Research
Education
Sign In
EN
EN - English
CN - 中文
DE - Deutsch
ES - Español
KR - 한국어
IT - Italiano
FR - Français
PT - Português
TR - Turkish
JA - Japanese
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
9.9K Views
•
09:26 min
July 10th, 2019
DOI :
10.3791/59913-v
Chapters
0:04
Title
1:40
Cell Harvesting and Formaldehyde Treatment
2:50
FLAG Immunoprecipitation and RNase I Digestion
4:09
Affinity Elution and Magnetic Bead-antibody Conjugation
5:14
Second Immunoprecipitation
6:12
RNA Extraction and Analysis
7:51
Results: RNA and Protein Yields
8:38
Conclusion
Transcript
タンデムでのRNA免疫沈降、シーケンシング、またはRIPiT-Seqは、RNAのどの領域が特定のRNA結合タンパク質によって結合されているかを同定するための方法である。RIPiTの最もユニークな利点は、2つの精製で2つの異なるタンパク質を標的にする能力です。これは、他の複合体とは組成的に異なるRNAタンパク質複合体を濃縮するための強力な方法を提供します。
また、RIPiT-SeqはUV架橋独立性であり、直接結合することなくRNAに作用する多くのタンパク質に適用することができます
Sign in or start your free trial to access this content
Summary
ここでは、哺乳動物細胞由来のRNA:タンパク質(RNP)複合体の内因性RNA結合部位または「フットプリント」を濃縮するプロトコルを提示する。このアプローチは、RNPサブユニットの2つの免疫沈殿を伴い、したがって、並行してRNA免疫沈殿(RIPiT)と呼ばれています。
Explore More Videos
Privacy
Terms of Use
Policies
Contact Us
Recommend to library
JoVE NEWSLETTERS
JoVE Journal
Methods Collections
JoVE Encyclopedia of Experiments
Archive
JoVE Core
JoVE Business
JoVE Science Education
JoVE Lab Manual
Faculty Resource Center
Authors
Librarians
Access
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved