Name: pre-clinical model of cardiac donation after circulatory death
Uploaded: 2019-08-02T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pre-clinical Model of Cardiac Donation after Circulatory Death at JoVE.com

وقد تم دعم أجزاء من هذا العمل بمساهمة سخية من مؤسسة مارسيل ورولاند جوسلين ومؤسسة السيد ستيفان فومى. نيكولاس Noiseux هو عالم FRQ-S.
ويود المؤلفون أن يشكروا جوش تشو لو هوانغ، وغابرييل غاسكون، وصوفيا غياسي، وكاثرين سكالابريني على دعمهم في جمع البيانات.

وتتفق جميع بروتوكولات رعاية الحيوانات والبروتوكولات التجريبية مع دليل رعاية واستخدام الحيوانات المختبرية، وقد وافقت عليها اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها التابعة لمركز مستشفى جامعة مونتريال للبحوث.
1 - الأعمال التحضيرية الأولية
<ol><li>تشغيل حمام الماء لتسخين...

<ol>
	<li>Gass, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+Transplantation+in+the+New+Era.">Cardiac Transplantation in the New Era.</a> Cardiology in Review. 23 (4), 182-188 (2015).</li><li>von Dossow, V., Costa, J., D'Ovidio, F., Marczin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+trends+in+heart+and+lung+transplantation:+Guarding+the+most+precious+gift+ever.">Worldwide trends in heart and lung transplantation: Guarding the most precious gift ever.</a> Best Practice &amp; Research. Clinical Anaesthesiology. 31 (2), 141-152 (2017).</li><li>Hornby, K., Ross, H., Keshavjee, S., Rao, V., Shemie, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-utilization+of+hearts+and+lungs+after+consent+for+donation:+a+Canadian+multicentre+study.">Non-utilization of hearts and lungs after consent for donation: a Canadian multicentre study.</a> Canadian Journal Of Anaesthesia. 53 (8), 831-837 (2006).</li><li>Manyalich, M., Nelson, H., Delmonico, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+need+and+opportunity+for+donation+after+circulatory+death+worldwide.">The need and opportunity for donation after circulatory death worldwide.</a> Current Opinion In Organ Transplantation. 23 (1), 136-141 (2018).</li><li>Shemie, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National+recommendations+for+donation+after+cardiocirculatory+death+in+Canada:+Donation+after+cardiocirculatory+death+in+Canada.">National recommendations for donation after cardiocirculatory death in Canada: Donation after cardiocirculatory death in Canada.</a> CMAJ : Canadian Medical Association Journal. 175 (8), S1 (2006).</li><li>Page, A., Messer, S., Large, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+from+donation+after+circulatory+determined+death.">Heart transplantation from donation after circulatory determined death.</a> Annals of Cardiothoracic Surgery. 7 (1), 75-81 (2018).</li><li>Monteagudo Vela, M., Garcia Saez, D., Simon, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+approaches+in+retrieval+and+heart+preservation.">Current approaches in retrieval and heart preservation.</a> Annals of Cardiothoracic Surgery. 7 (1), 67-74 (2018).</li><li>Dhital, K. K., Chew, H. C., Macdonald, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donation+after+circulatory+death+heart+transplantation.">Donation after circulatory death heart transplantation.</a> Current Opinion In Organ Transplantation. 22 (3), 189-197 (2017).</li><li>McNally, S. J., Harrison, E. M., Wigmore, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+considerations+in+the+application+of+preconditioning+to+solid+organ+transplantation.">Ethical considerations in the application of preconditioning to solid organ transplantation.</a> Journal of Medical Ethics. 31 (11), 631-634 (2005).</li><li>Rao, V., Feindel, C. M., Weisel, R. D., Boylen, P., Cohen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+blood+perfusion+improves+myocardial+recovery+after+heart+transplantation.">Donor blood perfusion improves myocardial recovery after heart transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 16 (6), 667-673 (1997).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+preservation+using+donor-shed+blood+supplemented+with+L-arginine.">Cardiac allograft preservation using donor-shed blood supplemented with L-arginine.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 24 (10), 1665-1672 (2005).</li><li>Xin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+New+Multi-Mode+Perfusion+System+for+Ex+vivo+Heart+Perfusion+Study.">A New Multi-Mode Perfusion System for Ex vivo Heart Perfusion Study.</a> Journal of Medical Systems. 42 (2), 25 (2017).</li><li>Messer, S., Ardehali, A., Tsui, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+donor+heart+perfusion:+current+clinical+experience+and+the+future.">Normothermic donor heart perfusion: current clinical experience and the future.</a> Transplant International. 28 (6), 634-642 (2015).</li><li>Flecknell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory Animal Anaesthesia (Fourth Edition). , 77-108 (2016).</li><li>Kearns, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Rodent+Model+of+Cardiac+Donation+After+Circulatory+Death+and+Novel+Biomarkers+of+Cardiac+Viability+During+Ex+vivo+Heart+Perfusion.">A Rodent Model of Cardiac Donation After Circulatory Death and Novel Biomarkers of Cardiac Viability During Ex vivo Heart Perfusion.</a> Transplantation. 101 (8), e231-e239 (2017).</li><li>Sandha, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroids+Limit+Myocardial+Edema+During+Ex+vivo+Perfusion+of+Hearts+Donated+After+Circulatory+Death.">Steroids Limit Myocardial Edema During Ex vivo Perfusion of Hearts Donated After Circulatory Death.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 105 (6), 1763-1770 (2018).</li><li>Iyer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increasing+the+tolerance+of+DCD+hearts+to+warm+ischemia+by+pharmacological+postconditioning.">Increasing the tolerance of DCD hearts to warm ischemia by pharmacological postconditioning.</a> American Journal of Transplantation. 14 (8), 1744-1752 (2014).</li><li>Sanz, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+reperfusion+strategies+differentially+affect+mitochondria:studies+in+an+isolated+rat+heart+model+of+donation+after+circulatory+death+(DCD).">Cardioprotective reperfusion strategies differentially affect mitochondria:studies in an isolated rat heart model of donation after circulatory death (DCD).</a> American Journal of Transplantation. , (2018).</li><li>Van de Wauwer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mode+of+death+in+the+non-heart-beating+donor+has+an+impact+on+lung+graft+quality.">The mode of death in the non-heart-beating donor has an impact on lung graft quality.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 36 (5), 919-926 (2009).</li><li>Quader, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Optimal+Coronary+Flow+for+the+Preservation+of+&amp;#34;Donation+after+Circulatory+Death&amp;#34;+in+Murine+Heart+Model.">Determination of Optimal Coronary Flow for the Preservation of &amp;#34;Donation after Circulatory Death&amp;#34; in Murine Heart Model.</a> ASAIO journal (American Society for Artificial Internal Organs : 1992). 64 (2), 225-231 (2018).</li><li>Priebe, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+open-chest+model.">The acute open-chest model.</a> British Journal Of Anaesthesia. 60 (8 Suppl 1), 38-41 (1988).</li><li>Narita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+effects+of+vecuronium+and+its+interaction+with+autonomic+nervous+system+in+isolated+perfused+canine+hearts.">Cardiac effects of vecuronium and its interaction with autonomic nervous system in isolated perfused canine hearts.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 19 (6), 1000-1008 (1992).</li><li>Dhital, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+heart+transplantation+with+distant+procurement+and+ex-vivo+preservation+of+donor+hearts+after+circulatory+death:+a+case+series.">Adult heart transplantation with distant procurement and ex-vivo preservation of donor hearts after circulatory death: a case series.</a> Lancet (London, England). 385 (9987), 2585-2591 (2015).</li><li>Messer, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+assessment+and+transplantation+of+the+donor+heart+after+circulatory+death.">Functional assessment and transplantation of the donor heart after circulatory death.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (12), 1443-1452 (2016).</li><li>White, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+donor+heart+viability+during+ex+vivo+heart+perfusion.">Assessment of donor heart viability during ex vivo heart perfusion.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 93 (10), 893-901 (2015).</li><li>Mayr, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+troponin+T+and+creatine+kinase+predict+mid-term+infarct+size+and+left+ventricular+function+after+acute+myocardial+infarction:+a+cardiac+MR+study.">Cardiac troponin T and creatine kinase predict mid-term infarct size and left ventricular function after acute myocardial infarction: a cardiac MR study.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 33 (4), 847-854 (2011).</li><li>Remppis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+compartmentation+of+troponin+T:+release+kinetics+after+global+ischemia+and+calcium+paradox+in+the+isolated+perfused+rat+heart.">Intracellular compartmentation of troponin T: release kinetics after global ischemia and calcium paradox in the isolated perfused rat heart.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 27 (2), 793-803 (1995).</li><li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Langendorff+Perfused+Isolated+Mouse+Heart+Model+of+Global+Ischemia-Reperfusion+Injury:+Impact+of+Ischemia+and+Reperfusion+Length+on+Infarct+Size+and+LDH+Release.">Characterization of the Langendorff Perfused Isolated Mouse Heart Model of Global Ischemia-Reperfusion Injury: Impact of Ischemia and Reperfusion Length on Infarct Size and LDH Release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li><li>Dornbierer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+reperfusion+hemodynamics+predict+recovery+in+rat+hearts:+a+potential+approach+towards+evaluating+cardiac+grafts+from+non-heart-beating+donors.">Early reperfusion hemodynamics predict recovery in rat hearts: a potential approach towards evaluating cardiac grafts from non-heart-beating donors.</a> PloS One. 7 (8), e43642 (2012).</li><li>Henry, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+staircase+effect+in+the+rat+heart.">Positive staircase effect in the rat heart.</a> The American Journal of Physiology. 228 (2), 360-364 (1975).</li><li>Markert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+correct+the+contractility+index+LVdP/dt(max)+for+changes+in+heart+rate.">Evaluation of a method to correct the contractility index LVdP/dt(max) for changes in heart rate.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 66 (2), 98-105 (2012).</li><li>Azar, T., Sharp, J., Lawson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rates+of+male+and+female+Sprague-Dawley+and+spontaneously+hypertensive+rats+housed+singly+or+in+groups.">Heart rates of male and female Sprague-Dawley and spontaneously hypertensive rats housed singly or in groups.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 50 (2), 175-184 (2011).</li><li>Bonney, S., Hughes, K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+cardioprotection:+the+role+of+adenosine.">Anesthetic cardioprotection: the role of adenosine.</a> Current Pharmaceutical Design. 20 (36), 5690-5695 (2014).</li><li>Ali, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+veno-arterial+extracorporeal+membrane+oxygenation.">Rat model of veno-arterial extracorporeal membrane oxygenation.</a> Journal of Translational Medicine. 12, 37 (2014).</li></ol>

يقدم البروتوكول المعروض هنا نموذجًا بسيطًا ومريحًا ومتعدد الاستخدامات لـ DCD القلبي، مما يتيح الفرصة لتقييم التعافي الوظيفي القلبي، وتلف الأنسجة، واستخدام عوامل حماية القلب بعد التكييف لتحسين تعافي المتبرعين القلوب تجاهل خلاف ذلك لزرع. تم تحسين أنظمة التسريب القلبي (EVHP) من الجسم الحي الس...

زرع الأعضاء الصلبة بشكل عام وزرع القلب، علىوجه الخصوص، هي في ارتفاع في جميع أنحاء العالم 1،2. الطريقة القياسية لشراء الأعضاء هي التبرع بعد موت الدماغ (DBD). وبالنظر إلى معايير الإدراج الصارمة من DBD، يتمقبول أقل من 40٪ من القلوب المعروضة 3، وبالتالي الحد من العرض في مواجهة الطلب المتزايد وتوسيع قائمة انتظار الجهاز. ولمعالجة هذه المسألة، يعتبر استخدام الأعضاء المتبرع بها بعد الوفاة في الدورة الدموية حلاً محتملاً4.
في الجهات المانحة DCD، ومع ذلك، مرحلة الهلوال بعد سحب الرعاية وفترة من نقص التروية الدافئة غير المحمية قبل الإنعاش لا مفر منه5. يمكن أن تؤدي إصابة الأعضاء المحتملة بعد الوفاة في الدورة الدموية إلى خلل في الأعضاء، مما يفسر التردد في اعتماد عمليات زرع القلب DCD بشكل روتيني. ويقال أن 4 مراكز فقط استخدام قلوب DCD سريريا، مع معايير صارمة التي تشمل أوقات نقص التروية الدافئة قصيرة جدا والمانحين الشباب دون الأمراض المزمنة6،7. لأسباب أخلاقية وقانونية، يمكن تطبيق تدخلات محدودة أو غير محددة في مجال حماية القلب في المتبرعين قبل الوفاة الدورة الدموية5و8و9. وبالتالي، فإن أي تخفيف للتخفيف من إصابة نقص التروية (IR) يقتصر على العلاجات القلبية التي بدأت خلال التسريب المبكر مع حلول القلب، ولا تسمح بإجراء تقييم وظيفي مناسب. وقد تم اقتراح التسريب القلب الجسم الحي السابق (EVHP) وإعادة تكييف القلب DCD باستخدام منصات مخصصة كحل بديل ودرس من قبل مختلف العلماء10،11،12،13 . يوفر EVHP فرصة فريدة لتقديم عوامل ما بعد التكييف إلى قلوب DCD لتحسين الانتعاش الوظيفي. ومع ذلك، للترجمة السريرية الفعالة، لا يزال يتعين معالجة العديد من القضايا التقنية والعملية، وهذا يزيد من تفاقمه عدم وجود توافق في الآراء حول مجموعة من التسريب والمعايير الوظيفية لتحديد قابلية الزراعة6، 8.
هنا نبلغ عن تطوير بروتوكول DCD الحيوان الصغير قبل السريرية القابلة لإعادة الاستخدام جنبا إلى جنب مع نظام التسريب القلب في الجسم الحي السابق التي يمكن استخدامها للتحقيق في الجهاز بعد تكييف بدأت في وقت الشراء، خلال التسريب الأولي، و /أو في جميع أنحاء EVHP.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0,9% Sodium Chloride. 1L bag</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td>Electrolyte solution for flushing in the modified Langendorff system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14G 2&#34; I.V catheter</td>
			<td>Jelco</td>
			<td>4098</td>
			<td>To act as endotracheal tube.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>T8877</td>
			<td>Vital coloration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22G 1&#34; I.V catheter</td>
			<td>BD</td>
			<td>383532</td>
			<td>I.V catheter with extension tube that facilitates manipulation for carotid catheterization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Dressing Fcp, 4 3/4&#34;, Serr</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>50-3147</td>
			<td>Additional forceps for tissue manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alm Self-retaining retractor 4x4 Teeth Blunt 2-3/4&#34;</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>22-9027</td>
			<td>Tissue retractor used to maintain the chest open.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bridge amp</td>
			<td>ADinstruments</td>
			<td>FE221</td>
			<td>Bridge amp for intracarotid blood pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>C1016</td>
			<td>CaCl2 anhydrous, granular, &#8804;7.0 mm, &#8805;93.0% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>G8270</td>
			<td>D-Glucose &#8805;99.5% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIN(8) to Disposable BP Transducer</td>
			<td>ADinstruments</td>
			<td>MLAC06</td>
			<td>Adapter cable for link between bridge amp and pressure transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable BP Transducer (stopcock)</td>
			<td>ADinstruments</td>
			<td>MLT0670</td>
			<td>Pressure transducer for intracarotid blood pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td>Electrolyte solution without calcium or magnesium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Dressing Fcp, Str, Serr, 4&#34;</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>66-2740</td>
			<td>Additional forceps for tissue manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin solution, neutral buffered, 10%</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>HT501128</td>
			<td>Fixative solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Sunbean</td>
			<td>756-CN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium 1000 UI/mL</td>
			<td>Sandoz</td>
			<td></td>
			<td>For systemic anticoagulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric Acid 36,5 to 38,0%</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>A144-500</td>
			<td>Diluted 1:1 for pH correction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Bimeda</td>
			<td></td>
			<td>Anesthetic. 100 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart</td>
			<td>ADinstruments</td>
			<td></td>
			<td>Control software for the Powerlab polygraph, allowing off-line analyses. Version 7, with blood pressure and PV loop modules enabled</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Left ventricle pressure balloon</td>
			<td>Radnoti</td>
			<td>170404</td>
			<td>In latex. Size 4.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine HCl 2% solution</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td></td>
			<td>Antiarrhythmic for the cardioplegic solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride ACS</td>
			<td>ACP Chemicals</td>
			<td>M-0460</td>
			<td>MgCl2+6H2O &#8805;99.0% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro pressure sensor</td>
			<td>Radnoti</td>
			<td>159905</td>
			<td>Micro pressure sensor and amplifier connected to the intraventricular balloon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacemaker</td>
			<td>Biotronik</td>
			<td>Reliaty</td>
			<td>Set to generate a pulse each 200 ms for a heart rate of 300 bpm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH bench top meter</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>AE150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological monitor</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>Physiosuite</td>
			<td>For continuous monitoring of rodent temperature and saturation during the procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma-Lyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td>Electrolyte solution used as base to prepare cardioplegia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>P4504</td>
			<td>KCl &#8805;99.0% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride 2 meq/ml</td>
			<td>Hospira</td>
			<td></td>
			<td>Part of the cardioplegic solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 8/30 Polygraph</td>
			<td>ADinstruments</td>
			<td></td>
			<td>Electronic polygraph</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk 2-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>A305H</td>
			<td>Suture material for Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk 5-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>A302H</td>
			<td>Suture material for carotid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal anesthesia workstation</td>
			<td>Hallowell EMC</td>
			<td>000A2770</td>
			<td>Small animal ventilator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td>NaHCO3 &#8805;99,5% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>S7653</td>
			<td>NaCl &#8805;99.5% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide pellets</td>
			<td>ACP chemicals</td>
			<td>S3700</td>
			<td>Diluted to 5N (10 g in 50 ml) for pH correction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic</td>
			<td>Milipore-Sigma</td>
			<td>S0751</td>
			<td>NaH2PO4 &#8805;99.0% Part of the Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stevens Tenotomy Sciss, Str, Delicate, SH/SH, 4 1/2&#34;</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>22-1240</td>
			<td>Small scisors for atria and cava vein opening</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue slicer blades</td>
			<td>Thomas scientific</td>
			<td>6727C18</td>
			<td>Straight carbon steel blades for tissue slicing at the end of the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tuberculin safety syringe with needle 25G 5/8&#34;</td>
			<td>CardinalHealth</td>
			<td>8881511235</td>
			<td>For heparin injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary General Surgery Set</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>98-1275</td>
			<td>Surgery instruments including disection scisors and mosquito clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary Micro Set</td>
			<td>Skalar</td>
			<td>98-1311</td>
			<td>Surgery instruments with microscisors used for carotid artery opening</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Working Heart Rat/Guinea Pig/Rabbit system</td>
			<td>Radnoti</td>
			<td>120101BEZ</td>
			<td>Modular working heart system modified for the needs of the protocol. Includes all the necesary tubbing, water jacketed reservoirs and valves, including 2 and 3 way stop cock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td>Sedative. 20 mg/ml</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pre-clinical model of cardiac donation after circulatory death

الطلب على زرع القلب آخذ في الارتفاع. ومع ذلك، فإن توافر الأعضاء محدود بسبب ندرة المانحين المناسبين. التبرع بالأعضاء بعد الوفاة الدورة الدموية (DCD) هو حل لمعالجة هذا التوافر المحدود، ولكن بسبب فترة من نقص التروية الدافئة لفترات طويلة وخطر الإصابة في الأنسجة، نادرا ما ينظر إلى استخدامه الروتيني في زرع القلب. في هذه المخطوطة نقدم بروتوكول مفصل يحاكي عن كثب الممارسات السريرية الحالية في سياق DCD مع الرصد المستمر لوظيفة القلب، مما يسمح لتقييم استراتيجيات وتدخلات القلب الجديدة للحد من إصابة نقص التروية والانصهار.
في هذا النموذج، يتم بدء بروتوكول DCD في الفئران لويس التخدير عن طريق وقف التهوية للحث على الموت الدورة الدموية. عندما ينخفض ضغط الدم الانقباضي أقل من 30 مم زئبق، يبدأ وقت الإقفاري الدافئ. بعد فترة إقفارية دافئة محددة مسبقاً، يتم مسح القلوب بمحلول قلبي نُوَمُرَي، يتم شراؤه، وتحميله على نظام التسريب القلبي السابق في لانغندورف. بعد 10 دقائق من إعادة التسريب الأولي والاستقرار، يتم تقييم إعادة تأهيل القلب باستمرار لمدة 60 دقيقة باستخدام مراقبة الضغط داخل البطين. يتم تقييم إصابة القلب عن طريق قياس تروبونين القلب T ويتم قياس حجم احتشاء عن طريق تلطيخ النسيج. يمكن تعديل الوقت الإقفاري الدافئ وتفصيله لتطوير الكمية المطلوبة من الضرر الهيكلي والوظيفي. يسمح هذا البروتوكول البسيط بتقييم مختلف استراتيجيات تكييف القلب الواقية من القلب التي أدخلت في لحظة الشلل القلبي، والانصهار الأولي و / أو خلال التسريب الجسم الحي السابق. ويمكن استنساخ النتائج التي تم الحصول عليها من هذا البروتوكول في نماذج كبيرة، مما يسهل الترجمة السريرية.

بعد التنبيب، ينخفض ضغط الدم بسرعةفي نمط يمكن التنبؤ به (الشكل 3). الوقت المتوقع للموت هو أقل من 5 دقائق.
ويبين الشكل 4 متوسط منحنى الضغط/الوقت في بداية إعادة التكييف بعد 0 و10 و15 دقيقة من معدل الذكاء. سوف تعمل على تحسين وظيفة العقد مع مرور الوقت. وس...

Watch this Scientific Journal Video about Pre-clinical Model of Cardiac Donation after Circulatory Death at JoVE.com

Pre-clinical Model of Cardiac Donation after Circulatory Death

يُظهر هذا البروتوكول نهجاً بسيطاً ومرناً لتقييم عوامل التكييف الجديدة أو الاستراتيجيات الرامية إلى زيادة جدوى التبرع القلبي بعد الوفاة الدورة الدموية.

نموذج ما قبل السريرية للتبرع القلبي بعد الوفاة الدورة الدموية

Cardiac transplantation demand is on the rise; nevertheless, organ availability is limited due to a paucity of suitable donors. Organ donation after ...

يستهدف هذا البروتوكول مشكلة إمدادات الأعضاء المحدودة من خلال تسهيل تقييم استراتيجيات تكييف القلب المختلفة للسماح باستخدام القلوب المتبرع بها بعد الوفاة في الدورة الدموية. وضع الحيوان على وسادة التدفئة تعيين إلى متوسطة. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في فأر بالغ تخدير، أدخل مسبار درجة حرارة المستقيم.قم بتوصيل مستشعر أكسدة نبض عبر الجلد بمخلب خلفي، وغطي الجرذ بلوحة ماصة للحفاظ على درجة حرارة الجسم. جعل شق الجلد خط الوسط من ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات في الرقبة، واستخدام مقص منحنى تلميح حادة لتشريح حاد الأنسجة تحت الجلد، لفضح العضلات sternohyoid الحق. باستخدام ملقط غير تراوية، تحرك العضلات بشكلٍ ثُمائي حتى يتم تحديد الشريان السباتي والحق في الوريد الوداجي والعصب المبهم.استخدم المقص لفصل العصب المبهم بعناية عن الشريان السباتي. حقن 2000 وحدة دولية لكل كيلوغرام من الهيبارين في الوريد الوداجي الأيمن ، مع الضغط على موقع الحقن بعد سحب الإبرة لتجنب تسرب الدم. استخدام ملقط منحني لتمرير اثنين من خياطة الحرير 5-0 حول الشريان السباتي.نعلق بحزم خياطة لocclude الشريان السباتي في الجانب متفوقة من الشريان المكشوفة، والحفاظ على خياطة القريب غير مربوطة، ووضع الفئران تحت مجهر ستيريو. ثم استخدم مقص الجراحة المجهرية لعمل شق من ملليمتر واحد بعناية فوق الجدار الأمامي للشريان السباتي ، وأدخل قسطرة في الوريد مغلقة مقاس 22 بوصة واحدة نحو القوس الأبهري. إن استخدام أدوات التكبير والصغري ينصح بشدة بهذه الخطوات.يمكن تحقيق حقل نظيف عن طريق توتّر الغرز القريب لتجنب النزيف. التبرع القلبي ضروري لتجميع جهاز القلب البليجيا السابق. لبدء بروتوكول DCD ، قم أولاً بتخلص الحيوان ، ثم استخدام ملقط البعوض لتضييق القصبة الهوائية ، بدءًا من المرحلة الهينية.ابدأ في عد الـ WIT الوظيفي عندما ينخفض ضغط الدم الانقباضي الذروة إلى أقل من 30 ملليمترًا من الزئبق أو يظهر الرجفان البطيني أو الرجفان البطيني، أيهما يأتي أولاً. في نهاية WIT، قم بإجراء عملية شد البطن الوسيطة، مع الحفاظ على الصدر مفتوح مع مُناسِّر Alm إذا لزم الأمر. افصل القلب عن الأوردة الرئوية والهياكل الصدرية الأخرى لإكمال استئصال الحفّال.غمر القلب على الفور في محلول كريبس البارد للجليد لنقل سريع إلى نظام vivo السابق. استخدام خياطة الحرير 2-0 لإصلاح بإحكام الشريان الأورطي لجهاز Langendorff، ومن ثم فتح stopcock. الآن فتح تماما تدفق إلى cannula، وبدء إعادة ضخ الأولية ووقت الاستقرار.قم بتدوير القلب بحيث تواجه الأذين مستشعر الضغط، وتشريح الأوردة الرئوية لتوسيع فتحة الأذينية البطينية اليسرى إذا لزم الأمر. بعد ذلك، أدخل بالون اللاتكس متصلاً بمستشعر الضغط، مع التأكد من أن البالون في وضع كامل داخل البطين. املأ البالون ببطء بالملوحة المالحة حتى يصل الضغط الانبساطي إلى 15 ملليمتراً من الزئبق.أدخل قطب سرعة في الوجه الأمامي للقلب دون ثقب الأوعية التاجية. مرة واحدة لوحظ الضرب العفوي، تعيين سرعة إلى 300 نبضة في الدقيقة الواحدة. بعد 10 دقائق من الاستقرار، بدء تسجيل قياس الضغط داخل البطين المستمر لبدء مرحلة إعادة التأهيل والتقييم.بعد ساعة واحدة، قم بإزالة القلب من جهاز Langendorff واستخدم شفرة فولاذية عالية الكربون مباشرة لإزالة الأذين. مع البطين الأيمن التي تواجه أسفل، وقطع واحد إلى اثنين ملليمتر سميكة شرائح البطين. قم باستئصال البطين الأيمن من الشريحة الثالثة من الأنسجة، وتجميد البطين الأيسر للتحاليل البيوكيميائية المصب.غمر الأجزاء المتبقية في حديثا أعد 5٪ TTC الحل في برنامج تلفزيوني لمدة 10 دقائق في 37 درجة مئوية. في صباح اليوم التالي، غسل العينات مرتين في برنامج تلفزيوني جديد وغمر العينات في برنامج تلفزيوني جديد للتصوير. الأنسجة القابلة للحياة سوف تظهر بلون الطوب الأحمر.بعد التخبيب ، ينخفض ضغط الدم بسرعة في نمط يمكن التنبؤ به والوقت المتوقع حتى الموت هو أقل من خمس دقائق. هنا، يتم عرض متوسط الضغط مقابل منحنيات الوقت في بداية إعادة التأهيل بعد صفر و10 و 15 دقيقة من WIT. وستتحسن وظيفة العقد مع مرور الوقت، وسيسمح استخدام فترات قصيرة من نظام النقل والوظائف بالرجوع إلى الوضع الطبيعي، ولن يمكن الكشف عن الضرر المورفولوجي.استخدام عامل تكييف إضافة مع القلب وplegia في مرحلة الاستقرار أظهرت أن الضرر الناجم عن 15 دقيقة من WIT في هذا النموذج قابلة للتشكيل من قبل وكلاء cardioprotective. تسمح هذه التقنية بالتحكم الكامل في جميع المتغيرات ذات الصلة واختبار التدخل الدوائي وغير الدوائي ويمكن استنساخها في نماذج أكبر، مما يسهل الترجمة السريرية.

pre-clinical-model-of-cardiac-donation-after-circulatory-death

Research

JoVE Journal

Medicine

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are attractive druggable therapeutic targets. Here we describe an efficient four-step strategy for pre-clinical evaluation of tyrosine kinase inhibitors (TKIs) in the treatment of acute leukemia. Initially, western blot analysis is used to confirm target inhibition in cultured leukemia cells. Functional activity is then evaluated using clonogenic assays in methylcellulose or soft agar cultures. Experimental compounds that demonstrate activity in cell culture assays are evaluated in vivo using NOD-SCID-gamma (NSG) mice transplanted orthotopically with human leukemia cell lines. Initial in vivo pharmacodynamic studies evaluate target inhibition in leukemic blasts isolated from the bone marrow. This approach is used to determine the dose and schedule of administration required for effective target inhibition. Subsequent studies evaluate the efficacy of the TKIs in vivo using luciferase expressing leukemia cells, thereby allowing for non-invasive bioluminescent monitoring of leukemia burden and assessment of therapeutic response using an in vivo bioluminescence imaging system. This strategy has been effective for evaluation of TKIs in vitro and in vivo and can be applied for identification of molecularly-targeted agents with therapeutic potential or for direct comparison and prioritization of multiple compounds.

Receptor tyrosine kinases are ectopically expressed in many cancers and have been identified as therapeutic targets in acute leukemia. This manuscript describes an efficient strategy for pre-clinical evaluation of tyrosine kinase inhibitors for the treatment of acute leukemia.

تقييم ما قبل السريرية من التيروزين كيناز مثبطات لعلاج اللوكيميا الحادة

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

Handling of the Cotton Rat in Studies for the Pre-clinical Evaluation of Oncolytic Viruses

Oncolytic viruses are a novel anticancer therapy with the ability to target tumor cells, while leaving healthy cells intact. For this strategy to be successful, recent studies have shown that involvement of the host immune system is essential. Therefore, oncolytic virotherapy should be evaluated within the context of an immunocompetent model. Furthermore, the study of antitumor therapies in tolerized animal models may better recapitulate results seen in clinical trials. Cotton rats, commonly used to study respiratory viruses, are an attractive model to study oncolytic virotherapy as syngeneic models of mammary carcinoma and osteosarcoma are well established. However, there is a lack of published information on the proper handling procedure for these highly excitable rodents. The handling and capture approach outlined minimizes animal stress to facilitate experimentation. This technique hinges upon the ability of the researcher to keep calm during handling and perform procedures in a timely fashion. Finally, we describe how to prepare cotton rat mammary tumor cells for consistent subcutaneous tumor formation, and how to perform intratumoral and intraperitoneal injections. These methods can be applied to a wide range of studies furthering the development of the cotton rat as a relevant pre-clinical model to study antitumor therapy.

Cotton rats are extremely excitable and have a strong flight-or-fight response. A handling method optimized to reduce the stress of the animals is described which will make cotton rats more accessible as a preclinical model.

التعامل مع الفأر القطن في الدراسات لتقييم ما قبل السريرية من حال الورم الفيروسات

Oncolytic viruses are a novel anticancer therapy with the ability to target tumor cells, while leaving healthy cells intact.  For this strategy to be ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.

Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.

ما قبل السريرية مثلي فأري موديل سرطان البروستاتا البشرية

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Use of a Low-flow Digital Anesthesia System for Mice and Rats

A traditional vaporizer depends on flowing gas and atmospheric pressure for passive anesthetic vaporization. Newly developed direct injection vaporizers utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a gas stream. Unlike a traditional vaporizer, it can be used at very low flow rates, making it ideal for use on mice and rats. 
The equipment's capability to use low flow rates could result in a substantial cost savings due to the reduced need for anesthetic agents, compressed gas, and charcoal scavenging filters1. A lower flow rate means less waste of anesthetic gas and likely reduces the risk of anesthetic exposure to laboratory personnel. Thus, the high levels of precision and safety associated with direct injection vaporizers, along with a reduced need for anesthetic agents, compressed gas, and charcoal filters are beneficial for research requiring small animal anesthesia. 
The goal of this protocol is to demonstrate the use of a syringe-driven direct injection vaporizer as part of a digital, low-flow anesthesia system. The direct injection vaporizer is capable of accurately delivering anesthesia at very low flow rates compared to a traditional vaporizer, making it a promising alternative for controlled gas anesthetic delivery to rodents.

Here, we present a protocol to more safely and efficiently administer anesthetic gas to mice using a digital, low flow anesthesia system utilizing a syringe-driven direct injection vaporizer.

استخدام نظام التخدير الرقمية منخفضة لتدفق الفئران والجرذان

A traditional vaporizer depends on flowing gas and atmospheric pressure for passive anesthetic vaporization. Newly developed direct injection vaporizers ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss of relevant amounts of heart muscle mass can lead to the heart failure. Besides heart transplantation, there is no curative treatment option for the end-stage heart failure. In times of organ donor shortage, organ independent treatment modalities are needed. Left-ventricular assist devices are a promising therapy option, however, especially as destination therapy, limited by its side-effects like stroke, infections and bleedings. In recent years, several cardiac repair strategies including stem cell injection, cardiac progenitors or myocardial tissue engineering have been investigated. Recent improvements in cell biology allow for the differentiation of large amounts of cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells (iPSC). One of the cardiac repair strategies currently under evaluation is to transplant artificial heart tissue. Engineered heart tissue (EHT) is a three-dimensional in vitro created cardiomyocyte network, with functional properties of native heart tissue. We have created EHT-patches from hiPSC derived cardiomyocytes. Here we present a protocol for the induction of left ventricular myocardial cryoinjury in a guinea pig, followed by implantation of hiPSC derived EHT on the left ventricular wall.

Here we present a protocol for the induction of left ventricular cryoinjury followed by the implantation of a cardiac muscle patch, derived from human iPS-cell cardiomyocytes in a guinea pig model.

غرس المستمدة من هيبسك بقع عضلة القلب بعد "إصابة احتشاء عضلة القلب" في "نموذج خنزير غينيا"

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

نموذج بورسين ما قبل السريرية لزراعة القلب التقويمي

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

تقييم الأورام الدموية الغازية لنظام البطين الأيمن وفرط ضغط الدم الرئوي الناجم عن نقص الأكسجين في الفئران

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

نموذج الفئران قبل السريرية لدراسة نقص التروية-ضخ الاصابه في جراحه المجهرية الترميمية

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Use of an Integrated Low-Flow Anesthetic Vaporizer, Ventilator, and Physiological Monitoring System for Rodents

Low-flow digital vaporizers commonly utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a stream of carrier gas. Per animal welfare recommendations, animals are warmed and monitored during procedures requiring anesthesia. Common anesthesia and physiological monitoring equipment include gas tanks, anesthetic vaporizers and stands, warming controllers and pads, mechanical ventilators, and pulse oximeters. A computer is also necessary for data collection and to run equipment software. In smaller spaces or when performing field work, it can be challenging to configure all this equipment in limited space.
The goal of this protocol is to demonstrate best practices for use of a low-flow digital vaporizer using both compressed oxygen and room air, along with an integrated mechanical ventilator, pulse oximeter, and far infrared warming as an all-inclusive anesthesia and physiological monitoring suite ideal for rodents.

Here, we present a protocol to safely and effectively administer anesthetic gas to mice using a digital, low flow anesthesia system with integrated ventilator and physiological monitoring modules.

استخدام جهاز متكامل للانساب المنخفض للتخدير، جهاز التنفس الصناعي، ونظام الرصد الفسيولوجي للقوارض

Low-flow digital vaporizers commonly utilize a syringe pump to directly administer volatile anesthetics into a stream of carrier gas. Per animal welfare ...