Name: disclosing hemolymph collection and inoculation of metarhizium blastospores into rhipicephalus microplus ticks towards invertebrate pathology studies
Uploaded: 2019-06-01T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Disclosing Hemolymph Collection and Inoculation of Metarhizium Blastospores into Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Invertebrate Pathology Studies at JoVE.

Diese Studie wurde zum Teil von der Coordenacão de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) aus Brasilien, Finanzcode 001, finanziert. CAPES vergab ein Doktorandenstipendium für A.F. Marciano. Wir danken dem Nationalen Rat für wissenschaftliche und technologische Entwicklung (CNPq) Brasiliens für die Bereitstellung von Promotionsstipendien für J. Fiorotti. Diese Forschung wurde auch durch Stipendien der Carlos Chagas Filho Foundation for Research of the State of Rio de Janeiro (FAPERJ) und CNPq unterstützt. V.R.E.P. Bittencourt ist CNPq-Forscher.

Zecken, die in der vorliegenden Studie verwendet wurden, stammen aus einer künstlichen Kolonie, die an der Federal Rural University of Rio de Janeiro betrieben wird und deren Methoden vom Ethikausschuss für die Verwendung von Vertebraten-Tieren genehmigt wurden (CEUA-IV/UFRRJ #037/2014).
1. Zick engmaschte Weibchen
<ol><li>Nach der Zeckenauflösung, waschen Sie engreibige Weibchen mit Leitungswasser und tauchen Sie sie in 0,5% (v/v) Natriumhypochlorit-Lösung für 3 min in einem 500 ml Gla...

<ol>
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Die Nachahmung von Krankheitserregern ist nützlich, wenn die Studie darauf abzielt, die In-vivo-Wirkung von Mikroorganismen in experimentellen Arthropodenmodellen zu untersuchen, da sie sicherstellt, dass sich der Erreger im Inneren des Wirts befindet. Die Technik kann auch auf Impfungen wie RNA-Interferenzen (RNAi) angewendet werden. Die Inokulation zwischen dem Skutum und dem Kapitulum wird als leichter zu erbringen angesehen, schädigt aber häufig das Organ von Gené,wasdie Lebensfähigkeit<s...

Die Rinderzecke, Rhipicephalus microplus,ist ein Hämatophait-Ektoparasit mit enormen negativen Auswirkungen auf die Tiere in tropischen Gebieten. Diese Zecke ist der Vektor von Krankheitserregern wie Babesiabovis, Babesia bigeminaund Anaplasma marginale , die in Kombination mit den direkten Hämorschäden, die Milch-und Fleischproduktion, Anämie und schließlich den Tod reduzieren können. Die Verluste, die durch diesen Ektoparasiten verursachtwurden, wurden in Brasilien jährlich auf 3,24 Milliarden Dollar geschätzt. Nachhaltige Methoden werden gefordert und der Einsatz von entomopathogenen Wirkstoffen gilt als vielversprechende Alternative, um den Einsatz von chemischen Akarziden 2,3,4zu reduzieren.
Entomopathogene Pilze, wie Metarhizium spp., sind natürliche Feinde von Arthropoden einschließlich Zecken, und einige Isolate können als Biocontroller verwendet werden. Diese Erreger infizieren den Wirt aktiv durch die Kutikel und kolonisieren ihren Körper2,5,6. Im Zuge der Entwicklung der Infektion werden zelluläre und humorale Reaktionen durch das Zeckenimmunsystem vermittelt. Die Analyse der Zecke Hämata wird als ein nützliches Werkzeug zur Bewertung der Immunreaktionen nach der Herausforderung mit Krankheitserregern7,8berichtet.
Arthropods Immunantwort ist in humorale und zelluläre Reaktionen unterteilt. Die humorale Reaktion beinhaltet Hämoroperationen und die Produktion von antimikrobiellen Proteins-/Peptiden, während die zelluläre Immunantwort durch die Hämozyten erfolgt. Diese Zellen sind in der Hämatymphe von allen Arthropoden vorhanden und werden berichtet, um eine ausdrucksstarke Rolle in Studien mit angeborenen Immunantwort9 zuentwickeln, da es direkt mit der Phagozytose und Verkapselung. Demnach können Studien über Hämozyten helfen, den Todesweg zu untersuchen und Prozesse wie Autophagie, Apoptose und Nekrose zu verstehen. Bei einigen Wirbellosen als Zweiventile sieht sich die Sammlung der Hämozyten mit Einschränkungen konfrontiert, wie Zellstörungen, niedrigem Hemolymphvolumen und geringer Konzentration der wiedergewonnenen Zellen10. Sehr häufig, je nach angewandter Methodik, wird eine reduzierte Konzentration der Zellen erreicht, die sich direkt auf die Quantifizierung und Analyse der Zellen auswirkt.
Die Anzahl der Hämozyten, die in der Hämatymphe zirkulieren, ist unter den verschiedenen Arthropoden variabel und kann sich in der gleichen Art aufgrund verschiedener physiologischer Stadien wie Geschlecht, Alter und Entwicklungsstufe 11 des Arthropods verändern. Hanzyten können auch an einigen Organen haften und kurz nach dem Infektionsprozess 11 in den Kreislaufentlassenwerden. Dennoch werden die meisten Studien mit Insekten beschäftigt, während Zecken in Bezug auf ihre Physiologie und Pathologie weniger erforscht sind. Trotz der Paarungs-Impfung und Hämatolymphentnahme in Zecken sind weniger verwendet Techniken, die Etablierung von Standardmethoden hilft bei der Entwicklung von genaueren Studien.
Ziel der vorliegenden Studie war es, die am häufigsten verwendeten Methoden zur Hämatolymphentnahme und Impfung von Krankheitserregern in R. Microplus-Zecken zu vergleichen und dabei die Wirksamkeit bei der Hämatolymphenerfassung und der Hämozytenkonzentration zu bewerten.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:668px;" width="668">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Alkaline Hypochlorite solution</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">A1727</td>
			<td style="width:172px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">D-(+)-Glucose</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">G8270-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">EDTA</td>
			<td style="width:116px;">Synth</td>
			<td style="width:158px;">2706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:116px;">Gibco</td>
			<td style="width:158px;">16000036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flexible rubber</td>
			<td style="width:116px;">BD</td>
			<td style="width:158px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Giemsa stain</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">48900-500ML-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Glass capillary</td>
			<td style="width:116px;">CTechGlass</td>
			<td style="width:158px;">CT95-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Insulin syringe (needle)</td>
			<td style="width:116px;">BD</td>
			<td style="width:158px;">SKU:&#160;324910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">KH2PO4</td>
			<td style="width:116px;">Vetec</td>
			<td style="width:158px;">60REAVET014512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Leibovitz&#39;s L-15 culture medium&#160;</td>
			<td style="width:116px;">Gibco</td>
			<td style="width:158px;">11415-064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Methanol</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">34860-1L-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Microscope slides</td>
			<td style="width:116px;">Kasvi</td>
			<td style="width:158px;">K5-7105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Microtubes</td>
			<td style="width:116px;">BRAND</td>
			<td style="width:158px;">Z336769-1PAK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Na2HPO4</td>
			<td style="width:116px;">Vetec</td>
			<td style="width:158px;">60REAVET014593</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">NaCl</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">S7653-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Neubauer chamber&#160;</td>
			<td style="width:116px;">Kasvi</td>
			<td style="width:158px;">K5-0111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Penicillin</td>
			<td style="width:116px;">Gibco</td>
			<td style="width:158px;">15140163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Protease inhibitor cocktail</td>
			<td style="width:116px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:158px;">P2714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Tween 80</td>
			<td style="width:116px;">Vetec</td>
			<td style="width:158px;">60REAVET003662</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

disclosing hemolymph collection and inoculation of metarhizium blastospores into rhipicephalus microplus ticks towards invertebrate pathology studies

Zecken sind obligatorische hämatopophagöse Ektoparasiten und Rhipicephalus microplus hat eine große Bedeutung in der Veterinärmedizin, weil es Anämie, Gewichtsverlust, Abwertung des Gelders der Tiere verursacht und auch als Vektor von mehreren Krankheitserregern wirken kann. Aufgrund der exorbitanten Kosten für die Kontrolle dieser Parasiten, der Umweltschäden, die durch den unangemessenen Einsatz chemischer Akarzide verursacht werden, und der erhöhten Resistenz gegen traditionelle Parasitizide, der alternativen Kontrolle von Zecken, durch den Einsatz von Entomopathogene Pilze etwa wurden als interessanter Ansatz angesehen. Dennoch haben nur wenige Studien gezeigt, wie das Immunsystem der Zecke gegen diese Entomopathogene wirkt. Daher zeigt dieses Protokoll zwei Methoden, die zur Entomopathogen-Impfung in engormierte Frauen verwendet werden, und zwei Techniken, die für die Hämatolymphentnahme und die Ernte von Hämozyten verwendet werden. Die Inokulation von Krankheitserregern an der Beineinfügung in den Körper der Zecke ermöglicht die Bewertung von weiblichen biologischen Parametern im Gegensatz zur Impfung zwischen dem Sutum und dem Kapitulum, die häufig das Organ von Gené schädigt. Die Dorsal-Hämatymphe gab eine höhere Erholung als die Sammlung durch die Beine. Einige Einschränkungen der Zeckenhemolymphentnahme und-verarbeitung sind i) hohe Raten der Hämozyten-Störung, ii) Hämatolymphkontamination mit gestörtem Midgut, und iii) niedrige Hämatolymphen-Volumen-Erholung. Wenn die Hämatymphe durch den Beinschnitt gesammelt wird, braucht die Hämatymphe Zeit, um sich an der Beinöffnung zu sammeln, was den Gerinnungsprozess begünstigt. Darüber hinaus werden im Vergleich zur Rückensammlung weniger Hämozyten in der Sammlung durch das Bein gewonnen, obwohl die erste Methode als leichter durchzuführen gilt. Das Verständnis der Immunantwort in Zecken durch entomopathogene Wirkstoffe vermittelt hilft, ihre Pathogenese zu enthüllen und neue Ziele für die Zeckenkontrolle zu entwickeln. Die hier beschriebenen Impfprozesse erfordern sehr geringe technologische Ressourcen und können nicht nur zur Exposition von Zecken für pathogene Mikroorganismen eingesetzt werden. In ähnlicher Weise kann die Sammlung von Zeckenhemolymphe den ersten Schritt für viele physiologische Studien darstellen.

Dieser Artikel nähert sich der Impfung und Hämatolymphentnahme Methoden, die auf Zecken angewendet. Nach der Impfung zwischen dem BeinthOberschenkel und dem Körper der Zecke kann während des Prozesses etwas Flüssigkeit (Hämatolymphe) ausgeschieden werden; Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass bei Beendigung der Impfung keine Flüssigkeit oder Gewebe in der Nadelspitze oder an der Impfung vorhanden waren, so dass die Pilzfederung vollständig geimpft wurde. Wenn der Impfprozess kor...

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Disclosing Hemolymph Collection and Inoculation of Metarhizium Blastospores into Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Invertebrate Pathology Studies

Die Analyse der Zeckenhemolymphe stellt eine wichtige Quelle für Informationen darüber dar, wie einige Krankheitserreger verursachen und wie Zecken immunologisch auf diese Infektion reagieren. Die vorliegende Studie zeigt, wie man Pilzpropagiolen impfen und die Hämatymphe von Rhipicephalus microplus verzierten Weibchen sammeln kann.

Die Sammlung der Häkolymphe und die Inokulation von Metarhizium-Blastospores in Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Pathology Studies

Ticks are obligate hematophagous ectoparasites and Rhipicephalus microplus has great importance in veterinary medicine because it causes anemia, weight ...

Zecken sind hämatophagoe Ektoparasiten, Rhipicephalus microplus, im Volksmund bekannt als rinderzecken hat enorme negative wirtschaftliche Auswirkungen auf das Vieh in tropischen Gebieten. Darüber hinaus stimulieren zunehmende Sorgen über degradierte Umweltbedingungen und Sorgen um die öffentliche Gesundheit, die durch den unsachgemäßen Einsatz chemischer Akarizide und die zunehmende Resistenz von Zeckenpopulationen gegen traditionelle Parasiten verursacht werden, die Forschung über alternative Kontrollmethoden, wie die Verwendung von entomopathogenen Pilzen. Diese Entomopathogene infizieren aktiv Arthropodenwirte durch ihre Nagelhaut und besiedeln ihren Körper.Der Arthropode kann unterschiedliche Reaktionen auf die Pilzinfektion haben. Arthropoden Immunsystem ist in humorale und zelluläre Reaktionen unterteilt. Die humorale Reaktion beinhaltet HemagglutinationSprozess und Produktion von antimikrobiellen Molekülen, während Hämozyten die zelluläre Immunantwort vermitteln.Die meisten Studien über Arthropoden Immunantwort werden mit Insekten berichtet, während Zeckenreaktionen weniger erforscht bleiben. Auch Pathogen-Inokulation und Zeckenhämäule-Sammlung sind schlecht weit verbreitete Techniken notwendig, um die Immunantwort des Arthropoden besser zu verstehen. Dementsprechend wird in diesem Video die Techniken zur Verfilmung der Impfung, der Hämolympheund-Sammlung und -Verarbeitung verwendet.Da Zeckenhämozyten Ernte mit einigen Einschränkungen konfrontiert, wie Zellen Disruption, niedrigen Hämolymph-Wert erhalten, und niedrige Konzentration der wiedergewonnenen Zellen. Direkte Infizierung auf Zellenkonfiguration und -analyse. Nach dem Zeckensammeln, waschen engorged Weibchen.Verwenden Sie Leitungswasser und tauchen Sie sie in 0,5% Natriumhypochloritlösung für drei Minuten in einem 500 Milliliter Glasbecher Empfänger. Teilen Sie die Weibchen für die Nagelhauthygiene in homogene Gruppen mit jeweils 20 Weibchen auf. Es wurden drei Repliken jeder Gruppe durchgeführt.Metarhizium robertsii blastospores wurden im Impfprozess verwendet. Fügen Sie auf eine Flüssigkeit von fünf Mikroliter metarhizium blastospores Suspension an die Oberfläche einer Kunststoff-Paraffinfolie. Um den Impfprozess zu beschleunigen, können der Kunststoff-Paraffinfilmoberfläche mehrere Blasen hinzugefügt werden, jede Blase entspricht fünf Mikrolitern.Verwenden Sie eine ein Millimeter ultrafeine Insulinspritze und eine 0,3 Millimeter Nadel, um eine Suspension zu setzen und in die Zecke zu impfen. Denken Sie daran, die gesamte Luft aus der Spritze zu nehmen, bevor Sie sie verwenden. Impfen Sie 5 Mikroliter Pilzsuspension in die Zeckenhündin zwischen scutum und capitulum.Ein kleines Volumen von Hämolympium kann auf der Rahmung nach dem Nadelschnitt vorhanden sein. Achten Sie darauf, keine Luft zu impfen. Impfen Sie Weibchen mit Pilzsuspension zwischen dem Oberschenkel und dem Körper des Weibchens mit einer ein Milliliter ultrafeinen Insulinspritze, die an eine 0,3-Millimeter-Nadel gekoppelt ist.Wenn die Metarhizium blastospores Impfung zwischen dem Oberschenkel und dem Körper des Zeckenweibchens durchgeführt wird, kann nach dem Einsetzen der Nadel ein kleines Volumen hämäulend auf dem Oberschenkel vorhanden sein. Achten Sie darauf, keine Luft zu impfen. Verwenden Sie den Gummiteil einer geflügelten Infusion, die ein 0,3-Millionen-Meter-Kapillarrohr und eine Filterspitze für die Hemolymph-Sammlung verwendet.Stören Sie die weibliche dorsale Nagelhaut mit einer 0,3 Millimeter Nadel. Nach der Störung sanften Druck auf den anterialen Teil des Zeckenkörpers ausüben. Beobachten Sie eine nahezu transparente Flüssigkeit, die sich aus der Disruptionsstelle herausbündelt.Sammeln Sie die Hämolymphe, indem Sie die Flüssigkeit durch die Filterspitze saugen, die an einen Gummiteil eines geflügelten Infusionssets und ein 0,3-Millimeter-Kapillarrohr gekoppelt ist. Drücken Sie den Körper der Zecke während der Immobilisierung kaum, da dies das Mittelgut stören und die Hämolymphe kontaminieren kann. Warten Sie, bis der sanfte Druck die Flüssigkeit ohne Kontamination vertreiben kann.Immobilisieren Sie die Zecke. Schneiden Sie ein Stück eines Vorderbeins. Ein oder mehrere Beine können geschnitten werden, und das gleiche Bein kann mehr als einmal geschnitten werden.Tragen Sie sanften Druck auf den hinteren Körperteil der Zecke auf. Beobachten Sie, wie eine transparente Flüssigkeitsblase auf der geschnittenen Seite auftaucht und mit dem Kapillarrohr sammelt. Drücken Sie den Körper der Zecke nicht kaum, während der Mobilisierung, weil dies das Mittelgut stören und die Hämolymphe kontaminieren kann.Warten Sie, bis der sanfte Druck die Flüssigkeit ohne Kontamination vertreiben kann. Nach der Hämolymphe-Sammlung in 1,5-Milliliter Mikrotube, die zuvor mit 30 Mikroliter Protease-Cocktail und 82 Mikroliter-Saline-Puffer gefüllt waren, hinterlegen. Halten Sie die Mikroröhren während der gesamten Hämolymph-Sammlung auf Eis.Zentrifugenproben und das weiche Pellet von Hämozyten werden nach der Hämolymphzentrifugation gebildet. Für die Hämolymphquantifizierung, quantifizieren Sie das Hämolymphvolumen erhalten, indem Sie das Gesamtvolumen innerhalb des Mikroröhrens und Diskontierung des Volumens von Protease-Cocktail und Saline-Puffer erhalten. Entfernen Sie vorsichtig die überstande zellfreie Hämolymphe und hängen Sie die Zellen vorsichtig wieder auf.Quantifizieren Sie die Hämozyten, indem Sie 10 Mikroliter re-suspended Hämozyten in der Neubauer-Kammer platzieren. Für Zellen wurde ein Kulturmedium verwendet. Schneiden Sie das Vorderbein der Zecke, wenden Sie sanften Druck auf den hinteren Körperteil der Zecke an, beobachten Sie eine transparente Flüssigkeitsblase, die auf der Schnittstelle auftaucht.Tragen Sie die Hämlymphtropfen direkt auf saubere Mikroskopschlitten auf. Danach verwenden Sie geeignete Methoden, um die Zellen zu färben. Die Impfung zwischen dem Oberschenkel und der Zeckenweibliche Körper kann auch Zecken innere Organe wie Midgut und die malpighian Tubuli beschädigen.Wenn die Zecke Midgut durch die Nadel bei der dorsalen Hämolymph-Sammlung gestört wird, ist die erhaltene Flüssigkeit rot, nicht transparent. Dies weist auf eine falsche Hämolympheinsammlung hin. In diesem Fall ist die Hämolympium zu entsorgen, da sie kontaminiert ist.Hämolymphkontamination kann auch beobachtet werden, wenn die Zecke auf natürliche Weise mit hohen Belastungen von Krankheitserregern infiziert ist, oder in den letzten Schritten nach dem Todprozess durch geimpfte Krankheitserreger verursacht. Das hemlymphe Volumen, das nach der dorsalen Sammlung erhalten wird, ist höher als das Volumen, das bei der Sammlung durch das Bein erhalten wird. Trotz der Leichtigkeit der Kontamination ist in der ersten Sammelmethode höher.Auch bei der Dorsal-Sammlung war die Hämozytenkonzentration deutlich höher. Wenn richtige Hämozyten Sammlung durchgeführt wird, kann ein guter Abstrich erhalten werden und es ist möglich, verschiedene Hämozyten nach der Färbung zu unterscheiden. Dieses Video lieferte Informationen über Methoden zur Impfung von Erregern, insbesondere entomopathogenen Pilzen, in Zecken und sammeln deren Hämolymphe.Die hier vorgestellten Techniken erfordern sehr geringe technologische Ressourcen in unseren klassischen Schritten für Studien über Zeckenphysiologie, Zeckenpathologie und Zeckenimmunantwort. Die korrekte Ernte der Arthropodenzellen und die zellfreie Hämolympium ist entscheidend, um zuverlässige Informationen für nachfolgende Studien zu ermöglichen. Aus diesem Grund ist es auch wichtig, sich der häufigsten Fehler bewusst zu sein, die bei der Ausführung dieser Techniken beobachtet werden.Darüber hinaus müssen die Vorschläge dieser Studie den geeigneteren Ort für die Hämolympium-Sammlung durch Verformung oder Schneiden der Beine unter Berücksichtigung des Unterschieds in der erhaltenen Menge und der Wahrscheinlichkeit einer Kontamination bestimmen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Disclosing Hemolymph Collection and Inoculation of Metarhizium Blastospores into Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Invertebrate Pathology Studies

RNA Interference in Ticks

RNA-Interferenz in Ticks

Ticks are obligate hematophagous ectoparasites of wild and domestic animals and humans, and are considered to be second worldwide to mosquitoes as vectors ...

Forschung

Immunologie und Infektion

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (Aedes aegypti) and Tick (Rhipicephalus microplus) G Protein-coupled Receptors

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito Aedes aegypti and Tick Rhipicephalus microplus G Protein-coupled Receptors

Ein Calcium Biolumineszenzassay für die funktionelle Analyse von Mosquito ( Aedes aegypti) Und Tick ( Rhipicephalus microplus) G-Protein gekoppelten Rezeptoren

Arthropod hormone receptors are potential targets for novel pesticides as they regulate many essential physiological and behavioral processes.  The ...

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Protokolle für Vaginal Inokulation und Probenahme in der Experimental-Maus-Modell der Candida Vaginitis

Vulvovaginal candidiasis (VVC), caused by Candida species, is a fungal infection of the lower female genital tract that affects approximately 75% of ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Speichel, Speicheldrüse, und Hämolymphe Abholung Ixodes scapularis Zecken

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Directed Differentiation of Induced Pluripotent Stem Cells towards T Lymphocytes

Gerichtete Differenzierung von induzierten pluripotenten Stammzellen in Richtung T-Lymphozyten

Adoptive cell transfer (ACT) of antigen-specific CD8+  cytotoxic T lymphocytes (CTLs) is a promising treatment for a variety of  malignancies 1. CTLs can  ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Fütterung von Zecken auf Tiere, die zur Übertragung und Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

Das<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Colon Organ Culture und seine Verwendung in Antimicrobial-Host Defense Studies

The intestine displays an architecture of repetitive crypt structures consisting of different types of epithelial cells, lamina propia containing immune ...

Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis

Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis

Intratrachealen Inokulation von Fischer 344 Ratten mit Francisella tularensis

Pulmonary infection with the bacterium Francisella tularensis can lead to the serious and potentially fatal disease, tularemia, in humans. Due to the ...

Isolation and Characterization of Neutrophil-derived Microparticles for Functional Studies

Isolierung und Charakterisierung von Neutrophilen abgeleitet Mikropartikel für funktionelle Studien

Polymorphonuclear neutrophil-derived microparticles (PMN)-MPs) are lipid bilayer, spherical microvesicles with sizes ranging from 50&#8211;1,000 nm in ...

Collection and Processing of Lymph Nodes from Large Animals for RNA Analysis: Preparing for Lymph Node Transcriptomic Studies of Large Animal Species

Erhebung und Verarbeitung von Lymphknoten von großen Tieren für RNA-Analyse: Vorbereitung auf Lymphknoten Transkriptomischen Studien der großen Tierarten

Large animals (both livestock and wildlife) serve as important reservoirs of zoonotic pathogens, including Brucella, Mycobacterium bovis, Salmonella, and ...