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•
08:27 min
March 11th, 2020
DOI :
10.3791/60113-v
Chapters
0:04
Introduction
0:28
Autofluorescence Correction
1:48
Bouton Search
3:19
Glutamate Release and Clearance Visualization
4:49
Off-Line Glutamate Transient Construction and Rapid Glutamate Release and Clearance Assessment
6:01
Results: Representative Identification of Dysfunctional Synapses in Q175 Mice with a Hypokinetic Phenotype
7:51
Conclusion
Transcript
高速グルタミン酸センサーを発現する単一シナプスの高解像度イメージングにより、送信機の放出と取り込みの局所的な不一致を検出できます。疾患の場合、この方法は、機能不全シナプスを同定するために使用することができる。自己蛍光補正のために、まず、目的のマウスから脳スライスを1光子顕微鏡の記録室に入れる。
スライスを酸素化された人工脳脊髄液に浸漬し、20倍の水浸漬目的を使用して、後部線条体を見つけます。ティッシュの動きを最小にするためにプラチナハープのナイロングリッドでスライスを固定し、6
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Summary
我々は、単一のコルチコストリアタールグルタミン酸シナプスにおけるグルタミン酸放出とクリアランスのバランスを、成体マウスからの急性スライスにおける評価するプロトコルを提示する。このプロトコルは、グルタミン酸検出用の蛍光センサ iGluu、信号取得用のsCMOSカメラ、焦点レーザー照明装置を使用します。
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