Name: isolation of intact eyeball to obtain integral ocular surface tissue for histological examination and immunohistochemistry
Uploaded: 2019-10-20T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Intact Eyeball to Obtain Integral Ocular Surface Tissue for Histological Examination and Immunohistochemistry at JoVE.com

Os autores agradecem ao Prof. Rong Ju a leitura crítica do manuscrito e todos os membros do laboratório para assistência técnica. Este trabalho foi apoiado por subsídios da Fundação Nacional de ciências naturais da China (NSFC: 31571077; Pequim, China), o Guangzhou City Sciences and Technologies Innovation Project (201707020009; Guangzhou, província de Guangdong, China), "plano de 100 pessoas" da Universidade de Sun Yat-Sen (8300-18821104; Guangzhou, província de Guangdong, China), e financiamento da pesquisa do laboratório chave do estado do ophthalmology no centro ophthalmic de Zhongshan (303060202400339; Guangzhou, província de Guangdong, China).

Todos os procedimentos envolvendo o uso de camundongos foram aprovados pelo Comitê de cuidado e uso de animais, centro Oftalmico de Zhongshan, e aderiram à declaração de ARVO para o uso de animais em pesquisa Oftaltrônica e visão.
1. dissecção do globo ocular com superfície ocular intacta e pálpebras
<ol><li>Dissecar a cabeça.<ol>
<li>Eutanizar dia pós-natal 10 (P10) e P28 camundongos (veja a tabela de materiais para cepas de mouse) por luxação cervical, corte ...

<ol>
	<li>Swamynathan, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+surface+development+and+gene+expression.">Ocular surface development and gene expression.</a> Journal of Ophthalmology. 2013, (2013).</li><li>Arita, R., Fukuoka, S., Morishige, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Morphology+of+the+Lipid+Layer+of+the+Tear+Film.">Functional Morphology of the Lipid Layer of the Tear Film.</a> Cornea. 36 Suppl 1, S60-S66 (2017).</li><li>Guo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+surface+pathogenesis+associated+with+precocious+eyelid+opening+and+necrotic+autologous+tissue+in+mouse+with+disruption+of+Prickle+1+gene.">Ocular surface pathogenesis associated with precocious eyelid opening and necrotic autologous tissue in mouse with disruption of Prickle 1 gene.</a> Experimental Eye Research. 180, 208-225 (2018).</li><li>Knop, E., Knop, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+immunology+of+the+ocular+surface.">Anatomy and immunology of the ocular surface.</a> Chemical Immunology and Allergy. 92, 36-49 (2007).</li><li>Mizoguchi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+surface+alkali+injury+damages+meibomian+glands+in+mice.">Ocular surface alkali injury damages meibomian glands in mice.</a> The Ocular Surface. 15 (4), 713-722 (2017).</li><li>Gipson, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Goblet+cells+of+the+conjunctiva:+A+review+of+recent+findings.">Goblet cells of the conjunctiva: A review of recent findings.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 54, 49-63 (2016).</li><li>Nowell, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+inflammation+imposes+aberrant+cell+fate+in+regenerating+epithelia+through+mechanotransduction.">Chronic inflammation imposes aberrant cell fate in regenerating epithelia through mechanotransduction.</a> Nature Cell Biology. 18 (2), 168-180 (2016).</li><li>Nagata, M., Ohashi, Y., Ozawa, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+histochemical+study+of+the+development+of+premaxilla+and+maxilla+during+secondary+palate+formation+in+the+mouse+embryo.">A histochemical study of the development of premaxilla and maxilla during secondary palate formation in the mouse embryo.</a> Archives of Histology and Cytology. 54 (3), 267-278 (1991).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+MEK+kinase+1+in+TGF-beta/activin-induced+epithelium+movement+and+embryonic+eyelid+closure.">A role for MEK kinase 1 in TGF-beta/activin-induced epithelium movement and embryonic eyelid closure.</a> The Embo Journal. 22 (17), 4443-4454 (2003).</li><li>Sharov, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noggin+overexpression+inhibits+eyelid+opening+by+altering+epidermal+apoptosis+and+differentiation.">Noggin overexpression inhibits eyelid opening by altering epidermal apoptosis and differentiation.</a> The Embo Journal. 22 (12), 2992-3003 (2003).</li><li>Setala, N. L., Metso, J., Jauhiainen, M., Sajantila, A., Holopainen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+symptoms+are+increased+in+mice+deficient+in+phospholipid+transfer+protein+(PLTP).">Dry eye symptoms are increased in mice deficient in phospholipid transfer protein (PLTP).</a> The American Journal of Pathology. 178 (5), 2058-2065 (2011).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mastermind-like+transcriptional+co-activator-mediated+Notch+signaling+is+indispensable+for+maintaining+conjunctival+epithelial+identity.">Mastermind-like transcriptional co-activator-mediated Notch signaling is indispensable for maintaining conjunctival epithelial identity.</a> Development. 140 (3), 594-605 (2013).</li><li>McCauley, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGFbeta+signaling+inhibits+goblet+cell+differentiation+via+SPDEF+in+conjunctival+epithelium.">TGFbeta signaling inhibits goblet cell differentiation via SPDEF in conjunctival epithelium.</a> Development. 141 (23), 4628-4639 (2014).</li><li>Guo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+surface+pathogenesis+associated+with+precocious+eyelid+opening+and+necrotic+autologous+tissue+in+mouse+with+disruption+of+Prickle+1+gene.">Ocular surface pathogenesis associated with precocious eyelid opening and necrotic autologous tissue in mouse with disruption of Prickle 1 gene.</a> Experimental Eye Research. 180, 208-225 (2019).</li></ol>

Um lembrete crítico para a preparação do globo ocular intacto é que todos os ossos orbitais devem ser removidos completamente, especialmente os ossos da juga e lacrimal, que são pequenos e localizados perto do fundo do soquete do olho. Qualquer osso esquerdo pode complicar a histologia que se seguiu. No caso de um pequeno pedaço de osso não foi completamente removido da dissecção por acidente, ele pode ser retirado do bloco de parafina incorporação usando um par de sharptweezers. O furo deixado para trás deve...

A superfície da ocular consiste em uma folha contínua do epitélio regionalizada que inclui a conjuntiva palpebral, a conjuntiva bulbar e a córnea1. Muitas estruturas glandulares estão associadas ao epitélio da superfície ocular e, juntas, geram uma camada de película lacrimal protegendo a superfície da córnea da secagem e das invasões ambientais2. O rompimento do ósmio conduziria ao keratitis, à conjuntivite ou aos ambos (Keratoconjunctivitis). Tanto os fatores genéticos quanto os irritantes ambientais ou suas interações contribuem para alterações patológicas do sistema operacional3,4. Assim, uma variedade de modelos animais geneticamente modificados e fisicamente ou quimicamente induzida têm sido usados para estudar os processos de doença do sistema operacional humano.
A estrutura e a função do ósmio do rato são similares àquela dos seres humanos em muitas maneiras. Os componentes da película do rasgo secretado pelas glândulas da ocular são igualmente similares entre ratos e seres humanos. Uma riqueza de estudos foi conduzida usando modelos do rato para elucidar mecanismos de doenças humanas do ósmio5,6,7. Em muitas ocasiões, é fundamental analisar global em vez de mudanças moleculares locais do sistema operacional para obter informações abrangentes o mesmo tratamento experimental. Portanto, a preparação da amostra com boa integridade é necessária para garantir que cada parte do sistema operacional seja analisada simultaneamente.
O ósmio do rato associa firmemente com o globo ocular que foi encaixado no soquete/órbita do olho (um copo ósseo feito de diversos ossos diferentes do crânio) e conecta-lhe com os tecidos conexivos finos. Existem enormes desafios para dissecação da superfície ocular inteira sem danificar a conjuntiva palpebral ou bulbar. Estes desafios descem de: (i) o OS é macio e fino e afixado às pálpebras e ao globo ocular fisicamente separados contudo móveis, conseqüentemente vulneráveis para a distorção e os danos; e (II) o espaço limitado entre os ossos orbitais e o globo ocular restringem as operações de dissecção. Os desafios são muito maiores para o rato adulto. No rato embrionário, a ossificação orbital do osso não é completa e os tecidos circunvizinhos são frouxos relativos8. A cabeça pode ser removida e cortada e, em seguida, submetida diretamente à fixação de paraformaldeído (PFA) e incorporação9. Pelo contraste, os ossos orbitais pós-natal e adultos do rato são totalmente ossificados com os tecidos circunvizinhos grossos, fazendo a penetração dos fixadores menos eficientes. Além disso, os ossos orbitais/crânio são duros e quebradiços, facilmente quebrados quando seccionando-os nos compostos de incorporação macios tais como a parafina. Os pedaços quebrados de ossos, por unanimidade, rasgar os tecidos próximos, resultando em morfologia do tecido inferior.
Muitos estudos publicados mostraram frequentemente a superfície parcial da ocular, que pode ser suficiente para suas finalidades particulares da pesquisa10,11. Uma examinação bruta das literaturas encontrou somente poucos estudos que mostram a superfície intacta inteira da ocular que está sendo demonstrada sem descrição detalhada de protocolos12,13da dissecção. Neste protocolo, nós detalhamos um método da dissecção para obter a superfície pós-natal integral da ocular, em que os ossos orbitais e do crânio foram removidos ordenadamente, deixando a superfície intocada da ocular junto com o globo ocular e as pálpebras, minimizando os danos físicos. Nós examinamos mais a histologia do ósmio e executámos immunohistochemistry usando as seções do tecido preparadas com este protocolo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1&#215; Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Transgen Biotech</td>
			<td>FG701-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml centrifuge tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive microscope slides</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen/Life Technologies</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Suggested concentration 1:500 - 1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 568 Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen/Life Technologies</td>
			<td>A12380</td>
			<td>Suggested concentration 1:500 - 1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-K12 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab124975</td>
			<td>Suggested concentration 1:1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-K14 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab7800</td>
			<td>Suggested concentration 1:800</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slide</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope.</td>
			<td>Olmpus</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>AxioImager.Z2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount-G Mounting media</td>
			<td>SouthernBiotech</td>
			<td>0100-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro dissecting scissors-straight blade</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave ovens</td>
			<td>Galanz</td>
			<td>P70D20TL-D4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse strains</td>
			<td>C57/BL6 and Sv129 mixed</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No.4 straight forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501978-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>Prepare a 4% solution in 1&#215; PBS and filter with 0.45&#956;m filter membrane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trisodium citrate</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SLBW6818</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of intact eyeball to obtain integral ocular surface tissue for histological examination and immunohistochemistry

A superfície ocular (OS) consiste em uma folha epitelial com três partes conectadas: conjuntiva palpebral, conjuntiva bulbar e epitélio corneano. O rompimento do ósmio conduziria ao keratitis, à conjuntivite ou aos ambos (Keratoconjunctivitis). Em modelos animais experimentais com certas modificações genéticas ou operações artificiais, é útil examinar todas as partes da folha epitelial do so para avaliar as alterações patogenéticas relativas de cada parte em paralelo. Entretanto, a dissecção do tecido do ósmio como um todo sem distorção ou dano foi desafiando, primeiramente devido à suavidade e à magreza do ósmio afixada às pálpebras e ao globo ocular fisicamente separados contudo móveis. Adicionalmente, o soquete profundo do olho dado forma pelos ossos duros do crânio/orbital é ocupado inteiramente pelo globo ocular que sae do espaço limitado para dissecções operando-se. Em conseqüência, a dissecção direta do globo ocular com OS tecidos associados do ósmio do lado facial conduziria frequentemente aos danos do tecido, especial a conjuntiva palpebral e bulbar. Neste protocolo, nós descrevemos um método para remover o crânio e os ossos orbitais sequencialmente de uma cabeça de rato cortada pelo, deixando as pálpebras, a superfície da ocular, a lente e o retina completamente em uma parte. A integridade da folha do sistema operacional foi bem preservada e pode ser examinada por histologia ou imunocoloração em uma única seção.

Os principais ossos do crânio vistos a partir de diferentes perspectivas foram ilustrados na Figura 1A-E, com cores que denitavam diferentes ossos. Utilizamos animais de quatro semanas de idade para demonstração dos processos de dissecção. Depois das etapas de dissecção 1.1.1-1.1.3 e de uma pré-fixação curta (etapa 1.1.4), o globo ocular com os ossos faciais associados é demonstrado na Figura 1...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Intact Eyeball to Obtain Integral Ocular Surface Tissue for Histological Examination and Immunohistochemistry at JoVE.com

Isolation of Intact Eyeball to Obtain Integral Ocular Surface Tissue for Histological Examination and Immunohistochemistry

Este protocolo descreve um método para o isolamento do globo ocular do rato com pálpebra, superfície ocular, segmentos anterior e posterior em posição relativamente intacta.

Isolação do globo ocular intacto para obter o tecido integral da superfície da ocular para a examinação histológica e immunohistochemistry

Ocular surface (OS) consists of an epithelial sheet with three connected parts: palpebral conjunctiva, bulbar conjunctiva and corneal epithelium. ...

Nosso laboratório se concentra no desenvolvimento ocular e nas doenças. Este protocolo descreve um método para remover o crânio e os ossos orbitais sequencialmente da cabeça do rato dissecado. Deixando pálpebras, superfície ocular, lente, e a retina juntas inteiras. O protocolo beneficiará oftalmologistas interessados em didática de superfície ocular. Eu sou Dianlel Guo, para dizer a técnica com uma luta provável ao tentar evitar o dano do globo ocular, enquanto disseca os ossos faciais. A principal vantagem desta questão de dissecção é que a integridade da folha epitelial da superfície ocular está bem preservada e as diferentes partes da superfície ocular podem ser examinadas por histologia ou imunosmuntaining em uma única seção. Certifique-se de cortar todos os pequenos ossos e detritos dos tecidos moles. Razão, causará marcas de cicatrizes na seção de tecido caso contrário. Depois de eutanásia do rato, use um par de tesouras retas para cortar a cabeça e bissectá-la ao longo da linha média sagital começando no osso intraparietal rostrally até o nasal. Coloque cada metade da cabeça bisseccionada em uma placa de petri limpa e use uma tesoura afiada para cortar a mandíbula e a língua. Liberte o nervo óptico cortando-o do cérebro antes da localização do quiasmo óptico. E remova todos os tecidos cerebrais, incluindo a lâmpada olfativa, que está presa à parede do crânio. Agora todos os tecidos restantes devem ter todo o crânio e ossos orbitais associados com o globo ocular. Lave as partes restantes com PBS para limpar qualquer sangue e detritos capilares. Pré-fixar os tecidos colocando-os em um tubo de 50 mililitros contendo 4% de paraformaldeído e girando-os à temperatura ambiente. Depois que a prefixação estiver completa, lave rapidamente a cabeça dissecada no PBS três vezes para eliminar ainda mais os cabelos e fixações quebrados. Coloque o tecido em uma placa de petri de 10 centímetros e corte o crânio em três partes ao longo dos planos indicadas na figura um do protocolo de texto. O globo ocular e a tomada estão escondidos na parte média do crânio sob ossos ethmóides, frontais e maxilais. Use dois pares de fórceps retos número quatro para descascar o osso ethmóide e expor totalmente os ossos frontal e maxilar. Então, divida geograficamente a superfície do crânio em quatro áreas. Insira a ponta das fórceps curvas horizontalmente em cada área para remover os ossos maxilares e frontais sequencialmente. Depois disso, os ossos lacrimais e jugais subjacentes serão expostos. Remova os dois ossos e os músculos subcutâneos associados e gorduras ao redor do globo ocular. Corte o globo ocular com pálpebras presas e pele em um pequeno bloco quadrado para reduzir o volume do tecido e facilitar a orientação do tecido ao incorporar. Coloque o globo ocular e os tecidos associados de volta em 4% de paraformaldeído e continue a fixar durante a noite às 4

Research

JoVE Journal

Biology

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

Actina Ensaio Co Sedimentação; para a Análise da proteína de ligação a F-Actina

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

Biologia

Production of Tissue Microarrays, Immunohistochemistry Staining and Digitalization Within the Human Protein Atlas

Produção de Microarrays Tecido, de coloração imuno-histoquímica e de digitalização Dentro do Atlas proteína humana

The  tissue microarray (TMA) technology provides the means for high-throughput  analysis of multiple tissues and cells. The technique is used within the ...

Avidity-based Extracellular Interaction Screening (AVEXIS) for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Avidity-based Extracellular Interaction Screening AVEXIS for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Avidez baseado Triagem Interação Extracelular (AVEXIS) para a detecção escalável de baixa afinidade Extracelular receptor-ligante Interações

Extracellular protein:protein interactions between secreted or membrane-tethered proteins are critical for both initiating intercellular communication and ...

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

Isolamento e diferenciação de células estromais vasculares para Células Bege / Brite

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Dissection of the Auditory Bulla in Postnatal Mice: Isolation of the Middle Ear Bones and Histological Analysis

Dissecção da Auditivo Bulla em ratos pós-natais: Isolamento dos ossos do ouvido médio e da análise histológica

In most mammals, auditory ossicles in the middle ear, including the malleus, incus and stapes, are the smallest bones. In mice, a bony structure called ...

Histological-Based Stainings Using Free-Floating Tissue Sections

Coloração histológica usando seções de tecido flutuantes livres

Immunohistochemistry is a widely used technique to visualize specific tissue structures as well as protein expression and localization. Two alternative ...

Isolation and Characterization of Intact Phycobilisome in Cyanobacteria

Isolamento e Caracterização de Ficobilisome intacto em cianobactérias

In cyanobacteria, phycobilisome is a vital antenna protein complex that harvests light and transfers energy to photosystem I and II for photochemistry. ...

Isolation and Analysis of Traceable and Functionalized Extracellular Vesicles from the Plasma and Solid Tissues

Isolamento e Análise de Vesículas Extracelulares Rastreáveis e Funcionalizadas do Plasma e Tecidos Sólidos

Circulating and tissue-resident extracellular vesicles (EVs) represent promising targets as novel theranostic biomarkers, and they emerge as important ...

Isolation, Characterization, and Therapeutic Application of Extracellular Vesicles from Cultured Human Mesenchymal Stem Cells

Isolamento, Caracterização e Aplicação Terapêutica de Vesículas Extracelulares a partir de Células-Tronco Mesenquimais Humanas Cultivadas

Extracellular vesicles (EVs) are heterogeneous membrane nanoparticles released by most cell types, and they are increasingly recognized as physiological ...

Efficient and Consistent Generation of Retinal Pigment Epithelium/Choroid Flatmounts from Human Eyes for Histological Analysis

Geração eficiente e consistente de epitélio/coroide de pigmento da retina a partir de olhos humanos para análise histológica

The retinal pigment epithelium (RPE) and retina are functionally and structurally connected tissues that work together to regulate light perception and ...