Name: solid phase 11c-methylation, purification and formulation for the production of pet tracers
Uploaded: 2019-10-24T14:30:00
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这项研究得到了加拿大阿尔茨海默氏症协会（A.K.）和脑加拿大基金会18-05年赠款的部分支持，并得到了加拿大卫生部的支持。作者感谢麦吉尔大学医学院、蒙特利尔神经学研究所和麦康奈尔脑成像中心对这项工作的支持。我们还感谢莫妮卡·拉卡图斯-萨莫伊拉夫人在质量控制程序方面提供的帮助，感谢让-保罗·苏西博士和加桑·马萨尔韦博士获得放射性同位素和放射性化学设施。

1. 制备缓冲液和埃鲁剂
<ol><li>将2.72克醋酸钠三水合物溶解在100 mL水中，制备0.2M醋酸钠溶液（溶液A）。</li>
	<li>将11.4 mL的冰川醋酸溶解在1L水中，制备0.2M醋酸溶液（溶液B）。</li>
	<li>将50 mL溶液A与450 mL溶液B结合，根据缓冲器参考中心15制备pH 3.7（缓冲1）的醋酸缓冲液。使用 pH 条或 pH 计验证缓冲液的 pH。</li>
	<li>将 12.5 mL 的绝对乙醇与 87.5 mL 的缓冲液 1 结合，使 12.5% 的 AOH 溶液...

<ol>
	<li>Langstrom, B., Lundqvist, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preparation+of+11C-methyl+iodide+and+its+use+in+the+synthesis+of+11C-methyl-L-methionine.">The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine.</a> The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).</li><li>Larsen, P., Ulin, J., Dahlstr&#248;m, K., Jensen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+[11C]iodomethane+by+iodination+of+[11C]methane.">Synthesis of [11C]iodomethane by iodination of [11C]methane.</a> Applied radiation and isotopes. 48 (2), 153-157 (1997).</li><li>Jewett, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+synthesis+of+[11C]methyl+triflate.">A simple synthesis of [11C]methyl triflate.</a> International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 43 (11), 1383-1385 (1992).</li><li>Wilson, A. A., Garcia, A., Houle, S., Vasdev, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+commercial+radiosynthetic+modules+in+captive+solvent+[11C]-methylation+reactions.">Utility of commercial radiosynthetic modules in captive solvent [11C]-methylation reactions.</a> Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 52 (11), 490-492 (2009).</li><li>Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotracer+synthesis+from+[(11)C]-iodomethane:+a+remarkably+simple+captive+solvent+method.">Radiotracer synthesis from [(11)C]-iodomethane: a remarkably simple captive solvent method.</a> Nuclear medicine and biology. 27 (6), 529-532 (2000).</li><li>Fedorova, O. S., Vaitekhovich, F. P., Krasikova, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+Synthesis+of+[18F]Fluoromethylcholine+for+Positron-Emission+Tomography+Imaging.">Automated Synthesis of [18F]Fluoromethylcholine for Positron-Emission Tomography Imaging.</a> Pharmaceutical Chemistry Journal. 52 (8), 730-734 (2018).</li><li>Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+captive+solvent+method+for+rapid+radiosynthesis:+application+to+the+synthesis+of+[1-(11)C]palmitic+acid.">A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-(11)C]palmitic acid.</a> The International journal of applied radiation and isotopes. 36 (8), 672-674 (1985).</li><li>Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+captive+solvent+method+for+rapid+N-[11C]methylation+of+secondary+amides:+application+to+the+benzodiazepine,+4'-chlorodiazepam+(RO5-4864).">A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864).</a> International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 39 (5), 441-444 (1988).</li><li>Hockley, B. G., Henderson, B., Shao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+27,+Synthesis+of+{11C]Raclopride.">Chapter 27, Synthesis of {11C]Raclopride.</a> Radiochemical Syntheses. , 167-175 (2012).</li><li>Lodi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+and+reproducibility+of+N-[11C]methyl-choline+and+L-(S-methyl-[11C])methionine+solid-phase+synthesis:+a+useful+and+suitable+method+in+clinical+practice.">Reliability and reproducibility of N-[11C]methyl-choline and L-(S-methyl-[11C])methionine solid-phase synthesis: a useful and suitable method in clinical practice.</a> Nuclear Medicine Communications. 29 (8), 736-740 (2008).</li><li>Jolly, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+"[(11)C]kits"+for+a+fast,+efficient+and+reliable+production+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals+for+Positron+Emission+Tomography.">Development of "[(11)C]kits" for a fast, efficient and reliable production of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography.</a> Applied radiation and isotopes. 121, 76-81 (2017).</li><li>Boudjemeline, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+solid+phase+supported+radiosynthesis+of+[(11)+C]PiB+using+tC18+cartridge+as+a+"3-in-1"+production+entity.">Highly efficient solid phase supported radiosynthesis of [(11) C]PiB using tC18 cartridge as a "3-in-1" production entity.</a> Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 60 (14), 632-638 (2017).</li><li>Mathis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lipophilic+thioflavin-T+derivative+for+positron+emission+tomography+(PET)+imaging+of+amyloid+in+brain.">A lipophilic thioflavin-T derivative for positron emission tomography (PET) imaging of amyloid in brain.</a> Bioorganic and medicinal chemistry letters. 12 (3), 295-298 (2002).</li><li>Mathis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+evaluation+of+11C-labeled+6-substituted+2-arylbenzothiazoles+as+amyloid+imaging+agents.">Synthesis and evaluation of 11C-labeled 6-substituted 2-arylbenzothiazoles as amyloid imaging agents.</a> Journal of medicinal chemistry. 46 (13), 2740-2754 (2003).</li><li>. Buffer Reference Center Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/life-science/core-bioreagents/biological-buffers/learning-center/buffer-reference-center.html">https://www.sigmaaldrich.com/life-science/core-bioreagents/biological-buffers/learning-center/buffer-reference-center.html</a> (2019)</li><li>Philippe, C., Mitterhauser, M., Wadsak, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+18,+Synthesis+of+2-(4-N-[11C]Methylaminophenyl)-6-Hydroxybenzothiazole+([11C]6-OH-BTA-1;+[11C]PIB).">Chapter 18, Synthesis of 2-(4-N-[11C]Methylaminophenyl)-6-Hydroxybenzothiazole ([11C]6-OH-BTA-1; [11C]PIB).</a> Radiochemical Syntheses. , 177-189 (2012).</li><li>Shao, X., Fawaz, M. V., Jang, K., Scott, P. J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+Applications+of+[11C]Hydrogen+Cyanide.">Synthesis and Applications of [11C]Hydrogen Cyanide.</a> Radiochemical Syntheses. , 207-232 (2015).</li><li>Ametamey, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiosynthesis+and+preclinical+evaluation+of+11C-ABP688+as+a+probe+for+imaging+the+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+5.">Radiosynthesis and preclinical evaluation of 11C-ABP688 as a probe for imaging the metabotropic glutamate receptor subtype 5.</a> Journal of Nuclear Medicine. 47 (4), 698-705 (2006).</li><li>Ametamey, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+PET+studies+of+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+5+with+11C-ABP688.">Human PET studies of metabotropic glutamate receptor subtype 5 with 11C-ABP688.</a> Journal of Nuclear Medicine. 48 (2), 247-252 (2007).</li></ol>

尽管最近出现和FDA批准几个18F标记PET示踪剂，如花贝贝，弗洛贝贝本和长笛元醇，#11C_PiB仍然是淀粉样蛋白成像的黄金标准示踪剂，由于快速的大脑吸收和低非特异性绑定。目前这种示踪剂是通过湿化学16或使用"干循环"方法4，17合成的。两种方法都需要HPLC纯化，然后重新配方在水乙醇，这大约需要20-30分钟?...

正电子发射断层扫描（PET）是一种分子成像模式，它依赖于检测附着在生物活性分子上的同位素的放射性衰变，从而能够对生化过程、信号和转化进行体内可视化.碳-11（t1/2 = 20.3分钟）是PET中最常用的放射性同位素之一，因为它在有机分子中丰富，而且半寿命短，允许在同一天对同一人类或动物主体进行多次示踪剂，并且减轻病人的辐射负担。许多标有这种同位素的示踪剂用于临床研究和基础健康研究，用于经典和新兴生物相关靶点体内 PET 成像 - [11C]d2/D3受体的 raclopride，[11 C]用于淀粉样斑块的 PiB， =11C_PBR28 用于转位蛋白 - 仅举几例。
碳-11标记的PET示踪剂主要通过11个C-甲基化的非放射性前体生产，这些前体含有-OH（酒精、苯酚和甲氧乙酸）、-NH（胺和酰胺）或-SH（二醇）组。简单地说，同位素通过14N（p，α）11C核反应在回旋加速器的气体靶中生成，化学形式为11C+CO2。后者然后通过湿化学（减少至+ 11 C_CH 3 I）转化为11C_甲基碘化物 （=11C_CH3I），减少至 +11C_CH3OH，LiAlH4，然后用 HI 淬火）1或干燥化学（催化还原到+11C_CH4，然后是分子 I2的基基碘化 ）2。[11C]CH3I 然后可以通过在银三聚苯甲柱3上将其转换进一步转换为反应性更强的 11C-甲基三聚醚（=11C_CH3OTf）。然后，通过将放射性气体冒泡成有机溶剂中的非放射性前体溶液，或通过更优雅的自有溶剂"循环"方法4、5进行11C甲基化。然后，通过HPLC对11种C-示踪剂进行纯化，在生物相容性溶剂中重新配制，并通过无菌过滤器，然后施用给人体。鉴于碳-11的半寿命很短，所有这些操作都必须快速可靠。然而，使用HPLC系统会大大增加示踪剂的损失和生产时间，通常需要使用有毒溶剂，使自动化复杂化，偶尔会导致合成失败。此外，对反应器和HPLC柱进行必要的清洁延长了后续示踪剂批次合成之间的延迟，并增加了人员对辐射的暴露。
氟-18（t1/2 = 109.7分钟）的放射性化学，另一种广泛使用的PET同位素，最近通过开发基于盒式试剂盒的试剂盒，消除了对HPLC纯化的需要而得到推进。通过采用固相萃取 （SPE） 盒，这些完全一次性试剂盒可实现18 种F 示踪剂的可靠常规生产，包括18F_FDG、18 F_FMISO、18 F_FMC 等，合成更短时间、减少人员参与和最少的设备维护。碳-11在PET成像中仍然不太受欢迎的同位素的原因之一是缺乏用于常规生产11种C示踪剂的类似试剂盒。它们的开发将大大提高合成可靠性，提高放射性化学产量，并简化生产模块的自动化和预防性维护。
目前可用的生产套件利用廉价的一次性 SPE 墨盒，而不是 HPLC 柱，用于将放射性追踪器与未反应的放射性同位素、前体和其他放射性和非放射性副产品分离。理想情况下，无线电标记反应也在同一墨盒上进行;例如，在生产前列腺癌成像PET示踪剂PET示踪剂时，二甲基氨基甲醇的18F_氟甲基化与气态性 =18F_CH2BrF发生于阳离子交换树脂盒上6.虽然已报告在墨盒上对几个11个C示踪剂进行放射性标记的类似程序7，8，并且对11C_choline9的放射合成特别强大和[11C_美色氨酸10，这些例子仍然限于肿瘤PET示踪剂，其中通常不需要从前体分离。我们最近报告了用于生产[11C]CH3I11和随后11 C甲基化以及固体相支持合成12的"[11 C]基套"的开发，简化了11种C示踪剂的常规生产。在这里，我们希望以固相支持放射性合成的11C_PiB为例来展示我们的进步，这是A+成像的放射跟踪器，在2003年首次开发时彻底改变了阿尔茨海默氏病（AD）成像领域（图 1）13，14.在这种方法中，挥发性 =11C_CH3OTf （bp 100 °C） 通过沉积在一次性墨盒树脂上的 6-OH-BTA-0 前体传递。PET 示踪剂 =11C_PiB 然后通过从盒中洗脱具有生物相容性水乙醇从前体和放射性杂质中分离出来。此外，我们使用遥控无线电化学合成模块和一次性盒式试剂盒试剂盒，自动化了这种11C_PiB 放射合成方法。具体来说，我们在一个20瓣放射性化学模块上实现了这种放射合成，该模块配备了注射器驱动（分配器），适合标准的20 mL一次性塑料注射器、气体流量控制器、真空泵和仪表。由于这种方法的简单性，我们相信它可以被修改为大多数市售的自动合成器，无论是盒式或带有固定阀门的。这种固相支持技术有助于符合良好制造规范 （GMP） 法规的 11C_PiB 生产，并提高合成可靠性。此处描述的技术还减少了放射性合成所需的前体量，只使用"绿色"生物相容性溶剂，并减少了连续生产批次之间的时间。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>6-OH-BTA-0</td>
			<td>ABX advanced biochemical compounds</td>
			<td>5101</td>
			<td>Non-radioactive precursor of [11C]PiB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-OH-BTA-1</td>
			<td>ABX advanced biochemical compounds</td>
			<td>5140</td>
			<td>Non-radioactive standard of [11C]PiB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1200 HPLC system</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>Agilent 1200</td>
			<td>Analytical HPLC system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Commercial alcohols</td>
			<td>432526</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe (luer-tip, 250 &#181;L)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>HAM80701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MZ Analytical PerfectSil 120</td>
			<td>MZ-Analysentechik GmbH</td>
			<td>MZ1440-100040</td>
			<td>Analytical HPLC column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perkin Elmer Clarus 480 GC system</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Clarus 480</td>
			<td>Gas chromotograph</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>polycarbonate manifold</td>
			<td>Scintomics</td>
			<td>ACC-101</td>
			<td>Synthesis manifold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restek MTX-Wax column (30 m, 0.53 mm)</td>
			<td>Restek</td>
			<td>70625-273</td>
			<td>Analytical GC column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scintomics GRP module</td>
			<td>Scintomics</td>
			<td>Scintomics GRP</td>
			<td>Automated synthesis unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sep-Pak tC18 Plus</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT020515</td>
			<td>Solid phase extraction cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>solvent-resistant manifold</td>
			<td>Scintomics</td>
			<td>ACC-201</td>
			<td>Synthesis manifold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>405181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile extension line</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>8255059</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLLG013SL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile vial (20mL)</td>
			<td>Huayi</td>
			<td>SVV-20A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile water</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JF7623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synthra MeIplus Research</td>
			<td>Synthra</td>
			<td>MeIplus Research</td>
			<td>[11C]CH3I/[11C]CH3OTf module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (10 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (20 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4617207V</td>
			<td>Dispenser syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vent filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>TEFG02525</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

solid phase 11c-methylation, purification and formulation for the production of pet tracers

用于正电子发射断层扫描（PET）的放射性跟踪器的常规生产主要依靠湿化学，其中放射性合成素与溶液中的非放射性前体发生反应。这种方法需要通过高性能液相色谱法（HPLC）对示踪剂进行纯化，然后重新配方在生物相容性溶剂中用于人体管理。我们最近开发了一种新型的 11C 甲基化方法，用于高效合成碳-11 标记 PET 放射性药物，利用固相盒作为一次性"三合一"单元进行合成、纯化和重新制定示踪剂。这种方法消除了对预准备HPLC的使用，并减少了示踪剂在传输线和放射性衰变造成的损失。此外，基于墨盒的技术提高了合成可靠性，简化了自动化流程，并便于符合良好制造规范 （GMP） 要求。在这里，我们演示了这项技术，在生产PET示踪剂匹兹堡化合物B（=11C_PiB）的例子，一个金标准在体内的淀粉样斑块在人脑中。

为了总结典型放射性合成的 [11C_PiB， 气态 ]11C_CH3OTf 首先通过预装前体溶液的 tC18 盒 （图 1）。然后，通过连续洗脱水乙醇溶液实现反应混合物的分离，如下所示。首先，12.5% EtOH洗脱大多数未反应的 [11C_CH3OTf 和 6-OH-BTA-0》，然后 15% EtOH 洗掉残留杂质，最后 50% 乙醇溶液将所需的 [11C]PiB 排脱到无菌小瓶...

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Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers

我们报告一种高效的碳-11放射性标签技术，使用固体相提取盒生产与正电子发射断层扫描（PET）相关的临床示踪剂。11C甲基化剂通过预装前体的盒，并连续用水乙醇洗脱提供高放射性化学产量的化学和放射化学纯PET示踪剂。

用于生产PET示踪剂的固体阶段11C甲基化、纯化和配方

Routine production of radiotracers used in positron emission tomography (PET) mostly relies on wet chemistry where the radioactive synthon reacts with a ...

Carbon-11是正电子发射断层扫描中应用最广泛的放射性同位素之一，因为它在有机分子中含量丰富，半寿命短，为20分钟。在这段视频中，我们展示使用固相提取墨盒的高效碳-11无线电标记技术。与传统方法相比，基于墨盒的技术可避免使用 HPLC，缩短无线电合成时间，提高合成可靠性，简化自动化过程，并促进符合 GMP 良好制造规范。基于墨盒的技术在C11 PiB的放射性合成上得到演示，这是一种PET示踪剂，用于在阿尔茨海默氏症患者大脑中对淀粉样斑块进行体内成像。最近，我们把三合一技术应用于C11 ABP688的放射性合成，这是一种PET示踪剂，用于5型代谢性谷氨酸受体的成像，以及其他碳-11标记示踪剂。将 450 毫升 0.2 摩尔醋酸溶液与 50 毫升醋酸钠 0.2 摩尔溶液混合，以 pH 3.7 作为缓冲液准备醋酸酯缓冲液。使用 pH 条或 pH 计验证缓冲液的 pH 值。然后，将12.5毫升绝对乙醇与87.5毫升醋酸酯缓冲液混合在100毫升瓶中，使12.5%的水乙醇溶液作为洗涤溶液。将15毫升绝对乙醇与85毫升醋酸酯缓冲液混合在100毫升瓶中，使15%的水乙醇溶液洗涤两个。将五毫升绝对乙醇与五毫升醋酸酯缓冲液相结合，使50%水性乙醇溶液作为最终的吸水剂，并将溶液的2.5毫升放入10毫升注射器中。为了预置 tC18 墨盒，从女性端，使用注射器通过 10 毫升水，然后通过墨盒传递 5 毫升丙酮。以每分钟 50 毫升的氮气流干燥墨盒一分钟。在Eppendorf管中，将前体6-OH-BTA-0的两毫克溶解在一毫升无水丙酮中。拿着一个Luer-tip，250微升，精密玻璃注射器向下，提取100微升的前体溶液，然后50微升气垫。取出针头，然后点按注射器，以确保气垫位于注射器中的溶液上方。将前体溶液从母端涂抹到 tC18 墨盒上，缓慢地向下推柱塞。不要进一步推动空气。在合成模块上固定并组装标准的五端口一次性歧管。端口一有两个位置。将水平入口连接到装有 20 毫升注射器的自动分配器。将垂直入口连接到瓶子，洗一个。连接生产 C11 甲基三叶的模块的输出，移植两个歧管。在端口 3 和 4 之间安装装有前体 6-OH-BTA-0 的 tC18 墨盒。端口五有两个位置。将水平出口连接到废瓶，将垂直出口连接到无菌小瓶，通过无菌过滤器收集示踪剂。在铅屏蔽热电池中，使用特氟隆线通过端口二将 C11 甲基三叶（T11 甲基）交付到歧管中，然后以每分钟 20 毫升的输出流量通过加载的 tC18 墨盒。C11 甲基三叶酸模块调节通过端口三和四的流动，并进入废瓶。一旦所有放射性被转移并困在放射性探测器监控的 tC18 墨盒中，通过关闭端口 2 停止气体流动。让墨盒坐两分钟以完成反应。然后，通过端口一，以每分钟 100 毫升的速度将 19 毫升的溶液从 100 毫升的瓶子中放入分配器注射器中。通过端口 3 和 4 将 18.5 毫升的溶液从分配器中通过 tC18 墨盒中清洗，然后以每分钟 50 毫升的速度放入废瓶中。确保歧管中没有气泡，因为它们可能会降低分离效率。重复提取和点胶四次，每次洗涤18.5毫升，总体积为92.5毫升，通过tC18。将端口 1 上的输入线从洗一到洗 2。重复提取和点胶三次，每次洗涤两个溶液 18.5 毫升，总体积为 55.5 毫升，通过 tC18。将阀 5 向最终小瓶切换。断开管路与分配器的连接，将其连接到含有 2.5 毫升最终吸液溶液和 7.5 毫升空气的 10 毫升注射器。向下握注射器，手动将最终的吸液溶液，然后通过端口 3 和 4 将空气通过 tC18 滤芯，然后放入无菌小瓶中，通过无菌过滤器收集示踪剂。将注射器切换到含有 10 毫升无菌磷酸盐缓冲液的注射器，然后通过 tC18 墨盒将整个体积推入无菌小瓶中。断开注射器，使用相同的注射器用 10 毫升空气冲洗管路。使用一毫升注射器，提取样品进行预发行质量控制程序、细菌内毒素测试和无菌测试。要执行预发行质量控制程序，首先通过配备紫外线放射性探测器和反相柱的分析 HPLC 系统确定示踪剂的放射化学特性、放射化学纯度、化学纯度和摩尔活性。确定 6-OH-BTA-0 和 6-OH-BTA-1 的保留时间，并校准仪器以量化每种化合物的含量。通过配备毛细管柱的分析气相色谱系统确定残留溶剂含量。确定丙酮和乙醇的保留时间，并校准仪器以量化每种溶剂的含量。本研究对C11 PiB的放射性合成进行了C11-甲基化6-OH-BTA-0前体与C11甲基三叶酸。C11 PiB的质量控制分析HPLC显示，6-OH-BTA-0前体和6-OH-BTA-1示踪剂峰值的留存时间为3.6和5.9分钟。对紫外线微量的分析表明，在没有其他非放射性杂质的情况下，残留前体浓度低于可接受的1.3微克限值。这表明示踪剂的放射化学和化学纯度对于临床PET研究是可以接受的。将 6-OH-BTA-0 前体量从 0.1 毫克增加至 0.3 毫克，使放射化学产量从 18.1% 提高至 32.1%，而最终产品中的前体量略高。该技术应适用于前体和放射性标记产品之间具有适当极性差异的许多不同的系统。所有涉及放射性同位素的操作都必须在铅屏蔽的热细胞中进行，由具有足够培训的人员处理放射性材料。

Research

JoVE Journal

Chemistry

Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers

Determination of the Gas-phase Acidities of Oligopeptides

寡肽测定气相酸性

Amino acid residues located at different positions in folded proteins often exhibit different degrees of acidities. For example, a cysteine residue ...

科研

化学

Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies

生产二硫键稳定的跨膜肽复合物的结构研究

Physical  interactions among the lipid-embedded alpha-helical domains of membrane  proteins play a crucial role in folding and assembly of membrane ...

Thin-layer Chromatographic (TLC) Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

Thin-layer Chromatographic TLC Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

薄层色谱（TLC）分离和植物提取物的生物测定识别抗菌化合物

A common screen for plant antimicrobial compounds consists of separating plant extracts by paper or thin-layer chromatography (PC or TLC), exposing the ...

Synthesis and Purification of Iodoaziridines Involving Quantitative Selection of the Optimal Stationary Phase for Chromatography

合成和Iodoaziridines纯化涉及定量选择最优固定相的色谱

The highly diastereoselective preparation of cis-N-Ts-iodoaziridines through reaction of diiodomethyllithium with N-Ts aldimines is described. ...

Synthetic Methodology for Asymmetric Ferrocene Derived Bio-conjugate Systems via Solid Phase Resin-based Methodology

合成方法通过固相树脂为基础的方法不对称二茂铁产生的生物共轭系统

Early detection is a key to successful treatment of most diseases, and is particularly imperative for the diagnosis and treatment of many types of cancer. ...

Supercritical Nitrogen Processing for the Purification of Reactive Porous Materials

超临界氮处理的活性多孔材料的净化

Supercritical fluid extraction and drying methods are well established in numerous applications for the synthesis and processing of porous materials. ...

X-ray Powder Diffraction in Conservation Science: Towards Routine Crystal Structure Determination of Corrosion Products on Heritage Art Objects

X射线粉末衍射在保护科学：迈向文物艺术品腐蚀产物的常规晶体结构测定

The crystal structure determination and refinement process of corrosion products on historic art objects using laboratory high-resolution X-ray powder ...

Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

通过动态光散射显微镜混浊解决方案粒度分布的测定

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a ...

Integration of Miniaturized Solid Phase Extraction and LC-MS/MS Detection of 3-Nitrotyrosine in Human Urine for Clinical Applications

微型固相萃取和LC-MS / MS检测人尿中3-硝基酪氨酸的临床应用

Free 3-nitrotyrosine (3-NT) has been extensively used as a possible biomarker for oxidative stress. Increased levels of 3-NT have been reported in a wide ...

Protocol for the Solid-phase Synthesis of Oligomers of RNA Containing a 2'-O-thiophenylmethyl Modification and Characterization via Circular Dichroism

Protocol for the Solid-phase Synthesis of Oligomers of RNA Containing a 2'-O-thiophenylmethyl Modification and Characterization via Circular Dichroism

用于固相合成含有2&#39;-<em&gt; 0</em通过圆二色性修饰和表征

Solid-phase synthesis has been used to obtain canonical and modified polymers of nucleic acids, specifically of DNA or RNA, which has made it a popular ...