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•
07:18 min
July 26th, 2019
DOI :
10.3791/59687-v
Chapters
0:04
Title
0:59
Biosensor Hydration and Assay Set-Up
2:51
Loading of Ligand onto Biosensor and Washing Away Additional Ligand
3:43
Association of Analyte to Ligand and Dissociation of Analyte from Ligand
5:41
Results: A 28 Amino Acid Middle Region of GrgA Binds σ28 In Vitro
6:45
Conclusion
Transcript
转录中的蛋白质-蛋白质相互作用传统上是使用波透析研究。然而,波尔透析是纯粹的定量。我们使用生物层干涉测量,或BLI,来克服这个问题。
与Por dan相比,BLI检测粘合伙伴之间的实时关联和分离。它还生成定量动力学参数,这些参数表示相互作用机制。BLI 技术听起来可能令人生畏,但学习使用这项技术并不难,必须访问 BLI 仪器和相关软件。
此视频将使您能够轻松适应 BLI 技术。大约在测定开始前10分钟,移液器200微升的BLI缓冲液进入PCR管。用戴手套的手握住生物
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Summary
转录因子(TFs)与RNA聚合酶的相互作用通常使用下拉测定进行研究。我们应用生物层干涉测量(BLI)技术来描述GrgA与衣原RNA聚合酶的相互作用。与下拉检测相比,BLI可检测实时关联和解结,具有更高的灵敏度,并且具有高度定量性。
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