Name: a decentralized (ex vivo) murine bladder model with the detrusor muscle removed for direct access to the suburothelium during bladder filling
Uploaded: 2019-11-28T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av National Institute of diabetes og fordøyelses-og nyre sykdommer Grant DK41315.

Alle prosedyrer som involverer dyr som er beskrevet i dette manuskriptet ble gjennomført i henhold til National Institutes of Health guide for omsorg og bruk av laboratorium dyr og den institusjonelle Animal use og Care Committee ved Universitetet i Nevada.
Merk: modellen som presenteres her består av fjerning av detrusor muskelen mens Urothelium og SUBU/LP forblir intakt (figur 1B) for å aktivere ETTERFORSKERE direkte...

<ol>
	<li>Apodaca, G., Balestreire, E., Birder, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+uroepithelial-associated+sensory+web.">The uroepithelial-associated sensory web.</a> Kidney International. 72, 1057-1064 (2007).</li><li>Fry, C. H., Vahabi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+the+Mucosa+in+Normal+and+Abnormal+Bladder+Function.">The Role of the Mucosa in Normal and Abnormal Bladder Function.</a> Basic and Clinical Pharmacology and Toxicology. , 57-62 (2016).</li><li>Merrill, L., Gonzalez, E. J., Girard, B. M., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptors,+channels,+and+signalling+in+the+urothelial+sensory+system+in+the+bladder.">Receptors, channels, and signalling in the urothelial sensory system in the bladder.</a> Nature Reviewes Urology. 13, 193-204 (2016).</li><li>Ferguson, D. R., Kennedy, I., Burton, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+is+released+from+rabbit+urinary+bladder+epithelial+cells+by+hydrostatic+pressure+changes--a+possible+sensory+mechanism?.">ATP is released from rabbit urinary bladder epithelial cells by hydrostatic pressure changes--a possible sensory mechanism?.</a> Journal of Physiology. 505, 503-511 (1997).</li><li>Wang, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+and+purinergic+receptor-dependent+membrane+traffic+in+bladder+umbrella+cells.">ATP and purinergic receptor-dependent membrane traffic in bladder umbrella cells.</a> Journal of Clinical Investigation. 115, 2412-2422 (2005).</li><li>Miyamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+role+for+Piezo1+in+stretch-evoked+Ca(2)(+)+influx+and+ATP+release+in+urothelial+cell+cultures.">Functional role for Piezo1 in stretch-evoked Ca(2)(+) influx and ATP release in urothelial cell cultures.</a> Journal of Biological Chemistry. 289, 16565-16575 (2014).</li><li>Mochizuki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TRPV4+cation+channel+mediates+stretch-evoked+Ca2++influx+and+ATP+release+in+primary+urothelial+cell+cultures.">The TRPV4 cation channel mediates stretch-evoked Ca2+ influx and ATP release in primary urothelial cell cultures.</a> Journal of Biological Chemistry. 284, 21257-21264 (2009).</li><li>McLatchie, L. M., Fry, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+freshly+isolated+guinea-pig+bladder+urothelial+cells:+a+quantification+and+study+of+the+mechanisms+involved.">ATP release from freshly isolated guinea-pig bladder urothelial cells: a quantification and study of the mechanisms involved.</a> BJU International. 115, 987-993 (2015).</li><li>Birder, L. A., Apodaca, G., de Groat, W. C., Kanai, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic-+and+capsaicin-evoked+nitric+oxide+release+from+urothelium+and+afferent+nerves+in+urinary+bladder.">Adrenergic- and capsaicin-evoked nitric oxide release from urothelium and afferent nerves in urinary bladder.</a> American Journal of Physiology Renal Physiology. 275, F226-F229 (1998).</li><li>Birder, L. A., Kanai, A. J., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DMSO:+effect+on+bladder+afferent+neurons+and+nitric+oxide+release.">DMSO: effect on bladder afferent neurons and nitric oxide release.</a> Journal of Urology. 158, 1989-1995 (1997).</li><li>Birder, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanilloid+receptor+expression+suggests+a+sensory+role+for+urinary+bladder+epithelial+cells.">Vanilloid receptor expression suggests a sensory role for urinary bladder epithelial cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences U S A. 98, 13396-13401 (2001).</li><li>Birder, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-adrenoceptor+agonists+stimulate+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+rat+urinary+bladder+urothelial+cells.">Beta-adrenoceptor agonists stimulate endothelial nitric oxide synthase in rat urinary bladder urothelial cells.</a> Journal of Neuroscience. 22, 8063-8070 (2002).</li><li>Durnin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ex+vivo+bladder+model+with+detrusor+smooth+muscle+removed+to+analyse+biologically+active+mediators+released+from+the+suburothelium.">An ex vivo bladder model with detrusor smooth muscle removed to analyse biologically active mediators released from the suburothelium.</a> Journal of Physiology. 597, 1467-1485 (2019).</li><li>Yoshida, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-neuronal+cholinergic+system+in+human+bladder+urothelium.">Non-neuronal cholinergic system in human bladder urothelium.</a> Urology. 67, 425-430 (2006).</li><li>Beckel, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pannexin+1+channels+mediate+the+release+of+ATP+into+the+lumen+of+the+rat+urinary+bladder.">Pannexin 1 channels mediate the release of ATP into the lumen of the rat urinary bladder.</a> Journal of Physiology. 593, 1857-1871 (2015).</li><li>Collins, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OnabotulinumtoxinA+significantly+attenuates+bladder+afferent+nerve+firing+and+inhibits+ATP+release+from+the+urothelium.">OnabotulinumtoxinA significantly attenuates bladder afferent nerve firing and inhibits ATP release from the urothelium.</a> BJU International. 112, 1018-1026 (2013).</li><li>Daly, D. M., Nocchi, L., Liaskos, M., McKay, N. G., Chapple, C., Grundy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+afferent+pathways+and+urothelial+function+in+the+male+mouse+bladder.">Age-related changes in afferent pathways and urothelial function in the male mouse bladder.</a> Journal of Physiology. 592, 537-549 (2014).</li><li>Durnin, L., Hayoz, S., Corrigan, R. D., Yanez, A., Koh, S. D., Mutafova-Yambolieva, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urothelial+purine+release+during+filling+of+murine+and+primate+bladders.">Urothelial purine release during filling of murine and primate bladders.</a> American Journal of Physiology Renal Physiology. 311, F708-F716 (2016).</li><li>Gonzalez, E. J., Heppner, T. J., Nelson, M. T., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purinergic+signalling+underlies+transforming+growth+factor-beta-mediated+bladder+afferent+nerve+hyperexcitability.">Purinergic signalling underlies transforming growth factor-beta-mediated bladder afferent nerve hyperexcitability.</a> Journal of Physiology. 594, 3575-3588 (2016).</li></ol>

Blæren har to funksjoner: lagring og annullering av urin. Normal drift av disse funksjonene krever riktig mekanisk sensing av intraluminal volum og trykk og Transduction av signaler gjennom celler i blæren veggen for å regulere detrusor muskel excitability. Blæren mucosa (urothelium) antas å regulere blæren excitability ved å slippe en rekke signalering molekyler i SubU/LP som påvirker mange celletyper i blæren veggen. For tiden, de fleste forsøk på karakterisering av urothelium-avledede meglere innebære bruk...

Hensikten med denne modellen er å muliggjøre direkte tilgang til den submucosal siden av blæren mucosa under ulike faser av blæren fylling.
Blæren må avstå fra for tidlig sammentrekning under fylling og tom når kritisk volum og trykk er nådd. Unormal continence eller annullering av urin er ofte forbundet med unormal excitability av den detrusor glatte muskelen (DSM) i løpet av blære fylling. Excitability av DSM bestemmes av faktorer som er iboende til den glatte muskelceller og ved påvirkninger generert av ulike celletyper i blæren veggen. Veggen av urin blæren består av urothelium (mucosa), suburothelium (SubU)/lamina propria (LP), detrusor glatt muskel (DSM) og serosa (figur 1a). Urothelium består av paraply celler (dvs. det ytterste laget av urothelium), mellomliggende celler og basal celler (dvs. det innerste laget av urothelium). Ulike typer celler, inkludert interstitiell celler, fibroblaster, afferente nerve terminaler, små blodkar, og immunceller bor i SubU/LP. Det er allment antatt at blæren urothelium er en sensorisk organ som initierer refleks vannlating og continence ved å slippe meglere i submukosa som påvirker cellene i SubU/LP og DSM1,2,3. For det meste er slike forutsetninger basert på studier som har vist utgivelsen av meglere: fra biter av mucosa utsatt for endringer i hydrostatisk trykk4,5; fra kultivert urotelialt celler utsatt for strekk6,7, hypotonicity-indusert celle hevelse7 eller drag styrker8; fra isolerte blære vegg strimler ved reseptor eller nerve aktivering9,10,11,12,13,14; og i blæren lumen på slutten av blæren fylle15,16,17,18,19. Mens slike studier var medvirkende til å demonstrere utgivelsen av meglere ved mekanisk stimulering av blære vegg segmenter eller kultivert urotelialt celler, må de støttes av direkte bevis for frigjøring av meglere i submukosa som er elicited av fysiologiske stimuli som reproduserer blære fylling. Dette er en utfordrende oppgave gitt at SubU/LP ligger dypt i blæreveggen hindrer enkel tilgang til nærheten av SubU/LP under blære fylling.
Her illustrerer vi en desentralisert (ex vivo) murine blære modell med detrusor muskelen fjernet13 som ble utviklet for å lette studier på lokale mekanismer for mechanotransduction som deltar i signalering mellom blæren urothelium, DSM og andre celletyper i blæren veggen. Denne tilnærmingen er overlegen ved hjelp av flat blæreveggen ark, blære vegg strimler eller kultivert urotelialt celler fordi det tillater direkte målinger i nærheten av SubU/LP av urothelium-avledet meglere som er utgitt eller dannet som svar på fysiologiske trykk og volumer i blæren og unngår potensielle fenotypiske endringer i celle kulturen. Den kan brukes til å måle tilgjengelighet, utgivelse, metabolisme og transurothelial transport av meglere i SubU/LP på ulike stadier av blære fylling (figur 1B). Preparatet kan også brukes til å undersøke urotelialt signalering og mechanotransduction i modeller av overaktiv og underactive blære syndromer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>C79</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextrose</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>D16</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-20</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>GenieTouch</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>P217</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>P284</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>SCHOTT ACEI</td>
			<td></td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Olympus SZX7</td>
			<td></td>
			<td>Flexible to use any scope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>M33</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S671</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S233</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles 25G</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305122</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ bath</td>
			<td>Custom made</td>
			<td></td>
			<td>Flexible source; We made it from Radnoti dissecting dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-20 tubing</td>
			<td>Intramedic</td>
			<td>427405</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure transducer</td>
			<td>AD instrument</td>
			<td></td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>00632-11</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software pressure-volume</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>Power lab</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Nylon, 6-0</td>
			<td>AD surgical</td>
			<td>S-N618R13</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Silk, 6-0</td>
			<td>Deknatel via Braintree Scientific, Inc.</td>
			<td>07J1500190</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 1 ml</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309602</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water circulator</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>K-MOD 100</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a decentralized (ex vivo) murine bladder model with the detrusor muscle removed for direct access to the suburothelium during bladder filling

Tidligere studier har etablert utgivelsen av kjemiske stoffer fra flat blære mucosa ark festet i ussing kamre og utsatt for endringer i hydrostatisk trykk eller mekanisk strekk og fra kultivert urotelialt celler på hydrostatisk trykk endringer, strekk, celle hevelse, eller dra krefter, og i blæren lumen på slutten av fylling. Slike funn førte til antagelsen om at disse meglere er også utgitt i suburothelium (SubU)/lamina propria (LP) under blære fylling, hvor de påvirker celler dypt i blæren veggen til slutt regulere blæren excitability. Det er minst to åpenbare begrensninger i slike studier: 1) ingen av disse tilnærmingene gir direkte informasjon om tilstedeværelsen av meglere i SubU/LP, og 2) stimuli som brukes er ikke fysiologiske og ikke recapitulate autentisk fylling av blæren. Her diskuterer vi en prosedyre som gir direkte tilgang til den suburothelial overflaten av blæren mucosa i løpet av blæren fylling. Den murine detrusor-fri forberedelse vi skapte ligner fylling av intakt blæren og tillater trykk-volum studier som skal utføres på blæren i fravær av forvirrende signalering fra spinal reflekser og detrusor glatt muskel. Ved hjelp av romanen detrusor-fri blære modell, vi nylig viste at intravesical målinger av meglere ikke kan brukes som en proxy til hva som er utgitt eller finnes i SubU/LP under blære fylling. Modellen muliggjør undersøkelse av urothelium-avledet signalering molekyler som er utgitt, generert av metabolisme og/eller transporteres inn i SubU/LP i løpet av blæren fylling å overføre informasjon til neurons og glatte muskelen i blæren og regulere sin excitability under continence og vannlating.

Veggen av murine detrusor-fri blære forberedelse er intakt og inneholder alle lag unntatt DSM og serosa. Studier med bevis på prinsippet viste at den DSM-frie blæreveggen inkluderer urothelium og SubU/LP mens tunika- muscularis og serosa er fraværende (figur 2)13.
Fylling av detrusor-fri blære tilnærmet normal blære fylling. Figur 3</stron...

Watch this Scientific Journal Video about A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling at JoVE.com

A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling

Den detrusor-frie blæren modellen gir direkte tilgang til suburothelium å studere lokale mekanismer for regulering av biologisk aktive mekler tilgjengelighet i suburothelium/lamina propria under lagring og annullering av urin. Forberedelsene ligner fylling av en intakt blære og gjør at trykk-volum studier skal utføres uten systemiske påvirkninger.

En desentralisert (ex vivo) murine blære modell med Detrusor muskelen fjernet for direkte tilgang til Suburothelium under blære fylling

Previous studies have established the release of chemical substances from flat bladder mucosa sheets affixed in Ussing chambers and exposed to changes in ...

Vår blæremodell med en fjernet detrusormuskel er en ny eksperimentell tilnærming til å studere samtidig tilgjengeligheten av urotheliale mediatorer i lamia propria og blærelumper under blærefylling. Denne modellen kan gi ny innsikt i signalmekanismene mellom urothelium, suburothelium og detrusormuskel som regulerer blæreutnyttelse under fylling. Begynn med å plassere den intakte murinblæreprøven i en disseksjonsfat under et disseksjonsmikroskop som inneholder 10 grader celsius oksygenert KBS og renser ut binde- og fettvevet rundt blæren.Pin en liten del av kuppelen av den isolerte blæren hele veien gjennom den ytterste kanten av detrusor muskelen langt fra den innerste kanten av muskelen som vender mot suburothelium lamia propria til en sylgard dekket dissekere parabolen fylt med KBS, og pin urinledere og blærehals for å vise intakt blære forberedelse. Bruk fintippet tang, trekk forsiktig et stykke serosa i hjørnet mellom urineren og blærekroppen og juster lyset på mikroskopet for å øke gjennomsiktigheten og for å skille mellom undermucosaens margin under detrusormuskelen. For å unngå å perforere forberedelsesveggen, sørg for å kutte bort detrusormuskelen bare mens den laterale kanten av blæreslimhinnen er tydelig synlig.Ved hjelp av fin-tipped saks, begynne å kutte blæreveggen langs den indre overflaten av detrusor muskellaget mens forsiktig trekke kuttet segmentet bort fra preparatet tar vare på at den laterale kanten av slimhinnen kan observeres samtidig unngå å berøre kanten av vevet. La et lite stykke av detrusormuskelen på toppen av blærekuppelen tillate forberedelse å bli immobilisert under de resterende trinnene i protokollen og fyll en to centimeter stykke 20 polyetylen rør med 37 grader celsius oksygenert KBS. Etter at kateteret er satt inn i åpningen av blærethra, skyv forsiktig kateteret til kateterspissen når omtrentlig midten av blæren.Fest deretter kateteret i det omkringliggende vevet i blærehalsen med en dobbel løkke 6,0 nylonsutur. Etter å ha sjekket vevet for lekkasjer, legg denuded blærepreparatet i et tre milliliter kammer på 37 grader celsius vannjakket organrett med en sylgardbunn og fest kateteret til siden av kammeret slik at preparatet ikke flyter over overflaten av perfusjonsløsningen. Koble blærekateteret til et stykke polyetylen 20-rør som er koblet til en treveis stoppekran og en infusjonssprøyte fylt med 37 grader celsius oksygenert KBS og start infusjonspumpen for å fylle blæren med KBS som tar vare på å overvåke fyllingsvolumet i intravesisk trykk under fyllingen.For å oppdage meklere i suburothelium lamina propria aspektet av preparatet, samle aliquots av badløsningen på ulike passende eksperimentelle tidspunkter og behandle prøvene i henhold til den planlagte nedstrømsanalysen. Den denuded blære forberedelse veggen inneholder urothelium og suburothelium, men ikke detrusor glatt muskel. Trykkvolumforholdene er bemerkelsesverdig like i de intakte og denuded forberedelsene.Egnetheten av modellen for måling av urothelium-avledede meklere som frigjøres i suburothelium lamina propria-siden under fylling, kan testes ved å måle frigjøring av purinmeklere i løsningen som bader suburothelium lamina propria av denuded preparatet. Som demonstrert kan ubetydelige mengder puriner oppdages i et bad som inneholder et isolert blærepreparat med en intakt detrusormuskel;mens mengdene av disse purinene er betydelig høyere i prøver samlet inn fra badet som inneholder et denuded blærepreparat. Spesielt varierer fordelingen av puriner og metabolitter i prøver samlet inn fra lumen og suburothelium lamina propria på slutten av fyllingen betydelig.Tillegg av atheno ATP, en svært fluorescerende analog av ATP, til den suburotheliale siden av detrusor-fri forberedelse resulterer i en nedgang i atheno ATP og en økning i atheno ATP produkter, atheno ADP, atheno AMP, og atheno ADO. Likeledes, tillegg av atheno ATP til lumen forberedelse resulterer i en nedgang i atheno ATP og en økning i atheno ADP, atheno AMP, og atheno ADO i lumen. Videre, tillegg av atheno ATP til suburothelium lamina propria side av denuded forberedelse resulterer i utseendet av atheno AMP og atheno ADO innenfor lumen.Likeledes, legge atheno ATP til lumen resulterer i utseendet av atheno AMP og atheno ADO i suburothelium lamina propria. Etter denne prosedyren kan tilgjengeligheten av ekstiende og hemmende mediatorer måles ved laminapropria og i blærelumen på forskjellige stadier av blærefylling. Bilateral transuretral transport av meklere og metabolisme av mediatorer kan også studeres ved hjelp av denne modellen.Ved hjelp av denne nye blæremodellen vil resultere i ny forståelse av iboende, lokal mekanosensitiv signalering mellom urothelium og detrusor glatt muskel som styrer blæren spenning i helse og sykdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Decentralized (Ex Vivo) Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling

Mouse Bladder Wall Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment

En Orthotopic Blære Tumor Model og bedømmelse av intravesikal Sarna Treatment

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

En orthotopic Blærekreft Modell for Gene Levering Studies

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

High-throughput Flow Cytometry cellebasert analyse for å påvise antistoffer mot N-metyl-D-aspartat-reseptoren, eller dopamin-2-reseptor i Human Serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Minimally Invasive Establishment of Murine Orthotopic Bladder Xenografts

Minimal Invasive Etablering av Murint orthotopic Blære xenografts

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Urinblæren Stinnhet fremkalt Visceromotor Responses som en modell for blære Smerter i Mus

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology

Blære glatt muskulatur Strip kontraktilitet som en metode for å vurdere de nedre urinveiene Pharmacology

We describe an in vitro method to measure bladder smooth muscle contractility, and its use for investigating physiological and pharmacological properties ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

En<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modell for å studere Hormone Handling i Human Breast

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...