Select the Sequence to be Cloned in an Expression Vector
3:35
Design Primers for Cloning
4:59
Cloning of Constructs
7:05
Transfection of the Reporter Genes into Eukaryotic Cells
10:21
Results: Analysis of Circular RNAs
11:09
Conclusion
Transcript
Este protocolo es significativo porque permite al usuario generar un sistema de expresión genómica que puede someterse a empalmes alternativos y en este caso formar ARN circulares que se pueden probar para su función y asociación de enfermedad. La
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Clonamos y analizamos genes de reportero generando ARN circulares. Estos genes reporteros son más grandes que las construcciones para analizar el empalme lineal y contener elementos Alu. Para investigar los ARN circulares, las construcciones se transinfectan en células y el ARN resultante se analiza utilizando RT-PCR después de la eliminación del ARN lineal.