Name: glomerular outgrowth as an ex vivo assay to analyze pathways involved in parietal epithelial cell activation
Uploaded: 2020-08-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Glomerular Outgrowth as an Ex Vivo Assay to Analyze Pathways Involved in Parietal Epithelial Cell Activation at JoVE.com

Это исследование было поддержано Голландским фондом почек (грант 14A3D104) и Нидерландской организацией научных исследований (грант NWO VIDI: 016.156.363).

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с руководящими принципами Комитета по этике животных Университета Радбуда Неймегена.
ПРИМЕЧАНИЕ: Необработанные, здоровые дикие мыши типа (N No 4) и cd44-/- (n q 4) мыши были принесены в жертву в возрасте от 12 до 16 недел...

<ol>
	<li>Fatima, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parietal+epithelial+cell+activation+marker+in+early+recurrence+of+FSGS+in+the+transplant.">Parietal epithelial cell activation marker in early recurrence of FSGS in the transplant.</a> Clinical journal of the American Society of Nephrology: CJASN. 7 (11), 1852-1858 (2012).</li><li>Dijkman, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferating+cells+in+HIV+and+pamidronate-associated+collapsing+focal+segmental+glomerulosclerosis+are+parietal+epithelial+cells.">Proliferating cells in HIV and pamidronate-associated collapsing focal segmental glomerulosclerosis are parietal epithelial cells.</a> Kidney International. 70 (2), 338-344 (2006).</li><li>Kuppe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+histological+patterns+in+glomerular+epithelial+cells+in+secondary+focal+segmental+glomerulosclerosis.">Common histological patterns in glomerular epithelial cells in secondary focal segmental glomerulosclerosis.</a> Kidney International. 88 (5), 990-998 (2015).</li><li>Dijkman, H., Smeets, B., van der Laak, J., Steenbergen, E., Wetzels, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parietal+epithelial+cell+is+crucially+involved+in+human+idiopathic+focal+segmental+glomerulosclerosis.">The parietal epithelial cell is crucially involved in human idiopathic focal segmental glomerulosclerosis.</a> Kidney International. 68 (4), 1562-1572 (2005).</li><li>Smeets, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parietal+epithelial+cells+participate+in+the+formation+of+sclerotic+lesions+in+focal+segmental+glomerulosclerosis.">Parietal epithelial cells participate in the formation of sclerotic lesions in focal segmental glomerulosclerosis.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 22 (7), 1262-1274 (2011).</li><li>Smeets, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+origin+of+glomerular+extracapillary+lesions+from+parietal+epithelial+cells.">Tracing the origin of glomerular extracapillary lesions from parietal epithelial cells.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 20 (12), 2604-2615 (2009).</li><li>Smeets, B., Moeller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parietal+epithelial+cells+and+podocytes+in+glomerular+diseases.">Parietal epithelial cells and podocytes in glomerular diseases.</a> Seminars in Nephrology. 32 (4), 357-367 (2012).</li><li>Ryu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+leakage+through+glomerular+basement+membrane+ruptures+triggers+the+proliferation+of+parietal+epithelial+cells+and+crescent+formation+in+non-inflammatory+glomerular+injury.">Plasma leakage through glomerular basement membrane ruptures triggers the proliferation of parietal epithelial cells and crescent formation in non-inflammatory glomerular injury.</a> The Journal of Pathology. 228 (4), 482-494 (2012).</li><li>Eymael, J., Smeets, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+and+fate+of+the+regenerating+cells+of+the+kidney.">Origin and fate of the regenerating cells of the kidney.</a> European Journal of Pharmacology. 790, 62-73 (2016).</li><li>Smeets, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+progenitor+cells+contribute+to+hyperplastic+lesions+of+podocytopathies+and+crescentic+glomerulonephritis.">Renal progenitor cells contribute to hyperplastic lesions of podocytopathies and crescentic glomerulonephritis.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 20 (12), 2593-2603 (2009).</li><li>Eymael, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD44+is+required+for+the+pathogenesis+of+experimental+crescentic+glomerulonephritis+and+collapsing+focal+segmental+glomerulosclerosis.">CD44 is required for the pathogenesis of experimental crescentic glomerulonephritis and collapsing focal segmental glomerulosclerosis.</a> Kidney International. 93 (3), 626-642 (2018).</li><li>Roeder, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+ERK1/2+increases+CD44+in+glomerular+parietal+epithelial+cells+leading+to+matrix+expansion.">Activated ERK1/2 increases CD44 in glomerular parietal epithelial cells leading to matrix expansion.</a> Kidney International. 91 (4), 896-913 (2017).</li><li>Appel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+of+podocytes+from+glomerular+parietal+epithelial+cells.">Recruitment of podocytes from glomerular parietal epithelial cells.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 20 (2), 333-343 (2009).</li><li>Yaoita, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visceral+epithelial+cells+in+rat+glomerular+cell+culture.">Visceral epithelial cells in rat glomerular cell culture.</a> European Journal of Cell Biology. 67 (2), 136-144 (1995).</li><li>Kuppe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigations+of+Glucocorticoid+Action+in+GN.">Investigations of Glucocorticoid Action in GN.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 28 (5), 1408-1420 (2017).</li><li>Ohse, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+conditionally+immortalized+mouse+glomerular+parietal+epithelial+cells+in+culture.">Establishment of conditionally immortalized mouse glomerular parietal epithelial cells in culture.</a> Journal of the American Society of Nephrology: JASN. 19 (10), 1879-1890 (2008).</li></ol>

Используя протокол, описанный в этой статье, можно использовать одиночные инкапсулированные гломерули для оценки тейетальной эпителиальной пролиферации клеток, которая является следствием тейетальной активации клеток. Эта модель ex vivo позволит нам детально изучить молекулярные пути...

Гломерулярные заболевания являются важной группой заболеваний почек и представляют собой основную причину заболевания почек на конечной стадии (ESRD). К сожалению, конкретные варианты лечения ограничены и прогрессирование в ESRD неизбежна. Гломерулярные заболевания определяются наличием гломерулярных травм и могут быть сгруппированы в воспалительных и невоспалительных заболеваниях. Хотя первоначальное оскорбление отличается, последние исследования показали, что общий клеточный механизм приводит к гломерулярной гиперплазии клеток и в конечном итоге гломерулосклероз во всех гломерулярных заболеваний, независимо от основной причины1,2,3,4.
В частности, было показано, что гломерулоклеротические поражения в основном состоят из активированных темеальных эпителиальных клеток5,,6. В физиологических условиях, теменные эпителиальные клетки плоские тихие эпителиальные клетки, которые выстиляют капсулу Боумана из гломерула. Однако любая гломерулярная травма, вызванная генетическими мутациями (например, специфическими подоцитами или митохондриальными цитопатиями), воспалением или гиперфильтрацией (например, вызванной снижением почечной массы, гипертонией, ожирением или диабетическим меллитом), может вызвать активацию темных эпителиальных клеток. Активированные теметальные эпителиальные клетки размножаются и откладывают внеклеточную матрицу, что приводит к образованию клеточных полумесяцев или склеротических поражений5,,7,,8. Прогрессирование этих процессов приводит к потере функции почек9. Поэтому активация теменной эпителиальной клетки является ключевым фактором в развитии и прогрессировании гломерулосклероза как при воспалительных, так и при невоспалительных гломерулярных заболеваниях1,,2,,3,,4,,10.
Молекулярные процессы, посреднительные темиетальной активации эпителиальных клеток, до сих пор в значительной степени неизвестны. Недавние исследования показывают, что активированные теметальные эпителиальные клетки de novo экспресс CD44, рецептор, который имеет важное значение для активации различных путей, участвующих в клеточной пролиферации и миграции. Кроме того, было показано, что ингибирование CD44 ингибирует активацию теменных эпителиальных клеток и опутывает прогрессирование образования полумесяца и гломерулезплероза у животных моделей воспалительных, а также невоспалительных гломерулярных заболеваний11,,12.
Поскольку активация теменной эпителиальной клетки является ключевым игроком для развития гломерулосклероза и формирования полумесяца, ингибирование этих клеток может замедлить прогрессирование гломерулярных заболеваний. Выяснение молекулярных путей активации теменной эпителиальной клетки может привести к развитию специфических терапевтических вмешательств, которые смягчат образование гиперпластических и гломеруклеротических поражений при гломерулярных заболеваниях.
В экспериментальных моделях животных часто трудно представить доказательства прямого влияния измененного экспрессии генов (модели нокаутирования или трансгенные мышиные модели) или медикаментозного лечения теменных эпителиальных клеток. В обычной выдаваемой мыши наблюдаемые изменения in vivo могут быть объяснены прямыми изменениями в теменных эпителиальных клетках. Однако, поскольку экспрессия генов также изменяется в других типах клеток в мыши, нельзя исключать косвенных эффектов, опосредованных другими типами клеток. Развитие условных кре-локс мышей, управляемых промоутерами, в основном активными в теменных эпителиальных клетках, обеспечило решение в некоторых случаях13. Тем не менее, условные трансгенные модели являются сложными и, хотя более условные линии становятся доступными, для многих обычных нокаут-аут или трансгенных линий мыши еще не условный заменитель.
Для изучения прямого воздействия на теменной эпителиальной клетки, наша группа разработала ex vivo анализ с использованием одного инкапсулированных гломерули изолированы от мышиных почек для измерения и анализа теменной эпителиальной пролиферации клеток и миграции. Этот метод позволит нам определить теменной эпителиальной клетки конкретные эффекты и найти ответственные пути для теменной активации эпителиальных клеток и варианты лечения теста, чтобы ингибировать эту активацию.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >24-well cell culture plate</td>
			<td >Corning Costar</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >anti-CD31</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>Endothelial cell marker (used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >chicken-anti-rat Alexa 647</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>&#160;(used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI-Fluoromount G</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>Mounting medium containing DAPI</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Digital inverted light microscope</td>
			<td>Westburg, EVOS fl microscope</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >donkey-anti-goat Alexa 568</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>&#160;(used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >donkey-anti-rabbit Alexa 568</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>&#160;(used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s medium&#160;</td>
			<td>Lonza</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >EBM Medium</td>
			<td>Lonza</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >EBM-MV Single Quots kit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>containing hydrocortisone, hEGF, GA-1000, FBS and BBE</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Lonza</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fetal Calf Serum</td>
			<td>Lonza</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescent microscope</td>
			<td>Leica Microsystems GmbH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >goat-anti-synaptopodin</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>Podocyte marker (used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hanks&#39;Balanced Salt Solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ImageJ software</td>
			<td >FIJI 1.51n</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >petri dish</td>
			<td >Sarstedt</td>
			<td>size 100</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >rabbit-anti-claudin1</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Parietal epithelial cell marker (used concentration 1:100)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >rabbit-anti-SSeCKS</td>
			<td>Roswell Park Comprehensive Cancer Center,Buffalo, NY, USA</td>
			<td>kindly provided by Dr. E. Gelman, Parietal epithelial cell marker</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >rat-anti-CD44</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>Parietal epithelial cell marker (used concentration 1:200)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >scalpel</td>
			<td >Dahlhausen</td>
			<td>size 10</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sieves&#160;</td>
			<td >Endecotts Ltd</td>
			<td>size 300 &#181;m, 75 &#181;m, 53 &#181;m, steel</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >syringe</td>
			<td >BD Plastipak</td>
			<td>size: 20 ml</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ultra-Low Attachment Microplates&#160;</td>
			<td>Corning Costar</td>
			<td>6-well plates</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

glomerular outgrowth as an ex vivo assay to analyze pathways involved in parietal epithelial cell activation

Активация париетальных эпителиальных клеток (УИК) является одним из ключевых факторов, влияющих на развитие и прогрессирование гломерулокслероза. Ингибирование путей, участвующих в теменной активации эпителиальных клеток, может быть инструментом для ослабления прогрессирования гломерулярных заболеваний. В этой статье описывается метод культуры и анализа теменной эпителиальной клетки нарост инкапсулированных гломерули, изолированных от мышиных почек. После вскрытия изолированных почек мыши, ткань измельчается, а гломерули изолированы сито. Инкапсулированные гломерули собираются, и одиночные гломерули культивируются в течение 6 дней, чтобы получить гломерулярные нарост темеетальных эпителиальных клеток. В течение этого периода, теменной эпителиальной пролиферации клеток и миграции могут быть проанализированы путем определения числа клеток или площади поверхности перерастающей клетки. Этот анализ может поэтому использоваться в качестве инструмента для изучения последствий измененного экспрессии генов у трансгенных или нокаут-мышей или влияние условий культуры на теменные характеристики эпителиального роста клеток и сигнализации. Используя этот метод, важные пути, участвующие в процессе активации теменной эпителиальной клетки и, следовательно, при гломерулокслерозе могут быть изучены.

На рисунке 1показана систематическая диаграмма метода выполнения гломерулярного анализа наростов. Рисунок 2A-D показывает гломерулярные наросты инкапсулированного гломерули в разных точках времени, как это наблюдается с помо...

Watch this Scientific Journal Video about Glomerular Outgrowth as an Ex Vivo Assay to Analyze Pathways Involved in Parietal Epithelial Cell Activation at JoVE.com

Glomerular Outgrowth as an Ex Vivo Assay to Analyze Pathways Involved in Parietal Epithelial Cell Activation

В этой статье описывается метод культивирования и анализа гломерулярных темеальных эпителиальных клеточных заростов инкапсулированных гломерули, изолированных от мышиных почек. Этот метод может быть использован для изучения путей, участвующих в теменной эпителиальной пролиферации клеток и миграции.

Гломерулярный рост, как Ex Vivo Assay для анализа путей, участвующих в пареталальной активации клеток

Parietal epithelial cell (PEC) activation is one of the key factors involved in the development and progression of glomerulosclerosis. Inhibition of ...

Активация теменной эпителиальной клетки является ключевым фактором в развитии рубцовой ткани в гломеруле почки. Используя этот метод, мы можем изучить клеточные процессы, участвующие в этой активации и, надеюсь, найти варианты лечения, чтобы замедлить или даже остановить прогрессирование болезни. Основным преимуществом нашей техники является то, что мы используем первичные клетки, которые растут прямо из изолированных glomeruli.После освобождения почек, как указано в тексте рукописи, удерживайте почку хирургическими типсами и используйте еще пару типсов, чтобы снять почечные капсулы. После этого поместите почки в колодцы из шести хорошо культуры пластины, каждая из которых содержит два миллилитров HBSS и место культуры пластины на льду. Во-первых, перенесите почки в 100-миллиметровую чашку Петри и используйте два скальпеля, чтобы измельчить их на мелкие кусочки, которые примерно от одного до двух миллиметров.Держите рубленые кусочки почек мокрыми с HBSS. Затем поместите кусочки почек поверх 300-метрового металлического сито и нажмите на почку через сито с помощью поршеня из шприца 20 миллилитров. Неоднократно промыть сито с HBSS между ними и использовать серологические пипетки для сбора потока через и передать его в чистую чашку Петри.Используйте скальпель, чтобы соскребать все, что остается в нижней части сито и передать его в собранный гомогенат почек. Промыть гомогенат почек через сито 75 и 53 микрометров с помощью HBSS. Затем вымойте оба сито с HBSS, чтобы удалить все мелкие структуры.Соберите структуры почек и материал, который остался в сито путем мытья верхней поверхности каждого с DMEM дополнен 20%fetal икроножной сыворотки и передачи материала в скважины из шести хорошо ультра-низкой микроплиги крепления. Принесите ультра-низкий микроплой крепления к перевернутому световому микроскопу и используйте 20 микролитровую пипетку, которая взяла одноместный инкапсулированный и /или decapsulated glomeruli. После ловли одного glomerulus в кончике пипетки, добавить свежие DMEM среды без собранного материала почек в тот же кончик пипетки в объеме 20 микролитров.Передача одного glomerulus с DMEM среды в центр колодец 24 хорошо пластины культуры клеток и инкубировать при 37 градусов по Цельсию с 5%углекислого газа в течение трех часов, чтобы вложение glomerulus в центре хорошо. После инкубации гломерул будет прикреплен к центру колодец. Аккуратно добавьте 500 микролитров эндотелиальной базальной среды, дополненную набором фактора роста и дополнительными 5%FBS и 1%пенициллином и стрептомицином к каждой хорошо.Культура одного glomeruli при 37 градусах по Цельсию с 5%углекислого газа в течение шести дней. После шести дней инкубации используйте цифровой перевернутый световой микроскоп для получения изображений и анализа гломерулярного вырастания. Используя программное обеспечение для анализа изображений, определите площадь поверхности гломерулярного нарой, открыв один из файлов изображения с помощью планки масштаба.Нарисуйте прямую линию на строке масштаба и нажмите на Analyze, а затем измерьте, чтобы определить расстояние в пикселях. Чтобы определить шкалу, нажмите Анализ и Установить шкалу и ввести известное расстояние в пикселях, известное расстояние и единицу длины. Нажмите Хорошо, когда закончите.Нажмите на анализ и установить измерения. Затем проверьте параметры для Area и Display Label. Нажмите Хорошо, когда закончите.Затем нарисуйте выбор от руки вокруг гломерулярного нарой. Нажмите Анализ и измерить, чтобы отобразить таблицу результатов, которая содержит площадь поверхности нарой в ранее определенных масштабах. в этом исследовании, гломерулярные теменные эпителиальные клеточные нарои инкапсулированные гломерули изолированы от почек мыши, культурны, и проанализированы.Репрезентативные изображения световой микроскопии показывают гломерулярные нарои в разные моменты времени во время культуры после того, как гломерулы изолированы от почек мыши. Для того, чтобы подтвердить, что перерастает клетки теменных эпителиальных клеток, декапсулированные гломерули также изолированы и культурны в течение шести дней. Декапсулированные гломерули не показывают клеточного нароения в этот инкубационный период.Иммунофторесцентное окрашивание затем выполняется для различных темальных эпителиальных маркеров клеток, фото сайт конкретных маркеров, а также эндотелиальных маркеров клеток. Результаты подтверждают, что перерастает клетки, действительно, теменые эпителиальные клетки. Гломерули, связанные с CD44 нокаут мышей показывают снижение числа перераставных клеток, а также снижение площади поверхности гломерулярного перераста по сравнению с glomeruli изолированы от диких мышей типа.Это говорит о важной роли CD44 в активации теменной эпителиальной клетки. Используя этот метод, можно также изучить влияние на наркотики на теменной эпителиальной активации клеток. Это может быть сделано путем лечения изолированных glomeruli с препаратом по вашему выбору и проанализировать различия в росте клеток и миграции клеток.

Research

JoVE Journal

Biology

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Экс Vivo культуры первичных человеческих маточных труб эпителиальных клеток

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Activation of Apoptosis by Cytoplasmic Microinjection of Cytochrome c

Activation of Apoptosis by Cytoplasmic Microinjection of Cytochrome c

Активация апоптоза Цитоплазматическая Микроинъекция цитохрома С</em

Apoptosis, or programmed cell death, is a conserved and highly regulated pathway by which cells die1.  Apoptosis can be triggered when cells encounter a ...

Chromatin Isolation by RNA Purification (ChIRP)

Chromatin Isolation by RNA Purification ChIRP

Хроматина Изоляция очистки РНК (чирпа)

Long noncoding RNAs are key regulators of chromatin states for important biological processes such as dosage compensation, imprinting, and developmental ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Быстрое Генетический анализ эпителиальных мезенхимальных сигнализации во время регенерации волос

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

An Ex vivo Culture System to Study Thyroid Development

An Ex vivo Culture System to Study Thyroid Development

<em&gt; Экс естественных</em&gt; Культура Система по изучению развития щитовидной железы

The thyroid is a bilobated endocrine gland localized at the base of the neck, producing the thyroid hormones T3, T4, and calcitonin. T3 and T4 are ...

Mouse Fetal Whole Intestine Culture System for Ex Vivo Manipulation of Signaling Pathways and Three-dimensional Live Imaging of Villus Development

Mouse Fetal Whole Intestine Culture System for Ex Vivo Manipulation of Signaling Pathways and Three-dimensional Live Imaging of Villus Development

Мышь плода Всего кишка Культура Система для<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Манипуляция сигнальных путей и трехмерных живых изображений развития ворсинки

Most morphogenetic processes in the fetal intestine have been inferred from thin sections of fixed tissues, providing snapshots of changes over ...

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

В режиме реального времени Анализ метаболического профиля в<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Мышь Кишечная Crypt Органоид Культуры

The small intestinal mucosa exhibits a repetitive architecture organized into two fundamental structures: villi, projecting into the intestinal lumen and ...

The c-FOS Protein Immunohistological Detection: A Useful Tool As a Marker of Central Pathways Involved in Specific Physiological Responses In Vivo and Ex Vivo

The c-FOS Protein Immunohistological Detection: A Useful Tool As a Marker of Central Pathways Involved in Specific Physiological Responses In Vivo and Ex Vivo

C-FOS белка Обнаружение иммуногистохимического: Полезный инструмент в качестве маркера Центральной путей, участвующих в конкретных физиологических реакций<em&gt; В Vivo</em&gt; и<em&gt; Ex Vivo</em

Many studies seek to identify and map the brain regions involved in specific physiological regulations. The proto-oncogene c-fos, an immediate early gene, ...

In Vitro and In Vivo Approaches to Determine Intestinal Epithelial Cell Permeability

In Vitro and In Vivo Approaches to Determine Intestinal Epithelial Cell Permeability

In Vitro и In Vivo подходы для определения проницаемости кишечной эпителиальных клеток

The intestinal barrier defends against pathogenic microorganism and microbial toxin. Its function is regulated by tight junction permeability and ...

Forced Salivation As a Method to Analyze Vector Competence of Mosquitoes

Вынуждены слюноотделение как метод для анализа вектора компетенции комаров

Vector competence is defined as the potential of a mosquito species to transmit a mosquito-borne virus (mobovirus) to a vertebrate host. Viable virus ...