该协议已经产生了一些最好的见解，我们迄今对坎迪达阿尔比安人如何居住在哺乳动物胃肠道。例如，直到最近，我们才真正知道念珠菌在肠道内被本地化，或者它在这个利基中假定的许多形态形式中，哪些是局部的。这种技术的主要优点是，它允许一个人在其自然环境中可视化念珠菌，而不会破坏真菌与宿主结构或微生物群中的细菌的三维相互作用。
由于肠道是一个复杂的环境，很难在实验室建模，因此，它是非常令人满意的找到一种方法，直接探索坎迪达生物学在宿主模型。肠道微生物群的某些成分，包括念珠菌，被怀疑在炎症性肠病等疾病中发挥作用。该技术可用于诊断从患者获得的活检样本中是否存在特定微生物。
掌握 gavage 技术和在不撕裂器官的情况下解剖胃肠道部分的能力对于获得最佳结果非常重要。首先，用给定的幼崽的计算体积对每只动物进行加维。将自 <3>分动物喂养针连接到一毫升注射器，并给注射器加满一个量量，确保清除所有气泡。
将注射器放在无菌表面上。要固定动物，用占统治地位的手握住它，然后将非霸主的手滑到动物的背部，放在耳朵后面的松弛皮肤上。用拇指和食指把毛屑紧紧地聚集在一起。
用擦伤把动物捡起来，翻转过来，用同一只手的小手指在尾巴上循环，使动物固定在手掌上。轻轻伸展动物的头部，使动物与身体直线。然后用占统治地位的手拿起注射器，用弯曲的针头向下抓住它垂直于动物。
使用针头的球轻轻地钩住嘴的内角，然后沿着嘴的一侧将针头推进到喉咙后面，然后将针头移动到中心。一旦针头的球在动物的喉咙后面，向上倾斜针，使它平行于动物的身体线，并允许它顺利地滑下喉咙。如果针头不顺利滑下喉咙，针头可能位置不正确，应撤回重新定位，然后重试。
顺利推进针头，让动物吞下针头，直到只有几毫米保持可见。测试针头的球是否通过轻轻推进柱塞在胃中，如果没有阻力，请继续提供注射。注射后慢慢取针，将动物放在笼子里。
继续监测动物5至10分钟的呼吸或不适迹象，并验证其正常活动后不久，盖夫格。如果同一注射用于下一个动物，用酒精擦拭清洁针头。如果使用不同的注射，请更换针头。
使用钝端钳子捏住腹部皮肤的一部分，用剪刀将皮肤和骨盆底部附近的底筋膜切开。沿着腹腔的每一侧以 U 形将切口延伸至肋骨，然后将皮肤抬出。使用钝端钳子用剪刀从腹腔中轻轻提取 cecum，以切断 cecum 与小肠和大肠之间的连接。
将整个 cecum 放入组织学盒中，以便其解开并平放。将第二个泡沫垫放在顶部并关闭盒式磁带。然后将盒式磁带放入一个装有美莎卡恩的螺丝帽罐中。
切除含有一到两个粪便颗粒且长度小于盒式磁带的大肠部分。将纸巾放入盒式磁带中，保持平整和未缠绕。用第二个泡沫垫覆盖它，关闭盒式磁带，并放入梅塔卡恩。
对于小肠的每个部分进行取样，切除含有一些消化物质的一到两厘米段。将组织放入盒式磁带中，用第二个泡沫垫覆盖，关闭盒式磁带并放入梅塔卡恩。切除胃部时，切断与食道和小肠的连接。
将纸巾放入盒式磁带中，然后将盒式磁带放入梅塔卡恩。将盒式磁带留在美塔卡恩溶液中，在室温下至少三个小时，但少于两周。固定后，取出泡沫垫，将每个完整的组织部分返回到其盒式磁带中。
然后用100%甲醇洗两次组织35分钟，用100%乙醇洗25分钟，用二甲苯洗20分钟。将盒式磁带擦干纸巾，在70摄氏度的杂交烤箱中放入预熔化的石蜡中两小时。然后从蜡中取下盒式磁带，让多余的蜡排出并储存在室温下，直到它们嵌入蜡块中。
通过将幻灯片插入装满二甲苯的预热罐中，去蜡嵌入组织学部分。将罐子在60摄氏度下保持10分钟，然后丢弃二甲苯洗涤。将新鲜的室温二甲苯倒入罐中，重复孵育。
然后用100%乙醇填充罐子，并在室温下孵育5分钟。孵育后，从罐子上取下滑梯，然后风干。要用鱼探来污渍C.albicans，首先使用帕特笔在组织部分周围画一个圆圈。
含有杂交溶液的移液器 50 微升探针到固定组织中，用移液器尖端轻轻传播。用杂交盖玻片覆盖液体，确保防止气泡。然后将滑梯密封在水密杂交室中，在黑暗中在50摄氏度的杂交温度下孵育该部分3小时。
孵育后，将洗涤液加入科普林罐。用钳子小心地从幻灯片上取下盖玻片，然后将滑轨放在洗涤液中。用铝箔盖住罐子，在50摄氏度下孵育20分钟。
接下来，通过倒掉洗涤液并用 PBS 重新填充罐子来清洗幻灯片。立即倒出并重新填充新鲜 PBS，重复此过程，总共洗涤两次。用细腻的任务擦拭和用帕特笔圈出肠道组织部分。
将幻灯片放在不透明的塑料容器中，并在组织部分加入 50 微升粘液核染色溶液。用铝箔盖住容器，在4摄氏度下孵育45分钟。孵育后，将幻灯片放入科普林罐中，用 PBS 清洗两次。
将多余的 PBS 敲开纸巾上的，然后用纸巾擦去最后一滴。在每个部分上放置一滴安装介质，并用玻璃盖玻片盖住，确保防止气泡。让安装介质在整个盖玻片下扩散。
将盖玻片与指甲油固定在角落，并使用荧光显微镜对幻灯片进行成像。该协议可用于在体外和宿主组织中对C.albicans进行荧光标记。体外传播的催眠、圆形酵母细胞、肠道细胞和不透明细胞被固定、渗透，并区分荧光和相位对比显微镜。
圆形酵母和高度拉长的催眠在小鼠大肠中成像。宿主组织被染色的C.albicans特异性探头或泛真菌探针。C.albicans 被标记为红色，宿主细胞核蓝色，粘液层绿色。
在粘液胃肠道的不同部分，包括紧邻宿主粘膜的区域和肠道流明的更中心区域，检测到了C.albicans。对于以前没有进行过格法技术的科学家来说，在尝试这种方法之前获得专门培训非常重要。在鱼染色后，免疫荧光技术可用于染色宿主粘膜的其他特征。
这允许对宿主的组织损伤或免疫反应进行表征。这项技术使我们能够描述念珠三生菌突变体真菌细胞形态与宿主生存之间的关系，进一步增进了我们对念珠菌生物的理解，在开发疗法时可以利用这种生物学。
