Name: a uniform shear assay for human platelet and cell surface receptors via cone-plate viscometry
Uploaded: 2019-06-05T14:30:00
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이 연구에 관련 된 작업은 국가 보건 연구소 (NIH) 국립 심장, 폐 및 혈액 학회 보조금 HL082808, HL123984 (R.L.) 및 F31HL134241 (M.E.Q.)에 의해 부분적으로 지원 되었습니다. 자금 조달은 또한 NIH 국립 연구소 일반 의료 과학 교부 금 T32GM008367 (M.E.Q.)에 의해 제공; 애 틀 란 타 및에 모리 대학교 소아과 유 세포 분석 코어의 아동 건강 관리에서 파일럿 보조금을 지급 합니다. 저자는 6B4 항 체를 공유 하는 Dr. Hans Deckmyn과 기술 지원을 위한 Emory 아 이들의 소아과 연구 센터 유 세포 분석 코어를 감사 하 고 싶습니다.

본 원에 기재 된 기증자 유래 인간 혈소판을 사용 하는 모든 방법은에 모리 대학교/아 틀 란 타의 어린이 건강 관리 기관 검토 위원회에 의해 승인 되었다.
1. 혈액 채취 및 혈소판 분리
<ol><li>실험 당일에에 동의 건강 한 성인 기증자를 통해 인간의 혈액을 그립니다 3.8% 트리 구 연산 나트륨. 혈액의 1 개의 4.5 mL 관은 혈소판이 1 μ l 당 250 x 10에 가까운 기증자에 있는 20-25 조건?...

<ol>
	<li>Sullivan, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-voltage-gated+Ca2++influx+through+mechanosensitive+ion+channels+in+aortic+baroreceptor+neurons.">Non-voltage-gated Ca2+ influx through mechanosensitive ion channels in aortic baroreceptor neurons.</a> Circulation Research. 80 (6), 861-867 (1997).</li><li>Lansman, J. B., Hallam, T. J., Rink, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+stretch-activated+ion+channels+in+vascular+endothelial+cells+as+mechanotransducers.">Single stretch-activated ion channels in vascular endothelial cells as mechanotransducers.</a> Nature. 325 (6107), 811-813 (1987).</li><li>Fettiplace, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+Cell+Transduction,+Tuning,+and+Synaptic+Transmission+in+the+Mammalian+Cochlea.">Hair Cell Transduction, Tuning, and Synaptic Transmission in the Mammalian Cochlea.</a> Comprehensive Physiology. 7 (4), 1197-1227 (2017).</li><li>Zimmerman, A., Bai, L., Ginty, D. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+the+3D+orientation+of+piconewton+integrin+traction+forces.">Mapping the 3D orientation of piconewton integrin traction forces.</a> Nature Methods. 15 (2), 115-118 (2018).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constructing+modular+and+universal+single+molecule+tension+sensor+using+protein+G+to+study+mechano-sensitive+receptors.">Constructing modular and universal single molecule tension sensor using protein G to study mechano-sensitive receptors.</a> Scientific Reports. 6, 21584 (2016).</li><li>Quach, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fc-independent+immune+thrombocytopenia+via+mechanomolecular+signaling+in+platelets.">Fc-independent immune thrombocytopenia via mechanomolecular signaling in platelets.</a> Blood. 131 (7), 787-796 (2018).</li><li>Cao, W., Krishnaswamy, S., Camire, R. M., Lenting, P. J., Zheng, X. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factor+VIII+accelerates+proteolytic+cleavage+of+von+Willebrand+factor+by+ADAMTS13.">Factor VIII accelerates proteolytic cleavage of von Willebrand factor by ADAMTS13.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 105 (21), 7416-7421 (2008).</li><li>Kroll, M. H., Hellums, J. D., McIntire, L. V., Schafer, A. I., Moake, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelets+and+shear+stress.">Platelets and shear stress.</a> Blood. 88 (5), 1525-1541 (1996).</li><li>Pareti, F. I., Niiya, K., McPherson, J. M., Ruggeri, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+two+domains+of+human+von+Willebrand+factor+that+interact+with+fibrillar+collagen+types+I+and+III.">Isolation and characterization of two domains of human von Willebrand factor that interact with fibrillar collagen types I and III.</a> Journal of Biological Chemistry. 262 (28), 13835-13841 (1987).</li><li>Deng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+clearance+via+shear-induced+unfolding+of+a+membrane+mechanoreceptor.">Platelet clearance via shear-induced unfolding of a membrane mechanoreceptor.</a> Nature Communications. 7, 12863 (2016).</li><li>Ikeda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+von+Willebrand+factor+and+fibrinogen+in+platelet+aggregation+under+varying+shear+stress.">The role of von Willebrand factor and fibrinogen in platelet aggregation under varying shear stress.</a> Journal of Clinical Investigation. 87 (4), 1234-1240 (1991).</li><li>Westerhof, N., Stergiopulos, N., Noble, M. 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A., Ortyn, W. E., Liang, L., Venkatachalam, V., Morrissey, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+image+analysis+and+imaging+by+flow+cytometry.">Cellular image analysis and imaging by flow cytometry.</a> Clinics in Laboratory Medicine. 27 (3), 653-670 (2007).</li><li>Quach, M. E., Chen, W., Li, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+platelet+clearance+and+translation+to+improve+platelet+storage.">Mechanisms of platelet clearance and translation to improve platelet storage.</a> Blood. 131 (14), 1512-1521 (2018).</li></ol>

이 원고에 설명 된 프로토콜은 혈소판 및 세포 표면 수용 체에 층 류 전단 효과의 신속 하 고 다양 한 평가를 할 수 있습니다. 여기에 제시 된 특정 대표적인 결과는 다이 성체 또는이가 리간드의 영향이 전단 흐름에 의해 영향을 받을 수 있는 방법을 강조 한다. 이 응용 분야 외에도 균일 한 전단 분석은 전단 의존적 효과를 관찰 하는 광범위 한 응용 분야를가지고 있습니다. 알려진 리간드-수용 체 ...

기계 수용 체는 압력 또는 기계적인 섭 동/변형과 같은 기계적인 자극에 반응 하는 단백질입니다. 일부 기계 수용 체의 경우, 이러한 기계적 섭 동을 감지 하는 것은 그들이 발현 되는 세포 유형의 기능에 명시 적 이다. 복용, 예를 들어, baroreceptor 뉴런의 스트레칭 수용 체; 이러한 기계 과민 이온 채널은 혈관 "스트레칭"1,2를 감지 하 여 혈압을 조절 합니다. 내이에서 머리카락 세포의 이온 채널은 음파3으로 인 한 기계적 변형을 감지 하 고 피부 낮은 임계 기계 수용 체 (ltmrs)는 촉각 정보4의 전달을 용이 하 게 합니다. 다른 경우에, 기계 수용 체는 접착 또는 성장의 설치를 위해 세포에 중요 한 정보를 제공 합니다. 세포는 그들의 국부 환경의 강성을 감지할 수 있고, 성장 또는5확산을 지시 하는 액 틴 세포 골격 및 인 테 그린을 통해 수축 힘에 의존할 수 있다.
세포 또는 조직 기반 모델에서 수용 체-리간드 상호 작용을 연구 할 때, 온도, pH, 리간드 농도, 음조, 막 전위 및 기타 여러 매개 변수를 변경 하는 효과를 신속 하 고 정확 하 게 보고할 수 있는 일반적인 분석 법이 존재 합니다. 생체 내에서 다를 수 있습니다. 그러나,이 같은 분석은 수용 체 활성화에 기계적인 힘의 기여를 검출 하는 관해서 짧은 떨어질 수 있습니다. 세포가 그들의 미세 환경을 감지 하 고, 음파를 감지 하거나, 스트레칭에 반응 하 든, 앞서 언급 한 기계 수 용기가 공통적으로가지고 있는 것은 리간드, 수용 체 또는 둘 모두가 상호 작용에 참여 한다는 것입니다. 표면. 수용 체 상호 작용에 기계적인 힘의 효력을 시험 하기 위하여 개발 된 분석은 수시로이 패러다임을 반영 합니다. 미세 유체 및 유량 챔버는 세포 및 수용 체7,8에 대 한 전단 흐름의 효과를 연구 하는 데 사용 됩니다. 이러한 유형의 실험은 확립 된 흐름 속도를 통해 전단 속도를 미세 조정할 수 있는 이점이 있습니다. 다른 기술은 형광 분자 프로브를 사용 하 여 리간드가 풍부한 표면에 세포가가 해지는 힘을 감지 하 고 상호 작용9,10에 관련 된 힘의 크기와 방향을 정확 하 게 판독 합니다.
하나 또는 두 파트너가 표면에 고정 되는 경우 발생 하는 기계 감각 외에도 전단 응력은 용액의 단백질과 세포에 영향을 줄 수 있습니다. 이것은 수시로 순환에서 지속적으로 혈액 세포/단백질에서 관찰 되 고, 일반적으로 표면 앵커 링 되는 기계 수용 체의 활성화를 통해 나타날 수 있다11, 또는 아래 폐색 되는 대상 시퀀스의 노출을 통해 정적 조건12. 그러나 상대적으로 적은 기법은 용액 내 입자에 대 한 전단 력의 영향을 분석 합니다. 일부 인-솔루션 접근법은 다양 한 속도와 기간으로 유체 현 탁 액의 볼 텍 싱 세포를 통해 전단을 도입 하지만, 이러한 접근법은 생성 된 전단 응력의 매우 정밀한 결정을 허용 하지 않을 수 있다. 회전 점도 계 유체에 특정 전단 력을 적용 하 여 점도를 측정 합니다. 본 명세서에서는 용액 중의 세포 또는 세포 단편에 대 한 특정 층 류 전단 율의 효과를 결정 하기 위한 적용 방법을 설명 한다.
혈소판 표면에 가장 높게 발현 된 단백질 중 하나는 당단백질 (GP) Ib-IX 복합체 이다. GPIb-IX는 본 플라즈마 단백질에 대 한 1 차 수용 체 폰 빌 레 브란트 팩터 (VWF) 이다. 함께,이 수용 체-리간드 쌍은 전단 응력 (13)에 대 한 혈소판 반응의 기초로 서 오랫동안 인식 되 고 있다. 혈관 손상이 발생 하는 경우, VWF는 부 내 피 매트릭스14의 노출 된 콜라겐에 결합 하 여 Vwf-GPIB-IX 상호작용을 통해 부상 부위를 혈소판으로 모집 합니다. VWF는 GPIbα 서브 유닛에서의 결합 부 위에 참여 하 여 생리 적 전단 응력 하에서 GPIb-IX는 멤브레인 근 위부 (MSD) 도메인의 전개를 유도 하 고이는 GPIb-IX15를 차례로 활성화 시킨다. 최근의 연구에서, 우리는 많은 면역 혈소판 감소 증 (ITP) 환자에서 생성 된 것과 같은 GPIbα에 대 한 항 체가 또한 전단 응력11하에서 MSD를 통해 서 발생 하는 혈소판 신호를 유도할 수 있다는 것을 보여주었습니다. 그러나 일반적인 순환 하에서 복합체를 고 정화 함으로써 전단 유도 된 GPIb-IX 활성화를 용이 하 게 하는 VWF와는 달리,이가 항 체는 GPIb-IX를 통해 혈소판을 가교 결합 하 고, 순환 하 여 MSD를 펼칠 수 있습니다. 이러한 방식으로, 일반적으로 전단 하에서 표면 고 정화에 의해 활성화 되는 기계 수용 체는 용액에서 활성화 될 수 있다. 본 보고서에서는 용액에서의 수용 체 활성화에 대 한 특정 수준의 전단 응력의 영향을 검출 하기 위해 점도 계 기반 균일 전단 분석을 활용 하는 방법을 설명 합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:764px;" width="764">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:413px;">APC anti-human CD62P (P-Selectin)</td>
			<td style="width:128px;">BioLegend</td>
			<td style="width:135px;">304910</td>
			<td style="width:88px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:413px;">Brookfield Cap 2000+ Viscometer</td>
			<td style="width:128px;">Brookfield</td>
			<td style="width:135px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:413px;">FITC-conjugated Erythrina cristagalli lectin (ECL)</td>
			<td style="width:128px;">Vector Labs</td>
			<td style="width:135px;">FL-1141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pooled Normal Human Plasma</td>
			<td>Precision Biologic</td>
			<td>CCN-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:413px;">Vacutainer Light Blue Blood Collection Tube (Sodium Citrate)</td>
			<td style="width:128px;">BD</td>
			<td style="width:135px;">369714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:413px;">Vacutainer Blood Collection Set, 21G x &#190;&#34; Needle</td>
			<td style="width:128px;">BD</td>
			<td style="width:135px;">367287</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a uniform shear assay for human platelet and cell surface receptors via cone-plate viscometry

많은 생물학 세포/조직은 기계 수용 체를 통해 그들의 현지 환경의 기계적인 속성을, 압력 또는 기계적인 섭 동 같은 힘에 반응할 수 있는 단백질을 감지 합니다. 기계 수용 체는 자극을 감지 하 고 다양 한 메커니즘을 통해 신호를 전송 합니다. 기계 수용 체에 대 한 가장 일반적인 역할 중 일부는 신경 반응에, 터치와 통증 같은, 또는 균형 및 청각에서 기능 하는 머리 세포. 기계 감각은 또한 정기적으로 혈관 내 피 세포와 같은 전단 응력에 노출 되는 세포 종류에 대 한 중요 한, 어떤 라인 혈액 혈관, 또는 정상적인 순환에 전단을 경험 하는 혈액 세포. 점도 계는 유체의 점도를 감지 하는 장치입니다. 회전 점도 계는 또한 유체에 공지 된 전단 력을 적용 하기 위해 사용 될 수 있다. 유체에 균일 한 전단을 소개 하는이 계기의 능력은 혈액과 플라스마를 포함 하 여 많은 생물학 액체를 연구 하기 위하여 착취 되었습니다. 점도는 또한 용액 내의 세포에 전단을 적용 하 고 특정 리간드-수용 체 쌍에 전단의 영향을 시험 하기 위해 사용 될 수 있다. 여기에서, 우리는 콘 플레이트 점도 혈소판 기계 감각 수용 체 복잡 한 GPIb에 대하여 항 체로 처리 한 혈소판에 전단 응력의 내 인 성 수준의 효력을 시험 하기 위하여 이용 합니다.

도 1 은 상기 혈관 벽에 앵커 되었을 때 전단 의존적 수용 체 활성화를 설명 하기 위해 처음 도입 된 GPIB-IX 활성화의 트리거 모델을 개략적으로 설명 하 고, 또한 다가 리간드에 의해 가교 된 혈소판의 활성화를 지원할 수 있다. 도 2 는 GPIB-IX (6B4 및 11A8)의 N-말단 도메인을 표적화 하 고 전단 및 정적 조건 하에서 하나의 대조 항 체 (정상 IgG)를 대상으로 하...

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A Uniform Shear Assay for Human Platelet and Cell Surface Receptors via Cone-plate Viscometry

원뿔형 플레이트 점도를 통한 인간 혈소판 및 세포 표면 수용 체에 대 한 균일 한 전단 분석

우리는 원뿔 판 점도를 사용 하 여 혈소판 표면 수용 체에 균일 한 전단을 적용 하는 인 솔루션 방법을 설명 합니다. 이 방법은 또한 다른 세포 유형 및 세포 단편에 전단을 적용 하 고 특정 리간드-수용 체 쌍을 표적으로 할 필요가 없는 더 광범위 하 게 사용 될 수 있다.

Many biological cells/tissues sense the mechanical properties of their local environments via mechanoreceptors, proteins that can respond to forces like ...

이 프로토콜을 사용하면 전단이 용액의 세포에서 작동하는 방식에 대한 다양한 질문에 답할 수 있으며 전단 지속 시간과 크기에 대한 상당한 제어를 제공합니다. 고정된 세포에 대한 전단의 효과를 감지하는 다른 기술과 달리 이 기술은 용액의 세포에 전단을 적용할 수 있게 해주며 다운스트림 신호 검출 방법의 스펙트럼에 빌려줍니다. 동의에서 말초 혈액을 얻은 후, 3.8%의 트리나트륨 구연산의 4.5 밀리리터 튜브에서 건강한 성인 기증자, 혈소판이 풍부한 혈장을 얻기 위해 혈액 원심분리기, 45도 각도로 자른 파이펫 팁을 사용하여 결과 상단, 흐린, 노란색 혈소판이 풍부한 플라즈마 층을 조심스럽게 제거한다.완전한 혈액 수를 통해 혈소판 수를 얻고, 혈소판 수를 약 2.5 배 10으로 조정하여 마이크로리터 당 다섯 번째 혈소판당 제5 혈소판으로 풀이 된 인간 혈소판이 없는 플라즈마를 갖는다. 그런 다음 서스펜션을 섭씨 22도에 부드럽게 회전시 놓습니다. 리간드 처리를 위해 혈소판이 풍부한 혈장에 관심 있는 항체 또는 리간드를 천천히 추가하고 혈소판을 부드럽게 섞습니다.인큐베이션 중에 원뿔판 비스코마를 켜고 플레이트 온도를 섭씨 22도로 설정합니다. 5-10분 후, 처리된 혈소판이 풍부한 플라즈마를 플레이트 중앙에 직접 온도 조절 된 콘 플레이트 비스코머에 전달하여 모든 샘플이 접촉 지점에서 콘과 플레이트 사이에 증착되는 것을 주의하십시오. 샘플에 전단을 적용하려면 비스혜성 매뉴얼에 따라 전단을 계산하고 적절한 속도와 지속 시간으로 샘플에 전단을 적용합니다.응용 프로그램의 끝에서, 샘플이 플레이트와 콘 둘 다와 접촉유지되도록 플레이트에서 약 2밀리미터 원뿔을 들어 올리고, 젤 로딩 파이펫 팁을 사용하여 샘플 부피의 중심에서 5~10 마이크로리터를 수집한다. 그런 다음 실온에서 20 분 동안 관심있는 표면 마커에 대한 항체로 전단 샘플을 배양하고 실온에서 20 분 동안 2 %의 파라 포름알데히드로 샘플을 수정합니다. 유동 세포측정에 의해 샘플을 분석하려면 각 조건에 대해 적어도 20, 000개의 이벤트를 수집하고 각 형광마커의 신호 강도를 정량화하고 각 형광의 강도에 대한 높이 값을 이용하여 정량화한다.그런 다음 소 세럼 알부민 또는 차량으로 음의 제어를 사용하여 부정적인 배경 형광 이벤트를 제외하고 게이트를 그리고 모든 실험 조건에 대한 게이트 내부의 이벤트의 백분율을 정량화합니다. 전단 력 응용 프로그램에 대한 응답으로 혈소판 활성화 마커 발현은 시간에 따라 조절되지 않습니다. 여기서, 혈당 단백질 1b-IX의 N단말 도메인을 표적으로 하는 2개의 항체의 존재하에 인간 혈소판 활성화의 대표적인 판독및 정전기 조건 하에서 하나의 대조항체가 도시된다.3개의 활성화 마커 의 발현은 정전기 조건 또는 제어 항체의 존재에 비해 전단력 및 표적 항체의 존재에서 현저하게 증가하였다. 특히, 혈당 단백질 1b-IX 활성화를 유발하기에너무 낮은 결합력으로 항체를 사용하여 처리하면 정적 또는 전단 힘 조건 하에서 혈소판 활성화 마커 업조절을 유발하지 않습니다. 또한, 당단백질 1b-IX에 대하여 항체를 포함하는 면역 혈전 세포성페니아 환자로부터 혈장은 당단백질 1b-IX 표적화 항체가 없는 환자로부터 혈장과 대조적으로 전단 의존반응을 유발한다.유량 분석 외에도 전단에 노출된 세포는 단백질 레벨의 변화를 결정하기 위해 서부 얼룩, ELISA 및 질량 스펙 분석을 위해 용액을 제거할 수 있습니다. 언제나처럼, 혈액 이나 인간의 샘플을 사용 하는 경우, 적절 한 보호 장비를 착용 하 고 실험실 안전 및 혈액 태어난 병원 체 지침을 따라야 합니다.

Research

JoVE Journal

Biology

A Chromatin Assay for Human Brain Tissue

인간 두뇌 조직에 대한 염색질 어세이

Chronic neuropsychiatric illnesses such as schizophrenia, bipolar disease and autism are thought to result from a combination of genetic and environmental ...

연구

생물학

Preparation of Pooled Human Platelet Lysate (pHPL) as an Efficient Supplement for Animal Serum-Free Human Stem Cell Cultures

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동물 세럼 - 무료 인간 줄기 세포 배양을위한 효율적인 보충으로 풀링 인간 혈소판 Lysate (pHPL)의 준비

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Avidity-based Extracellular Interaction Screening (AVEXIS) for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Avidity-based Extracellular Interaction Screening AVEXIS for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

낮은 친화력 세포 수용체 - 리간드 상호 작용의 확장 가능한 감지를위한 욕망 기반의 세포 상호 작용 검사 (AVEXIS)

Extracellular protein:protein interactions between secreted or membrane-tethered proteins are critical for both initiating intercellular communication and ...

Glycopeptide Capture for Cell Surface Proteomics

세포 표면 단백질 체학 (Proteomics)에 대한 글리코 펩타이드 캡처

Cell surface proteins, including extracellular matrix proteins, participate in all major cellular processes and functions, such as growth, ...

Visualizing Clathrin-mediated Endocytosis of G Protein-coupled Receptors at Single-event Resolution via TIRF Microscopy

TIRF 현미경을 통해 단일 ​​이벤트 해상도에서 G 단백질 결합 수용체의 Clathrin 매개 엔도 시토 시스를 시각화

Many important signaling receptors are internalized through the well-studied process of clathrin-mediated endocytosis (CME). Traditional cell biological ...

A Method for Selecting Structure-switching Aptamers Applied to a Colorimetric Gold Nanoparticle Assay

색채 금 나노 입자 분석에 적용 구조 전환 앱 타머를 선택하는 방법

Small molecules provide rich targets for biosensing applications due to their physiological implications as biomarkers of various aspects of human health ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

총회와 &#39;전단 반지&#39;의 응용 프로그램 : 궤도, 단방향 및 정기 유체 흐름 및 전단 응력에 대한 소설 내피 모델

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

Live-cell Imaging of Platelet Degranulation and Secretion Under Flow

흐름하에있는 혈소판 탈식 및 분비의 라이브 셀 이미징

Blood platelets are essential players in hemostasis, the formation of thrombi to seal vascular breaches. They are also involved in thrombosis, the ...

A Simple Fluorescence-based Reporter Assay to Identify Cellular Components Required for Ricin Toxin A Chain (RTA) Trafficking in Yeast

A Simple Fluorescence-based Reporter Assay to Identify Cellular Components Required for Ricin Toxin A Chain RTA Trafficking in Yeast

세포질 구성 요소를 식별 하는 간단한 형광 기반 기자 분석 결과 리 독 소에 필요한 체인 (RTA) 효 모에 인신 매매

Bacterial and plant A/B toxins exploit the natural trafficking pathways in eukaryotic cells to reach their intracellular target(s) in the cytosol and to ...