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•
05:31 min
September 14th, 2019
DOI :
10.3791/59610-v
Chapters
0:04
Title
2:24
Oocyst/Sporozoite Injection into the Organoid Lumen
3:20
Results: Representative Oocyst Identification and Analyses
4:49
Conclusion
0:34
In Vitro Sporozite Purification
Transcript
このスポロゾアイト精製およびマイクロインジェクション手順を用いて、本質的に任意の宿主微生物が、任意の組織由来臓器系で研究され得る。この技術を用いて、オルガノイドの内腔またはオルガノイドの尖体側に注入される純粋なスポロゾイトの量を制御することができます。C.parvum sporozoitesを精製するには、ウーストシットを15ミリリットルチューブに移し、ミリリットル剥離培地濃度あたり10回から7番目のウーストシットで細胞を再懸濁する。
摂氏37度で60~90分後、適切な洗浄液を
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Summary
我々は、クリプトスポリジウムパルバムによるヒト腸および気道オルガノイドの感染を研究するための卵胞を調造し、スポロゾイツを精製するためのプロトコルを説明する。腸内臓器内膜への寄生虫のマイクロインジェクションとオルガノイドの免疫染色の手順を示す.最後に、オルガノイドから発生した卵胞の単離について述べた。
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