Matningssystemet av Aplysia har länge använts som ett modellsystem för studier av motorisk kontroll och mjuk kroppsbiomekanik. Musklerna djupt inne i utfodring gripare har dock varit otillgängliga för in vivo manipulation. Denna operation tillåter oss att komma åt dessa muskler i övrigt intakt beter djur.
Detta ger oss inte bara in vivo tillgång för första gången, utan tekniken innebär ett enda snitt till en enda del av en snigel, vilket innebär att skadorna på de andra regionerna är relativt små. Det bästa preparatet är att göra noggranna dissektioner av den buckala massan och grundligt bekanta sig med anatomin. Välj ett aktivt djur genom att erbjuda det tång och bekräfta att bitintervallen inte är större än fem sekunder.
10 minuter efter anestesi, försiktigt försöka sätta in en stift i gälen och rhinophore, kontrollera att dessa inte tillbaka för att säkerställa tillräcklig anesthetization. Se till att snigelns läppar är släta, vilket indikerar att käftarna är helt avslappnade. På så sätt exponeras odontofor.
I det fall då skrynkling förekommer på läpparna, djurets läppar och käken är inte tillräckligt avslappnad för det kirurgiska ingreppet. Hänvisa till manuskriptet för tips om att framkalla läppavslappning. Placera snigeln så att huvudet hänger nedåt, vilket gör att den buckala massan att bosätta sig mot käftarna.
Applicera tryck med tummen och pekfingret för att driva den buckala massan mot käftarna, hålla den buckala massan på plats. Rotera käken så att de syns. Samtidigt, upprätthålla trycket på den buckala massan så att prow av den buckala massan är synlig genom käftarna.
Arbeta försiktigt spetsarna på de trubbiga tlyckorna i klyven i odontoforen och använd dem för att spak den radoriska ytan genom käftarna. Om käftarna inte är tillräckligt avslappnade, använd krafttopparna för att försiktigt greppa kanten av kluven för att bistå denna process. När ytan är utsatt, arbeta käftarna bort från den främre delen av den radulära ytan hela vägen runt omkretsen.
Detta gör odontoforen mindre benägna att dra tillbaka. Se till att högst hälften av väggarna i odontoforen exponeras. När den radulära ytan är fullt exponerad, ordna snigel under en dissekering mikroskop för operationen.
För forskare med mindre erfarenhet, använd ett brett gummiband och en tredje hand för att stabilisera käftarna och radulära ytan för operationen. Placera radularytan så att klyssidan är vänd mot prövaren. Ta försiktigt tag i den radulära ytan nära den radulära basen så att ett horisontellt veck skapas vinkelrätt mot det anatomiska vecket.
Använd fin sax för att skära igenom denna lucka, vilket gör ett snitt längs den anatomiska veck. Utöka denna inledande snitt till tre till fem centimeter för att möjliggöra åtkomst till det inre av den buccal massan. Justera ljus så att den pekar direkt bakåt genom detta snitt.
Del kanterna på snittet så att baksidan av lumen av odontofor och de tunna vertikala strängarna på I7 muskeln är synliga. Nå in i snittet. Ta tag i båda delarna av I7 och dra upp dem genom snittet, där så mycket av muskeln kan skäras bort som är praktiskt.
Efter skador har utförts, ta tag i de främre tentakler och tryck ner dem på radular ytan för att återgå snigel till sin ursprungliga konfiguration. Placera postkirurgiska djur i skyddad miljö med bra vattenflöde. Se till att djuren är alerta och lyhörda dagen efter operationen.
På den första eller andra dagen efter operationen börjar djur att mata. För att utföra subradular fiber lesion efter kirurgiska snitt, sätt in spetsen på en liten, rak skalpell blad genom snittet med den skarpa kanten vinklad uppåt. Skrapa försiktigt de fina muskulösa fibrerna från undersidan av den radulära ytan.
Sedan, utföra postoperativ vård som tidigare. I denna anatomiska studie hade skenskador ingen signifikant effekt på öppningens bredd vid toppen av bitande. Medan både I7 och sub-radular fibrösa skador gjorde avsevärt minska bita bredd.
Det viktigaste att komma ihåg är att läpparna och käftarna på djuret är helt avslappnad innan du försöker driva griparen ut genom käftarna. Troligtvis är både I7 och de subradulära fibrerna multifunktionella muskler och vi har bara identifierat vissa aspekter av det beteende som de bidrar till. Dessutom ger denna teknik att utdraga den odontofor tillgång till hela delar av anatomin som tidigare var otillgängliga.
Förutom att öppna anatomiska regioner och mjuk kroppsbiomekanik, hoppas vi att detta kan fungera som en grund för andra utredare som arbetar med mjuka strukturer som annars kan vara svåra att undersöka.