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•
09:18 min
September 17th, 2019
DOI :
10.3791/60133-v
Chapters
0:04
Title
0:40
Protease Inhibitor Administration
1:31
Tissue Acquisition and Biochemical Fractionation
5:10
Western Blotting
6:48
Data Analysis
8:06
Results: Representative Experimental Flux Results
8:36
Conclusion
Transcript
我们的协议允许测量小鼠组织中自噬和蛋白酶活性的速率,并且足够灵敏,可以检测这些活动中的昼夜变化。该技术可用于体内评估细胞和组织中的蛋白质代谢,所需的材料相对较低,可供任何分子生物学实验室使用。演示这个程序的将是米哈伊尔·雷日科夫,一个来自我实验室的博士后。
在每个时间点前十五分钟,将利普蛋白和波特佐米布库存溶液加热至室温,并稀释无菌 PBS 中解冻的 bortezomib,以产生每毫升 50 毫克的工作溶液。对于蛋白酶抑制剂给药,内向每千克利普蛋白注射40毫克或每公斤1.6微克
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Summary
我们描述了我们通过自噬和小鼠肝脏蛋白体体来测量蛋白质代谢的生物节律的规程。
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