Name: rapid isolation of dorsal root ganglion macrophages
Uploaded: 2019-09-07T14:30:00
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L'étude a été soutenue par : Foundation for Anesthesia Education and Research (XY); le Département d'anesthésie et de soins périopératoires de l'UCSF (XY); et 1R01NS100801-01(GZ). Cette étude a été appuyée en partie par le Laboratoire d'analyse cellulaire des ressources partagées du CCSDHc grâce à une subvention des NIH (P30CA082103).

Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d'utilisation des animaux de l'Université de Californie à San Francisco et ont été menées conformément au Guide des NIH pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire.
1. Recueillir d'autres DRG lombaires à partir de souris expérimentales
<ol><li>Avant de commencer l'expérience, préparez la solution de travail du milieu de gradient de densité (par exemple, Percoll) en ...

<ol>
	<li>Ji, R. R., Chamessian, A., Zhang, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+regulation+by+non-neuronal+cells+and+inflammation.">Pain regulation by non-neuronal cells and inflammation.</a> Science. 354 (6312), 572-577 (2016).</li><li>Inoue, K., Tsuda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+in+neuropathic+pain:+cellular+and+molecular+mechanisms+and+therapeutic+potential.">Microglia in neuropathic pain: cellular and molecular mechanisms and therapeutic potential.</a> Nature Reviews Neurosciences. 19 (3), 138-152 (2018).</li><li>Hu, P., McLachlan, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+functional+types+of+macrophage+in+dorsal+root+ganglia+and+spinal+nerves+proximal+to+sciatic+and+spinal+nerve+transections+in+the+rat.">Distinct functional types of macrophage in dorsal root ganglia and spinal nerves proximal to sciatic and spinal nerve transections in the rat.</a> Experimental Neurology. 184 (2), 590-605 (2003).</li><li>Simeoli, R., Montague, K., Jones, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomal+cargo+including+microRNA+regulates+sensory+neuron+to+macrophage+communication+after+nerve+trauma.">Exosomal cargo including microRNA regulates sensory neuron to macrophage communication after nerve trauma.</a> Nature Communication. 8 (1), 1778 (2017).</li><li>Cobos, E. J., Nickerson, C. A., Gao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+differences+in+neuropathic+pain+modalities+revealed+by+correlating+behavior+with+global+expression+profiling.">Mechanistic differences in neuropathic pain modalities revealed by correlating behavior with global expression profiling.</a> Cell Reports. 22 (5), 1301-1312 (2018).</li><li>Zhang, H., Li, Y., de Carvalho-Barbosa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+Root+Ganglion+Infiltration+by+Macrophages+Contributes+to+Paclitaxel+Chemotherapy-Induced+Peripheral+Neuropathy.">Dorsal Root Ganglion Infiltration by Macrophages Contributes to Paclitaxel Chemotherapy-Induced Peripheral Neuropathy.</a> The Journal of Pain. 17 (7), 775-786 (2016).</li><li>Liu, T., van Rooijen, N., Tracey, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depletion+of+macrophages+reduces+axonal+degeneration+and+hyperalgesia+following+nerve+injury.">Depletion of macrophages reduces axonal degeneration and hyperalgesia following nerve injury.</a> Pain. 86 (1-2), 25-32 (2000).</li><li>Peng, J., Gu, N., Zhou, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+and+monocytes+synergistically+promote+the+transition+from+acute+to+chronic+pain+after+nerve+injury.">Microglia and monocytes synergistically promote the transition from acute to chronic pain after nerve injury.</a> Nature Communication. 7, 12029 (2016).</li><li>Barclay, J., Clark, A. K., Ganju, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+cysteine+protease+cathepsin+S+in+neuropathic+hyperalgesia.">Role of the cysteine protease cathepsin S in neuropathic hyperalgesia.</a> Pain. 130 (3), 225-234 (2007).</li><li>Lim, H., Lee, H., Noh, K., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IKK/NF-kappaB-dependent+satellite+glia+activation+induces+spinal+cord+microglia+activation+and+neuropathic+pain+after+nerve+injury.">IKK/NF-kappaB-dependent satellite glia activation induces spinal cord microglia activation and neuropathic pain after nerve injury.</a> Pain. 158 (9), 1666-1677 (2017).</li><li>Rutkowski, M. D., Pahl, J. L., Sweitzer, S., van Rooijen, N., DeLeo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limited+role+of+macrophages+in+generation+of+nerve+injury-induced+mechanical+allodynia.">Limited role of macrophages in generation of nerve injury-induced mechanical allodynia.</a> Physiology and Behavior. (3-4), 225-235 (2000).</li><li>Kwon, M. J., Shin, H. Y., Cui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CCL2+Mediates+Neuron-Macrophage+Interactions+to+Drive+Proregenerative+Macrophage+Activation+Following+Preconditioning+Injury.">CCL2 Mediates Neuron-Macrophage Interactions to Drive Proregenerative Macrophage Activation Following Preconditioning Injury.</a> Journal of Neuroscience. 35 (48), 15934-15947 (2015).</li><li>Zigmond, R. E., Echevarria, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+biology+in+the+peripheral+nervous+system+after+injury.">Macrophage biology in the peripheral nervous system after injury.</a> Progress in Neurobiology. 173, 102-121 (2019).</li><li>Ghasemlou, N., Chiu, I. M., Julien, J. P., Woolf, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD11b+Ly6G-+myeloid+cells+mediate+mechanical+inflammatory+pain+hypersensitivity.">CD11b+Ly6G- myeloid cells mediate mechanical inflammatory pain hypersensitivity.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 112 (49), E6808-E6817 (2015).</li><li>Malin, S. A., Davis, B. M., Molliver, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+dissociated+sensory+neuron+cultures+and+considerations+for+their+use+in+studying+neuronal+function+and+plasticity.">Production of dissociated sensory neuron cultures and considerations for their use in studying neuronal function and plasticity.</a> Nature Protocols. 2 (1), 152-160 (2007).</li><li>Lin, Y. T., Chen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+Root+Ganglia+Isolation+and+Primary+Culture+to+Study+Neurotransmitter+Release.">Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release.</a> Journal of Visualized Experiment. (140), (2018).</li><li>Burnett, S. H., Kershen, E. J., Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+macrophage+ablation+in+transgenic+mice+expressing+a+Fas-based+suicide+gene.">Conditional macrophage ablation in transgenic mice expressing a Fas-based suicide gene.</a> J Leukoc Biol. 75 (4), 612-623 (2004).</li><li>Lopes, D. M., Malek, N., Edye, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+peripheral+not+central+immune+responses+to+pain-inducing+injury.">Sex differences in peripheral not central immune responses to pain-inducing injury.</a> Science Reports. 7 (1), 16460 (2017).</li><li>Kim, Y. S., Anderson, M., Park, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coupled+Activation+of+Primary+Sensory+Neurons+Contributes+to+Chronic+Pain.">Coupled Activation of Primary Sensory Neurons Contributes to Chronic Pain.</a> Neuron. 91 (5), 1085-1096 (2016).</li><li>Vicuna, L., Strochlic, D. E., Latremoliere, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+serine+protease+inhibitor+SerpinA3N+attenuates+neuropathic+pain+by+inhibiting+T+cell-derived+leukocyte+elastase.">The serine protease inhibitor SerpinA3N attenuates neuropathic pain by inhibiting T cell-derived leukocyte elastase.</a> Nature Medicine. 21 (5), 518-523 (2015).</li></ol>

Ici, nous introduisons une nouvelle méthode pour enrichir efficacement les macrophages isolés de la souris DRG. L'approche conventionnelle pour isoler les cellules immunitaires DRG nécessite une digestion enzymatique15,18, qui est maintenant remplacé par l'homogénéisation mécanique dans notre protocole pour limiter les dommages cellulaires indésirables et augmenter le rendement. Par conséquent, le nouveau protocole prend beaucoup moins de temps. Plus imp...

Il existe maintenant des preuves considérables que les cellules immunitaires contribuent à la douleur neuropathique suite à une lésion nerveuse périphérique1,2. Les cellules monocytiques périphériques, y compris les macrophages mûrs, sont connues pour répondre aux dommages de tissu et à l'infection systémique par la phagocytose, la présentation d'antigène, et la libération de cytokine. Parallèlement à l'activation des microglies induites par les lésions nerveuses dans la corne dorsal spinale, les macrophages dans les ganglions de racine dorsal (DRG) se développent également de manière significative après des dommages de nerf3,4. Notamment, il y a des intérêts croissants pour déterminer si les macrophages contribuent au développement neuropathique de douleur après la blessure périphérique de nerf en interagissant avec des neurones sensoriels dans le DRG5,6,7, 8 Annonces , 9 (en) , 10 Ans et plus , 11. En outre, des études récentes impliquent également la contribution des macrophages de DRG dans la réparation axonale après des dommages de nerf12,13. Une autre étude suggère en outre que les sous-populations de macrophages (c.-à-d. CD11b-Ly6Csalut et CD11b-Ly6Cfaible /- cellules) peuvent jouer un rôle différent dans l'hypersensibilité mécanique14. Par conséquent, le phénotypage rapide de la réponse des macrophages de DRG dans le contexte des dommages de nerf peut nous aider à identifier des facteurs neuroimmuns contribuant à la douleur neuropathique.
Conventionnellement, le protocole pour isoler les macrophages dans le DRG implique plusieurs étapes, y compris la digestion enzymatique15,16. La technique prend souvent beaucoup de temps et peut être coûteuse pour des expériences à grande échelle. Bien que la digestion douce avec le type II de collagène (4 mg/mL) et le type de dispase II (4.7 mg/mL) pendant 20 min ait été recommandée précédemment15,il est concevable que les cellules après l'exposition à cette enzyme soient sujettes aux dommages cellulaires ou à la mort cellulaire, qui peuvent mener à de bas produire. En outre, la différence dans la qualité des enzymes d'un lot à l'autre peut avoir un impact supplémentaire sur l'efficacité de ce processus. Plus important encore, les macrophages exposés à la digestion enzymatique pourraient être stimulés de façon irréprossable et peuvent donc être très différents du statut in vivo. Les changements peuvent potentiellement compliquer les résultats de l'étude fonctionnelle.
Ici nous décrivons un protocole enzyme-libre pour isoler rapidement des macrophages de DRG à 4 oC utilisant la dissociation mécanique. Les échantillons sont conservés sur la glace pour limiter le stress cellulaire. En conséquence, notre approche fournit un avantage pour maintenir la cohérence de l'isolement, et les cellules isolées sont probablement plus saines et moins stimulées. Nous présentons en outre les preuves pour valider la qualité des cellules isolées avec l'analyse de tri cellulaire activée par fluorescence (FACS).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>AP20187</td>
			<td>Clontech</td>
			<td>635058</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-mouse CX3CR1-APC antibody</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>149007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avertin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T48402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer (70 mm nylon)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dounce tissue homogenizer</td>
			<td>Wheaton</td>
			<td>357538 (1ml)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS tubes (5ml)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Friedman-Pearson Rongeur</td>
			<td>FST</td>
			<td>16121-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS (10x, Ca++/Mg++-free)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14185-052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noyes Spring Scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>15012-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4937-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4864-10ml</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rapid isolation of dorsal root ganglion macrophages

Il y a des intérêts croissants pour étudier les interactions moléculaires et cellulaires entre les cellules immunitaires et les neurones sensoriels dans les ganglions de racine dorsal après des dommages périphériques de nerf. Les cellules monocytiques périphériques, y compris les macrophages, sont connues pour répondre à une lésion tissulaire par phagocytose, présentation d'antigène, et libération de cytokine. Les preuves émergentes ont impliqué la contribution des macrophages de ganglions de racine dorsale au développement neuropathique de douleur et à la réparation axonale dans le contexte des dommages de nerf. Le phénotypage rapide (ou « isolement rapide de ») la réponse des macrophages de ganglions de racine dorsal dans le contexte des dommages de nerf est désirée pour identifier les facteurs neuroimmuns inconnus. Ici, nous démontrons comment notre laboratoire isole rapidement et efficacement les macrophages des ganglions de racine dorsal à l'aide d'un protocole de dissociation mécanique sans enzymes. Les échantillons sont conservés sur la glace tout au long pour limiter le stress cellulaire. Ce protocole prend beaucoup moins de temps que le protocole enzymatique standard et a été couramment utilisé pour notre analyse de tri cellulaire activée par fluorescence.

Pour valider les cellules isolées, nous avons d'abord choisi les souris transgéniques Macrophage Fas-Induced Apoptosis (MAFIA)17. Cette ligne exprime un gène de fusion de suicide FK506-Fas inductible de drogue-inductible (FKBP)-Fas et protéine fluorescente verte (eGFP) sous le contrôle du promoteur du récepteur CSF1 (CSF1R), qui est spécifiquement exprimé dans les macrophages et les microglies. L'injection systémique du dimerizer de protéine FK-contraignant, AP20187 (AP), induit l'apopto...

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Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Ici nous présentons un protocole mécanique de dissociation pour isoler rapidement des macrophages du ganglion de racine dorsal pour le phénotypage et l'analyse fonctionnelle.

Isolement rapide des macrophages de ganglion de racine dorsal

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...

Les preuves naissantes ont impliqué la contribution des macrophages dorsales de ganglion de racine au développement neuropathique de douleur et à la réparation axonale dans le contexte des dommages de nerf. Le phénotypage rapide de la réponse des macrophages dorsales de ganglion de racine est désiré pour identifier les facteurs neuroimmuns inconnus. Ici, nous démontrons comment notre laboratoire isole rapidement et efficacement les macrophages des ganglions de racines dorsales à l’aide d’un protocole de dissociation mécanique sans enzymes.Ce protocole prend beaucoup moins de temps que les protocoles enzymatiques standard, et nous l’avons couramment utilisé pour notre analyse de tri cellulaire activée par fluorescence. Avant de commencer l’expérience, préparez la solution de travail du milieu de gradient de densité en mélangeant neuf volumes du milieu avec un volume de calcium et de magnésium sans 10X HBSS et gardez-le sur la glace. Confirmez que la souris est entièrement anesthésiée par l’absence de réponse au pincement de la patte arrière.Commencez par placer une souris anesthésiée à l’intérieur d’une hotte de fumée chimique en position supine avec quatre pattes fixées avec du ruban adhésif. Utilisez des forceps pour soulever la peau sous la cage thoracique. Et puis avec des ciseaux chirurgicaux, faire une petite incision pour exposer le foie et le diaphragme.À l’aide des mêmes ciseaux, couper le diaphragme et la cage thoracique. Et puis ouvrez la cavité pleurale pour exposer le cœur battant. Ensuite, avec des ciseaux d’iris, couper rapidement le bon appendice auriculaire.Une fois le saignement noté, insérez une aiguille de calibre 30 dans l’extrémité postérieure du ventricule gauche et injectez lentement 10 millilitres de 1X PBS pré-réfrigéré pour imprfuser l’animal. Pour effectuer une laminectomie dorsale, placez la souris en position couchée. Utilisez un scalpel de taille 11 pour faire deux incisions longues latérales latérales profondes à partir de la région thoracique jusqu’à la région sacrée.Ensuite, retirez la peau exposant la couche musculaire dorsale. Ensuite, avec friedman-Pearson rongeur, décoller les tissus conjonctifs et les muscles jusqu’à ce que les processus de la colonne vertébrale lumbosacrale et les processus transversaux bilatéraux sont exposés. Tout d’abord, utilisez un rongeur Friedman-Pearson pour ouvrir soigneusement la colonne vertébrale dorsale, puis passez d’un rongeur Friedman-Pearson à des ciseaux à ressort Noyes pour enlever les os vertébraux, exposant la moelle épinière avec des nerfs rachidiens intacts attachés.Disséquer soigneusement le DRG lombaire ipsilateral et contralatéral. Placez-le dans un millilitre de calcium glacé et sans magnésium 1X HBSS dans un homogénéiseur de tissu de Dounce. Homogénéiser le tissu DRG dans l’homogénéiseur Dounce avec un pilon lâche pendant 20 à 25 fois.Placer une passoire stérile en nylon de 70 micromètres dans un tube conique stérile de 50 millilitres. Utilisez 800 microlitres de code de glace 1X HBSS pour mouiller la passoire cellulaire. Utilisez une pipette pour recueillir la suspension tissulaire homogénéisée de l’homogénéiseur sur la passoire à cellules humides et recueillez-la dans le tube conique de 50 millilitres.Rincez l’homogénéiseur deux fois avec 800 microlitres de glace froide 1X HBSS, en recueillant le liquide dans le même tube conique de 50 millilitres pour augmenter le rendement. Ajouter 1,5 millilitres de gradient de densité isotonique froid équilibré dans un tube stérile de flacon de polystyrène de cinq millilitres. Transférer l’homogénéité cellulaire du tube conique de 50 millilitres dans ce tube de flacon.Et pipette de haut en bas pour bien mélanger. Ajouter 500 microlitres supplémentaires de 1X HBSS pour sceller le dessus. Centrifuger les cellules à 800 fois G pendant 20 minutes à quatre degrés Celsius.Aspirez soigneusement le supernatant contenant de la myéline dans le milieu sans déranger la pastille cellulaire au fond du tube. Ajouter 100 microlitres de PBS contenant 5% de sérum bovin fœtal à la pastille, et suspendre à nouveau les cellules DRG. Ajoutez ensuite l’anticorps alpha souris CX3CR1 APC aux cellules et incubez dans l’obscurité à quatre degrés Celsius pendant une heure.Lavez les cellules une fois avec cinq millilitres de PBS. Centrifuger les cellules à 360 fois G pendant huit minutes à quatre degrés Celsius. Aspirer le supernatant, puis re-suspendre la pastille cellulaire dans 300 microlitres de PBS pour l’analyse des faits.Après des injections intraperitoneal de Dimerizer de protéine FK-liant AP dans les souris de MaFIA pour épuiser des macrophages, il y avait une perte significative des cellules positives de GFP dans les DRGs des souris AP-traitées comparées aux souris traitées par véhicule commandé. L’analyse des faits a révélé un épuisement réussi de la population élevée de GFP chez les souris AP-traitées et a démontré la haute qualité des cellules isolées. 4% du total des cellules isolées du DRG de l’animal traité par véhicule étaient des macrophages élevés GFP.En revanche seulement 0,4% du total des cellules DRG étaient des macrophages élevés de GFP dans la souris AP-traitée. Les cellules DRG mécaniquement isolées des souris sauvages de type ont été souillées avec l’anticorps de souris alpha CX3CR1-APC. 6% des cellules DRG étaient des macrophages positifs CX3CR1.Quand la viabilité cellulaire a été évaluée avec l’iodure de propidium, elle a indiqué que plus de 80% des cellules fraîchement isolées de DRG étaient viables. Si le rendement insatisfaisant de cellules est noté, l’homogénéisation insuffisante ou excessive du tissu de DRG peut être suspectée. En outre, la dissection DRG peut nécessiter une pratique répétée pour les débutants.Il est probable que l’application de notre protocole peut être élargie pour étudier d’autres cellules non neuronales telles que les cellules satellites et les cellules T. D’autres études peuvent être nécessaires pour confirmer l’efficacité de l’isolement cellulaire.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Recherche

Neurosciences

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In Vitro Modélisation de Cancerous Neural Invasion: Le ganglion de racine dorsale Modèle

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These ...

An Approach to Enhance Alignment and Myelination of Dorsal Root Ganglion Neurons

Une approche pour améliorer l&#39;alignement et myélinisation de ganglion de racine dorsale Neurones

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Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

Extrusion hydraulique de la moelle épinière et isolement de ganglions rachidiens en Rongeurs

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Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine

Laminotomy pour accès de Ganglion de la racine dorsale lombaire et Injection chez le porc

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