Name: robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils
Uploaded: 2020-01-21T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Robust Ligature-Induced Model of Murine Periodontitis for the Evaluation of Oral Neutrophils at JoVE.com

JW C. støttes av Canadian Institutes of Health Research (CIHR). Forfatterne vil gjerne takke Dr. Chunxiang Søn for hennes hjelp i å utføre trypan blå farging.

Alle murine studier overholdt de relevante etiske forskriftene og ble godkjent av University of Toronto Animal Care Committee og forskningsetikk styret (protokoll 20011930).
1. ligatur installasjon
Merk: Dette er en ikke-steril kirurgisk prosedyre som kan utføres i et standard operasjonsteater. Bruk av bakteriefrie dyr (dekkes ikke her) mandater håndtering i et biosafety kabinett, bruk av sterile instrumenter, og inoculation av munnhulen med periodontal patogener å...

Den mest kritiske element knyttet til bruk av murine ligatur-indusert modell av periodontitt er sentrert rundt oppbevaring av ligatur til tidspunktet for offer eller tilsiktet fjerning. Den installerte biofilm-retentive-ligatur er i stand til å indusere et betydelig tap på alveolære Ben høyde på så lite som 6 dager, plateauing mellom 11 – 16 dagers perioden39. Beslutningen om å ofre dyr før maksimal periode med bein tap, gjengi dette en mye kortere modell av ligatur-indusert periodontitt...

Periodontal sykdom (PD) er en osteolytiske tilstand forbundet med betydelig vert sykelighet og økonomisk byrde, som er manifestert ved gingival betennelser og tap av både bløtvev vedlegg og fluorose støtte for de berørte tennene1,2,3,4. Denne prosessen styres av interaksjoner mellom det muntlige bakterieflora og medfødte immunsystemet til verten. Det er også forbundet med forverring av andre systemiske inflammatoriske sykdommer, inkludert diabetes, hjerte-og karsykdommer, og kreft5,6,7,8. Historisk var det hypotetisk gjennomsnitt at PD-patogenesen er avhengig av store mengder spesifikke bakterier som Porphyromonas gingivalis9. Men, tyder nyere bevis på at den mikrobielle komponenten av PD er formidlet av Dental biofilm. Den biofilm er en organisert, komplekst fellesskap av mange mikroorganismer som kan eksistere i sunne symbiotisk og destruktive dysbiotic stater10,11. Den muntlige biofilm normalt gir motstand til verten ved å hindre etablering av fokus på patogene bakterier og fremmer ideell gingival vev struktur og funksjon gjennom regulering av verten immunrespons12,13. Forstyrrelser av equilibrious forholdet mellom Commensal organismer i munnhulen og verts immunforsvaret kan føre til endringer i vev homeostase, noe som resulterer i dysbacteriosis og utvikling av Hallmark klinisk og radiografisk opptredener av PD5,10,12,13,14.
Interessant, etablering av en muntlig dysbacteriosis, mens nødvendig for initiering av PD, er ikke tilstrekkelig til å drive PD i alle individer, eluding mot evnen til verten immunforsvaret til å undergrave overgangen av bakterieflora mellom symbiotisk og dysbiotic stater15. Dette plasserer en bestemt søkelys på midlene der PD påvirker en av de ledende karakterene i det medfødte immunsystemet, nemlig polymorfonukleære granulocytt (PMN), eller nøytrofile, fra lokale og systemiske perspektiver16,17.
Hos mennesker, PMN er rekruttert fra sirkulasjonen med en hastighet på ~ 2 x 106 celler/h i sunne periodontal bindevev, hvor de er de predominating leukocytter befolkning. Her er de senere utvist fra gingival sulcus inn i munnhulen som en del av gingival crevicular væsken. I nærvær av PD, neutrophilia manifesterer innenfor sirkulasjon og munnhulen, hvor disse Effektor celler besitter en hyperinflammatory fenotype som fører til de nevnte ødeleggelsen av periodontium17,18,19,20,21,22. Derfor er forståelsen av rollen til PMN i PD og andre systemiske inflammatoriske tilstander av største betydning.
Selv om det er allment akseptert at kroniske sykdommer er gjensidig knyttet til PD, de underliggende mekanismene har ennå ikke belyst, bidra til vanskeligheter i forvaltningen av disse sykelig og potensielt fatale systemiske forhold. Mangfoldig eksperimentelle dyr modeller, hver med enestående fordeler og ulempen, ha blitt anvende å studere patofysiologi av PD23,24. Fokuserer spesielt på murine modeller, er det en rekke protokoller der studiet av PD er tilrettelagt; men de har flere tekniske og fysiologiske svakheter25,26,27,28,29,30,31.
For det første, det muntlig gavage musen modell behøver tallrik muntlig vaksiner av Human periodontal patogener å utvikle gingival betennelse og Ben forlis. I tillegg er det vanligvis innledes med en periode med antibiotika behandling for å undergrave den murine Commensal oral flora25. Denne modellen krever ofte spesialisert trening for å trygt utføre muntlige gavage, bruker bare en liten brøkdel av periodontal patogener fra de mer komplekse menneskelige muntlige mikrobiomet, og krever flere måneder å etablere alveolære bein tap.
I kontrast, kjemisk indusert murine modeller benytte muntlig levering av trinitrobenzene sulfonsyrer syre (TNBS) eller dextran sulfat natrium (DSS), agenter som vanligvis brukes i å etablere murine modeller av kolitt over en periode på flere måneder for å indusere periodontal bein tap26. Intraorale og extraoral abscess-baserte modeller er tilgjengelig, som involverer murine fortenner og vev av antecubital samt calvarium, henholdsvis. I den tidligere abscess modellen, flere injeksjoner av bakterier administreres, skape flere gingival abscesser og en mangel av alveolære bein tap, begrense deres bruk i studiet av PD. Sistnevnte abscess modeller er betydelig mer tilbøyelige til å studere bakteriell virulens, betennelser, og bein resorpsjon på steder utenfor munnhulen, som eliminerer evaluering av periodontium og muntlig mikrobiomet27,28,29,30,31.
Ved hjelp av ligatur-indusert modell av periodontitt, en flettet silke Sutur har ofte blitt installert circumferentially rundt andre molar. Som et alternativ, kan en enkelt lineær segment av Sutur materiale settes inn mellom første og andre jeksler32,33. Målet med ligatur plassering er å lette bakteriell akkumulering og generere dysbiosis innenfor gingival sulci, noe som resulterer i periodontal vev betennelser og ødeleggelse av vev komponere periodontium. Mest spesielt er denne modellen i stand til å produsere betydelig mer alveolære bein tap i forhold til de mer brukte muntlige gavage modell34. Videre kompliserer bruken av oral gavage modellen er den naturlige motstanden av flere stammer av mus (dvs. C57BL/6) til å utvikle alveolære bein tap. Denne er likeledes problematisk, idet denne belastning er de fleste hyppig anvendt inne murine-basert dyr forskning35.
Eksisterende prosedyrer beskrevet av Marchesan et al. og Abe og Hajishengallis ble utviklet for å forenkle den tekniske handlingen å plassere ligatur33,36. Dessverre krever den tidligere protokollen spesialisert 3D-trykt utstyr og har potensial for prematur ligatur tap, og dermed øke dyr bruk og kostnadene forbundet med ekstra tid brukt i operasjonsstuen. Videre genererer begge protokollene bare små områder av de syke periodontium som er tilgjengelige for en studie.
Fordelene som ligger med denne teknikken er jordet i samtidige studier av oral dysbiosis og immunologi som regulerer periodontium, utnyttelse av rimelige dyr med ulike genetiske bakgrunner, og enkle boliger og husdyrhold praksis. Som sådan bør mål være å maksimere volumer av syke vev og, i forsøk på å praktisere prinsippene for reduksjon i animalsk forskning, redusere animalsk forbruk til et nivå så lavt som mulig. Dette krever at alle dyr er i stand til å bli inkludert i eksperimentelle analyser37. Imidlertid bør det bemerkes at uansett hvilken dyremodell av periodontal sykdom er utnyttet, er det ingen enkelt modell som omfatter hvert element av menneskelig PD patofysiologi.
Denne nye protokollen sysselsetter plasseringen av en ligatur rundt flere maksillære molar tenner ved hjelp av instrumentering og materialer som finnes i de fleste laboratorier. Den innrømmer en nok beløpet av tid å lett og trygt installere en ligatur det er usannsynlig å avulse for tidlig. Til slutt, som PMN koordinere ødeleggelsen av periodontium i PD, en ny metodikk for å gjenopprette muntlige nøytrofile på en måte som tilsvarer mennesker er også presentert.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-mouse F4/80 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>123131</td>
			<td>BV421, Clone BM8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse Ly6G Antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>560602</td>
			<td>PerCP-Cy5.5, Clone 1A8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 Male Mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td></td>
			<td>8 to 12 weeks old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Centrifuge Tube</td>
			<td>FroggaBio</td>
			<td>TB15-500</td>
			<td>15 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Centrifuge Tube</td>
			<td>FroggaBio</td>
			<td>TB50-500</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Buffer</td>
			<td>Multiple</td>
			<td></td>
			<td>1% BSA (BioShop), 2mM EDTA (Merck), 1x HBSS-/- (Gibco)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSDiva</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>v8.0.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibre-Lite</td>
			<td>Dolan-Jenner</td>
			<td></td>
			<td>Model 180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowJo</td>
			<td>Tree Star</td>
			<td></td>
			<td>v10.0.8r1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat Therapy Pump</td>
			<td>Hallowell</td>
			<td></td>
			<td>HTP-1500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot Glass Bead Sterilizer</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>66118-10</td>
			<td>Germinator 500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7602-A8-684</td>
			<td>Straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Vetoquinol</td>
			<td></td>
			<td>100mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSRFortessa</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>X-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5905-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Mesh Filter</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-547</td>
			<td>40 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>28908</td>
			<td>16% (w/v), Methanol Free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered Saline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1408-500ML</td>
			<td>Without CaCl2 and MgCl2, 10x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R9759-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>SS652</td>
			<td>C13 USP 5-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Splinter Forceps</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7726-A10-700</td>
			<td>#1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Splinter Forceps</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7727-A10-704</td>
			<td>#5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Dissecting Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>28865</td>
			<td>Photo-Zusatz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Hypodemic Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305111</td>
			<td>26G X 1/2&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
			<td>20mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils

De viktigste fordelene ved å studere patofysiologi av periodontal sykdom utnytte murine modeller er de reduserte kostnadene for dyr, rekke genmodifiserte stammer, det store antall analyser som kan utføres på høstet myke og harde vev. Men mange av disse systemene er gjenstand for prosessuelle kritikk. Som et alternativ, ligatur-indusert modell av periodontal sykdom, drevet av den lokaliserte utvikling og oppbevaring av en dysbiotic oral mikrobiomet, kan benyttes, som er raskt indusert og relativt pålitelig. Dessverre er variantene av ligatur-indusert murine periodontitt protokoll isolert til fokal områder av periodontium og utsatt for prematur avulsion av den installerte ligatur. Dette minimerer mengden av vev tilgjengelig for senere analyser og øker antall dyr som kreves for studier. Denne protokollen beskriver presise manipulasjoner som kreves for å plassere utvidet molar ligaturer med forbedret oppbevaring og bruk av en roman skylle teknikk for å gjenopprette muntlige nøytrofile i mus med en alternativ tilnærming som begrenser de nevnte tekniske utfordringer.

Representative Flow flowcytometri data fra Oral skylling prøver av en naiv (Figur 3a) og betent (Figur 3B) murine munnhulen sekundært til ligatur-indusert periodontitt er gitt. Gjenoppretting av PMN fra en installert ligatur er også demonstrert (Figur 3C). Flow flowcytometer kanal spenninger ble kalibrert manuelt, og kompensasjon ble utført med single-beiset kompensasjon perler....

Watch this Scientific Journal Video about Robust Ligature-Induced Model of Murine Periodontitis for the Evaluation of Oral Neutrophils at JoVE.com

Robust Ligature-Induced Model of Murine Periodontitis for the Evaluation of Oral Neutrophils

Denne artikkelen presenterer en protokoll for å etablere en ligatur-indusert modell av murine periodontitt involverer flere maksillære jeksler, noe som resulterer i større områder av den involverte gingival vev og bein for senere analyse samt redusert dyre bruk. En teknikk for å vurdere muntlig nøytrofile på en måte analoge til menneskelige er også beskrevet.

Robust ligatur-indusert modell av murine periodontitt for evalueringen av muntlig nøytrofile

The main advantages of studying the pathophysiology of periodontal disease utilizing murine models are the reduced cost of animals, array of genetically ...

Protokollen som er beskrevet her, gir forskerne en metode for å studere orale nøytrofiler innenfor en ligaturindusert dyremodell av periodontal sykdom på en analog måte til menneskelige deltakere. Den største fordelen med denne teknikken er fremhevet av det økte volumet av betent gingival vev tilgjengelig for etterfølgende analyse, noe som reduserer dyrebruken. Vår evne til å hente de biofilmbelagte ligaturene fra rundt tennene gir mulighet for simulering av effektiv behandling av en lokalisert periodontal sykdom.Bruken av denne modellen kan brukes i studien av de systemiske effektene av periodontitt i en dyremodell, på grunn av de økte områdene av betent gingivalvev. Kjennskap til bruk av mikrokirurgiske instrumenter og disseksjonsmikroskoper, samt å binde kirurgens knuter før håndtering av levende dyreforsøk, anbefales sterkt. Visuell demonstrasjon av denne teknikken er avgjørende for å redusere lengden på læringskurven som kreves for å oppnå dyktig ligaturplassering.Å demonstrere prosedyren vil være Jeff Chadwig, en avgangsstudent fra laboratoriet mitt. Start med å plassere musen på en oppvarmet kirurgisk plattform. Etter å ha sørget for at musen er riktig bedøvet, stabilisere maxilla og mandible i åpen stilling ved hjelp av elastiske bånd.Støtte nakken med en bomullsrull for å opprettholde maxilla i horisontal stilling og dekke kroppen og halen for å redusere varmetapet. Plasser det kirurgiske mikroskopet ved ønsket forstørrelse og belysning over munnhulen. Bruk splinter tang for å installere en steril 50 eller mindre flettet silke sutur rundt M1 og M2 maksillære jeksler i gingival sulcus.Plasser den distale halen på suturen på palatalsiden av dentition og sett inn det proksimale segmentet mellom kontakten med M2 og M3. Deretter vikle den rundt den bukkale overflaten av M2 og sett den inn mellom kontakten med M1 og M2. Sørg for at begge endene av suturen trekkes tett for å kjøre den inn i gingivalsulfen. Pakk det proksimale sutursegmentet rundt M1 under konturens høyde og sett det inn mellom kontakten med M1 og M2. Trekk den proksimale halen på suturen tett for å fjerne all slakk. Bind endene av suturen med en kirurgknute og trim halene så sortere som mulig.Plasser knuten i gingival embrasure mellom M1 og M2 på palatal side av den maksillære dentition. Det er avgjørende at knuten som brukes til å sikre ligaturen er sikker og i posisjon der den ikke vil irritere dyret eller forstyrre mastication. Etter ligaturinstallasjonen, fjern musen fra det kirurgiske apparatet og legg den i et rent bur under en varmelampe, og sørg for å overvåke den til den er helt gjenopprettet.Steriliser de kirurgiske instrumentene i den varme glassperlesterilisatoren mellom hvert dyreemne. Individuelt hus hver mus med riktig miljøberikelse og gi ad libitum tilgang til filtrert vann og mashed standard chow i et temperatur- og fuktighetskontrollert miljø i syv til 11 dager. Når du er klar til å samle prøver, bruk en pipette til å skylle munnhulen med 100 mikroliter sterilisert fire grader Celsius PBS uten kalsium og magnesium i 10 sekunder.Gjenta skyllingen to ganger til, og legg hver skyll i det samme koniske, koniske sterile reagensrøret på 15 milliliter for hvert dyr. Kjør innholdet i hvert 15 milliliter rør gjennom et 40 mikrometer nylonnettfilter til et 50 milliliter konisk rør, og overfør filtratet til et nytt 15 milliliter reagensrør. Tilsett 33,3 mikroliter med 16 % paraformaldehyd for å lette prøvefikseringen.Vortex prøvene umiddelbart og inkubere dem på is i 15 minutter. Paraformaldehyd er den farligste reagensen som brukes i protokollen og bør håndteres med anbefalt personlig verneutstyr som er anbefalt av produsenten. Etter inkubasjonen, fyll røret til 15 milliliter med PBS og sentrifuge det på 1000xg og fire grader Celsius i fem minutter.Aspirer den overnaturlige, re-suspendere pellet i en milliliter FACS buffer ved fire grader Celsius og telle cellene på et hemocytometer eller automatisert celleteller. Gjenta sentrifugeringen og aspirer det overnaturante. Deretter, re-suspendere cellepellet i et passende volum av FACS buffer for en endelig konsentrasjon på 500, 000 til 1 million celler per 50 mikroliter facs buffer og overføre cellene til FACS tube.Tilsett en mikroliter rotteserum og to mikroliter anti-mus IGG antistoff til 50 mikroliter av prøven. Vortex prøven umiddelbart og blokkere den på is i 20 minutter. Deretter legger du til de riktige antistoffene i hver prøve.Vortex og inkuber på is i 30 minutter i mørket. Etter inkubasjonen, vask prøvene med en milliliter FACS buffer, vortex kort, og sentrifuge i fem minutter på 1000xg og fire grader Celsius. Dump det overnaturlige og blokker forsiktig åpningen av FACS-røret.Gjenta vasken to ganger, og suspender deretter prøvene på nytt i 250 mikroliter FACS-buffer for lagring. Dekk rørene med parafinfilm, pakk dem inn i aluminiumsfolie, og lagre dem på fire grader Celsius til de er klare til å analysere. Flow cytometri ble brukt til å analysere nøytrofiler gjenopprettet fra en oral skyll fra en naiv mus, samt en oral skylling og gjenvunnet ligatur fra en mus med ligatur-indusert periodontitt.For å vurdere alveolært bentap ble alveolerbensnivået målt fra alveolerbenkammen til cementoenamel-krysset for friske og ligaterte mus. Deretter ble måleforskjellene beregnet. Selv om det ikke er gjennomgått her, kan histopatologisk, immunohistokjemisk og morfometrisk evaluering av periodontium og alveolrbein også utføres avhengig av forskningsspørsmålet.Denne modellen brukes for tiden i laboratoriet mitt for å studere effekten av det orale medfødte immunsystemet på systemisk helse og sykdom.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

An Analytical Tool-box for Comprehensive Biochemical, Structural and Transcriptome Evaluation of Oral Biofilms Mediated by Mutans Streptococci

Biofilms are highly dynamic, organized and structured communities of microbial cells enmeshed in an extracellular matrix of variable density and ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

Høy gjennomstrømming Kvantitativ Real-time RT-PCR-analyse for fastsetting Expression Profiler av type I og III Interferon Subtyper

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis som modellorganisme for Assessing Interaksjon av anaerobe bakterier med vertsceller

Anaerobic bacteria far outnumber aerobes in many human niches such as the gut, mouth, and vagina. Furthermore, anaerobic infections are common and ...

Oral Intubation of Adult Zebrafish: A Model for Evaluating Intestinal Uptake of Bioactive Compounds

Muntlig intubasjon av voksen sebrafisk: en modell for å vurdere Intestinal opptak av bioaktive forbindelser

Most pathogens invade organisms through their mucosa. This is particularly true in fish as they are continuously exposed to a microbial-rich water ...

Quantitative Polymerase Chain Reaction-based Analyses of Murine Intestinal Microbiota After Oral Antibiotic Treatment

Kvantitativ Polymerase kjedereaksjon-baserte analyser av Murine tarmen bakterieflora etter muntlig antibiotika behandling

The gut microbiota has a central influence on human health. Microbial dysbiosis is associated with many common immunopathologies such as inflammatory ...

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

Galleria mellonella muntlig administrasjonsmodell til Study Commensal-Induced medfødte immunreaksjoner

The investigation of the immunogenic potential of commensal bacteria on the host immune system is one essential component when studying intestinal ...

A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model

En moderne oppvarmings-/besøksforbudsenhet for effektive haleåreinjeksjoner i en Murine Fungal Sepsis-modell

In rodent models, tail vein injections are important methods for intravenous administration of experimental agents. Tail vein injections typically involve ...

Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model

Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model

Induksjon av periodontitt via en kombinasjon av ligatur og lipopolysakkarid injeksjon i en rottemodell

Periodontitis (PD) is a highly prevalent, chronic immune-inflammatory disease of the periodontium, that results in a loss of gingival soft tissue, ...

A Mouse Ear Model for Allergic Contact Dermatitis Evaluation

En mus øre modell for allergisk kontaktdermatitt evaluering

Skin is the human body&#39;s first line of defense and one of the most exposed organs to environmental chemicals. Allergic contact dermatitis (ACD) is a ...