DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
3:20
mRNA Generation by In Vitro Transcription
4:22
Cells Transfection with mRNA
6:04
Luciferase Activity Measurement
7:29
Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
8:21
Conclusion
Transcript
Il nostro protocollo per un saggio di luciferasi trascritto in vitro a base di RNA aiuta a studiare la regolazione della traduzione nelle cellule infettate dal virus del vaiolo. Inoltre, una lunghezza personalizzata del litro Poly(A) consente di s
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Presentiamo un protocollo per studiare la regolazione della traduzione di mRNA nelle cellule infettate da Poxvirus usando il saggio reporter di luciferasi basato sull'RNA trascritto in vitro. Il saggio può essere utilizzato per studiare la regolazione della traduzione da parte di CIS-elementi di un mRNA, tra cui 5'-non tradotto regione (UTR) e 3'-UTR. Diverse modalità di avvio della traduzione possono anche essere esaminate utilizzando questo metodo.