Fôringssystemet til Aplysia har lenge vært brukt som et modellsystem for studiet av motorkontroll og myk kroppsbiomekanikk. Imidlertid har musklene dypt inne i fôrings griperen vært utilgjengelig for in vivo manipulasjon. Denne operasjonen tillater oss å få tilgang til disse musklene i ellers intakt oppfører dyr.
Ikke bare tillater dette oss in vivo tilgang for første gang, men teknikken innebærer et enkelt snitt til en enkelt del av en slug, noe som betyr at skaden på de andre regionene er relativt liten. Det beste preparatet er å gjøre forsiktige disseksjoner av bukkalmassen og grundig kjent med anatomien. Velg et aktivt dyr ved å tilby det tang og bekrefte at biteintervaller ikke er større enn fem sekunder.
10 minutter etter anestesi, forsøk forsiktig å sette inn en pinne i gjelle og neshorn, og kontrollerer at disse ikke trekkes tilbake for å sikre tilstrekkelig bedøvelse. Sørg for at leppene på sneglen er glatte, noe som indikerer at kjevene er helt avslappet. På denne måten er odontophore utsatt.
I tilfelle hvor rynker vises på leppene, er dyrets lepper og kjeve ikke tilstrekkelig avslappet for kirurgisk prosedyre. Se manuskriptet for tips om å indusere leppeavslapning. Plasser sneglen slik at hodet henger nedover, slik at bukkalmassen kan bosette seg mot kjevene.
Påfør trykk med tommelen og pekefingeren for å presse den bukkale massen mot kjevene, og hold bukkalmassen på plass. Roter kjeven slik at de er synlige. Samtidig opprettholder trykket på bukkalmassen slik at prow av bukkalmassen er synlig gjennom kjevene.
Forsiktig arbeide tuppene av de stumpe tang i kløften av odontophore og bruke dem til å spak radulær overflate gjennom kjevene. Hvis kjevene ikke er tilstrekkelig avslappet, bruk tangen til å forsiktig gripe kanten av kløften for å hjelpe denne prosessen. Når overflaten er utsatt, må du arbeide kjevene klar av den fremre delen av den radulære overflaten hele veien rundt omkretsen.
Dette gjør odontophore mindre sannsynlig å trekke tilbake. Sørg for at ikke mer enn halvparten av veggene i odontoforen eksponeres. Når den radulære overflaten er fullt eksponert, ordne slug under et disseksjonsmikroskop for operasjonen.
For forskere med mindre erfaring, bruk et bredt gummibånd og en tredje hånd for å stabilisere kjevene og radulær overflate for operasjonen. Plasser den radulære overflaten slik at kløftsiden vender mot utprøveren. Ta forsiktig tak i den radulære overflaten nær den radulære basen slik at en horisontal fold opprettes vinkelrett på den anatomiske pressen.
Bruk fin saks for å skjære gjennom denne folden, noe som gjør et snitt langs den anatomiske pressen. Utvide dette første snittet til tre til fem centimeter for å gi tilgang til det indre av bukkalmassen. Juster lyset slik at det peker rett tilbake gjennom dette snittet.
Del kantene av snittet slik at baksiden av lumen av odontoforen og de tynne vertikale trådene i I7-muskelen er synlige. Nå inn i snittet. Grip begge trådene av I7 og trekk dem opp gjennom snittet, hvor så mye av muskelen kan kuttes bort som det er praktisk.
Etter at lesjoner er utført, ta tak i fremre tentakler og skyv dem ned på den radulære overflaten for å returnere sneglen til sin opprinnelige konfigurasjon. Plasser postkirurgiske dyr i et beskyttet miljø med god vannføring. Sørg for at dyrene er våken og lydhør på dagen etter operasjonen.
På den første eller andre dagen etter operasjonen begynner dyr å mate. For å utføre sub-radulær fiberlesjon etter kirurgisk snitt, sett spissen av et lite, rett skalpellblad gjennom snittet med den skarpe kanten vinklet oppover. Skrap forsiktig de fine muskelfibrene fra undersiden av den radulære overflaten.
Deretter utfører du postoperativ omsorg som tidligere. I denne anatomiske studien hadde sham lesjoner ingen signifikant effekt på bredden av åpningen på toppen av biting. Mens både I7 og sub-radulære fibrøse lesjoner gjorde betydelig redusere bite bredde.
Det viktigste å huske er at leppene og kjevene til dyret er helt avslappet før du prøver å skyve griperen ut gjennom kjevene. Mest sannsynlig er både I7 og de sub-radulære fibrene multifunksjonelle muskler, og vi har bare identifisert visse aspekter av oppførselen de bidrar til. I tillegg gir denne teknikken for å forlenge odontophoren tilgang til hele deler av anatomien som tidligere var utilgjengelig.
I tillegg til å åpne opp anatomiske regioner og myke kroppsbiomekanikk, håper vi at dette kan tjene som grunnlag for andre etterforskere som arbeider med myke strukturer som ellers kan være vanskelig å undersøke.
