Система питания Aplysia уже давно используется в качестве образцовой системы для изучения управления двигателем и мягкой биомеханики организма. Тем не менее, мышцы глубоко внутри кормления схватитель были недоступны для манипуляции in vivo. Эта операция позволяет нам получить доступ к этим мышцам в противном случае нетронутыми ведут себя животных.
Это не только позволяет нам виво доступ в первый раз, но техника включает в себя один разрез в одной части пули, а это означает, что ущерб другим регионам являются относительно небольшими. Лучший препарат заключается в том, чтобы сделать тщательное вскрытие бускальной массы и тщательно познакомить себя с анатомией. Выберите активное животное, предлагая ему водоросли и подтверждая, что интервалы укусов не больше пяти секунд.
Через 10 минут после анестезии, осторожно попытайтесь вставить булавку в жабру и ринофор, проверяя, что они не втягиваются, чтобы обеспечить достаточную анестезию. Убедитесь, что губы пули гладкие, указывая челюсти полностью расслаблены. Таким образом, одонтофор подвергается воздействию.
В случае, когда морщины появляются на губах, губы и челюсть животного недостаточно расслаблены для хирургической процедуры. Обратитесь к рукописи для советов по индуцированию релаксации губ. Распоимить пулю так, чтобы голова висела вниз, позволяя бускальной массе осесть против челюстей.
Нанесите давление большим пальцем и указательный палец, чтобы подтолкнуть бускальную массу к челюстям, удерживая бускальную массу на месте. Поверните челюсть так, чтобы они были видны. В то же время, поддерживать давление на бускальную массу так, что рыскать бускальной массы видно через челюсти.
Аккуратно отработать кончики тупых щипцы в расщелину одонтофора и использовать их для рычага радулярной поверхности через челюсти. Если челюсти недостаточно расслаблены, используйте щипцы, чтобы мягко понять край расщелины, чтобы помочь этому процессу. После того, как поверхность подвергается, работать челюсти подальше от передней части радулярной поверхности всю дорогу по периметру.
Это делает одонтофор менее вероятно, отказаться. Убедитесь, что не более половины стен одонтофора подвергается воздействию. После того, как радулярная поверхность полностью подвергается, организовать пули под микроскопом вскрытия для операции.
Для ученых с меньшим опытом, использовать широкую резинку и третью руку, чтобы стабилизировать челюсти и радулярной поверхности для операции. Распоитить радулярную поверхность так, чтобы расщелина сторона лицом к следователю. Аккуратно схватите радулярную поверхность вблизи радулярной базы так, чтобы горизонтальная складка была создана перпендикулярно анатомической складке.
Используйте тонкие ножницы, чтобы прорезать эту складку, делая разрез вдоль анатомической складки. Расширяйте этот первоначальный разрез до трех-пяти сантиметров, чтобы обеспечить доступ к внутренней части бускальной массы. Отрегулируйте свет так, чтобы он у указывает непосредственно обратно через этот разрез.
Часть края разреза так, что задняя часть люмена одонтофора и тонкие вертикальные нити мышцы I7 видны. Дотянуться до разреза. Возьмите обе нити I7 и потяните их вверх через разрез, где как большая часть мышц может быть отрезана, как это практично.
После того, как повреждения были выполнены, схватить передние щупальца и толкать их вниз на радулярной поверхности, чтобы вернуть пулю в свою первоначальную конфигурацию. Поместите послеоперационных животных в охраняемую среду с хорошим потоком воды. Убедитесь, что животные бдительны и отзывчивы на следующий день после операции.
На первый или второй день после операции животные начинают кормить. Для выполнения суб-радулярного поражения волокна после хирургического разреза, вставьте кончик небольшого, прямого лезвия скальпеля через разрез с острым краем под углом вверх. Аккуратно соскребать тонкие мышечные волокна из нижней части радулярной поверхности.
Затем, выполняя послеоперационный уход, как и раньше. В этом анатомическом исследовании, фиктивные поражения не имели существенного влияния на ширину отверстия на пике укусов. В то время как I7 и субрадулярных волокнистых поражений значительно уменьшить ширину укуса.
Самое главное помнить, что губы и челюсти животного полностью расслаблены, прежде чем пытаться вытолкнуть схватщика через челюсти. Скорее всего, как I7, так и суб-радулярные волокна являются многофункциональными мышцами, и мы определили только некоторые аспекты поведения, которому они способствуют. Кроме того, этот метод затягивания одонтофора дает доступ к целым частям анатомии, которые ранее были недоступны.
Помимо открытия анатомических регионов и мягкой биомеханики тела, мы надеемся, что это может послужить основой для других исследователей, которые работают с мягкими структурами, которые в противном случае было бы трудно исследовать.
