بروتوكولنا يوحد منهجيات لأخذ عينات من الخياشيم من بلح البحر الماء العذب وغرافيدي وتتميز مراحل مختلفة من تطور اليرقات مع توفير قاعدة بيانات على الانترنت لتقديم البيانات واستكشاف Gravidity Almanac. هذه التقنية غير فتية ولا تؤثر بشكل كبير على قدرة بلح البحر الأنثوي على البقاء في غرافيد بعد أخذ عينات من الخياشيم ، وبالتالي يمكن تطبيق الطريقة على الأنواع الشائعة والمحمية على حد سواء. ويمكن تطبيق هذه المنهجية على الكائنات الحية التي تتميز بها أسر بيفالفيا في هاريدا، ومارغيريتيفيريدا، ويونيفيدا، التي توزع في النظم الإيكولوجية للمياه العذبة في كل قارة باستثناء القارة القطبية الجنوبية.
من المهم فتح بلح البحر بعناية، وجمع معلومات الموقع، والتأكد من جمع البيانات بشكل صحيح. إذا كانت الهويات مشكوك فيها، ينبغي للمرء أن يلتقط الصور وأن يتصل بالخبراء المختصين. ابدأ بجمع بلح البحر الحي من الحقل باستخدام طرق بصرية عن طريق اللمس.
تقييم الجاذبية الإناث عن طريق التفتيش البصري سواء أثناء أو بعد جمع عن طريق المتطفلين بلطف فتح الصمامات فقط بما فيه الكفاية للنظر في الداخل ومعرفة ما إذا كانت الخياشيم تضخم. إذا كان استخدام عينة محفوظة من متحف، وإجراء الفحص البصرية عن طريق فتح الصمامات وتفتيش الخياشيم. لتذوق محتوى الخيشومي، قم بإعداد أنبوب جمع ميكروسنتروجي بلاستيكي سعة 1.5 ملليلتر مع ما يقرب من ملليلتر من الماء أو الإيثانول، وهذا يتوقف على مدى وقت إجراء التقييم.
فك إبرة معقم 30 قياس شطبة تلميح على حقنة 10 ملليلتر، فك الغطاء لفضح الإبرة، ودفع مقبض الحقنة إلى أسفل حتى سدادة هو في خط صفر ملليلتر. التقاط الإناث جرافيد وناقب بلطف فتح الصمامين باستخدام نصائح من الإبهام. استخدام طرف إبرة لاختراق بلطف أنبوب ماء واحد من الخياشيم متضخمة، ثم مغرفة بلطف محتويات الخيش مع طرف مشطوف من الإبرة.
تخزينها في أنبوب microcentrifuge المعدة للتقييم في وقت لاحق. تسجيل المعلومات ذات الصلة، مثل تحديد جنس الأنواع، وجمع المعلومات الموقع، وحالة gravidity على ورقة البيانات وتسجيل معرف فريد على كل سفينة جمع لضمان سجلات بيانات دقيقة أثناء النقل. توجيه بلح البحر بشكل صحيح لتصوير الصمام الصحيح للتحقق من الهوية ، ووضعها ، والتقاط الصورة ، مع التأكد من تضمين أنبوب العينة المسمى في الصورة.
لتقييم محتويات الخياشيم، قم بنقلها إلى طبق بيتري وملء الجزء السفلي من الطبق بالماء. دوامة بلطف الطبق لجمع محتويات في المركز لعرض أكثر تركيزا من العينة. ضع طبق بيتري تحت مجهر تشريح لتقييم العينة، وإذا أمكن، التقط صورة للعينة تحت المجهر.
تسجيل النتائج التي تكون مراحل النمو الموجودة في كل عينة من الخياشيم. إذا كانت الإناث يرقات مكتئبة في مراحل نمو متعددة ، فبلغ عن كل مرحلة نمو لوحظت في عينة معينة. إذا تم تحديد الجلوتشيديا المطورة بالكامل ولم يتم استخدام الإيثانول للحفاظ عليها ، قم بتقييم صلاحيتها عن طريق إضافة بلورة من كلوريد الصوديوم إلى قطرة فرعية من العينة الخيشومية.
سوف glochidia قابلة للحياة الرد عن طريق فتح وإغلاق الصمامات أو ببساطة إغلاق لهم من موقف مفتوح. الإبلاغ عن أي غلوشيديا اختبار الملح مع T في نهاية التعيين عند تسجيل البيانات. للإبلاغ عن البيانات، قم بالوصول إلى صفحة FMGA أو تطبيق الجوال وتسجيل النتائج في نموذج إدخال البيانات باستخدام القوائم المنسدلة وحقول إدخال النص.
بالنسبة لمجموعات البيانات الكبيرة الموجودة مسبقاً، اتصل بـ المؤلفين للحصول على جدول بيانات القالب. أدخل البيانات المسجلة تحت عناوين الأعمدة المناسبة ، مع الأخذ في الاعتبار أن كل صف في جدول البيانات يمثل ملاحظات عينة من جيلية من فرد واحد من جرافيد ، ثم قم بتقديم النتائج وسيتم إضافتها إلى قاعدة بيانات FMGA بعد التحقق من صحتها من قبل مسؤول ، والذي قد يتصل بجامع طلب مزيد من التفاصيل أو الصور. قاعدة بيانات FMGA تجمع جميع المعلومات المقدمة ويسمح للمستخدم لتصور البيانات gravidity الزمنية لجميع الأنواع في قاعدة البيانات.
يعد بلح البحر في المياه العذبة غرافيديتي أماناك أداة بحثية مصممة لتوحيد جمع بيانات الجاذبية مع تسهيل جهود البحث والحفظ والإنعاش في المستقبل. وتم تقييم بروتوكول أخذ العينات الخيشومية عن طريق وضع علامات على الإناث و التقاطها على فترات شهرية على مدار السنة. وعلى الرغم من أن أحجام العينات في الدراسة غير متساوية عبر الأنواع، فإن النتائج تسلط الضوء على التطبيقات المفيدة والعملية لهذا البروتوكول.
التقويم gravidity لVillosa lienosa يظهر الإناث gravid المكتئب تم العثور على الجلوتشيديا المتقدمة بالكامل في كل شهر تقريبا من السنة باستثناء آب / أغسطس ، عندما تم العثور على الإناث فقط كتل البيض المكتئب. تم العثور على الإناث Hamiota australis غير gravid في يوليو وأغسطس وديسمبر. وكانت نسبة أكبر من الإناث تكتئب بشكل كامل من الجلوتشيديا في كانون الثاني/يناير وشباط/فبراير وفي تشرين الأول/أكتوبر وتشرين الثاني/نوفمبر.
لم يتم العثور على أي فرد من Elliptio pullata المكتئب الجلوتشيدية المتقدمة بالكامل ، على الرغم من أن الإناث كانت كتل البيض المكتئبة من مايو إلى يونيو. تم العثور على أنثى واحدة فقط من عائلة (ستروميتوس ويليامزي) و أُعيدت ثلاث مرات تم العثور على هذه الأنثى المكتئب الجلوتشيديا المتقدمة بالكامل في مارس، وليس gravid في مايو، ذكرت gravid في يونيو حزيران، والبيض المكتئب في أغسطس.
تم العثور على الإناث غرافيد من فيلوسا فيبيإكس المكتئب glochidia المتقدمة بالكامل بين فبراير ويونيو. بلح البحر في المياه العذبة هي مجموعة معرضة للخطر للغاية من الكائنات الحية. وهذه المنهجية مهمة لأنها توفر طريقة غير فتية لتقييم الخصائص الإنجابية للأنواع المعرضة للخطر.
من المهم التعامل مع بلح البحر بعناية. ويمكن قياس الظروف البيئية، مثل درجة حرارة المياه وتدفقات الدفق في الحقل لتحديد الظروف التي تؤدي إلى التفريخ وتنمية اليرقات في بلح البحر في المياه العذبة. ويمكن أن يساعد تجميع بيانات الجاذبية الزمنية لجميع أنواع بلح البحر في المياه العذبة في إجراء دراسات في علم الأوبئة، والمورفولوجيا الجلوية، وتاريخ الحياة، وعلم الوراثة، والانتشار، والتنكيل.
