Name: preparation of high-quality fermented fish product
Uploaded: 2019-08-23T15:00:00
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इस शोध को जियांग्सू नेचुरल साइंस फंड (BK20170185), जियांग्सू मत्स्य पालन प्रशासक (Y2017-30), नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना (NFSC31801575), चीन एग्रीकल्चर रिसर्च से परियोजना के लिए निर्धारित निधि द्वारा वित्तीय रूप से सहायता प्रदान की गई थी। प्रणाली (CARS-45-26), खाद्य विज्ञान और प्रौद्योगिकी के राष्ट्रीय प्रथम श्रेणी के अनुशासन कार्यक्रम (JUFSTR20180201), और यी टोंग-जियांग्सू Postdoctoral कार्यक्रम.

1. नमूना तैयारी
<ol><li>20 डिग्री सेल्सियस से नीचे बहते पानी के नीचे स्टर्जियन मांस जमे हुए स्टर्जन मांस। फिर, साफ, त्वचा बंद और क्यूब्स में मछली में कटौती (2 सेमी $ 2 सेमी $ 1.5 सेमी). नोट: कच्चे माल ताजा या जमे हुए स्...

<ol>
	<li>Riebroy, S., Benjakul, S., Visessanguan, W., Tanaka, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+during+fermentation+and+properties+of+som-fug+produced+from+different+marine+fish.">Changes during fermentation and properties of som-fug produced from different marine fish.</a> Journal of Food Processing and Preservation. 31 (6), 751-770 (2007).</li><li>Xu, Y., Xia, W., Yang, F., Jinmoon, K., Nie, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+fermentation+temperature+on+the+microbial+and+physicochemical+properties+of+silver+carp+sausages+inoculated+with+Pediococcus+pentosaceus.">Effect of fermentation temperature on the microbial and physicochemical properties of silver carp sausages inoculated with Pediococcus pentosaceus.</a> Food Chemistry. 118 (3), 512-518 (2010).</li><li>Cano-Garcia, L., Flores, M., Belloch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+characterization+and+aromatic+potential+of+Debaryomyces+hansenii+strains+isolated+from+naturally+fermented+sausages.">Molecular characterization and aromatic potential of Debaryomyces hansenii strains isolated from naturally fermented sausages.</a> Food Research International. 52 (1), 42-49 (2013).</li><li>Chen, Q., Liu, Q., Sun, Q., Kong, B., Xiong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flavour+formation+from+hydrolysis+of+pork+sarcoplasmic+protein+extract+by+a+unique+LAB+culture+isolated+from+Harbin+dry+sausage.">Flavour formation from hydrolysis of pork sarcoplasmic protein extract by a unique LAB culture isolated from Harbin dry sausage.</a> Meat Science. 100, 110-117 (2015).</li><li>Saithong, P., Panthavee, W., Boonyaratanakornkit, M., Sikkhamondhol, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+starter+culture+of+lactic+acid+bacteria+in+plaa-som,+a+Thai+fermented+fish.">Use of a starter culture of lactic acid bacteria in plaa-som, a Thai fermented fish.</a> Journal of Bioscience &amp; Bioengineering. 110 (5), 553-557 (2010).</li><li>Zeng, X., Xia, W., Jiang, Q., Guan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+and+Sensory+Characteristics+of+Whole+Carp+Inoculated+With+Autochthonous+Starter+Cultures.">Biochemical and Sensory Characteristics of Whole Carp Inoculated With Autochthonous Starter Cultures.</a> Journal of Aquatic Food Product Technology. 24 (1), 52-67 (2015).</li><li>Casaburi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+and+sensory+characteristics+of+traditional+fermented+sausages+of+Vallo+di+Diano+(Southern+Italy)+as+affected+by+the+use+of+starter+cultures.">Biochemical and sensory characteristics of traditional fermented sausages of Vallo di Diano (Southern Italy) as affected by the use of starter cultures.</a> Meat Science. 76 (2), 295-307 (2007).</li><li>Gao, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+autochthonous+starter+cultures+on+the+volatile+flavour+compounds+of+Chinese+traditional+fermented+fish+(Suan+yu).">Effect of autochthonous starter cultures on the volatile flavour compounds of Chinese traditional fermented fish (Suan yu).</a> International Journal of Food Science and Technology. 51 (7), 1630-1637 (2016).</li><li>Zeng, X. F., Xia, W. S., Jiang, Q. X., Xu, Y. S., Fan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+Mixed+Starter+Cultures+to+Flavor+Profile+of+Suanyu+-+A+Traditional+Chinese+Low-Salt+Fermented+Whole+Fish.">Contribution of Mixed Starter Cultures to Flavor Profile of Suanyu - A Traditional Chinese Low-Salt Fermented Whole Fish.</a> Journal of Food Processing and Preservation. 41 (5), 15 (2017).</li><li>Anihouvi, V. B., Sakyi-Dawson, E., Ayernor, G. S., Hounhouigan, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiological+changes+in+naturally+fermented+cassava+fish+(Pseudotolithus+sp.)+for+lanhouin+production.">Microbiological changes in naturally fermented cassava fish (Pseudotolithus sp.) for lanhouin production.</a> International Journal of Food Microbiology. 116 (2), 287-291 (2007).</li><li>Corral, S., Salvador, A., Flores, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salt+reduction+in+slow+fermented+sausages+affects+the+generation+of+aroma+active+compounds.">Salt reduction in slow fermented sausages affects the generation of aroma active compounds.</a> Meat Science. 93 (3), 776-785 (2013).</li><li>Wang, W., Xia, W., Pei, G., Xu, Y., Jiang, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteolysis+during+fermentation+of+Suanyu+as+a+traditional+fermented+fish+product+of+China.">Proteolysis during fermentation of Suanyu as a traditional fermented fish product of China.</a> International Journal of Food Properties. 20 (90), 29-38 (2017).</li><li>Coventry, M. J., Hickey, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+spices+and+manganese+on+meat+starter+culture+activity.">The effect of spices and manganese on meat starter culture activity.</a> Meat Science. 33 (3), 391-399 (1993).</li><li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+on+quality+characteristics+of+pickled+and+fermented+sturgeon+(Acipenser+sinensis)+meat+in+retort+cooking.">Comparative study on quality characteristics of pickled and fermented sturgeon (Acipenser sinensis) meat in retort cooking.</a> International Journal of Food Science &amp; Technology. , (2019).</li><li>Mendonca, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+the+yeast+flora+in+artisanal+country+style+and+industrial;dry+cured+sausage+(yeast+in+fermented+sausage).">Dynamics of the yeast flora in artisanal country style and industrial;dry cured sausage (yeast in fermented sausage).</a> Food Control. 29 (1), 143-148 (2013).</li><li>Zeng, X. F., Xia, W. S., Jiang, Q. X., Yang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+autochthonous+starter+cultures+on+microbiological+and+physico-chemical+characteristics+of+Suan+yu,+a+traditional+Chinese+low+salt+fermented+fish.">Effect of autochthonous starter cultures on microbiological and physico-chemical characteristics of Suan yu, a traditional Chinese low salt fermented fish.</a> Food Control. 33 (2), 344-351 (2013).</li><li>Gao, P., Jiang, Q., Xu, Y., Xia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Esterase+activities+of+autochthonous+starter+cultures+to+increase+volatile+flavor+compounds+in+Chinese+traditional+fermented+fish+(Suan+yu).">Esterase activities of autochthonous starter cultures to increase volatile flavor compounds in Chinese traditional fermented fish (Suan yu).</a> International Journal of Food Properties. 20 (1), 663-672 (2017).</li><li>Wahyuni, S., Holilah, , Asranudin, , Noviyanti, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+shelf+life+of+wikau+maombo+brownies+cake+using+Accelerated+Shelf+Life+Testing+(ASLT)+method+with+Arrhenius+model.">Estimation of shelf life of wikau maombo brownies cake using Accelerated Shelf Life Testing (ASLT) method with Arrhenius model.</a> IOP Conference Series Earth and Environmental Science. 122 (1), 12-22 (2018).</li><li>Zeng, X. F., Xia, W. S., Jiang, Q. X., Yang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+and+microbial+properties+of+Chinese+traditional+low-salt+fermented+whole+fish+product+Suan+yu.">Chemical and microbial properties of Chinese traditional low-salt fermented whole fish product Suan yu.</a> Food Control. 30 (2), 590-595 (2013).</li><li>Yu, D., Jiang, Q., Xu, Y., Xia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+shelf+life+extension+of+refrigerated+grass+carp+(Ctenopharyngodon+idellus)+fillets+by+chitosan+coating+combined+with+glycerol+monolaurate.">The shelf life extension of refrigerated grass carp (Ctenopharyngodon idellus) fillets by chitosan coating combined with glycerol monolaurate.</a> International Journal of Biological Macromolecules. 101, 448-454 (2017).</li><li>Czerner, M., Tomas, M. C., Yeannes, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ripening+of+salted+anchovy+(Engraulis+anchoita):+development+of+lipid+oxidation,+colour+and+other+sensorial+characteristics.">Ripening of salted anchovy (Engraulis anchoita): development of lipid oxidation, colour and other sensorial characteristics.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 91 (4), 609-615 (2011).</li></ol>

इस अध्ययन में, शराब सुगंध और संवेदी गुणों के लिए परीक्षण के साथ उच्च गुणवत्ता किण्वित मछली उत्पाद के उत्पादन के लिए एक नई तकनीक प्रदान की जाती हैं. इस तकनीक की प्रमुख प्रक्रियाओं marinating, सुखाने, किण्वन और न...

चीन में वर्तमान वाणिज्यिक मसालेदार मछली उत्पाद भारी नमकीन स्वाद, अपर्याप्त शराब सुगंध, गरीब लोच और पीला रंग है, जो उपभोक्ताओं को स्वीकार्यता कम हो जाती है की समस्या है. इसलिए, शराब सुगंध के साथ एक उच्च गुणवत्ता वाले मछली मांस उत्पाद के लिए एक नई तकनीक बनाया और अनुकूलित की जरूरत है.
हाल के वर्षों में , मांस और मछली में आधुनिक किण्वन तकनीकों के अनुप्रयोग से अधिक से अधिक शोधकर्ताओं का ध्यान आकर्षित किया है1,2,3,4. मांस और मछली में स्टार्टर संस्कृतियों के टीका द्वारा, खाद्य सुरक्षा बढ़ा दिया गया है, प्रसंस्करण समय छोटा किया गया है; और उत्पाद संवेदी गुण संशोधित किया गया है. Saithong एटअल. 5 अलग लैक्टोबैसिलस बैक्टीरिया (LAB) प्राकृतिक pla-som से और एक स्टार्टर संस्कृति है, जो उच्च अम्लता और दबा रोगजनक बैक्टीरिया प्रेरित के रूप में इस लैब का इस्तेमाल किया. ज़ेंग एट अल.6 ने बताया कि ऑटोचथॉनस स्टार्टर संस्कृतियों के साथ टीका किण्वन समय कम और नमूनों के संवेदी गुणों में सुधार हुआ। Casaburi एट अल7 का दावा किया है कि माइक्रोबियल स्टार्टर संस्कृतियों का उपयोग किण्वित मांस में सुगंध के विकास को प्रभावित करते हैं. इन स्टार्टर संस्कृतियों में, एस cerevisiae मादक किण्वन द्वारा शराब सुगंध का उत्पादन कर सकता है और यह भी उत्पाद अन्य बेहतर organoleptic गुण दे सकता है. इसलिए, एस cerevisiae शराब-अरोमा उत्पादों8,9,10 और शराब-अरोमा मछली उत्पाद के लिए एक उपयुक्त स्टार्टर संस्कृति एस cerevisiaeद्वारा बनाया जा सकता है।
वाइन-अरोमा मछली उत्पाद बनाने की प्रक्रिया में, मांस और मछली की बनावट नमक सामग्री, पानी की सामग्री, पीएच, प्रोटीन विकृतीकरण, आदि से प्रभावित हो सकती है। इसलिए, marinating, सुखाने, किण्वन और नसबंदी सभी बनावट विशेषताओं को प्रभावित कर सकता है. स्वाद और स्वाद का गठन जटिल है और मुख्य रूप से marinating और किण्वन से प्रभावित है, क्योंकि यह अत्यधिक कार्बोहाइड्रेट, प्रोटीन और लिपिड के hydrolysis से संबंधित है, और हल्के लिपिड ऑक्सीकरण11,12. यह मसालों के अतिरिक्त13से भी प्रभावित हो सकता है . रंग के विकास के लिए, Maillard प्रतिक्रिया होती है जो किण्वन और नसबंदी की प्रक्रिया में शामिल है10.
यह लेख शराब सुगंध, जो मछली प्रसंस्करण उद्योग के विकास के लिए बहुत महत्व का है के साथ किण्वित मछली उत्पाद के औद्योगिकीकरण के लिए तकनीकी सहायता प्रदान कर सकता है. इस तकनीक में वृद्धि हुई प्रोटीओलिसिस (अधिक मुक्त एमिनो एसिड और टीसीए-सोर्बल पेप्टाइड्स) द्वारा उत्पाद के स्वाद में सुधार कर सकता है, मुख्य रूप से अल्कोहल (एथेनोल, 1-ऑक्टेन-3-ओल, 2-मेथिल-1-प्रोपेनोल और 3-मेथिल-1-ब्यूटॉनोल), एस्टर (एथिल ऐसीटेट) और ऐल्डिहाइड (नोनल, 3-मेथिलब्यूनल और बेंजैल्डिहाइड), उच्च कठोरता, वसंतता, चिपचिपापन और चबाना द्वारा माउथफील में वृद्धि, और अधिक आकर्षक रससेट रंग और एक उज्ज्वल सतह14प्रदान करते हैं। यह भी उपभोक्ताओं को सुविधा देता है क्योंकि उत्पाद कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है. जैसा कि अन्य पिछले अध्ययनों द्वारा वर्णित15,16,17, एस सेरेविएसिया के साथ किण्वन भी अन्य मांस या मछली उत्पादों में organoleptic गुणों में काफी सुधार करने के लिए साबित किया गया है।
यह ध्यान देने योग्य बात है कि शुरू किए गए प्रोटोकॉल को मछली की अन्य प्रजातियों में भी लागू किया जा सकता है, जैसे घास कार्प, चांदी कार्प, काला कार्प, बिगहेड कार्प, कॉड, सामन आदि। मछली उत्पादों की उच्च गुणवत्ता के लिए, प्रसंस्करण के बिना मछली का इस्तेमाल किया जाना चाहिए, इस तरह के ताजा मछली के रूप में, बर्फ में मछली या जमे हुए मछली कम से कम 1 वर्ष के लिए संग्रहीत. इसके अलावा, के बाद से हल्के लिपिड ऑक्सीकरण स्वाद बढ़ाने सकता है, जबकि व्यापक लिपिड ऑक्सीकरण अप्रिय स्वाद लाता है, कम वसा के साथ मछली पसंद है या स्किम्ड मछली की सिफारिश की है.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>2,4,6-trimethylpyridine</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.</td>
			<td>Purity 98%</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colorimeter</td>
			<td>Hunterlab</td>
			<td>UltraScan Pro1166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DB-WAX column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>30 m &#215; 0.25 mm &#215; 0.25&#956;m</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital pH meter</td>
			<td>Mettler toledo Instrument (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>DELTA-320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drying oven</td>
			<td>Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>DHG-9070A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Frozen sturgeon</td>
			<td>Huada Marine Industry Group Co., Ltd</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatograph-mass spectrometer</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>TSQ Quantum XLS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humidities incubator</td>
			<td>Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>LHS-250HC-II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saccharomyces cerevisiae</td>
			<td>Angel Yeast Co., Ltd</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spices</td>
			<td>Auchan Supermarket</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilization pot</td>
			<td>Longqiang Machinery Technology Co., Ltd.</td>
			<td>RHS-03-700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supelco</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>65&#956;m, PDMS/DVB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Texture analyzer</td>
			<td>Stable Micro Systems, Ltd.</td>
			<td>TA-XT2i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum package machine</td>
			<td>Quanzhou Yiminxin Electromechanical Co., Ltd.</td>
			<td>YMX-958-10L</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of high-quality fermented fish product

इस प्रोटोकॉल स्टर्जन के साथ औद्योगिक किण्वित मछली उत्पाद की तैयारी के लिए एक विधि प्रदान करता है (एक्वेलारिया साइनेन्सिस) मांस उत्पाद. प्रक्रियाएं थीं: (1) decapitation, evisceration, skinning-off, सफाई और काटने सहित खेती स्टर्जन के pretreatment; (2) 6-12% (w/v) नमक समाधान (1:1, मछली घन बड़े पैमाने पर समाधान मात्रा में) में मछली क्यूब्स marinating; (3) गर्म हवा (40-60 डिग्री सेल्सियस) या वैक्यूम द्वारा 50-60% की पानी की सामग्री के लिए मछली क्यूब्स सुखाने; (4) किण्वन जिसमें 0.4-1.6% (w/w) S. cerevisiae के साथ मछली के क्यूब्स के स्वाद समाधान में टीका लगाना और 6-10 h के लिए 25-35 डिग्री सेल्सियस पर किण्वीय; (5) marinating और किण्वित समाधान के साथ वैक्यूम संकुल में मछली क्यूब्स सील; (6) 10-20 मिनट के लिए 115-121 डिग्री सेल्सियस पर बाँझ। इस विधि द्वारा तैयार स्टर्जन मांस उत्पाद स्वादिष्ट स्वाद है जो मधुर और मोटी है, विभिन्न प्रकार और ऐसे alcohols और एस्टर जो मछली से मूंछ और अप्रिय गंध मुखौटा सकता है के रूप में अस्थिर स्वाद यौगिकों की बड़ी मात्रा में है, मध्यम नमक है सामग्री लेकिन इस तरह के उच्च springiness, gumminess और chewiness के रूप में अच्छा बनावट गुण, और उज्ज्वल russet रंग और आकर्षक उपस्थिति है. इस नई तकनीक भी अन्य मछली के प्रसंस्करण में लागू किया जा सकता है सुविधाजनक मछली नाश्ता खाद्य पदार्थ है जो कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है प्रदान करते हैं. यह समुद्री और मीठे पानी की मछली दोनों के लिए उपयुक्त है।

उपयुक्त नमक एकाग्रता, marinating समय और तापमान उत्पाद के textural गुणवत्ता बेहतर बनाते हैं। सबसे अच्छा marinating शर्तों के रूप में इस प्रकार थे: marinating समाधान में 8% की नमक एकाग्रता; 2 ज के marinating समय; और 10 डिग्री सेल्सियस का marinating त...

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Preparation of High-Quality Fermented Fish Product

प्रोटोकॉल का लक्ष्य सैकरोमाइसीज सेरेविएसियाके टीका पर आधारित एक औद्योगिक मछली किण्वन तकनीक प्रदान करना है .

उच्च गुणवत्ता किण्वित मछली उत्पाद की तैयारी

This protocol provides a method for preparation of industrialized fermented fish product with sturgeon (Aquilaria sinensis) meat product. The procedures ...

यह प्रक्रिया शराब सुगंध के साथ किण्वित मछली उत्पाद की एक उच्च गुणवत्ता का उत्पादन करती है, और उद्योग उत्पादन में लागू की जा सकती है। यह तकनीक मछली उत्पाद को एक आकर्षक उपस्थिति, अद्वितीय स्वाद, स्वादिष्ट स्वाद और अच्छी बनावट गुण देती है। और इस उत्पाद को कम से कम एक वर्ष के लिए कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है।इस प्रक्रिया को शुरू करने के लिए, गल, साफ, और त्वचा जमे हुए स्टर्जन मांस के रूप में पाठ प्रोटोकॉल में उल्लिखित । मछली को क्यूब्स में काट लें। इसके बाद, मछली के क्यूब्स को एक से 12% नमक समाधान के साथ एक से तीन घंटे के लिए 10 डिग्री सेल्सियस पर एक-से-एक के अनुपात में मिलाएं।फिर, मसालेदार मछली क्यूब्स को स्टेनलेस स्टील झंझरी प्लेट पर रखें और उन्हें छह से 10 घंटे के लिए 40 और 60 डिग्री सेल्सियस के बीच तापमान पर गर्म हवा के साथ सुखाएं। मसाला तरल तैयार करने के लिए, स्कैलियन की 1.2 इकाइयों, अदरक की एक इकाई, स्टार सौंफ की 0.6 इकाइयों, सौंफ की 0.6 इकाइयों, ग्रीन टी की 0.3 इकाइयों और 40 यूनिट पानी के साथ काली मिर्च की 0.3 यूनिट सहित मसालों को मिलाएं। आधे घंटे के लिए उबालें, और फिलट्रेट इकट्ठा करें।स्वाद समाधान तैयार करने के लिए, यहां दिखाए गए द्रव्यमान अंशों में मसाले तरल, पीली शराब, सफेद शराब, गन्ना चीनी, मोनोसोडियम ग्लूटामेट और सिरका मिलाएं। इसके बाद, सूखे मछली के क्यूब्स को स्वाद समाधान के साथ मिलाएं, 0.4 से 1.6% सैकरोमाइसेस सेरेविसिया को एक-से-एक के अनुपात में मिलाएं। मिश्रण को एक कंटेनर में सील करें, और छह से 10 घंटे के लिए 25 और 35 डिग्री सेल्सियस के बीच तापमान पर किण्वित करें।किण्वित मछली क्यूब्स को खटाई में डालने और किण्वित समाधानों के साथ वैक्यूम पैकेज में रखें और वैक्यूम पैकेज को 0.085 मेगापास्कल की वैक्यूम ताकत, 3.6 सेकंड का सीलिंग समय और 5.5 सेकंड का ठंडा समय के साथ सील करें। फिर 10 से 20 मिनट के लिए ११५ और १२१ डिग्री सेल्सियस के बीच एक नसबंदी तापमान का उपयोग पैक मछली क्यूब्स बंध्याकरण । इस अध्ययन में, उच्च गुणवत्ता वाले किण्वित मछली उत्पाद तैयार किए जाते हैं।एक उपयुक्त नमक एकाग्रता का उपयोग करना, समय खटाई में डालना, और तापमान उत्पादों पाठ्य गुणवत्ता बेहतर बनाता है। सबसे अच्छा खटाई की स्थिति के लिए 8% की एक नमक एकाग्रता और खटाई में पड़ समाधान, दो घंटे के एक खटाई में डालना लग रहा है । और 10 डिग्री सेल्सियस का एक खटाई में डाल तापमान ।सुखाने की प्रक्रिया में, अंतिम नमी सामग्री और सुखाने का तापमान बनावट और सेंसर गुणवत्ता को प्रभावित कर सकता है। सबसे अच्छी सुखाने की स्थिति 55% के सूखे मछली क्यूब्स की नमी सामग्री और 50 डिग्री सेल्सियस के सुखाने के तापमान को लग रहा है। किण्वन प्रक्रिया में, सैकरोमाइसेस सेरेविसिया, तापमान और समय के अलावा मछली के स्वाद, स्वाद, रंग और बनावट गुणों को प्रभावित करता है।सफल किण्वित मछली में स्वाद, स्वाद, रंग और बनावट के लिए उच्च स्कोर होता है, जिसके परिणामस्वरूप सामंजस्यपूर्ण स्वाद, किण्वित सुगंध, वाइनी, रस्सेट रंग, उज्ज्वल सतह, कारमेल और अल डेंट बनावट होती है। असफल मछली उत्पाद में स्वाद, स्वाद, रंग और बनावट के लिए कम स्कोर होता है जिसके परिणामस्वरूप खराब स्वाद, कड़वाहट, खट्टापन, मछली, पीला रंग, किसी न किसी सतह, मोटे माउथफील और खराब बनावट होती है। उपयुक्त नसबंदी और तीव्रता 4.5 मिनट लग रही है।और एक उपयुक्त नसबंदी तापमान १२१ डिग्री सेल्सियस लग रहा है । भंडारण विचारों की गणना की जाती है और टेक्स्ट प्रोटोकॉल में उल्लिखित के रूप में निर्धारित की जाती है। और शेल्फ जीवन के लिए भविष्यवाणी 25 डिग्री सेल्सियस या २०५ दिन पर ३५ डिग्री सेल्सियस पर २६४ दिन है ।इस प्रक्रिया को करते समय, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि किण्वन और नसबंदी दोनों कदम इस तकनीक की सफलता के लिए महत्वपूर्ण हैं। इस प्रक्रिया को सीखने के बाद, इसका उपयोग अन्य मछली प्रजातियों के किण्वन में किया जा सकता है। भविष्य में, अन्य उपभेदों के साथ किण्वन की जांच की जा सकती है।जैसे लैक्टोबेसिलस, स्टेफिलोकोकस, एट सेटेरा। क्षेत्र, मछली उत्पादों को स्टरलाइज करते समय सावधानी बरतना सुनिश्चित करें, क्योंकि अत्यंत उच्च तापमान नुकसान पहुंचा सकता है।

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Research

JoVE Journal

Biochemistry

Preparation of Homogeneous MALDI Samples for Quantitative Applications

This protocol demonstrates a simple sample preparation to reduce spatial heterogeneity in ion signals during matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry. The heterogeneity of ion signals is a severe problem in MALDI, which results in poor data reproducibility and makes MALDI unsuitable for quantitative analysis. By regulating sample plate temperature during sample preparation, thermal-induced hydrodynamic flows inside droplets of sample solution are able to reduce the heterogeneity problem. A room-temperature sample preparation chamber equipped with a temperature-regulated copper base block that holds MALDI sample plates facilitates precise control of the sample drying condition. After drying of sample droplets, the temperature of sample plates is returned to room temperature and removed from the chamber for subsequent mass spectrometric analysis. The areas of samples are examined with MALDI-imaging mass spectrometry to obtain the spatial distribution of all components in the sample. In comparison with the conventional dried-droplet method that prepares samples under ambient conditions without temperature control, the samples prepared with the method demonstrated herein show significantly better spatial distribution and signal intensity. According to observations using carbohydrate and peptide samples, decreasing substrate temperature while maintaining the surroundings at ambient temperature during the drying process can effectively reduce the heterogeneity of ion signals. This method is generally applicable to various combinations of samples and matrices.

A protocol for reducing spatial heterogeneities of ion signals in MALDI mass spectrometry by regulating substrate temperature during sample drying processes is demonstrated.

मात्रात्मक अनुप्रयोगों के लिए सजातीय MALDI नमूनों की तैयारी

This protocol demonstrates a simple sample preparation to reduce spatial heterogeneity in ion signals during matrix-assisted laser desorption/ionization ...

A Filtration-based Method of Preparing High-quality Nuclei from Cross-linked Skeletal Muscle for Chromatin Immunoprecipitation

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful method to determine protein binding to chromatin DNA. Fiber-rich skeletal muscle, however, has been a challenge for ChIP due to technical difficulty in isolation of high-quality nuclei with minimal contamination of myofibrils. Previous protocols have attempted to purify nuclei before cross-linking, which incurs the risk of altered DNA-protein interaction during the prolonged nuclei preparation process. In the current protocol, we first cross-linked the skeletal muscle tissue collected from mice, and the tissues were minced and sonicated. Since we found that ultracentrifugation was not able to separate nuclei from myofibrils using cross-linked muscle tissue, we devised a sequential filtration procedure to obtain high-quality nuclei devoid of significant myofibril contamination. We subsequently prepared chromatin by using an ultrasonicator, and ChIP assays with anti-BMAL1 antibody revealed robust circadian binding pattern of BMAL1 to target gene promoters. This filtration protocol constitutes an easily applicable method to isolate high-quality nuclei from cross-linked skeletal muscle tissue, allowing consistent sample processing for circadian and other time-sensitive studies. In combination with next-generation sequencing (NGS), our method can be deployed for various mechanistic and genomic studies focusing on skeletal muscle function.

We present a filtration-based protocol to isolate high-quality nuclei from cross-linked mouse skeletal muscle wherein we removed the need for ultracentrifugation, making it easily applicable. We show that chromatin prepared from the nuclei is suitable for chromatin immunoprecipitation and likely chromatin immunoprecipitation sequencing studies.

Chromatin Immunoprecipitation के लिए क्रॉस-लिंक किए गए स्केलेटल स्नायु से उच्च-गुणवत्ता वाले नाभिक तैयार करने का एक निस्पंदन-आधारित पद्धति

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful method to determine protein binding to chromatin DNA. Fiber-rich skeletal muscle, however, has been a ...

Biosynthesis of a Flavonol from a Flavanone by Establishing a One-pot Bienzymatic Cascade

Flavonols are a major subclass of flavonoids with a variety of biological and pharmacological activities. Here, we provide a method for the in vitro enzymatic synthesis of a flavonol. In this method, Atf3h and Atfls1, two key genes in the biosynthetic pathway of the flavonols, are cloned and overexpressed in Escherichia coli. The recombinant enzymes are purified via an affinity column and then a bienzymatic cascade is established in a specific synthetic buffer. Two flavonols are synthesized in this system as examples and determined by TLC and HPLC/LC/MS analyses. The method displays obvious advantages in the derivation of flavonols over other approaches. It is time- and labor-saving and highly cost-effective. The reaction is easy to be accurately controlled and thus scaled up for mass production. The target product can be purified easily due to the simple components in the system. However, this system is usually restricted to the production of a flavonol from a flavanone.

The derivation of a flavonol is crucial for its application in healthcare and the food industry. Here, we provide a detailed protocol for the biosynthesis of a flavonol from a flavanone and discuss the crucial steps and its advantages over other approaches.

एक एक पॉट Bienzymatic Cascade की स्थापना के द्वारा एक Flavanone से एक Flavonol के Biosynthesis

Flavonols are a major subclass of flavonoids with a variety of biological and pharmacological activities. Here, we provide a method for the in vitro ...

Obtaining High-Quality Transcriptome Data from Cereal Seeds by a Modified Method for Gene Expression Profiling

The characterization of gene expression is dependent on RNA quality. In germinating, developing and mature cereal seeds, the extraction of high-quality RNA is often hindered by high starch and sugar content. These compounds can reduce both the yield and the quality of the extracted total RNA. The deterioration in quantity and quality of total RNA can subsequently have a significant impact on the downstream transcriptomic analyses, which may not accurately reflect the spatial and/or temporal variation in the gene expression profile of the samples being tested. In this protocol, we describe an optimized method for extraction of total RNA with sufficient quantity and quality to be used for whole transcriptome analysis of cereal grains. The described method is suitable for several downstream applications used for transcriptomic profiling of developing, germinating, and mature cereal seeds. The method of transcriptome profiling using a microarray platform is shown. This method is specifically designed for gene expression profiling of cereals with described genome sequences. The detailed procedure from microarray handling to final quality control is described. This includes cDNA synthesis, cRNA labelling, microarray hybridization, slide scanning, feature extraction, and data quality validation. The data generated by this method can be used to characterize the transcriptome of cereals during germination, in various stages of grain development, or at different biotic or abiotic stress conditions. The results presented here exemplify high-quality transcriptome data amenable for downstream bioinformatics analyses, such as the determination of differentially expressed genes (DEGs), characterisation of gene regulatory networks, and conducting transcriptome-wide association study (TWAS).

A method for transcriptome profiling of cereals is presented. The microarray-based gene expression profiling starts with the isolation of high-quality total RNA from cereal grains and continues with the generation of cDNA. After cRNA labelling and microarray hybridization, recommendations are given for signal detection and quality control.

जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइलिंग के लिए संशोधित विधि द्वारा अनाज बीजों से उच्च गुणवत्ता वाले ट्रांसक्रिप्टोम डेटा प्राप्त करना

The characterization of gene expression is dependent on RNA quality. In germinating, developing and mature cereal seeds, the extraction of high-quality ...

Single Cell Analysis Of Transcriptionally Active Alleles By Single Molecule FISH

Gene transcription is an essential process in cell biology, and allows cells to interpret and respond to internal and external cues. Traditional bulk population methods (Northern blot, PCR, and RNAseq) that measure mRNA levels lack the ability to provide information on cell-to-cell variation in responses. Precise single cell and allelic visualization and quantification is possible via single molecule RNA fluorescence in situ hybridization (smFISH). RNA-FISH is performed by hybridizing target RNAs with labeled oligonucleotide probes. These can be imaged in medium/high throughput modalities, and, through image analysis pipelines, provide quantitative data on both mature and nascent RNAs, all at the single cell level. The fixation, permeabilization, hybridization and imaging steps have been optimized in the lab over many years using the model system described herein, which results in successful and robust single cell analysis of smFISH labeling. The main goal with sample preparation and processing is to produce high quality images characterized by a high signal-to-noise ratio to reduce false positives and provide data that are more accurate. Here, we present a protocol describing the pipeline from sample preparation to data analysis in conjunction with suggestions and optimization steps to tailor to specific samples.&#160;

Single molecule RNA fluorescence in situ hybridization (smFISH) is a method to accurately quantify levels and localization of specific RNAs at the single cell level. Here, we report our validated lab protocols for wet-bench processing, imaging and image analysis for single cell quantification of specific RNAs.

एकल अणु मछली द्वारा ट्रांसक्रिप्शनल एक्टिव एलील्स का एकल सेल विश्लेषण

Gene transcription is an essential process in cell biology, and allows cells to interpret and respond to internal and external cues. Traditional bulk ...

Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery

Thermal shift assays (TSAs) examine how the melting temperature (Tm) of a target protein changes in response to changes in its environment (e.g., buffer composition). The utility of TSA, and specifically of nano-Differential Scanning Fluorimetry (nano-DSF), has been established over the years, both for finding conditions that help stabilize a specific protein and for looking at ligand binding by monitoring changes in the apparent Tm. This paper presents an efficient screening of the Diamond-SGC-iNEXT Poised (DSi-Poised) fragment library (768 compounds) by the use of nano-DSF, monitoring Tm to identify potential fragment binding. The prerequisites regarding protein quality and concentration for performing nano-DSF experiments are briefly outlined followed by a step-by-step protocol that uses a nano-liter robotic dispenser commonly used in structural biology laboratories for preparing the required samples in 96-well plates. The protocol describes how the reagent mixtures are transferred to the capillaries needed for nano-DSF measurements. In addition, this paper provides protocols to measure thermal denaturation (monitoring intrinsic tryptophan fluorescence) and aggregation (monitoring light back-scattering) and the subsequent steps for data transfer and analysis. Finally, screening experiments with three different protein targets are discussed to illustrate the use of this procedure in the context of lead discovery campaigns. The overall principle of the method described can be easily transferred to other fragment libraries or adapted to other instruments.

Monitoring changes in the melting temperature of a target protein (i.e., thermal shift assay, TSA) is an efficient method for screening fragment libraries of a few hundred compounds. We present a TSA protocol implementing robotics-assisted nano-Differential Scanning Fluorimetry (nano-DSF) for monitoring intrinsic tryptophan fluorescence and light back-scattering for fragment screening.

टुकड़ा आधारित लीड डिस्कवरी में स्क्रीनिंग के लिए नैनो-अंतर स्कैनिंग फ्लोरीमीटर

Thermal shift assays (TSAs) examine how the melting temperature (Tm) of a target protein changes in response to changes in its environment (e.g., buffer ...

Preparation of High-Temperature Sample Grids for Cryo-EM

The sample grids for cryo-electron microscopy (cryo-EM) experiments are usually prepared at a temperature optimal for the storage of biological samples, mostly at 4 &#176;C and occasionally at room temperature. Recently, we discovered that the protein structure solved at low temperature may not be functionally relevant, particularly for proteins from thermophilic archaea. A procedure was developed to prepare protein samples at higher temperatures (up to 70 &#176;C) for cryo-EM analysis. We showed that the structures from samples prepared at higher temperatures are functionally relevant and temperature dependent. Here we describe a detailed protocol for preparing sample grids at high temperature, using 55 &#176;C as an example. The experiment made use of a vitrification apparatus modified using an additional centrifuge tube, and samples were incubated at 55 &#176;C. The detailed procedures were fine-tuned to minimize vapor condensation and obtain a thin layer of ice on the grid. Examples of successful and unsuccessful experiments are provided.

This paper provides a detailed protocol for preparing sample grids at temperatures as high as 70 &#176;C, prior to plunge freezing for cryo-EM experiments.

क्रायो-ईएम के लिए उच्च तापमान नमूना ग्रिड की तैयारी

The sample grids for cryo-electron microscopy (cryo-EM) experiments are usually prepared at a temperature optimal for the storage of biological samples, ...

The Extraction of Liver Glycogen Molecules for Glycogen Structure Determination

Liver glycogen is a hyperbranched glucose polymer that is involved in the maintenance of blood sugar levels in animals. The properties of glycogen are influenced by its structure. Hence, a suitable extraction method that isolates representative samples of glycogen is crucial to the study of this macromolecule. Compared to other extraction methods, a method that employs a sucrose density gradient centrifugation step can minimize molecular damage. Based on this method, a recent publication describes how the density of the sucrose solution used during centrifugation was varied (30%, 50%, 72.5%) to find the most suitable concentration to extract glycogen particles of a wide variety of sizes, limiting the loss of smaller particles. A 10 min boiling step was introduced to test its ability to denature glycogen degrading enzymes, thus preserving glycogen. The lowest sucrose concentration (30%) and the addition of the boiling step were shown to extract the most representative samples of glycogen.

An optimal sucrose concentration was determined for the extraction of liver glycogen using sucrose density gradient centrifugation. The addition of a 10 min boiling step to inhibit glycogen-degrading enzymes proved beneficial.

ग्लाइकोजन संरचना निर्धारण के लिए यकृत ग्लाइकोजन अणुओं का निष्कर्षण

Liver glycogen is a hyperbranched glucose polymer that is involved in the maintenance of blood sugar levels in animals. The properties of glycogen are ...

Preparation of siRNA Mixture for Mitochondrial DNA Synthesis

To begin, prepare a 140 nano molar mix of small interfering RNA or siRNA by diluting the siRNA in optimum medium. Add the five microliters of the diluted mix to the wells of a black 384 well cell culture microplate. Prepare the appropriate amount of RNAiMAX transfection reagent solution in optimum medium and add 10 microliters to each well of the 384 well plate with a reagent dispenser.

माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए संश्लेषण के लिए सीआरएनए मिश्रण की तैयारी

सीटू सेलुलर क्रायोटोमोग्राफी के लिए इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी ग्रिड की तैयारी

Sample Preparation for In Situ Cryotomography of Mammalian Cells

In situ cellular cryotomography is a powerful technique for studying complex objects in their native frozen-hydrated cellular context, making it highly relevant to cellular biology and virology. The potential of combining cryotomography with other microscopy modalities makes it a perfect technique for integrative and correlative imaging. However, sample preparation for in situ cellular tomography is not straightforward, as cells do not readily attach and stretch over the electron microscopy grid. Additionally, the grids themselves are fragile and can break if handled too forcefully, resulting in the loss of imageable areas. The geometry of tissue culture dishes can also pose a challenge when manipulating the grids with tweezers. Here, we describe the tips and tricks to overcome these (and other) challenges and prepare good-quality samples for in situ cellular cryotomography and correlative imaging of adherent mammalian cells. With continued advances in cryomicroscopy technology, this technique holds enormous promise for advancing our understanding of complex biological systems.

लेखक स्पॉटलाइट: एन्हांस्ड क्रायोइलेक्ट्रॉन टोमोग्राफी के लिए ग्रिड तैयारी का अनुकूलन 

This method provides an accessible and flexible protocol for the preparation of electron microscopy (EM) grids for in situ cellular cryotomography and correlative light and electron microscopy (CLEM).

स्तनधारी कोशिकाओं के सीटू क्रायोटोमोग्राफी के लिए नमूना तैयारी

In situ cellular cryotomography is a powerful technique for studying complex objects in their native frozen-hydrated cellular context, making it highly ...