Name: differentiation of mouse breast epithelial hc11 and eph4 cells
Uploaded: 2020-02-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Differentiation of Mouse Breast Epithelial HC11 and EpH4 Cells at JoVE.com

وتكرم د. د. مدينا (هيوستن، تكساس) بتوفير خط الخلايا HC11. المؤلفون ممتنون للدكتور أندرو كريغ من جامعة كوينز للعديد من الكواشف والاقتراحات القيمة. كانت خلايا EpH4 هدية من الدكتور سي روسكيلي (UBC ، فانكوفر). قدمت كولين شيك مساعدة تقنية ممتازة لدراسات الثقافة ثلاثية الأبعاد.
المساعدة المالية من مجلس البحوث الطبيعية والهندسية في كندا ( NSERC ) ، المعاهد الكندية للبحوث الصحية (CIHR) ، المؤسسة الكندية لسرطان الثدي (CBCF ، أونتاريو ) ، التحالف الكندي لأبحاث سرطان الثدي ، ومراكز أونتاريو للتميز، وسرطان الثدي العمل كينغستون (BCAK) وصندوق كلير نيلسون الوصية من خلال المنح إلى LR هو موضع تقدير بامتنان. كن تتلقى منحة الدعم من CIHR، CBCF، BCAK وجمعية أبحاث السرطان شركة PTG بدعم من رئيس البحوث الكندية، والمؤسسة الكندية للابتكار، CIHR، NSERC وجمعية السرطان الكندية. تم دعم MN من قبل الطلاب من برنامج تدريب تيري فوكس في أبحاث السرطان عبر التخصصات من NCIC، وجائزة الدراسات العليا (QGA)، وجائزة عميد من جامعة كوينز. تم دعم MG من خلال زمالات ما بعد الدكتوراه من برنامج الجيش الأمريكي لسرطان الثدي، ووزارة البحث والابتكار في مقاطعة أونتاريو ولجنة البحوث الاستشارية في جامعة كوينز. تم دعم VH من خلال زمالة الدكتوراه CBCF وزمالة ما بعد الدكتوراه من برنامج تدريب مؤسسة تيري فوكس في أبحاث السرطان عبر التخصصات بالشراكة مع CIHR. كان هاناد دان متلقياً لطالب صيفي من NSERC. تم دعم البكالوريس من قبل جائزة الدراسات العليا في جامعة كوينز.

1. طلاء خلايا HC11
<ol><li>في غطاء تدفق لامينار باستخدام تقنيات معقمة إعداد زجاجة مع 50 مل من وسط الخلية HC11: RPMI-1640 مع 10٪ مصل الأبقار الجنين (FBS)، 5 ميكروغرام / مل الأنسولين، و 10 نانوغرام / مل EGF (انظر جدول المواد).</li>
	<li>لوحة ما يقرب من 400،000 خلية لكل 3 سم طبق بيتري: تمرير اثنين من 10 سم، 50٪ أطباق بي...

<ol>
	<li>Geletu, M., Guy, S., Arulanandam, R., Feracci, H., Raptis, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engaged+for+survival;+from+cadherin+ligation+to+Stat3+activation.">Engaged for survival; from cadherin ligation to Stat3 activation.</a> Jaks-Stat. 2, 27363-27368 (2013).</li><li>Niit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+HC11+mouse+breast+epithelial+cell+differentiation+by+the+E-cadherin/Rac+axis.">Regulation of HC11 mouse breast epithelial cell differentiation by the E-cadherin/Rac axis.</a> Experimental Cell Research. 361 (1), 112-125 (2017).</li><li>Ball, R. K., Friis, R. R., Schoenenberger, C. A., Doppler, W., Groner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolactin+regulation+of+beta-casein+gene+expression+and+of+a+cytosolic+120-kd+protein+in+a+cloned+mouse+mammary+epithelial+cell+line.">Prolactin regulation of beta-casein gene expression and of a cytosolic 120-kd protein in a cloned mouse mammary epithelial cell line.</a> The EMBO Journal. 7 (7), 2089-2095 (1988).</li><li>Humphreys, R. C., Rosen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stably+transfected+HC11+cells+provide+an+in+vitro+and+in+vivo+model+system+for+studying+Wnt+gene+function.">Stably transfected HC11 cells provide an in vitro and in vivo model system for studying Wnt gene function.</a> Cell growth &amp; differentiation. 8 (8), 839-849 (1997).</li><li>Merlo, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=differentiation+and+survival+of+HC11+mammary+epithelial+cells:+diverse+effects+of+receptor+tyrosine+kinase-activating+peptide+growth+factors.">differentiation and survival of HC11 mammary epithelial cells: diverse effects of receptor tyrosine kinase-activating peptide growth factors.</a> European Journal of Cell Biology. 70 (2), 97-105 (1996).</li><li>Wirl, G., Hermann, M., Ekblom, P., Fassler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+epithelial+cell+differentiation+in+vitro+is+regulated+by+an+interplay+of+EGF+action+and+tenascin-C+downregulation.">Mammary epithelial cell differentiation in vitro is regulated by an interplay of EGF action and tenascin-C downregulation.</a> Journal of Cell Science. 108, 2445-2456 (1995).</li><li>Arbeithuber, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin+5+expression+in+mouse+mammary+gland+cells+is+not+driven+by+promoter+methylation.">Aquaporin 5 expression in mouse mammary gland cells is not driven by promoter methylation.</a> BioMed Research International. 2015, 460598 (2015).</li><li>Morrison, B., Cutler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Mammary+Epithelial+Cells+form+Mammospheres+During+Lactogenic+Differentiation.">Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1265 (2009).</li><li>Merlo, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+suppression+of+normal+mammary+epithelial+cells+by+wild-type+p53.">Growth suppression of normal mammary epithelial cells by wild-type p53.</a> Oncogene. 9, 443-453 (1994).</li><li>Reichmann, E., Ball, R., Groner, B., Friis, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+mammary+epithelial+and+fibroblastic+cell+clones+in+coculture+form+structures+competent+to+differentiate+functionally.">New mammary epithelial and fibroblastic cell clones in coculture form structures competent to differentiate functionally.</a> Journal of Cell Biology. 108 (3), 1127-1138 (1989).</li><li>Somasiri, A., Wu, C., Ellchuk, T., Turley, S., Roskelley, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+is+required+for+adherens+junction-dependent+mammary+epithelial+cell+spheroid+formation.">Phosphatidylinositol 3-kinase is required for adherens junction-dependent mammary epithelial cell spheroid formation.</a> Differentiation. 66 (2-3), 116-125 (2000).</li><li>Mroue, R., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+cultures+of+mouse+mammary+epithelial+cells.">Three-dimensional cultures of mouse mammary epithelial cells.</a> Methods in Molecular Biology. 945, 221-250 (2013).</li><li>Williams, C., Helguero, L., Edvardsson, K., Haldosen, L. A., Gustafsson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+in+murine+mammary+epithelial+stem+cell-like+cells+shows+similarities+to+human+breast+cancer+gene+expression.">Gene expression in murine mammary epithelial stem cell-like cells shows similarities to human breast cancer gene expression.</a> Breast Cancer Research. 11 (3), 26 (2009).</li><li>Montesano, R., Soriano, J. V., Fialka, I., Orci, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+EpH4+mammary+epithelial+cell+subpopulations+which+differ+in+their+morphogenetic+properties.">Isolation of EpH4 mammary epithelial cell subpopulations which differ in their morphogenetic properties.</a> In Vitro Cellular &amp; Developmental Biology - Animal. 34 (6), 468-477 (1998).</li><li>Nagaoka, K., Zhang, H., Watanabe, G., Taya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+cell+differentiation+regulated+by+MicroRNA-200a+in+mammary+glands.">Epithelial cell differentiation regulated by MicroRNA-200a in mammary glands.</a> PLoS One. 8 (6), 65127 (2013).</li><li>Arulanandam, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cadherin-cadherin+engagement+promotes+survival+via+Rac/Cdc42+and+Stat3.">Cadherin-cadherin engagement promotes survival via Rac/Cdc42 and Stat3.</a> Molecular Cancer Research. 17, 1310-1327 (2009).</li><li>Geletu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+cadherins+control+survival+through+the+gp130/Stat3+axis.">Classical cadherins control survival through the gp130/Stat3 axis.</a> BBA-Molecular Cell Research. 1833, 1947-1959 (2013).</li><li>Raptis, L., Arulanandam, R., Geletu, M., Turkson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+R(h)oads+to+Stat3:+Stat3+activation+by+the+Rho+GTPases.">The R(h)oads to Stat3: Stat3 activation by the Rho GTPases.</a> Experimental Cell Research. 317 (13), 1787-1795 (2011).</li><li>Raptis, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+structure,+to+survival:+Stat3+activation+by+cadherin+engagement.">Beyond structure, to survival: Stat3 activation by cadherin engagement.</a> Biochemistry and Cell Biology. 87, 835-843 (2009).</li><li>Niit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+Differentiation+of+HC11+Mouse+Breast+Epithelial+Cells+by+the+Signal+Transducer+and+Activator+of+Transcription-3.">Regulation of Differentiation of HC11 Mouse Breast Epithelial Cells by the Signal Transducer and Activator of Transcription-3.</a> Anticancer Research. 39 (6), 2749-2756 (2019).</li><li>Brinkmann, V., Foroutan, H., Sachs, M., Weidner, K. M., Birchmeier, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatocyte+growth+factor/scatter+factor+induces+a+variety+of+tissue-specific+morphogenic+programs+in+epithelial+cells.">Hepatocyte growth factor/scatter factor induces a variety of tissue-specific morphogenic programs in epithelial cells.</a> Journal of Cell Biology. 131, 1573-1586 (1995).</li><li>Starova, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Role of cell adhesion microevironment and the Src/Stat3 axis in autocrine HGF signaling during breast tumourigenesis. , (2008).</li><li>Raptis, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rasleu61+blocks+differentiation+of+transformable+3T3+L1+and+C3HT1/2-derived+preadipocytes+in+a+dose-+and+time-dependent+manner.">Rasleu61 blocks differentiation of transformable 3T3 L1 and C3HT1/2-derived preadipocytes in a dose- and time-dependent manner.</a> Cell Growth &amp; Differentiation. 8, 11-21 (1997).</li><li>Greer, S., Honeywell, R., Geletu, M., Arulanandam, R., Raptis, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Housekeeping+gene+products;+levels+may+change+with+confluence+of+cultured+cells.">Housekeeping gene products; levels may change with confluence of cultured cells.</a> Journal of Immunological Methods. 355, 76-79 (2010).</li><li>Vultur, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+to+cell+adhesion+modulates+Stat3+activity+in+normal+and+breast+carcinoma+cells.">Cell to cell adhesion modulates Stat3 activity in normal and breast carcinoma cells.</a> Oncogene. 23, 2600-2616 (2004).</li><li>Debnath, J., Muthuswamy, S. K., Brugge, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphogenesis+and+oncogenesis+of+MCF-10A+mammary+epithelial+acini+grown+in+three-dimensional+basement+membrane+cultures.">Morphogenesis and oncogenesis of MCF-10A mammary epithelial acini grown in three-dimensional basement membrane cultures.</a> Methods. 30 (3), 256-268 (2003).</li><li>Lee, G. Y., Kenny, P. A., Lee, E. H., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+models+of+normal+and+malignant+breast+epithelial+cells.">Three-dimensional culture models of normal and malignant breast epithelial cells.</a> Nature Methods. 4 (4), 359-365 (2007).</li><li>Hoskin, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A novel regulatory role of Ezrin in promoting breast cancer cell invasion and metastasis. , (2015).</li><li>Su, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+confluence-induced+activation+of+signal+transducer+and+activator+of+transcription-3+(Stat3)+triggers+epithelial+dome+formation+via+augmentation+of+sodium+hydrogen+exchanger-3+(NHE3)+expression.">Cell confluence-induced activation of signal transducer and activator of transcription-3 (Stat3) triggers epithelial dome formation via augmentation of sodium hydrogen exchanger-3 (NHE3) expression.</a> Journal of Biological Chemistry. 282 (13), 9883-9894 (2007).</li><li>Ostrovidov, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+tissue+engineering:+methods+to+form+skeletal+myotubes+and+their+applications.">Skeletal muscle tissue engineering: methods to form skeletal myotubes and their applications.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 20 (5), 403-436 (2014).</li><li>Cass, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Novel Stat3 and Stat5 pathways in epithelial cell differentiation. , (2013).</li></ol>

خلايا HC11 مناسبة بشكل مثالي لدراسة التمايز بالتزامن مع التحول النيوبلاستيك. وتتمثل الميزة المضافة في أن خلايا HC11 يمكن أن تصيب بسهولة بناقلات الفيروسات الرجعية المستندة إلى Mo-MLV للتعبير عن مجموعة متنوعة من الجينات. في أيدينا، كانت خلايا EpH4 أكثر صعوبة لتصيب بنفس ناقلات الفيروسات الرجعية من H...

في الأنسجة العادية أو الأورام ، والخلايا لديها فرص واسعة للالتصاق لجيرانها في منظمة ثلاثية الأبعاد ، وهذا يحاكي في الثقافة من قبل نمو الخلايا عالية الكثافة. يتم التوسط في الالتصاق من خلية إلى خلية بشكل رئيسي من خلال مستقبلات الكادهيرين ، والتي تحدد بنية الخلايا والأنسجة. ومن المثير للاهتمام، وقد ثبت مؤخرا أن الكاديرين تلعب أيضا دورا قويا في نقل الإشارات، وخاصة في البقاء على قيد الحياة إشارة1. ومن المفارقات أن بعض إشارات الالتصاق من الخلية إلى الخلية الصادرة من الكادهيرين وجدت مؤخراً أن كل من التمايز والأورام2مشتركة. هنا، ونحن نصف أساليب التعريفي وتقييم التمايز في نوعين تمثيليين من خطوط الخلايا الظهارية الثدي الماوس، HC11 وEpH4.
يمكن أن يوفر خط الخلية الظهارية للثدي من طراز HC11 نموذجًا مفيدًا لدراسة تمايز الخلايا الظهارية. خلايا HC11 هي خط خلية مشتق من COMMA-1D ، منتقاة من الغدة الثديية لفأرة Balb/c 3 الحامل متوسطةالحمل. على النقيض من غيرها من المستنسخين المشتقة COMMA-1D ، فإن استنساخ HC11 ليس لديه أي شرط لمصفوفة خارج الخلية المضافة أو الزراعة المشتركة مع أنواع الخلايا الأخرى للتحريض المختبري لجين اللاكسين الذاتي ة الذاتية بواسطة الهرمونات اللاكتراجينية3. وقد استخدم هذا الخط الخلية على نطاق واسع في دراسات التمايز لأنه احتفظ بخصائص هامة للظهارة الثديية العادية: يمكن لخلايا HC11 إعادة تشكيل ظهارة القناة جزئيًا فيوسادةالدهون الثديية 4 . وعلاوة على ذلك، فإنها يمكن أن تميز في ثقافة ثنائية الأبعاد (2D) عندما نمت إلى التقاء تعلق على سطح طبق بيتري البلاستيك في وجود الستيرويد مثل H ydrocortisone أو ديكساميثازون، بالإضافة إلى أناnsulin و P rolactin (HIP المتوسطة) تفتقر إلى عامل نمو البشرة (EGF)، وهو مثبط للتمايز 5،6،7. في ظل هذه الظروف، تنتج خلايا HC11 بروتينات الحليب مثل الفيسين والواب، والتي يمكن اكتشافها عن طريق النشاف الغربي في غضون 4 أيام بعد الحث. في الوقت نفسه ، يشكل جزء من خلايا HC11 هياكل بدائية تشبه الغدة الثديية يطلق عليها "القباب" بطريقة عشوائية. القباب مرئية 4-5 أيام بعد الاستقراء وزيادة تدريجية في الحجم حتى اليوم 10، بالتزامن مع زيادة في إنتاج الكيسينα 8. ومن المثير للاهتمام، خلايا HC11 تمتلك متحولة p539،وبالتالي تمثل حالة preneoplastic. لهذا السبب، فإن نموذج HC11 مناسب بشكل مثالي لدراسة إشارات شبكات التمايز بالاقتران مع الأورام في نفس نظام الخلية.
خلايا EpH4 ، وهي مشتقة من خلايا IM-2 ، هي خط خلية غير مورم مشتق في الأصل من خلايا الغدة الثديية الماوس الخالدة تلقائيًا المعزولة عن الفأر ة Balb /c متوسطة الحمل10. تشكل خلايا EpH4 أحادية ظهارية مستمرة في ثقافة ثنائية الأبعاد ، ولكنها لا تفرق إلى هياكل تشبه الغدية10،11. ومع ذلك، بعد نمو 3D في مادة تتكون من خليط من البروتينات مصفوفة خارج الخلية التي تنتجها خلايا ساركوما الماوس EHS12 (مصفوفة EHS، مصفوفة، أو Matrigel، انظر جدول المواد)،بالإضافة إلى التحفيز مع HIP، يمكن لخلايا EpH4 تلخيص المراحل الأولية للتمايز الغدة الثديية. في ظل هذه الظروف، تشكل خلايا EpH4 كرويات (تسمى أيضًا الغلاف الشعاعي للثدي) التي تحمل قطبية أبوية والقاعدية وتجويف أجوف، وهي قادرة على إنتاج بروتينات الحليب α-casein و WAP، على غرار الخلايا الظهارية الثديية المرضعة. على عكس خلايا HC11 ، والتي هي غير متمايزة ، وبعض علامات mesenchymal التعبير13، EpH4 الخلايا يحمل مورفولوجيا مضيئة بحتة14. وقد أفيد أيضا خلايا EpH4 لإنتاج بروتينات الحليب في ثقافة 2D من خلال التحفيز مع ديكساميثازون, الأنسولين, والبرولاكتين15. ومع ذلك، فإن هذا النهج يمنع دراسة الآثار التنظيمية التي تحاكي البيئة الدقيقة للغدة الثديية في الثقافة ثلاثية الأبعاد.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30% Acrylamide/0.8% Bis Solution</td>
			<td>Bio Rad</td>
			<td>1610154</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Cyclin D1 antibody</td>
			<td>rabbit, Santa Cruz</td>
			<td>sc-717</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-p120 antibody</td>
			<td>mouse, Santa Cruz</td>
			<td>sc-373751</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946; actin antibody</td>
			<td>mouse, Cell Signalling technology</td>
			<td>3700</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946; casein antibody</td>
			<td>goat, Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-17971</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aprotinin</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>APR600</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bicinchoninic Acid Solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B9643-1L-KC</td>
			<td>Protein Determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>ALB007.500</td>
			<td>Protein Determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Western ECL Substrate</td>
			<td>Bio Rad</td>
			<td>170-5061</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper(II) sulphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C2284-25ML</td>
			<td>Protein Determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td>Staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digitonin</td>
			<td>Calbiochem, Cedarlane Laboratories Ltd</td>
			<td>14952-500</td>
			<td>Staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>EDT001.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal Growth Factor</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>Medium for HC11 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal calf serum</td>
			<td>PAA</td>
			<td>A15-751</td>
			<td>Cell Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat- Anti Rabbit-HRP</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>SC-2004</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepatocyte Growth Factor recombinant</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>PHG0321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepes</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7365-45-9</td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse Anti-Mouse HRP</td>
			<td>Cell Signalling Technology</td>
			<td>7076</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H0888</td>
			<td>HIP Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I6634</td>
			<td>HIP Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar-flow hood</td>
			<td>BioGard Hood</td>
			<td></td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leupeptin</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>LEU001.10</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrix (Engelbreth-Holm-Swarm matrix, Matrigel)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CACB 354230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Anti-Goat HRP</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-8360</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 4-88 Reagent</td>
			<td>Calbiochem, Cedarlane Laboratories Ltd</td>
			<td>475904-100GM</td>
			<td>Staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-photon confocal microscope</td>
			<td>Leica TCS SP2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na3VO4</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>SOV850</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na4P207</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>125F-0262</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>SOD001.1</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaF</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>7681-49-4</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon digital Camera</td>
			<td>Coolpix 995</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrocellulose</td>
			<td>Bio Rad</td>
			<td>1620112</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9016-45-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>30525-89-4</td>
			<td>Staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phase Contrast Microscope</td>
			<td>Olympus IX70</td>
			<td></td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylmethylsuphonyl fluoride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>329-98-6</td>
			<td>Lysis Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMX GFP Rac G12V</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>14567</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolactin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L6520</td>
			<td>HIP Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R8758</td>
			<td>Cell Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Culture Dish 35</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.3900.</td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Culture Plate-24 well</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.1836.300</td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Apparatus</td>
			<td>CBS Scientific Co</td>
			<td>EBU-302</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Acetate</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>TRA222.500</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9002-07-7.</td>
			<td>Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>Bio Shop</td>
			<td>TWN510.500</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veritical Gel Electrophoresis System</td>
			<td>CBS Scientific Co</td>
			<td>MGV-202-33</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

differentiation of mouse breast epithelial hc11 and eph4 cells

الكادهيرين تلعب دورا هاما في تنظيم التمايز الخلية وكذلك الأورام. هنا نصف أصول وأساليب تحريض التمايز من اثنين من خطوط الخلايا الظهارية الثدي الماوس، HC11 وEpH4، واستخدامها لدراسة المراحل التكميلية لتطوير الغدة الثديية والتحول النيوبلاستيك.
وHC11 الماوس الثدي الظهارية خط الخلية نشأت من الغدة الثديية من حبل الحمل / ج الماوس. فإنه يميز عندما نمت إلى التقاء تعلق على سطح طبق بيتري البلاستيك في المتوسط التي تحتوي على مصل ربلة الساق الجنين وHydrocortisone، أناnsulin وProlactin (HIP المتوسطة). في ظل هذه الظروف، تنتج خلايا HC11 بروتينات الحليب α-casein وبروتين مصل اللبن الحمضية (WAP)، على غرار الخلايا الظهارية الثديية المرضعة، وتشكل هياكل بدائية تشبه الغدة الثديية يطلق عليها "القباب".
تم اشتقاق خط الخلية EpH4 من خلايا الغدة الثديية الظهارية للفأر ة الخالدة تلقائيًا والمعزولة عن فأر ة Balb/c الحامل. على عكس HC11، يمكن لخلايا EpH4 أن تفرق بشكل كامل إلى كرويدات (تسمى أيضًا الغلاف الشعاعي للثدي) عندما يتم استزراعها في ظل ظروف نمو ثلاثية الأبعاد (3D) في وسط HIP. الخلايا هي التربس، علقت في مصفوفة 20٪ تتكون من خليط من البروتينات مصفوفة خارج الخلية التي تنتجها Engelbreth-Holm-سرب (EHS) خلايا ساركوما الماوس، مطلي على الجزء العلوي من طبقة من مصفوفة مركزة طلاء طبق بيتري البلاستيك أو لوحة متعددة الآبار، وتغطي مع طبقة من 10٪ المتوسطة HIP التي تحتوي على مصفوفة. في ظل هذه الظروف، تشكل خلايا EpH4 كرويات جوفاء تحمل قطبية أبوية القاعدية، وهي تجويف أجوف، وتنتج الفيسين والواب.
باستخدام هذه التقنيات، أظهرت نتائجنا أن شدة إشارة الكادهيرين/راك أمر بالغ الأهمية للتمايز بين خلايا HC11. في حين أن Rac1 ضروري للتمايز والمستويات المنخفضة من تنشيط RacV12 زيادة التمايز، وارتفاع مستوياتV12 Rac كتلة التمايز في حين حفز الأورام. في المقابل ، تمثل خلايا EpH4 مرحلة مبكرة في التمايز الظهاري mammary ، والذي يتم تثبيطه حتى من خلال مستويات منخفضة من RacV12.

ومن المعروف منذ فترة طويلة أن التمايز من الخلايا الظهارية والخلايا الشحمية يتطلب التقاء والاشتباك من الكاديرين2. نحن وآخرون أظهرنا أن الالتصاق من خلية إلى خلية والاشتباك من E- أو N-cadherin وcadherin-11، كما يحدث مع التقاء الخلايا المستزرعة، يؤدي إلى زيادة كبيرة في نشاط GTPases الصغير وخلي...

Watch this Scientific Journal Video about Differentiation of Mouse Breast Epithelial HC11 and EpH4 Cells at JoVE.com

Differentiation of Mouse Breast Epithelial HC11 and EpH4 Cells

نحن نصف تقنيات الاستقراء التمايز من اثنين من خطوط الظهارية الثدي، HC11 و EpH4. في حين أن كلا تتطلب مصل ربلة الساق الجنين, الأنسولين, والبرولاكتين لإنتاج بروتينات الحليب, خلايا EpH4 يمكن أن تفرق تماما في الغلاف الشعاعي للثدي في ثقافة ثلاثية الأبعاد. وهذه النماذج التكميلية مفيدة لدراسات نقل الإشارات عن التمايز والأورام.

التمايز من الثدي الماوس HC11 وخلايا EpH4

Cadherins play an important role in the regulation of cell differentiation as well as neoplasia. Here we describe the origins and methods of the induction ...

خلايا HC11 وEpH4 هي خطوط خلايا ظهارية الماوس التي يمكن أن تفرق في الثقافة. في الوقت نفسه، يمكن تحويل هذه الخلايا من قبل عدد من الـ أونكوجين. هذه الخلايا هي مثالية لدراسة العلاقة المتبادلة بين التمايز والتحول neoplastic.يمكن استخدام هذه التقنيات في دراسات نقل الإشارات لاكتشاف أهداف لعلاج السرطان. على سبيل المثال، قد تؤدي الـ GTPase Rac الصغيرة والجزيئات الأخرى إلى تحويل خلايا الثدي الظهارية عندما يتم التعبير عنها إلى مستويات عالية، ولكن من المستغرب عند مستويات منخفضة، أنها قد تحفز التمايز. قد يتصرف محولات الإشارة الأخرى بطريقة مماثلة.المبادئ قد تنطبق على أنواع أخرى من التمايز وكذلك عندما التقاء الخلية يلعب دورا هاما، على سبيل المثال التفريق من adipocytes أو myotubes. يجب أن تضع في اعتبارك أن طلاء خلايا HC11 مهم. وهذا لأن الاتصال من خلية إلى خلية مهم للتمايز.نقطة أخرى لمشاهدة هو أن استخراج السليم من الخلايا EpH4 من المصفوفة أمر بالغ الأهمية لكمية البروتين لأن أي بقايا سوف تؤثر على تحديد البروتين. العرض التوضيحي المرئي لهذا الأسلوب مفيد لأن بعض تفاصيل البروتوكول يصعب وصفها على الورق. ابدأ بإعداد زجاجة من 50 ملليلتر من HC11 خلية المتوسطة وفقا لاتجاهات المخطوطات.لطبق الخلايا، وpirate المتوسطة من خمسة ستة سنتيمتر 50٪ التقاء أطباق بيتري وغسل الخلايا مع ما يقرب من 1.8 ملليلتر من التربسين باستخدام القطن تسعة بوصة معقم توصيل الماصات باستور. ثم إضافة 200 ميكرولترات من التربسين في لوحة ودوامة لوحة لإزاحة الخلايا المرفقة. مراقبة الخلايا تحت مرحلة المجهر النقيض مع هدف 4X للتأكد من أنها بدأت في طرد.ثم تطن تقريبا 1.5 ملليلتر من HC11 المتوسطة مع الماصات تسعة بوصة معقمة باستور وبخ عموديا ضد الخلايا أثناء تدوير الطبق مع التأكد من تجنب الرش. نقل جميع الخلايا إلى زجاجة مع HC11 المتوسطة ودوامة لتفريق بالتساوي في زجاجة. ثم aliquot تعليق الخلية في 20 ثلاثة أطباق بيتري سنتيمتر عن طريق الأنابيب مليلتر اثنين من الخلايا في الطبق الواحد.صخرة أطباق بيتري لنشر الخلايا واحتضان لهم في 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون بين عشية وضحاها. في اليوم التالي عندما تكون الخلايا 90 إلى 100٪ التقاء، التعرق المتوسطة واستبدالها مع المتوسطة مع FBS ولكن من دون EGF. بعد زراعة الخلايا في المتوسط دون EGF لمدة 24 ساعة، إضافة متوسطة التمايز إلى 10 أطباق وتنمو الخلايا لمدة تصل إلى 10 أيام حفظ الأطباق 10 الأخرى كضوابط.تغيير المتوسطة كل يومين إلى ثلاثة أيام مع كل من خلايا HIP المعالجة والتحكم. لرصد التمايز، لاحظ الخلايا مع المجهر النقيض المرحلة. استخدم المجهر الفلوري إذا كانت الخلايا تعبر عن البروتين الفلوري الأخضر.بالإضافة إلى ذلك، كمي درجة التمايز عن طريق استخراج البروتينات من الخلايا المعالجة والسيطرة HIP مرة واحدة في اليوم وإجراء تحليل لطخة الغربية. جمع ووضع متوسط النمو EPH4، ومصفوفة EHS، واثنين من أنابيب 50 ملليلتر مخروطية على الجليد. Prechill لوحات ثقافة الأنسجة مع نصائح ماصة في ناقص 20 درجة مئوية وإعداد EpH4 متوسطة النمو تكملها 10 أو 20٪ مصفوفة في اثنين من أنابيب مخروطية 50 ملليلتر والاحتفاظ بها على الجليد حتى جاهزة للاستخدام.بعد استرجاع لوحات ثقافة الأنسجة قبل التلهيل في ناقص 20 درجة مئوية، معطف 10 آبار من لوحة 24-جيدا مع 150 ميكرولترات من مصفوفة غير مخففة عن طريق نشر المصفوفة مع ماصة. تجنب خلق فقاعات عند نشر المصفوفة. ثم اضغط بلطف على جانبي اللوحة واحتضان اللوحة في 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة للسماح للمصفوفة لترسيخ.وفي الوقت نفسه، الاستعداد للتمايز عن طريق التربسينسين الخلايا EpH4 جيدا كما هو موضح سابقا وضمان تعليق خلية واحدة بعد إعادة دمج الخلايا التربسينيه. بعد ذلك، عد الخلايا في التعليق مع جهاز قياس الهيموسيت. نقل خمس مرات 10 إلى الخلايا الأربع في البئر إلى 1.5 ملليلتر أنبوب جهاز طرد مركزي مخروطي معقم وتدور عليها في 250 مرة ز لمدة خمس دقائق.الطامح بعناية المتوسطة فائقة ووضع الأنبوب على الجليد. استخدام تلميح ماصة ملليلتر واحد لإعادة ضغط الخلايا في 350 ميكرولتررس من متوسطة النمو EpH4 تكملها 20٪ مصفوفة مع الحفاظ على أنابيب على الجليد التأكد من تجنب فقاعات. مرة واحدة في طبقة أسفل قد توطدت، إضافة 350 ميكرولترات من تعليق الخلية إلى كل المغلفة جيدا ووضعها في حاضنة ثاني أكسيد الكربون في 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة للسماح 20٪ طبقة مصفوفة لترسيخ.مراقبة الخلايا مع المجهر النقيض من المرحلة للتأكد من خلايا واحدة مرئية. ثم إضافة 200 ميكرولتررس من EpH4 المتوسطة مع 10٪ مصفوفة على رأس واحتضان لوحة في 37 درجة مئوية. بدء التمايز التعريفي يوم واحد بعد طلاء الخلايا في المصفوفة.إزالة بعناية 150 ميكرولتررس من أعلى 10٪ مصفوفة المتوسطة وإضافة 200 ميكرولترات من EpH4 المتوسطة التي تحتوي على HIP و 10٪ مصفوفة ولضوابط إضافة 10٪ مصفوفة المتوسطة دون HIP. استبدال المتوسطة كل يومين لمدة تصل إلى 10 أيام رصد تشكيل ماmosphere مع المجهر النقيض من المرحلة. لتحديد التمايز ، والماصات بعناية قبالة 10 ٪ مصفوفة HIP المتوسطة من الآبار وشطف طبقة 20 ٪ مصفوفة مع 350 ميكرولترات من الجليد البارد PBS.ثم إضافة 70 إلى 100 ميكرولترات من الجليد البارد برنامج تلفزيوني مع EDTA ملليمتر واحد مباشرة في الآبار وفصل بلطف الطبقة السفلية من 100٪ مصفوفة مع طرف ماصة. هز لوحة بلطف في أربع درجات مئوية لمدة 30 دقيقة. نقل بعناية تعليق كروية إلى أنبوب مخروطي وشطف الآبار مع 500 ميكرولتردات من برنامج تلفزيوني EDTA لاسترداد أي كروية المتبقية.صخرة الأنبوب على الجليد لمدة 30 دقيقة إضافية للتأكد من أن المصفوفة يذوب تماما. إذا شوهدت كتل مصفوفة مرئية، أضف المزيد من PBS EDTA أو اهتز لفترة أطول. الطرد المركزي الحل في 350 مرات ز إلى بيليه spheroids.ثم pirate المافق ، وليز الإسفنج ، والتحقيق في الخلايا لبيتا القضي ، cyclin D1 ، وp120RasGAP من قبل النشاف الغربية. هناك اعتماد صارخ على التمايز على قوة إشارة راك في خلايا HC11. في حين أن CRAC1 الذاتية مطلوبة للتمايز والمستويات المنخفضة من RacV12 تنشيط طفرة تسبب زيادة في قدرة التمايز، وارتفاع مستويات RacV12 تؤدي كتلة من التمايز والحث على الأورام.عندما تم استكشاف خصائص التمايز من الخلايا EpH4 في ثقافة مصفوفة 3D، وجد أن إنتاج بيتا القضييين بلغت ذروتها في ثمانية إلى 10 أيام وكان التعبير D1 cyclin القصوى في أربعة إلى ستة أيام بعد التحفيز HIP. لتحديد موضع الخلايا الفردية ، كانت ملطخة DAPI وصورت مع المجهر confocal. ولوحظ موت الخلية الداخلية وتشكيل تجويفات جوفاء في الممومور بينما أدى إضافة HGF إلى تكوين هياكل أنبوبية.يجب أن تضع في اعتبارك أن طلاء خلايا HC11 مهم. أيضا استخراج السليم من الخلايا EpH4 من المصفوفة أمر بالغ الأهمية لكمية البروتين لأن أي بقايا سوف تؤثر على تحديد البروتين. يمكن استخدام هذه التقنية للتحقق من محولات الإشارة الأخرى التي قد تتصرف بطريقة مماثلة.إذا كان هناك طفرات السائق في السرطان، ثم تثبيط كامل لن يكون ضروريا لأن المستويات المنخفضة المتبقية من شأنه أن يؤدي في الواقع التمايز.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Synthesis and Characterization of an Aspirin-fumarate Prodrug that Inhibits NF&#954;B Activity and Breast Cancer Stem Cells

توليف وتوصيف للدواء مساعد الأسبرين-فومرت أن يمنع آخر عامل نووي معزز لسلسلة ضوء كابا في الخلايا البائية النشطة والثدي خلايا السرطان الجذعية

Inflammation is a cancer hallmark that underlies cancer incidence and promotion, and eventually progression to metastasis. Therefore, adding an ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

السلوك الغازية من خلايا سرطان الثدي البشرية في الجنينية الزرد

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Live-imaging of Breast Epithelial Cell Migration After the Transient Depletion of TIP60

يعيش-تصوير الثدي الخلايا الظهارية الهجرة بعد استنفاد عابر TIP60

The wound-healing assay is efficient and one of the most economical ways to study cell migration in vitro. Conventionally, images are taken at the ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad

حقن أورثوتوبيك من خلايا سرطان الثدي في لوحة الدهون الثديية في الفئران

A proper animal model is crucial for a better understanding of diseases. Animal models established by different methods (subcutaneous injections, ...

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland

نمذجة سرطان الثدي عن طريق حقن داخل القناة من فيروس الغدة الدرقية التعبير عن Cre في الغدة الثديية الماوس

Breast cancer is a heterogeneous disease, possibly due to complex interactions between different cells of origins and oncogenic events. Mouse models are ...

Evaluating the Differentiation Capacity of Mouse Prostate Epithelial Cells Using Organoid Culture

تقييم قدره التمايز من الخلايا الظهاريه البروستاتا الماوس باستخدام الثقافة Organoid

The prostate epithelium is comprised predominantly of basal and luminal cells. In vivo lineage tracing has been utilized to define the differentiation ...

Orthotopic Transplantation of Breast Tumors as Preclinical Models for Breast Cancer

زرع العظام لأورام الثدي كنماذج ما قبل السريرية لسرطان الثدي

Preclinical models that faithfully recapitulate tumor heterogeneity and therapeutic response are critical for translational breast cancer research. ...

In Vitro Evaluation of Oncogenic Transformation in Human Mammary Epithelial Cells

في المختبر تقييم التحول Oncogenic في الخلايا الظهارية ماماري الإنسان

Tumorigenesis is a multi-step process in which cells acquire capabilities&#160;that allow their growth, survival, and dissemination under hostile ...

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

العزل والتقييم الوظيفي للخلايا الجذعية لسرطان الثدي البشري من عينات الخلايا والأنسجة

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

Studying TGF-&#946; Signaling and TGF-&#946;-induced Epithelial-to-mesenchymal Transition in Breast Cancer and Normal Cells

دراسة TGF-β الإشارة و TGF-β الناجمة عن الظهارية إلى mesenchymal التحول في سرطان الثدي والخلايا الطبيعية

Transforming growth factor-&#946; (TGF-&#946;) is a secreted multifunctional factor that plays a key role in intercellular communication. Perturbations of ...