Affinity Elution and Magnetic Bead-antibody Conjugation
5:14
Second Immunoprecipitation
6:12
RNA Extraction and Analysis
7:51
Results: RNA and Protein Yields
8:38
Conclusion
Transcript
RNA 면역침전은 시퀀싱, 또는 RIPiT-Seq에 선행된 탠덤의 RNA 면역침전은, RNA의 특정 한 쌍의 RNA 결합 단백질에 의해 결합되는 RNA의 어떤 지구를 확인하는 방법이다. RIPiT의 가장 독특한 장점은 두 가지 정제에서 두 가지 단백질을 표적으로 하는 능력입니다. 이것은 다른 복합체에서 조성으로 구별되는 RNA 단백질 복합체를 위해 풍부하게 하는 강력한 방법을 제공합니다.
또한, RIPiT-Seq는 UV-크로스링
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여기에서, 우리는 포유류 세포에서 내인성 RNA 결합 사이트 또는 RNA의 "발자국"을 풍부하게 하는 프로토콜을 제시합니다:단백질 (RNP) 복합체. 이 접근은 RNP 소단위의 2개의 면역 강절을 관련시키고 그러므로 나란히 RNA 면역 침전이라고 불립니다 (RIPiT).