادها في أربع درجة مئوية، 40٪ مجلس الوزراء الرطوبة. وتستخدم البذور التي تم حصادها حديثا في هذه الحالة لأكثر من سبعة أيام بسهولة لبذر. لضمان زراعة كل مصنع في مساحة مماثلة نسبيا في طبق بيتري، ونحن نستخدم بطاقة درجة منطقة البذور.الآن، ترطيب طرف تعقيم، تراجع في البذور تعقيم، وزرع البذور واحدا تلو الآخر على الموقف المعين. بعد الانتهاء من البذر، ختم طبق بيتري مع البارا فيلم وشريط لزجة، ووضعها على موقف طبق بيتري للسماح لها تنمو عموديا. هنا هي الأدوات التي نحن ذاهبون لاستخدامها في هذه التجربة.يرجى ملاحظة أننا أفضل تحميل الصبغة بأسرع ما يمكن. عادة، يمكنك الانتهاء من العملية برمتها في 10 إلى 15 دقيقة. قبل أن نقوم بتجربة تحميل CFDA، نقوم دائمًا بإعداد حل CFDA جديد.هنا، تمييع CFDA المليمولار واحد إلى خمسة تركيزات ميكرومولار مع الماء قبل الاستخدام الفوري. قطع parafilm إلى قطع صغيرة في ثلاثة في ثلاثة ملليمتر الحجم. لأن هناك تكثيف على غطاء وأسفل طبق بيتري، ونحن بحاجة إلى مسح بها مع منشفة ورقية لتجنب صبغ تتدفق حولها.يتم وضع قطعة صغيرة من البارا فيلم تحت الجذر. رفع النباتات ووضعها على الغطاء. قطع الجذور حوالي خمسة إلى 10 ملليمتر تحت المهيبوكول.خذ يطلق النار مرة أخرى على قطعة صغيرة من البارا فيلم. الآن تطبيق بعناية CFDA ميكرولتر واحد على نهاية القطع من الجذر. في محاولة لتجنب تلويث جميع النباتات بروتو.ثم تغطية الغطاء، ثم تركها في غرفة النمو لمدة ساعتين. طريقة هيبوكو تيل معسرة. يتم وضع قطعة البارا فيلم الصغيرة ، كما تم إعدادها مسبقًا ، تحت تقاطع الـ root-hypocotyl.نستخدم a forecep إلى بلطف قرصة hypocotyl قريبة من أنسجة الجذر، وتطبيق بعناية 0.1 microliter CFDA على الجانب مقروص وترك النبات لمدة ساعتين. الصور من تسعة إلى 12 يوما بعد منطقة تلطيخ النباتات. أنها تظهر جميع نمط تلطيخ الأوعية الدموية في كل من كوتيليفدون والأوراق الحقيقية.فقط في حالة نادرة جدا، وأظهرت ورقة كوتيليدون نمط تلطيخ نصف ورقة. حتى في الأساس ، لم اثنين من الطرق لا تحدث فرقا في نمط تلطيخ CF ، ولكن إذا كنا تنفيذ صبغ التحميل في المزيد والمزيد من النباتات ، نجد اثنين من الإجراءات تعطي صفقة فرق كبير في الكفاءة. مع طريقة قطع الجذر، حوالي 70٪ من النباتات تظهر إشارة الفلورسنت في تبادل لاطلاق النار.ولكن يمكن زيادة الكفاءة إلى 91٪ باستخدام طريقة نقصcotyl معسر. حاولنا أيضا طريقة معسر الجذر، ولكن هذه الطريقة تؤدي إلى انخفاض الكفاءة، انها حوالي 30٪ ولذلك، يبدو أن طريقة لتحميل صبغة لا يفسر الفرق تلطيخ. والفرق يكمن على الأرجح في مواقع التحميل، التي قد تكون مفصولة بحاجز تكافلي.أظهرنا كيف نقوم بتحميل CFDA في جذور Arabidopsis و hypocotyl. استخدمنا اثنين من الإجراءات المختلفة قليلاً، وهاذين الإجراءين مختلفة قليلاً يؤدي إلى اختلاف كبير في هذا الجزء السفلي إلى أعلى حركة التحقيق. نقترح أن هذه الطريقة يمكن أن تساعدنا على تحديد حاجز symplastic المحتملة لإشارات تبادل لاطلاق النار المستمدة من الجذر.

Research

JoVE Journal

Environment

Shootward Movement of CFDA Tracer Loaded in the Bottom Sink Tissues of Arabidopsis

Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues

تقنية لدراسة المفصلية والمجتمعات الميكروبية داخل شجرة الأنسجة

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms.  Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear ...

A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms

مختبر الأحيائي تغذية الأسماك لتقييم آخر Antipredatory من المركبات الثانوية من الأنسجة من الكائنات البحرية

Marine chemical ecology is a young discipline, having emerged from the collaboration of natural products chemists and marine ecologists in the 1980s with ...

Use of Autometallography to Localize and Semi-Quantify Silver in Cetacean Tissues

استخدام أوتوميتالوجرافي لتعريب والتحديد الكمي لشبه الفضة في الأنسجة الحيتانيات

Silver nanoparticles (AgNPs) have been extensively used in commercial products, including textiles, cosmetics, and health care items, due to their strong ...

An Induction System for Clustered Stomata by Sugar Solution Immersion Treatment in Arabidopsis thaliana Seedlings

An Induction System for Clustered Stomata by Sugar Solution Immersion Treatment in Arabidopsis thaliana Seedlings

نظام التوجيهي "الثغور متفاوت" "السكر الحل العلاج الغمر" في شتلات نبات التمويل

Stomatal movement mediates plant gas exchange, which is essential for photosynthesis and transpiration. Stomatal opening and closing are accomplished by a ...

Fluorescently Labeled Bacteria as a Tracer to Reveal Novel Pathways of Organic Carbon Flow in Aquatic Ecosystems

البكتيريا التي تحمل علامة الفلورسنت كجهاز تتبع للكشف عن مسارات جديدة لتدفق الكربون العضوي في النظم الإيكولوجية المائية

Elucidating trophic interactions, such as predation and its effects, is a frequent task for many researchers in ecology. The study of microbial ...

A Telemetric, Gravimetric Platform for Real-Time Physiological Phenotyping of Plant&ndash;Environment Interactions

A Telemetric, Gravimetric Platform for Real-Time Physiological Phenotyping of Plant&#8211;Environment Interactions

ومنصة القياس عن بعد، gravimetric في الوقت الحقيقي فيزيولوجية الظاهري من التفاعلات النباتية والبيئة

Food security for the growing global population is a major concern. The data provided by genomic tools far exceeds the supply of phenotypic data, creating ...

Using Changes in Leaf Transmission to Investigate Chloroplast Movement in Arabidopsis thaliana

Using Changes in Leaf Transmission to Investigate Chloroplast Movement in Arabidopsis thaliana

استخدام التغيرات في انتقال الأوراق للتحقيق في حركة البلاستيدات الخضراء في أرابيدوبسيس ثاليانا

Chloroplast movement in leaves has been shown to help minimize photoinhibition and increase growth under certain conditions. Much can be learned about ...

Elucidating the Metabolism of 2,4-Dibromophenol in Plants

توضيح استقلاب 2،4-ثنائي بروموفينول في النباتات

Crops can be extensively exposed to organic pollutants, since soil is a major sink for pollutants discarded into the environment. This creates potential ...

Determination of the Absorption, Translocation, and Distribution of Imidacloprid in Wheat

تحديد امتصاص ونقل وتوزيع إيميداكلوبريد في القمح

Neonicotinoids, a class of insecticides, are widely used because of their novel modes of action, high insecticidal activity, and strong root uptake. ...

<meta charset="utf8"></head><body>تقدير السمية الخلوية للمستقلب المتكامل لمبيدات الآفات التريازول في النباتات

Assessing Cytotoxicity of Metabolites of Typical Triazole Pesticides in Plants

<meta charset="utf8"></head><body>تسليط الضوء على المؤلف: طريقة جديدة وفعالة لتقييم السمية الخلوية للمستقلب الشامل لمبيدات الآفات التريازول في النباتات

تقييم السمية الخلوية لمستقلبات مبيدات الآفات التريازول النموذجية في النباتات

Various organic pollutants have been released into the environment because of anthropogenic activities. These pollutants can be taken up by crop plants, ...