Name: a decentralized (ex vivo) murine bladder model with the detrusor muscle removed for direct access to the suburothelium during bladder filling
Uploaded: 2019-11-28T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling at JoVE.com

Эта работа была поддержана Национальным институтом диабета и заболеваний пищеварения и почек Грант DK41315.

Все процедуры с участием животных, описанных в этой рукописи, были проведены в соответствии с Национальным руководством по охране здоровья для ухода и использования лабораторных животных и Институционального комитета по использованию и уходу за животными в Университете Невады.</...

<ol>
	<li>Apodaca, G., Balestreire, E., Birder, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+uroepithelial-associated+sensory+web.">The uroepithelial-associated sensory web.</a> Kidney International. 72, 1057-1064 (2007).</li><li>Fry, C. H., Vahabi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+the+Mucosa+in+Normal+and+Abnormal+Bladder+Function.">The Role of the Mucosa in Normal and Abnormal Bladder Function.</a> Basic and Clinical Pharmacology and Toxicology. , 57-62 (2016).</li><li>Merrill, L., Gonzalez, E. J., Girard, B. M., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptors,+channels,+and+signalling+in+the+urothelial+sensory+system+in+the+bladder.">Receptors, channels, and signalling in the urothelial sensory system in the bladder.</a> Nature Reviewes Urology. 13, 193-204 (2016).</li><li>Ferguson, D. R., Kennedy, I., Burton, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+is+released+from+rabbit+urinary+bladder+epithelial+cells+by+hydrostatic+pressure+changes--a+possible+sensory+mechanism?.">ATP is released from rabbit urinary bladder epithelial cells by hydrostatic pressure changes--a possible sensory mechanism?.</a> Journal of Physiology. 505, 503-511 (1997).</li><li>Wang, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+and+purinergic+receptor-dependent+membrane+traffic+in+bladder+umbrella+cells.">ATP and purinergic receptor-dependent membrane traffic in bladder umbrella cells.</a> Journal of Clinical Investigation. 115, 2412-2422 (2005).</li><li>Miyamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+role+for+Piezo1+in+stretch-evoked+Ca(2)(+)+influx+and+ATP+release+in+urothelial+cell+cultures.">Functional role for Piezo1 in stretch-evoked Ca(2)(+) influx and ATP release in urothelial cell cultures.</a> Journal of Biological Chemistry. 289, 16565-16575 (2014).</li><li>Mochizuki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TRPV4+cation+channel+mediates+stretch-evoked+Ca2++influx+and+ATP+release+in+primary+urothelial+cell+cultures.">The TRPV4 cation channel mediates stretch-evoked Ca2+ influx and ATP release in primary urothelial cell cultures.</a> Journal of Biological Chemistry. 284, 21257-21264 (2009).</li><li>McLatchie, L. M., Fry, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+freshly+isolated+guinea-pig+bladder+urothelial+cells:+a+quantification+and+study+of+the+mechanisms+involved.">ATP release from freshly isolated guinea-pig bladder urothelial cells: a quantification and study of the mechanisms involved.</a> BJU International. 115, 987-993 (2015).</li><li>Birder, L. A., Apodaca, G., de Groat, W. C., Kanai, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic-+and+capsaicin-evoked+nitric+oxide+release+from+urothelium+and+afferent+nerves+in+urinary+bladder.">Adrenergic- and capsaicin-evoked nitric oxide release from urothelium and afferent nerves in urinary bladder.</a> American Journal of Physiology Renal Physiology. 275, F226-F229 (1998).</li><li>Birder, L. A., Kanai, A. J., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DMSO:+effect+on+bladder+afferent+neurons+and+nitric+oxide+release.">DMSO: effect on bladder afferent neurons and nitric oxide release.</a> Journal of Urology. 158, 1989-1995 (1997).</li><li>Birder, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanilloid+receptor+expression+suggests+a+sensory+role+for+urinary+bladder+epithelial+cells.">Vanilloid receptor expression suggests a sensory role for urinary bladder epithelial cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences U S A. 98, 13396-13401 (2001).</li><li>Birder, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-adrenoceptor+agonists+stimulate+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+rat+urinary+bladder+urothelial+cells.">Beta-adrenoceptor agonists stimulate endothelial nitric oxide synthase in rat urinary bladder urothelial cells.</a> Journal of Neuroscience. 22, 8063-8070 (2002).</li><li>Durnin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ex+vivo+bladder+model+with+detrusor+smooth+muscle+removed+to+analyse+biologically+active+mediators+released+from+the+suburothelium.">An ex vivo bladder model with detrusor smooth muscle removed to analyse biologically active mediators released from the suburothelium.</a> Journal of Physiology. 597, 1467-1485 (2019).</li><li>Yoshida, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-neuronal+cholinergic+system+in+human+bladder+urothelium.">Non-neuronal cholinergic system in human bladder urothelium.</a> Urology. 67, 425-430 (2006).</li><li>Beckel, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pannexin+1+channels+mediate+the+release+of+ATP+into+the+lumen+of+the+rat+urinary+bladder.">Pannexin 1 channels mediate the release of ATP into the lumen of the rat urinary bladder.</a> Journal of Physiology. 593, 1857-1871 (2015).</li><li>Collins, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OnabotulinumtoxinA+significantly+attenuates+bladder+afferent+nerve+firing+and+inhibits+ATP+release+from+the+urothelium.">OnabotulinumtoxinA significantly attenuates bladder afferent nerve firing and inhibits ATP release from the urothelium.</a> BJU International. 112, 1018-1026 (2013).</li><li>Daly, D. M., Nocchi, L., Liaskos, M., McKay, N. G., Chapple, C., Grundy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+afferent+pathways+and+urothelial+function+in+the+male+mouse+bladder.">Age-related changes in afferent pathways and urothelial function in the male mouse bladder.</a> Journal of Physiology. 592, 537-549 (2014).</li><li>Durnin, L., Hayoz, S., Corrigan, R. D., Yanez, A., Koh, S. D., Mutafova-Yambolieva, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urothelial+purine+release+during+filling+of+murine+and+primate+bladders.">Urothelial purine release during filling of murine and primate bladders.</a> American Journal of Physiology Renal Physiology. 311, F708-F716 (2016).</li><li>Gonzalez, E. J., Heppner, T. J., Nelson, M. T., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purinergic+signalling+underlies+transforming+growth+factor-beta-mediated+bladder+afferent+nerve+hyperexcitability.">Purinergic signalling underlies transforming growth factor-beta-mediated bladder afferent nerve hyperexcitability.</a> Journal of Physiology. 594, 3575-3588 (2016).</li></ol>

Мочевой пузырь имеет две функции: хранение и аннулирование мочи. Нормальная работа этих функций требует надлежащего механического зондирования внутрилюмительного объема и давления и трансдукции сигналов через клетки в стенке мочевого пузыря для регулирования возбуждания мышц детру...

Цель этой модели заключается в том, чтобы обеспечить прямой доступ к подмукозной стороне слизистой оболочки мочевого пузыря во время различных фаз заполнения мочевого пузыря.
Мочевой пузырь должен воздерживаться от преждевременного сокращения во время заполнения и пустой, когда критический объем и давление достигаются. Аномальные недержания или аннулирования мочи часто связаны с ненормальной возбудимостью детрузор гладкой мышцы (DSM) в ходе заполнения мочевого пузыря. Возбудимость DSM определяется факторами, присущими гладким мышечным клеткам, и влияниями, генерируемыми различными типами клеток в стенке мочевого пузыря. Стенка мочевого пузыря состоит из уротелия (слизистая оболочка), субуротелия (SubU)/lamina propria (LP), детрузора гладкой мышцы (DSM) и серозы(рисунок 1A). Уротелий состоит из зонтичных клеток (т.е. внешнего слоя уротелия), промежуточных клеток и базальных клеток (т.е. внутреннего слоя уротелия). Различные типы клеток, в том числе интерстициальные клетки, фибробласты, афферентные нервные терминалы, мелкие кровеносные сосуды и иммунные клетки находятся в SubU/LP. Широко предполагается, что уротелиум мочевого пузыря является сенсорным органом, который инициирует рефлекс micturition и недержание инфекции, выпуская посредников в субмукозы, которые влияют на клетки в SubU / LP и DSM1,2,3. По большей части, такие предположения основаны на исследованиях, которые продемонстрировали высвобождение посредников: из кусочков слизистой оболочки подвергаются изменениям гидростатического давления4,5; от культурных уротелиальных клеток подвергаются растяжения6,7, гипотониность индуцированной клеточной опухоль7 или перетащить силы8; от изолированных полоски стенки мочевого пузыря на рецепторе или активации нерва9,10,11,12,13,14; и в просвет мочевого пузыря в конце мочевого пузыря заполнения15,16,17,18,19. Хотя такие исследования сыграли важную роль, чтобы продемонстрировать освобождение посредников при механической стимуляции сегментов стенки мочевого пузыря или культивируемых уротелиальных клеток, они должны быть подкреплены прямыми доказательствами для освобождения посредников в субмукозе, которая вызывается физиологическими стимулами, которые воспроизводят наполнение мочевого пузыря. Это сложная задача, учитывая, что SubU / LP находится глубоко в стенке мочевого пузыря препятствует простой доступ к окрестностям SubU / LP во время заполнения мочевого пузыря.
Здесь мы иллюстрируем децентрализованную (ex vivo) модель мочевого пузыря с детрусорной мышцей удалены13, которая была разработана для облегчения исследований на местных механизмов механотрансдукции, которые участвуют в сигнализации между мочевого пузыря уротели, DSM и других типов клеток в стенке мочевого пузыря. Этот подход превосходит использование плоских листов стенки мочевого пузыря, полосы стенки мочевого пузыря или культивированные уротелиальные клетки, потому что он позволяет прямые измерения в непосредственной близости от SubU / LP уротелия полученных посредников, которые высвобождаются или формируются в ответ на физиологические давления и объемы в мочевом пузыре и позволяет избежать потенциальных фенотипических изменений в культуре клеток. Он может быть использован для измерения доступности, выпуска, метаболизма и трансуротелиальной транспортировки посредников в SubU/LP на разных стадиях заполнения мочевого пузыря(рисунок 1B). Препарат также может быть использован для изучения уротелилиальной сигнализации и механотрансдукции в моделях гиперактивных и недостаточно активных синдромов мочевого пузыря.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>C79</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextrose</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>D16</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-20</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>GenieTouch</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>P217</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>P284</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>SCHOTT ACEI</td>
			<td></td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Olympus SZX7</td>
			<td></td>
			<td>Flexible to use any scope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>M33</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S671</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S233</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles 25G</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305122</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ bath</td>
			<td>Custom made</td>
			<td></td>
			<td>Flexible source; We made it from Radnoti dissecting dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-20 tubing</td>
			<td>Intramedic</td>
			<td>427405</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure transducer</td>
			<td>AD instrument</td>
			<td></td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>00632-11</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software pressure-volume</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>Power lab</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Nylon, 6-0</td>
			<td>AD surgical</td>
			<td>S-N618R13</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Silk, 6-0</td>
			<td>Deknatel via Braintree Scientific, Inc.</td>
			<td>07J1500190</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 1 ml</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309602</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water circulator</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>K-MOD 100</td>
			<td>Source flexible</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a decentralized (ex vivo) murine bladder model with the detrusor muscle removed for direct access to the suburothelium during bladder filling

Предыдущие исследования установили высвобождение химических веществ из листов слизистой оболочки плоского пузыря, прикрепленных в усинг-камерах и подверженных изменениям гидростатического давления или механического растяжения, а также из культивированных уротических клеток при гидростатических изменениях давления, растяжения, отеке клеток или сил перетаскивания, а также в просвете мочевого пузыря в конце заполнения. Такие выводы привели к предположению, что эти посредники также высвобождаются в субуротелиум (SubU)/lamina propria (LP) во время заполнения мочевого пузыря, где они влияют на клетки глубоко в стенке мочевого пузыря, чтобы в конечном счете регулировать возбудимость мочевого пузыря. В таких исследованиях есть по крайней мере два очевидных ограничения: 1) ни один из этих подходов не дает прямой информации о присутствии посредников в SubU/LP, и 2) используемые стимулы не являются физиологическими и не поддаются подлинному наполнению мочевого пузыря. Здесь мы обсуждаем процедуру, которая позволяет прямой доступ к субротелиальной поверхности слизистой оболочки мочевого пузыря в процессе заполнения мочевого пузыря. Препарат без минурного детрузора, который мы создали, очень напоминает заполнение нетронутого мочевого пузыря и позволяет проводить исследования по объему давления на мочевом пузыре при отсутствии путаницы, сигнализирующей от спинальных рефлексов и гладкой мышцы. Используя новую модель мочевого пузыря без детрузора, мы недавно продемонстрировали, что внутривежные измерения посредников не могут быть использованы в качестве прокси-сервера к тому, что было выпущено или присутствует в SubU/LP во время заполнения мочевого пузыря. Модель позволяет изучить уротелий полученных сигнальных молекул, которые высвобождаются, генерируются метаболизмом и / или транспортируются в SubU / LP в ходе заполнения мочевого пузыря для передачи информации в нейроны и гладкой мышцы мочевого пузыря и регулировать его возбудимость во время недержания и micturition.

Стена мурин детрузора подготовки мочевого пузыря нетронутыми и содержит все слои, кроме DSM и serosa. Доказательство принципа исследования показали, что DSM-свободной стенки мочевого пузыря включает в себя urothelium и SubU / LP в то время как туника muscularis и serosa отсутствуют (<strong...

Watch this Scientific Journal Video about A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling at JoVE.com

A Decentralized Ex Vivo Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling

Модель мочевого пузыря, свободная от детрузозора, обеспечивает прямой доступ к субуротелию для изучения местных механизмов регулирования наличия биологически активного посредника в субуротелии/ламине проприи и опорожнение мочи. Препарат очень напоминает заполнение нетронутого мочевого пузыря и позволяет проводить исследования по объему давления без системного воздействия.

Децентрализованная (Ex Vivo) модель мочевого пузыря с детрусорной мышцей удалены для прямого доступа к suburothelium во время заполнения мочевого пузыря

Previous studies have established the release of chemical substances from flat bladder mucosa sheets affixed in Ussing chambers and exposed to changes in ...

Наша модель мочевого пузыря с удаленным детрусорным мышцем является новым экспериментальным подходом к изучению одновременно наличия уротелиальных посредников в ламии проприи и люмене мочевого пузыря во время заполнения мочевого пузыря. Эта модель может предоставить новые идеи в сигнальных механизмов между уротелием, субуротелием и детрусорными мышцами, которые регулируют возбудимость мочевого пузыря во время заполнения. Начните с размещения нетронутыми образца murine мочевого пузыря в рассечение блюдо под микроскопом вскрытия, содержащего 10 градусов по Цельсию кислородом KBS и очистки соединительной и жировой ткани вокруг мочевого пузыря.Прикрепите небольшую часть купола изолированного мочевого пузыря на всем пути через внешний край мышцы детрусора вдали от внутреннего края мышцы, которая сталкивается с субуротелиевой ламией проприии, чтобы силгард покрыл рассеченное блюдо, наполненное KBS, и прикрепите мочеточители и шею мочевого пузыря, чтобы показать нетронутую подготовку мочевого пузыря. Используя мелко опрокинутые типсы, аккуратно потяните кусок серозы на углу между мочеточником и телом мочевого пузыря и отрегулируйте свет микроскопа, чтобы повысить прозрачность и различить маржу субмукосы под мышцей детрусора. Чтобы избежать перфорации стенки подготовки, не забудьте отрезать мышцы детрусора только в то время как боковой край слизистой оболочки мочевого пузыря хорошо виден.Используя тонко наконечником ножницы, начать резки стенки мочевого пузыря вдоль внутренней поверхности слоя мышцы детрусора в то время как осторожно потянув сократить сегмент от подготовки заботясь о том, что боковой край слизистой оболочки можно наблюдать, избегая при этом касаясь края ткани. Оставьте небольшой кусочек мышцы детрусора на верхней части купола мочевого пузыря, чтобы позволить препарату быть обездвиженным во время остальных этапов протокола и заполнить двухметровый кусок 20 полиэтиленовых труб с 37 градусов по Цельсию кислородом KBS. После вставки катетера в отверстие мочевыводяной пузыря, осторожно нажмите катетер, пока кончик катетера не достигнет приблизительной середины мочевого пузыря.Затем закретуть катетер в окружающих тканях шейки мочевого пузыря двойной петлей 6.0 нейлонового шва. После проверки ткани на протечки, поместите оголоженный мочевой пузырь подготовки в три миллилитровые камеры 37 градусов по Цельсию воды куртку орган блюдо с силгардом дно и обеспечить катетер в сторону камеры, так что препарат не плавает над поверхностью перфузии раствора. Подключите катетер мочевого пузыря к куску полиэтилена 20 труб, соединенных с трехугольным стоп-коком и инфузионный шприц заполнены 37 градусов по Цельсию кислородом KBS и начать инфузионный насос для заполнения мочевого пузыря с KBS заботясь, чтобы контролировать объем заполнения внутривечного давления во время заполнения.Для обнаружения посредников в субуротелии ламина проприя аспект препарата, собирать aliquots раствора ванны в различных соответствующих экспериментальных точек времени и обрабатывать образцы в соответствии с запланированным анализом вниз по течению. Стена подготовки оголированного мочевого пузыря содержит уротелий и субуротелий, но не детрусорную гладкую мышцу. Отношения объема давления удивительно похожи в нетронутых и оголглых препаратов.Пригодность модели для измерения посредников, полученных из уротелия, которые высвобождаются в сторону субуротелия ламина проприя во время заполнения, может быть проверена путем измерения высвобождения пурин-посредников в раствор, купающий субуротелий ламина проприя оголётного препарата. Как было продемонстрировано, незначительное количество пуринов может быть обнаружено в ванне, содержащей изолированный препарат мочевого пузыря с нетронутой мышцей детрусора; в то время как количество этих пуринов значительно выше в образцах, собранных из ванны, содержащей оголожее приготовление мочевого пузыря. Примечательно, что распределение пуринов и метаболитов в образцах, взятых из люмена и субуротелийной ламинии проприи в конце начинки, существенно отличается.Добавление атено АТФ, высоко флуоресцентного аналога АТФ, к субуротелиальной стороне препаратов без детрусора приводит к снижению Атено АТФ и увеличению продуктов atheno ATP, atheno ADP, atheno AMP и atheno ADO. Аналогичным образом, добавление Атено АТФ в препарат люмена приводит к снижению Атено АТФ и увеличению atheno ADP, atheno AMP и atheno ADO в люмене. Кроме того, добавление атено АТФ в субуротелий ламина проприя стороне оголенного препарата приводит к появлению atheno AMP и atheno ADO в люмене.Аналогичным образом, добавление атено АТФ в люмен приводит к появлению atheno AMP и atheno ADO в субуротелии ламины проприии. После этой процедуры, наличие возбуждающей и ингибирующие посредники могут быть измерены в ламина проприя и в мочевом пузыре люмен на разных стадиях заполнения мочевого пузыря. С помощью этой модели можно также изучить двустороннюю трансуретрную транспортировку посредников и обмен веществ посредников.Использование этой новой модели мочевого пузыря приведет к новому пониманию внутренней, местной механочувствительной сигнализации между уротелием и детрусор гладкой мышцы, которые контролируют возбудимость мочевого пузыря в здоровье и болезни.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Decentralized (Ex Vivo) Murine Bladder Model with the Detrusor Muscle Removed for Direct Access to the Suburothelium during Bladder Filling

Mouse Bladder Wall Injection

Мышь стенки мочевого пузыря инъекций

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

Ортотопическая модели мышей раку мочевого пузыря

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

Использование Цистометрия в мелких грызунов: исследование мочевого пузыря Chemosensation

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment

Ортотопическая модели опухоли мочевого пузыря и оценке Внутрипузырная Лечение Сарна

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

Ортотопическая Рак мочевого пузыря Модель для генной исследований Доставка

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Высокая пропускная проточной цитометрии Клеточная Анализ для выявления антител к N-метил-D-аспартат рецепторов или допамин-2 рецепторов в сыворотке человека

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Minimally Invasive Establishment of Murine Orthotopic Bladder Xenografts

Минимально инвазивная Создание мышиной артифициального мочевого пузыря ксенотрансплантатов

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Мочевой пузырь Вздутие Вызванные висцеромоторный Ответы в качестве модели для мочевого пузыря боли у мышей

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology

Гладких мышц мочевого пузыря Газа Сократимость как метод оценки нижних мочевых путей фармакология

We describe an in vitro method to measure bladder smooth muscle contractility, and its use for investigating physiological and pharmacological properties ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

<em&gt; Экс естественных</em&gt; Модель для изучения действия гормонов в груди человека

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...