Name: in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency
Uploaded: 2020-05-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

Dr. Sylvie Morgeaux ve Dr. Jean-Michel Chapsal, aşı serileri konusunda ELISA titreşmelerini oluşturmak ve uluslararası çalıştaylar ve işbirlikçi çalışmalar düzenlemek için temel katılımları için kabul edilmelidir. Sabrina Kali'ye el yazmasının eleştirel okuması için teşekkür ederiz. Dr. Pierre Perrin mAb-D1'in izolasyon ve karakterizasyonundan sorumluydu. Bu çalışma ağırlıklı olarak Institut Pasteur finansmanı tarafından desteklenmiştir.

1. Güvenlik önlemleri
NOT: Bu yöntem hem canlı RABV hem de inaktive aşı için geçerlidir.
<ol><li>İyi Laboratuvar Uygulamaları ve Güvenlik prosedürleri kullanın.</li>
	<li>Tek kullanımlık palto, eldiven, maske, gözlük vb. dahil olmak üzere yeterli Kişisel Koruma Ekipmanı (PPE) giyin.</li>
	<li>Canlı virüs titre edildiğinde, sınıf II biyolojik güvenlik kabini kullanın.<ol>
<li>Numunelerle temas eden herhangi bir malzemeyi (reaktifler, yıkama solüsyonları, vb.) enf...

mAb-D1 tarafından tanınan epitop, rabv glikoproteininin antijenik bölgesi III'te yer alır ve bu sadece VNAb'lerin indüksiyonu için immündominant olmakla kalmamış, aynı zamanda nörovikurallılık, patojenite40,41 ve reseptör tanıma42'deyer almaktadır. Glikoprotein boyunca başka bir önemli antijenik site vardır, site II43, karşı birkaç MAbs mAb-WI-111235gibi izole edilmişti...

50 yıldan fazla olduğundan, NIH testi1 toplu yayından önce kuduz aşısı gücünü değerlendirmek için altın standart bir yöntem olarak kullanılır. Bu test, 14 gün sonra kuduz virüsü (RABV) türü olan Challenge Virus Standard (CVS) ile birlikte test edilecek aşı ile fare gruplarının intraperitoneal bağışıklamalarından oluşur. Potens IC meydan hayatta farelerin oranında değerlendirilir. Who2 ve Avrupa Farmakopesi3 hala aşı potens değerlendirmek için NIH testi gerektirir rağmen, Bu test çeşitli engeller uğrar: sonuçlar son derece değişken4; enfeksiyöz RABV meydan okuma sırasında kullanılır ve bu hem teknik beceri hem de sıkı biyogüvenlik önlemleri gerektirir; hayvanların çok sayıda kullanılır ve meydan şiddeti ciddi etikendişeleri5 yükseltir. Bu testin daha az ciddi bir varyasyonu geliştirilmiştir: intra-periton bağışıklama iki hafta sonra, fareler IC tarafından meydan değil ama kanama lı ve serumda spesifik RABV nötralize antikorların varlığı için test edilmiştir (VNAbs) bir in vitro nötralizasyon testi kullanarak. Ancak, bu test hala veteriner aşıları için kullanımda olmasına rağmen laboratuvar farelerin çok sayıda kurban gerektirir6,7 ve insan aşıları için kabul edilmiştir8.
Şu andan itibaren, hem Uluslararası9 hem de Avrupa10 önerisi, üreticileri ve Ulusal Kontrol Laboratuvarlarını (Official Medicine Control Laboratories - OMCLs) 3R stratejisi olarak adlandırılan laboratuvar hayvan testlerinin değiştirilmesi, azaltılması ve iyileştirilmesi konusunda teşvik etmektedir. Avrupa Direktifi 2010/63/EU (2013/01/01 yılından bu yana yürürlükte) hayvanların korunması ve refahı ile ilgili de kuduz aşılarının Kalite Kontrolü ile ilgili aşı üreticileri ve laboratuvarları için kısıtlamaları güçlendirdi yanı sıra kuduz araştırma11. Sonuç olarak, alternatif in vitro yaklaşımların geliştirilmesi, doğrulanması ve kullanımı artık bir öncelik haline gelmiştir. Bu sadece etik olarak sağlam değil, aynı zamanda toplu test maliyetlerini azaltabilir ve hafta yerine saat sonuçları için süre kısaltmak3.
RABV parçacığının yüzeyinde, glikoprotein trimerik formu benimser12,13,14,15,16. Kuduz aşısında, bu yerli trimerik form vnabs indükleyen büyük immünojen oluşturur17 ise monomerik, çözünür veya denatüre glikoproteinler kötü immünojenik18,19. Bu nedenle, aşı üretim süreci boyunca glikoprotein düzelticilerin korunması optimal immünojenik potansiyelin korunması için iyi bir göstergedir. Antikor-bağlayıcı-test20,,21, tek radyal immünodiffüzyon (SRD) testi22 ve ELISA testi23,24,,25,26,,27 gibi çeşitli immünokimyasal yöntemler, kuduz aşılarında antijen içeriğini ölçmek için WHO Teknik Rapor Serisi2 ve Avrupa monografisi3 tarafından tavsiye edilir.24 Bu aşı üretiminin tutarlılığını izlemek için üreticiler tarafından kullanılan ve OMCL tarafından insan aşıları28toplu tutarlı formülasyon değerlendirmek için, NIH testi hala potens için kabul olsa bile.
Ancak, tüm bu immünokimyasal yöntemler eşdeğer değildir. SRD testi membran demirli süsleyiciler değiştirebilir ve glikoprotein,22,29çözünür veya denatüre formu neden olabilir bir ön tedavi gerektirir. Bu nedenle, SRD bir aşı çok immünojenite kusurlu bir değerlendirme ile sonuçlanan immünojenik ve non-immünojenik glikoproteinler arasında ayrım çok verimli değildir. Buna karşılık, ELISA testi dahaduyarlıdır 22, glikoproteinin doğal yapısını korur, ve glikoprotein doğal katlanmış trimers içeriğini belirlemek için daha uygundur. ELISA testi tavşan poliklonal veya fare monoklonal anti-glikoprotein antikorları saflaştırılmış veya amonyum sülfat ile konsantre kullanabilirsiniz. Çalışmalar, NIH testi ile aşılarda ELISA tarafından değerlendirilen antijen içeriği arasında iyi bir uyum olduğunu göstermiş ve ELISA yöntemlerinin in vitro potens testi için uygun olduğu sonucuna varmıştır. Bu ELISA testleri en azından ek olabilir ya da hatta NIH testi4,26,27,30,31,32,33değiştirebilirsiniz savunucuları ., Bugün, Avrupa Farmakopesi NIH testi3alternatif olarak doğrulanmış serolojik veya immünokimyasal tahlillerin kullanılmasını önerir. Aşı potens için hayvan kullanımıtam kaçınma gerçekçi bir bakış açısı haline gelmiştir.
Aşağıda sunulan yöntem, trimerik RABV glikoprotein15,34antijenik siteleri III (aa 330-338) tanır bir fare monoklonal antikor klonu (mAb-D1) kullanarak dolaylı bir ELISA sandviç immünoyakalama dayanmaktadır. Bu yöntem başlangıçta Institut Pasteur26geliştirilmiştir ,30 sonra optimize edilmiş ve Agence Nationale de Sécurité du Médicament et des produits de santé tarafından doğrulandı (ANSM) laboratuvar, yani, Fransız OMCL4,33. mAb-D1 hem plakayı algılamak hem de yakalanan antijeni tespit etmek için kullanılır. Bu glikoprotein düzelticiler, yani, immünojenik RABV antijeninin spesifik niceliklenmesine olanak sağlar. Algılama için kullanılan mAb-D1 peroksidaz ile etiketlenir, hangi substrat ve kromojen varlığında ortaya çıkar. Test edilen aşı ve referans aşı için ölçülen emiciliğin karşılaştırılması immünojenik glikoprotein içeriğinin belirlenmesine olanak sağlar. RABV glikoprotein35'infarklı antijenik bölgelerini tanıyan farklı mAb'ler için aynı tip bir titreşme uygulanabileceği dikkat ivedidir. Amonyum sülfat anti-glikoprotein poliklonal tavşan immünglobulinleri G (IgG) veya monoklonal fare globulinleri elde etme ve arındırma veya konsantre etme yöntemi, peroksidaz ile antikorları bir araya getirmek için kullanılan yöntemle birlikte daha önce36 olarak açıklanmıştır37.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1523px;" width="1522">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td style="width:340px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">10445753</td>
			<td style="width:456px;">if titrating live virus</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:465px;">Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile 96-Well Plates, 400 &#181;L, MAXISORP</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>439454</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:85px;width:465px;">Equip Labo Polypropylene Laboratory Fume Hood</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>12576606</td>
			<td>for the preparation of sulfuric acid</td>
		</tr>
		<tr height="112">
			<td height="112" style="height:113px;width:465px;">Immunology Plate Strong 
			Adsorption MAXISORP Flat Bottom 
			Well F96</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>55303</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate Sealing Tape(100 sheets)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate&#160; single mode reader Sunrise</td>
			<td style="width:340px;">TECAN</td>
			<td style="width:262px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate shaker-incubator</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>441504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate washer Wellwash</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>5165000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:465px;">Multichannel pipette (30-300 &#181;L) 12 channels</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">4661180N</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:104px;width:465px;">Single Channel pipettes (Kit 2 : Finnpipettes F2 0.2-2 &#956;L micro, 2-20 &#956;L, 20-200 &#956;L &#38; 100-1000 &#956;L)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4700880</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency

Hayvan refahı için giderek artan küresel endişe üreticileri ve Ulusal Kontrol Laboratuvarları (OMCLs) Değiştirme, Azaltma ve Laboratuvar hayvan testleri arıtma için 3Rs stratejisi takip teşvik etmektedir. Kuduz aşısı nın gücünü değerlendirmek için NIH testine alternatif olarak dSÖ ve Avrupa düzeylerinde in vitro yaklaşımların geliştirilmesi önerilmektedir. Kuduz virüsü (RABV) partikülünün yüzeyinde glikoprotein indükleyicileri Viral Nötralize Antikorları (VNAb) oluşturmak için büyük immünojeni oluşturur. Monoklonal Antikorların (mAb-D1) glikoproteinin trimerik formunu tanıdığı bir ELISA testi, aşı serilerinin üretimiyle birlikte yerli katlanmış trimerik glikoproteinin içeriğini belirlemek için geliştirilmiştir. Bu in vitro potens testi NIH testi ile iyi bir uyum gösterdi ve RABV aşı üreticileri ve OMCLs tarafından ortak çalışmalarda uygun bulunmuştur. Hayvan kullanımından kaçınmak yakın gelecekte ulaşılabilir bir hedeftir.
Sunulan yöntem, trimerik RABV glikoproteininin iii (aa 330-338) antijenik bölgelerini tanıyan mAb-D1 kullanılarak dolaylı elisa sandviç immünoyakalamasına dayanmaktadır. mAb-D1, aşı da bulunan glikoprotein düzelticilerin hem kaplaması hem de tespiti için kullanılır. Epitop konformasyonel özellikleri nedeniyle tanındığından, potansiyel olarak denatüre glikoprotein (daha az immünojenik) mAb-D1 tarafından yakalanıp tespit edilemez. Test edilecek aşı mAb-D1 ile duyarlı bir plaka içinde kuluçkaya yatırılır. Bağlı trimerik RABV glikoproteinler tekrar mAb-D1 eklenerek tanımlanır, peroksidaz ile etiketlenir ve daha sonra substrat ve kromojen varlığında ortaya çıkar. Test edilen aşı ve referans aşı için ölçülen emiciliğin karşılaştırılması immünojenik glikoprotein içeriğinin belirlenmesine olanak sağlar.

Aşağıdaki örnekte saflaştırılmış inaktive kuduz virüs partiküllerinden (PV aşısı türü) oluşan referans aşı Lot 09 kullanılmaktadır. Bu nda glikoprotein düzelticiler (10 μg/mL) içeriği, toplam viral protein miktarının (BCA testi) belirlenmesi ve glikoprotein insiat yüzdesi SDS-poliakrilamid jel elektroforezi ile değerlendirildikten sonra oluşturulmuştur. Alternatif olarak, kuduz Aşısı için WHO6'ncı Uluslararası Standart (IS) (NIBSC kodu: 07/1...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency

Burada kuduz aşılarında immünojenik glikoprotein içeriğini belirlemek için dolaylı bir ELISA sandviç immünoyakalama açıklar. Bu test glikoprotein düzelticileri tanıyan nötralize monoklonal antikor (mAb-D1) kullanır. Üretim sırasında aşı potens tutarlılığını takip etmek için in vivo NIH testine alternatiftir.

In Vitro ELISA Testi Kuduz Aşısı Potens Değerlendirmek için

The growing global concern for the animal welfare is encouraging manufacturers and the National Control Laboratories (OMCLs) to follow the 3Rs strategy ...

Hayvan testlerini azaltmak ve NH testinin değişkenliği nedeniyle WHO, kuduz aşısının gücünü değerlendirmek için in vitro yaklaşımlar geliştirmeye teşvik eder. Bu ELISA testi glikoproteinin immünojenik formunu tanımada klasik NH testi ile iyi bir uyum gösterir, yüksek duyarlılık gösterir ve sadece bir gün içinde yapılabilir. Kuduz aşısı potensinin ELISA ile in vitro olarak değerlendirilmesi in vivo NH testine alternatiftir.Üreticiler ve ulusal kontrol laboratuvarları tarafından teşvik edilmektedir. Her seyreltme için çoğaltılmış hacimleri çoğaltmak ve yıkamadan sonra plakayı iyi kurutmak, bu prosedüre başlamak tan kaçınmak için, tek kullanımlık palto, eldiven, maske ve gözlük gibi yeterli kişisel koruma ekipmanı takmak çok önemlidir. Kirlenmiş maddeleri dekontaminasyon için 30 dakika boyunca %2,6 sodyum hipoklorit çözeltisi içine batırarak tedavi edin.Sonra, 96-iyi immünoassay plaka yola ve her kuyuya karbonat tampon seyreltilmiş monoklonal antikor 200 mikrolitre ekleyin. Plakayı yapışkan filmle kaplayın ve mikro plakayı nemli bir ortamda üç saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yatırın. Daha sonra dikkatlice aspire ve% 2.6 sodyum hipoklorit çözeltisi içeren bir alıcıya kuyu içeriği aktarın.Mikroplakayı ters çevirin ve oda sıcaklığında emici kağıda beş dakika kurutun. İlk olarak, her kuyuya 300 mikrolitre pasivasyon tamponu ekleyin. Plakayı yapışkan filmle kaplayın ve 37 derecede 30 dakika kuluçkaya yatırın.Bundan sonra kuyunun içindekileri %2.6 sodyum hipoklorit solüsyonu içeren bir ekive aktarın. Plakayı yıkamak için, her kuyuya 300 mikrolitre yıkama tamponu ekleyin. Daha sonra dikkatlice aspire ve% 2.6 sodyum hipoklorit çözeltisi içeren bir alıcıya iyi içeriği aktarın.Hassas plakayı kapsamlı bir şekilde yıkamak için bu yıkama işlemini beş kez daha tekrarlayın. Bundan sonra, mikroplaka ters ve bir dakika oda sıcaklığında emici kağıt parçası üzerinde kurumasına izin. Kuduz virüsü glikoproteininin son konsantrasyonunun mililitrede 10 mikrogram olması gibi bir mililitre distile suda referans aşıyı yeniden kurun.Mililitre başına bir mikrogram kuduz virüsü glikoprotein konsantrasyonuna ulaşmak için seyrelticide yeniden oluşturulmuş referans aşının 10 kat seyreltilmesini hazırlayın. Daha sonra, metin protokolütabloda belirtildiği gibi seyreltme bu referans aşı altı seri iki kat seyreltme gerçekleştirin. Yinelenen kuyularda seyreltici 200 mikrolitre dağıtın kör bir kontrol olarak hizmet ve çoğaltılmış her referans aşı seyreltme için iyi başına 200 mikrolitre.Daha sonra seyreltici de test edilen aşının 10 kat seyreltilmesini hazırlayın ve metin protokolünün ikinci tablolarında belirtildiği gibi seyreltici olarak test edilen aşının yedi iki kat seri seyreltmesini hazırlayın. Test edilen her aşı seyreltme 200 mikrolitresini mikroplakanın her kuyuya çoğaltılması için dağıtın. Mikro plakayı yapışkan filmle kaplayın ve bir saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yatırın.Bundan sonra, filmi kaldırın. Aspire dikkatle ve% 2.7 sodyum hipoklorit çözeltisi içeren bir alıcıya her kuyunun içeriğini aktarın. Plakayı yıkamak için, her kuyuya 300 mikrolitre yıkama tamponu ekleyin, dikkatlice aspire edin ve her kuyunun içeriğini %2,6 sodyum hipoklorit çözeltisi içeren bir alıcıya aktarın.Bağlanmamış antijeni çıkarmak ve kaplanmış antikora bağlı G-protein düzelticileri korumak için yıkama işlemini beş kez daha tekrarlayın. Yıkanmış mikroplakaters ve bir dakika oda sıcaklığında emici kağıt parçası üzerinde kurumasına izin. Daha sonra her kuyuya seyreltici olarak D1 monoklonal antikor etiketli peroksidaz önerilen seyreltme 200 mikrolitre dağıtmak.Mikro plakayı yapışkan filmle kaplayın ve bir saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yatırın. Daha sonra filmi çıkarın, dikkatlice aspire edin ve her kuyunun içeriğini %2,6 sodyum hipoklorit çözeltisi içeren bir alıcıya aktarın. Mikro plakayı yıkamak için, her kuyuya 300 mikrolitre yıkama tamponu ekleyin.Aspire dikkatle ve her kuyunun içeriğini bir alıcıya transfer 2.6% sodyum hipoklorit çözeltisi içeren. Bağlı olmayan peroksidaz etiketli antikorkaldırmak için bu yıkama işlemini beş kez daha tekrarlayın. Yıkanmış mikroplakaters ve bir dakika oda sıcaklığında emici kağıt parçası üzerinde kurumasına izin.Daha sonra, her kuyuya 200 mikrolitre substrat-kromojen çözeltisi dağıtın. Mikro plakayı filmle kapatın ve karanlıkta oda sıcaklığında 30 dakika kuluçkaya yatırın. Daha sonra reaksiyonu durdurmak için her kuyuya 50 mikrolitre durdurma çözeltisi ekleyin.Dikkatlice mikroplakanın alt silin ve spektrofotometre yerleştirin. Kullanılan tüm kuyular için optik yoğunluğu 492 nanometre olarak belirleyin. Bu verileri çözümleme için bir elektronik tablo dosyasında toplayın.Bundan sonra, hem referans aşı eğrisi hem de metin protokolünde belirtildiği gibi optik yoğunluk değerleri için çizimler oluşturun. Bu çalışmada kuduz aşısının gücünü değerlendirmek için in vitro ELISA testi kullanılmıştır. Tipik bir deneyden temsili optik yoğunluk değerleri burada gösterilmiştir.Bu değerler, referans aşının dikey eksenüzerindeki farklı seyreltmeleri ve glikoproteinin yatay eksen üzerindeki konsantrasyonu için ortalama optik yoğunluğu çizerek referans aşı eğrisini çizmek için kullanılır. Test edilen aşının glikoprotein içeriği bu eğri kullanılarak tahmin edilir. Değerlendirme, referans aşı eğrisinin astar alanında ortalama optik yoğunluk değerine sahip seyreltmeler için kesindir.Bir-40 seyreltme dikkate alınarak, x ekseni üzerinde OD 1534 dikey projeksiyon mililitre başına 500 nanogram karşılık gelir. Yani test edilen aşının mililitreglikoprotein başına 20 mikrogram olduğu tahmin ediliyor. In vitro potens kurulduğunda, uluslararası birimlerde kalibre referans altı WHO uluslararası standart için test aşısı karşılaştırmak için gereklidir.Aynı yöntem klasik olarak daha değişken veteriner aşıları kullanılanlar da dahil olmak üzere daha fazla aşı suşlarının tespitini büyütmek için diğer antikorlar ile birlikte kullanılabilir. Antikorlar da at veya insan serumantirabis antikorların titrasyonu için rekabet içinde kullanılabilir. İnaktive olmayan aşılar veya virüsler ile önlem alınmalıdır.Kişisel koruyucu ekipman kullandığınızdan, eldiven kullandığınızdan ve her şeyi düzgün bir şekilde dezenfekte etmeye özentin. Ayrıca, kanserojen ve asidik sodyum hipoklorit çözeltisi ile tabletler ile dikkatli olun.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Göç İnsan T Lenfosit İzolasyon, Kültür ve Analiz In Vitro</em

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

Bir Kısıtlama Enzim Temelli Klonlama Yöntemi değerlendirin<em&gt; In vitro</em&gt; HIV-1 Tipi C Gag-MJ4 Kimerik Virüslerin Çoğaltma Kapasitesi

The protective effect of many HLA class I alleles on HIV-1 pathogenesis and disease progression is, in part, attributed to their ability to target ...

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

Batı Nil Virüsü Mutant Soy Enfeksiyon MyD88-aracılı Hücresel Bağışıklık Tepki Vitro Analizi

An attenuated West Nile virus (WNV), a nonstructural (NS) 4B-P38G mutant, induced higher innate cytokine and T cell responses than the wild-type WNV in ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Görüntü tabanlı Sitometrisi Tekniği Granülosit Fonksiyonu Değişiklikleri değerlendirin<em&gt; İn Vitro</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Roman Vitro hücre göç değerlendirmek için şifa tahlil yara

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Enhanced Rabies Surveillance Using a Direct Rapid Immunohistochemical Test

Doğrudan hızlı Immünhistokimyasal testi kullanarak gelişmiş kuduz gözetimi

Laboratory-based surveillance is integral for rabies prevention, control and management efforts. While the DFA is the gold standard for rabies diagnosis, ...

Field Postmortem Rabies Rapid Immunochromatographic Diagnostic Test for Resource-Limited Settings with Further Molecular Applications

Field Postmortem Kuduz Hızlı İmmünromatografik Tanı Testi Kaynak Sınırlı Ayarlar için Diğer Moleküler Uygulamalar ile

Functional rabies surveillance systems are crucial to provide reliable data and increase the political commitment necessary for disease control. To date, ...

Immunohistochemistry Test for the Lyssavirus Antigen Detection from Formalin-Fixed Tissues

Formalin-Sabit Dokulardan Lyssavirüs Antijen Tespiti için İmmünohistokiniti Testi

One of the primary diagnostic modalities for rabies is the detection of viral ribonucleoprotein (RNP) complex (antigen) in the infected tissue samples. ...

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Bacillus anthracis ve Diğer Kapsüllenmiş Patojenlere Karşı Aşı Geliştirmede Fonksiyonel Antikorları Değerlendirmek için Opsono-Adherence Tahlili

The opsono-adherence assay is a functional assay that enumerates the attachment of bacterial pathogens to professional phagocytes. Because adherence is ...

Purification and Expansion of Mouse Invariant Natural Killer T Cells for in vitro and in vivo Studies

In vitro ve in vivo Çalışmalar için Fare Değişmez Doğal Öldürücü T Hücrelerinin Saflaştırılması ve Genişlemesi

Invariant Natural Killer T (iNKT) cells are innate-like T Lymphocytes expressing a conserved semi-invariant T cell receptor (TCR) specific for self or ...