Name: application of biolayer interferometry (bli) for studying protein-protein interactions in transcription
Uploaded: 2019-07-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Biolayer Interferometry BLI for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription at JoVE.com

Diese Arbeit wurde von den National Institutes of Health (Grants AI122034 und AI140167) und der New Jersey Health Foundation (Grant- PC 20-18) unterstützt.

1. Herstellung von Proteinen
<ol><li>Verwenden Sie einen Dialysebeutel (mit einer entsprechenden Cut-off-Größe), um jedes Protein, das für BLI-Assays verwendet werden soll (einschließlich des Mitbezeichenten Liganden und des Analyten), gegen 1.000 Volumina des BLI-Puffers (25 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 10 mM MgCl2) zu dialysieren. , 0,1 mM DTT, pH 8,0, vorgekühlt auf 4 °C) bei 4 °C für 4 h. HINWEIS: BLI-Assays erfordern, dass der Liganden in Konzentrationen vorhanden ist, die die Bindu...

<ol>
	<li>Vvedenskaya, I. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+RNA+polymerase+and+the+core+recognition+element+are+a+determinant+of+transcription+start+site+selection.">Interactions between RNA polymerase and the core recognition element are a determinant of transcription start site selection.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A. 113 (21), E2899-E2905 (2016).</li><li>Feklistov, A., Sharon, B. D., Darst, S. A., Gross, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+sigma+factors:+a+historical,+structural,+and+genomic+perspective.">Bacterial sigma factors: a historical, structural, and genomic perspective.</a> Annual Review of Microbiology. 68, 357-376 (2014).</li><li>Visweswariah, S. S., Busby, S. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biosensor-based+small+molecule+fragment+screening+with+biolayer+interferometry.">Biosensor-based small molecule fragment screening with biolayer interferometry.</a> Journal of Computer-Aided Molecular Design. 25 (7), 669-676 (2011).</li></ol>

Protein-Protein-Wechselwirkungen sind entscheidend für die Regulierung der Transkription und anderer biologischer Prozesse. Sie werden am häufigsten durch Pulldown-Assays untersucht. Obwohl Pulldown-Assays relativ einfach durchzuführen sind, sind sie schlecht quantitativ und können schwache, aber biologisch sinnvolle Wechselwirkungen möglicherweise nicht erkennen. Im Vergleich dazu bietet BLI durch die Erkennung von Echtzeitassoziation und Dissoziation zwischen einem Liganden und einem Analyten Assoziations- und Dis...

Die Transkription, die RNA-Moleküle unter Verwendung von DNA als Vorlage produziert, ist der allererste Schritt der Genexpression. Die bakterielle RNA-Synthese beginnt nach der Bindung des RNA-Polymerase(RNAP)-Holoenzyms an einen Zielpromotor1,2. Das RNAP-Holoenzym (RNAPholo) besteht aus einem katalytischen Multi-Subunit-Kern (RNAPcore) und einem Faktor , der für die Erkennung der Promotorsequenz erforderlich ist. Transkriptionsaktivatoren und Repressoren, kollektiv tFs, regulieren die Genexpression durch die Bindungskomponenten des RNAPcore, Faktoren und/oder DNA. Je nach Organismus kann ein erheblicher Teil seines Genoms TFs gewidmet werden, die die Transkription als Reaktion auf physiologische Bedürfnisse und Umwelthinweise regulieren3.
Chlamydien ist ein obligat intrazelluläres Bakterium verantwortlich für eine Vielzahl von Krankheiten bei Menschen und Tieren4,5,6,7,8. Zum Beispiel ist Chlamydia trachomatis wohl die Nummer eins sexuell übertragbarer Erreger beim Menschen weltweit und eine der Hauptursachen für Erblindung in einigen unterentwickelten Ländern4,5. Chlamydien hat einen einzigartigen Entwicklungszyklus gekennzeichnet durch zwei abwechselnde zelluläre Formen, die als Elementarkörper (EB) und Retikulatkörper (RB)9bezeichnet werden. Während EBs in einer extrazellulären Umgebung überleben können, sind sie nicht in der Lage, sich zu vermehren. EBs gelangen durch Endozytose in Wirtszellen und differenzieren sich innerhalb weniger Stunden nach der Inokulation in größere RBs in einer Vakuole im Wirtszytoplasma. Nicht mehr infektiös, RBs vermehren sich durch binäre Spaltung. Gegen 20 h beginnen sie sich wieder zu den EBs zu differenzieren, die die Wirtszellen um 30-70 h verlassen.
Das Fortschreiten des Chlamydien-Entwicklungszyklus wird durch Transkription reguliert. Während während des Midzyklus, in dem sich RBs aktiv replizieren, eine Übermehrheit der fast 1.000 Chlamydiengene exprimiert wird, wird nur eine kleine Anzahl von Genen unmittelbar nach dem Eintritt von EBs in die Wirtszellen transkribiert, um die Umwandlung von EBs in RBs, und ein weiterer kleiner Satz von Genen werden transkribiert oder zunehmend transkribiert, um die Differenzierung von RBs in EBs10,11zu ermöglichen.
Das Chlamydien-Genom kodiert drei Faktoren, nämlich66,28 und54. 66, was der Haushaltsführung von E. coli und anderen Bakterien entspricht, ist für die Erkennung von Promotoren von Frühen- und Midcycle-Genen sowie einiger später Gene verantwortlich, währendfür die transkription bestimmter später Gene. Es ist bekannt, dassmehrere Gene sowohl einen -66-abhängigen Promotor als auch einen 28-abhängigen Promotor12tragen.
Trotz eines komplizierten Entwicklungszyklus wurde nur eine geringe Anzahl von TFs in Chlamydiengefunden 13. GrgA (früher als hypothetisches Protein CT504 in C. trachomatis serovar D und CTL0766 in C. trachomatis L2) ist ein Chlamydien-spezifischerTF, der ursprünglich als Aktivator von66-abhängigen Genen14anerkannt wurde. Affinity Pulldown-Assays haben gezeigt, dass GrgA ihre Transkription aktiviert, indem sie sowohl66 € als auch DNA bindet. Interessanterweise wurde später festgestellt, dass GrgA auch mit28, und aktiviert Transkription von28-abhängigen Promotoren in vitro15. Um zu untersuchen, ob GrgA ähnliche oder unterschiedliche Affinitäten für66 und28€ hat, haben wir auf die Verwendung von BLI zurückgegriffen. BLI-Assays haben gezeigt, dass GrgA mit einer 30-fach höheren Affinität als mit28000 Personen interagiert, was darauf hindeutet, dass GrgA unterschiedliche Rollen in der -66-abhängigen Transkription und der28-abhängigenTranskription spielen kann. 15.
BLI erkennt das Interferenzmuster von weißem Licht, das von einer Schicht immobilisierten Proteins an der Spitze eines Biosensors reflektiert wird, und vergleicht es mit dem einer internen Referenzschicht16. Durch die Analyse dieser beiden Interferenzmuster kann BLI wertvolle und Echtzeitinformationen über die Menge an Protein liefern, die an die Spitze des Biosensors gebunden ist. Das Protein, das bis zur Spitze des Biosensors immobilisiert ist, wird als Liganden bezeichnet und in der Regel mit Hilfe eines gemeinsamen Antikörpers oder Epitop-Tags (z. B. einem Poly-His- oder Biotin-Tag) immobilisiert, das eine Affinität zu einem assoziierten Teilchen (wie NTA oder Streptavidin) auf der Spitze des Biosensors. Die Bindung eines Sekundärproteins, das als Analyt bezeichnet wird, mit dem Liganden an der Spitze des Biosensors führt zu Veränderungen in der Deckkraft des Biosensors und führt somit zu Veränderungen der Interferenzmuster. Bei wiederholter Konzentration verschiedener Konzentrationen des Analyten kann BLI nicht nur qualitative, sondern auch quantitative Informationen über die Affinität zwischen Liganden und Analyt16liefern.
Nach bestem Wissen und Gewissen waren wir die ersten, die BLI einsetzten, um Protein-Protein-Wechselwirkungen in der Transkription15zu charakterisieren. In dieser Publikation zeigen wir, dass ein GrgA-Fragment, das zuvor für die Bindung von28€ erforderlich war, die Bindung tatsächlich vermittelt. Dieses Manuskript konzentriert sich auf Schritte der BLI-Assays und die Generierung von BLI-Diagrammen und Parametern der Bindungskinetik. Methoden zur Herstellung (und Reinigung) von Liganden und Analyten werden hier nicht behandelt.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BLItz machine</td>
			<td>ForteBio</td>
			<td>45-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing cellulose membrane</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>D9652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dip and Read Ni-NTA biosensor tray</td>
			<td>ForteBio</td>
			<td>18-5101</td>
			<td>Ready-to-use Ni-NTA biosensors for poly-His-tagged Proteins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop holder</td>
			<td>ForteBio</td>
			<td>45-5004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCR tubes (0.2 mL)</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>CLS6571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tubes (black)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>03-391-166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>06-666A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>R0861</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>E6758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>M8266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>GoldBio</td>
			<td>T095100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of biolayer interferometry (bli) for studying protein-protein interactions in transcription

Ein Transkriptionsfaktor (TF) ist ein Protein, das die Genexpression reguliert, indem es mit der RNA-Polymerase, einem anderen TF und/oder Schablonen-DNA interagiert. GrgA ist ein neuartiger Transkriptionsaktivator, der speziell im obligaten intrazellulären bakteriellen Erreger Chlamydien gefunden wurde. Protein-Pulldown-Assays mit Affinitätsperlen haben gezeigt, dass GrgA zwei Faktoren bindet, nämlich66 und28, die verschiedene Sätze von Promotoren für Gene erkennen, deren Produkte in Entwicklungsstadien unterschiedlich benötigt werden. Wir haben BLI verwendet, um die Interaktionen zu bestätigen und weiter zu charakterisieren. BLI zeigt mehrere Vorteile gegenüber Pulldown: 1) Es zeigt Echtzeit-Assoziation und Dissoziation zwischen Bindungspartnern, 2) Es erzeugt quantitative kinetische Parameter, und 3) Es kann Bindungen erkennen, die Pulldown-Assays oft nicht erkennen. Diese Eigenschaften haben es uns ermöglicht, die physiologischen Rollen von GrgA bei der Genexpressionsregulation in Chlamydienund mögliche detaillierte Wechselwirkungsmechanismen abzuleiten. Wir stellen uns vor, dass diese relativ erschwingliche Technologie äußerst nützlich für das Studium der Transkription und anderer biologischer Prozesse sein kann.

Durch BLI-Assays haben wir zuvor festgestellt, dass die Bindung von GrgA an 28 Dollar von einem 28 Aminosäure-Mittelbereich (Rückstände 138-165) von GrgA15abhängt. Dementsprechend hatte ein GrgA-Löschkonstrukt ohne diese Region (NH-GrgA-138-165) im Vergleich zu N-terminally His-tagged Full-Length GrgA (NH-GrgA) eine verringerte Assoziationsrate und eine erhöhte Dissoziationsrate, was zu einem 3-millionenfachen Verlust der Gesamt- Affinität (Tabelle 1). Hier zeige...

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Application of Biolayer Interferometry BLI for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

Wechselwirkungen von Transkriptionsfaktoren (TFs) mit der RNA-Polymerase werden in der Regel mit Pulldown-Assays untersucht. Wir wenden eine Biolayer Interferometry (BLI) Technologie an, um die Wechselwirkung von GrgA mit der Chlamydien-RNA-Polymerase zu charakterisieren. Im Vergleich zu Pulldown-Assays erkennt BLI Echtzeit-Assoziation und Dissoziation, bietet eine höhere Empfindlichkeit und ist sehr quantitativ.

Anwendung der Biolayer-Interferometrie (BLI) zur Untersuchung von Protein-Protein-Wechselwirkungen bei der Transkription

A transcription factor&#160;(TF) is a protein that regulates gene expression by interacting with the RNA polymerase, another TF, and/or template DNA. GrgA ...

Die Protein-Protein-Wechselwirkung bei der Transkription wurde traditionell mit Por-Dialyse untersucht. Die Por-Dialyse ist jedoch rein quantitativ. Wir verwenden Biolayer-Interferometrie, oder BLI, um dieses Problem zu überwinden.Im Vergleich zu Por dan erkennt BLI Echtzeit-Assoziationen und Dissoziationen zwischen Bindungspartnern. Es erzeugt auch quantitative kinetische Parameter, die auf Interaktionsmechanismen hinweisen. BLI-Technologie mag einschüchternd klingen, aber es ist nicht schwer zu lernen, um diese Technologie zu verwenden, muss man den Zugriff auf ein BLI-Instrument und die zugehörige Software haben.Mit diesem Video können Sie sich einfach an die BLI-Technologie anpassen. Etwa 10 Minuten vor Beginn eines Assays, Pipette 200 Mikroliter des BLI-Puffers in ein PCR-Rohr. Entfernen Sie einen Nickel-NTA-Biosensor aus der Originalverpackung, indem Sie den breiten Teil des Biosensors mit einer handgeliebten Hand halten.Legen Sie den Biosensor über das PCR-Rohr, so dass nur die Glasspitze des Biosensors in den BLI-Puffer eingetaucht ist. Halten Sie die Biosensorspitze mindestens 10 Minuten unter Wasser, um eine vollständige Hydratation zu gewährleisten. Schalten Sie die Blitz-Maschine ein.Stellen Sie sicher, dass das Gerät über einen USB-Datenausgangsanschluss auf der Rückseite des Geräts mit dem Computer verbunden ist. Öffnen Sie auf dem Computer die zugehörige Software und klicken Sie auf Advanced Kinetics auf der linken Seite des Bildschirms. Geben Sie in der Software alle entsprechenden Informationen über das Experiment unter den jeweiligen Überschriften ein.Klicken Sie auf Biosensor Type und wählen Sie Nickel NTA aus dem Dropdown-Menü. Die Dauer jedes Schritts kann bei Bedarf von der Standardeinstellung geändert werden. Für optimale Ergebnisse mindestens 30 Sekunden für die Ausgangs- und Ausgangsbasislinie und 120 Sekunden für Die Zuordnung und Dissoziation verwenden.Entfernen Sie den hydratisierten Nickel-NTA-Biosensor aus dem PCR-Rohr und befestigen Sie ihn an der Biosensorhalterung an der Maschine, indem Sie den breiten Teil des Biosensors auf die Halterung schieben. Legen Sie ein 0,5 Milliliter schwarzes Mikrozentrifugenrohr in den Rohrhalter der Maschine und Pipette 400 Mikroliter BLI-Puffer hinein. Schließen Sie die Abdeckung der Maschine so, dass die Biosensorspitze in den Puffer im Mikrozentrifugenrohr eingetaucht wird.Klicken Sie auf Weiter in der Software, um mit der Aufzeichnung der ursprünglichen Baseline zu beginnen. Nachdem der erste Basisschritt die Aufzeichnung abgeschlossen hat, öffnen Sie die Abdeckung der Maschine. Bewegen Sie den Schieberegler nach rechts, so dass sich der Fallhalter vor dem schwarzen Pfeil befindet.Pipette vier Mikroliter eines dialyzierten Zintands mit Tindel auf den Fallhalter und schließen Sie die Abdeckung der Maschine, die automatisch mit der Aufzeichnung des Ladeschritts beginnt. Nachdem der Ladeschritt die Aufnahme beendet hat, öffnen Sie die Abdeckung der Maschine. Bewegen Sie den Schieberegler nach links, so dass sich der Rohrhalter wieder vor dem schwarzen Pfeil befindet.Schließen Sie den Deckel der Maschine und stellen Sie sicher, dass die Biosensorspitze in den BLI-Puffer des Rohres im Rohrhalter eingetaucht ist. Die Maschine und die Software beginnen automatisch mit der Aufzeichnung des Basisschritts. Nachdem der Basisschritt die Aufzeichnung abgeschlossen hat, öffnen Sie die Abdeckung der Maschine.Entfernen Sie den Tropfenhalter und reinigen Sie ihn, indem Sie ein Protein auspfeifen und insgesamt fünfmal mit doppelt entionisiertem Wasser ausspülen. Verwenden Sie ein Tuch, um die Oberfläche des Tropfenhalters nach der letzten Wäsche zu reinigen. Ersetzen Sie den Fallhalter wieder auf die Maschine.Bewegen Sie den Schieberegler auf der Maschine nach rechts, so dass sich der Fallhalter wieder vor dem schwarzen Pfeil befindet. Pipette vier Mikroliter eines Dialyzanels analyt auf den Tropfenhalter und schließen Sie die Abdeckung der Maschine, die automatisch die Aufzeichnung der Assoziation Schritt beginnt. Nachdem der Assoziationsschritt die Aufnahme beendet hat, öffnen Sie die Abdeckung der Maschine.Bewegen Sie den Schieberegler auf der Maschine nach rechts, so dass sich der Rohrhalter wieder vor dem schwarzen Pfeil befindet, und schließen Sie die Abdeckung der Maschine, die automatisch mit der Aufzeichnung des Dissoziationsschritts beginnt. Nachdem der Dissoziationsschritt die Aufnahme beendet hat, öffnen Sie die Abdeckung der Maschine und entfernen Sie den Fallhalter und den Rohrhalter. Spülen Sie beide mit doppelt entionisiertem Wasser gründlich ab, um jedes Protein wegzuwaschen.Entfernen Sie den Biosensor und entsorgen Sie ihn sicher. Wiederholen Sie diese Schritte für dasselbe Ligand-Analytpaar mit unterschiedlichen Analytkonzentrationen. Sobald alle Durchläufe abgeschlossen sind, speichern Sie die Daten auf der Software, indem Sie auf Datei und Experiment speichern wie auf der linken Seite des Bildschirms klicken.Wählen Sie unter der Überschrift Daten ausführen die Option Schrittkorrektur und Eins-zu-Eins aus, und klicken Sie auf Analysieren, um kinetische Daten zu generieren. Um die quantitativen Daten in ein Arbeitsblatt zu extrahieren und Diagramme zu generieren, klicken Sie auf In CSV exportieren und speichern Sie die aufgezeichneten Daten als CSV-Datei. Öffnen Sie die CSV-Datei mit einer Tabellenkalkulationssoftware.GrgA in voller Länge besteht aus 288 Aminosäuren. Wie hier gezeigt, bindet ein 28 Aminosäure-Mittelbereich Sigma 28 direkt. Hier wurde der mittlere Bereich mit einem Endterminal His-Tag als Liganden verwendet, der zuerst bis zur Spitze eines Nickel-NTA-Biosensors immobilisiert wurde.Gezeigt werden Aufnahmen von Experimenten mit drei verschiedenen Analytkonzentrationen, die jeweils 30 Sekunden vor der Ligandenbindung beginnen und zwei Minuten nach Beginn der letzten Wäsche enden. Die verbesserte Visualisierung der Liganand-Analytenzuordnung und -dissoziation wird nach dem Entfernen von Werten in den ersten beiden Phasen und dem Zurücksetzen der Basislinie angezeigt. Nach dem Waschen ungebunden und terminal Seine-getaggt GrgA 138 bis 165 aus dem Biosensor, Echtzeit-Assoziation mit dem Analyten wurde nach dem Zusatz von Sigma 28 aufgezeichnet.Schließlich wurde die Echtzeit-Dissoziation nach dem Waschen aufgezeichnet. Vor BLI-Assays wird Glycerin aus Liganden und Analyten entfernt. Wir empfehlen, dass BLI kurz nach der Dialyse durchgeführt wird, wie im Text beschrieben.Nach der Charakterisierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen in der Transkription mit BLI kann man untersuchen, wie sich die Interaktion auf die Transkriptionsinitiierung, Dehnung und Beendigung auswirkt.

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Application of Biolayer Interferometry (BLI) for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

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Fluorescence Anisotropy as a Tool to Study Protein-protein Interactions

Fluoreszenzanisotropiemessungen als Werkzeug Protein-Protein-Interaktionen zu untersuchen

Protein-protein interactions play an essential role in the function of a living organism. Once an interaction has been identified and validated it is ...

Forschung

Biochemie

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Scaffold Liposomen zu rekonstituieren Lipid-proximalen Protein-Protein-Wechselwirkungen<em&gt; In Vitro</em

Studies of integral membrane proteins in vitro are frequently complicated by the presence of a hydrophobic transmembrane domain. Further complicating ...

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

Zeitaufgelöste Elektrospray-Ionisations Wasserstoff-Deuterium-Austausch-Massenspektrometrie zur Struktur Protein Studium und Dynamik

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

Vorbereitung der Keratin-Hydrolysat aus Hühnerfedern und ihre Anwendung in der Kosmetik

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

Biotinylated Cell-penetrating Peptides to Study Intracellular Protein-protein Interactions

Biotinylierte Zelle eindringen Peptide, intrazelluläre Protein-Protein-Wechselwirkungen zu studieren

Here we present a protocol to study intracellular protein-protein interactions that is based on the widely used biotin-avidin pull-down system. The ...

Analyzing Dynamic Protein Complexes Assembled On and Released From Biolayer Interferometry Biosensor Using Mass Spectrometry and Electron Microscopy

Analyse dynamischer Proteinkomplexe montiert auf und befreit Biolayer Interferometrie Biosensor mit Massenspektrometrie und Elektronenmikroskopie

In vivo, proteins are often part of large macromolecular complexes where binding specificity and dynamics ultimately dictate functional outputs. In this ...

A Fluorescence Fluctuation Spectroscopy Assay of Protein-Protein Interactions at Cell-Cell Contacts

Eine Fluoreszenz Fluktuation Spektroskopie Assay von Protein-Protein-Wechselwirkungen an den Zell-Zell-Kontakten

A variety of biological processes involves cell-cell interactions, typically mediated by proteins that interact at the interface between neighboring ...

Evaluation of Protein&#8211;Protein Interactions using an On-Membrane Digestion Technique

Evaluation of ProteinÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬Å“Protein Interactions using an On-Membrane Digestion Technique

Bewertung von Protein-Protein-Wechselwirkungen mit einer On-Membrane-Verdauungstechnik

Numerous intracellular proteins physically interact in accordance with their intracellular and extracellular circumstances. Indeed, cellular functions ...

Interactions with and Membrane Permeabilization of Brain Mitochondria by Amyloid Fibrils

Wechselwirkungen mit und Membranpermeabilisierung des Gehirns Mitochondrien durch Amyloid Fibrils

A growing body of evidence indicates that membrane permeabilization, including internal membranes such as mitochondria, is a common feature and primary ...

Native Cell Membrane Nanoparticles System for Membrane Protein-Protein Interaction Analysis

Native Cell Membrane Nanoparticles System für Membran-Protein-Protein-Interaktionsanalyse

Protein-protein interactions in cell membrane systems play crucial roles in a wide range of biological processes- from cell-to-cell interactions to signal ...