Name: generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture
Uploaded: 2019-10-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

This work was supported by NIH/NICHD HD091068-01 to Dr. Ina Dobrinski.

NOTE: Testes from 1-week-old piglets were obtained from a commercial pig farm as by-product from castration of commercial pigs. Sourcing of testes was approved by the Animal Care Committee at the University of Calgary.
1. Preparation of enzyme solutions for tissue digestion
NOTE: Three different enzymatic solutions are needed, which include two different collagenase IV solutions (solution A, B) and a deoxyribonuclease I (DNase I) solution.
<ol>
	<li>To prepare sol...

<ol>
	<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lgr5(+ve)+stem+cells+drive+self-renewal+in+the+stomach+and+build+long-lived+gastric+units+in+vitro.">Lgr5(+ve) stem cells drive self-renewal in the stomach and build long-lived gastric units in vitro.</a> Cell Stem Cell. 6 (1), 25-36 (2010).</li><li>Huch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unlimited+in+vitro+expansion+of+adult+bi-potent+pancreas+progenitors+through+the+Lgr5/R-spondin+axis.">Unlimited in vitro expansion of adult bi-potent pancreas progenitors through the Lgr5/R-spondin axis.</a> Embo Journal. 32 (20), 2708-2721 (2013).</li><li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer.">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li><li>Takebe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+and+functional+human+liver+from+an+iPSC-derived+organ+bud+transplant.">Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant.</a> Nature. 499 (7459), 481-484 (2013).</li><li>Quadrato, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+diversity+and+network+dynamics+in+photosensitive+human+brain+organoids.">Cell diversity and network dynamics in photosensitive human brain organoids.</a> Nature. 545 (7652), 48-53 (2017).</li><li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture:+biology's+new+dimension.">Cell culture: biology's new dimension.</a> Nature. 424 (6951), 870-872 (2003).</li><li>Pendergraft, S. S., Sadri-Ardekani, H., Atala, A., Bishop, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+testicular+organoid:+a+novel+tool+for+the+study+of+human+spermatogenesis+and+gonadotoxicity+in+vitrodagger.">Three-dimensional testicular organoid: a novel tool for the study of human spermatogenesis and gonadotoxicity in vitrodagger.</a> Biology of Reproduction. 96 (3), 720-732 (2017).</li><li>Strange, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+testicular+organoid+system+as+a+novel+tool+to+study+Zika+virus+pathogenesis.">Human testicular organoid system as a novel tool to study Zika virus pathogenesis.</a> Emerging Microbes &amp; Infections. 7 (1), 82-82 (2018).</li><li>Alves-Lopes, J. P., Soder, O., Stukenborg, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testicular+organoid+generation+by+a+novel+in+vitro+three-layer+gradient+system.">Testicular organoid generation by a novel in vitro three-layer gradient system.</a> Biomaterials. 130, 76-89 (2017).</li><li>Baert, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Human+Testicular+Cells+Self-Organize+into+Organoids+with+Testicular+Properties.">Primary Human Testicular Cells Self-Organize into Organoids with Testicular Properties.</a> Stem Cell Reports. 8 (1), 30-38 (2017).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. , (2019).</li><li>Razian, G., Yu, Y., Ungrin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+Large+Numbers+of+Size-controlled+Tumor+Spheroids+Using+Microwell+Plates.">Production of Large Numbers of Size-controlled Tumor Spheroids Using Microwell Plates.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), 50665 (2013).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. 100 (6), 1648-1660 (2019).</li><li>Gonz&#225;lez, R., Dobrinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+the+Mouse+Monopoly:+Studying+the+Male+Germ+Line+in+Domestic+Animal+Models.">Beyond the Mouse Monopoly: Studying the Male Germ Line in Domestic Animal Models.</a> ILAR Journal. 56 (1), 83-98 (2015).</li><li>Oatley, J. M., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+germline+stem+cell+niche+unit+in+mammalian+testes.">The germline stem cell niche unit in mammalian testes.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 577-595 (2012).</li><li>Chen, L. Y., Willis, W. D., Eddy, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Gdnf+Gene+in+peritubular+myoid+cells+disrupts+undifferentiated+spermatogonial+cell+development.">Targeting the Gdnf Gene in peritubular myoid cells disrupts undifferentiated spermatogonial cell development.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 113 (7), 1829-1834 (2016).</li></ol>

We have established a simple method that allows the consistent, repeatable generation of large numbers of testicular organoids with tissue architecture that is similar to testis in vivo12. While the approach was developed using porcine testis cells, it is more broadly applicable also to mouse, non-human primate and human testis12. A number of different methods have been reported for producing testicular organoids8,9...

I de seneste år har der været en genopblussen af interesse i tredimensionale (3D) organoider. Forskellige organer såsom tarm1, mave2, bugspytkirtlen3,4, leveren5, og hjernen6 er blevet med succes afledt i 3D organoid systemer. Disse organoider har arkitektoniske og funktionelle ligheder med organerne in vivo og er mere biologisk relevante for undersøgelse af vævs mikromiljø end enkeltlags kultur systemer7. Som et resultat, testikel organoider er begyndt at samle interesse samt8,9,10,11,12. De fleste af metoder rapporteret indtil videre er komplekse, ikke-høj gennemløb10 og kræver tilsætning af ECM proteiner8,10. Denne kompleksitet fører også til problemer med reproducerbarhed. En enkel og reproducerbar metode er nødvendig, der giver mulighed for generering af testikel organoider med celle-foreninger, der er ligesom testikel in vivo.
Vi har for nylig rapporteret et system til at løse disse krav12. Ved hjælp af grisen som model anvendte vi en centrifugal tvungen aggregerings tilgang i strips med mikrobrønde-systemet. I strips med mikrobrønde-systemet indeholder hver brønd et stort antal identiske mindre mikrobrønde13. Dette giver mulighed for generering af talrige sfæroider af ensartet størrelse. Strips med mikrobrønde-systemet aktiverede generering af et stort antal ensartede organoider med en testis-specifik arkitektur. Systemet er simpelt og kræver ikke tilsætning af ECM-proteiner.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm ultra low attachment tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#CLS3262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#353803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aggrwell 400</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#34411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Adherence Rinsing Solution</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#07010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#C5138</td>
			<td>referred as Collagenase IV S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV Worthington</td>
			<td>Worthington-Biochem</td>
			<td>#LS004189</td>
			<td>referred as Collagenase IV W</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#DN25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#11330-032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - high glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D6429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal Growth Factor</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>#236-EG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 70 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 40 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>#12483-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin-Transferrin-Selenium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#41400-045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porcine testicular tissue</td>
			<td>Sunterra Farms Ltd (Alberta, Canada)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip-GP Sterile Centrifuge Tube Top Filter Unit</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>#SCGP00525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture

Organoider er tre dimensionelle strukturer bestående af flere celletyper, der er i stand til at rekapitulere væv arkitektur og funktioner af organer in vivo. Dannelsen af organoider har åbnet forskellige veje for grundlæggende og Translationel forskning. I de seneste år har testikel organoider høstet interesse i området for mandlig reproduktiv biologi. Testikel organoider giver mulighed for undersøgelse af celle-celle interaktioner, vævs udvikling, og kimcelle niche mikromiljø og lette høj gennemstrømning stof og toksicitet screening. En metode er nødvendig for pålideligt og reproducerbart generere testikel organoider med testikel specifikke væv arkitektur. Mikrobrøndens kultur system indeholder et tæt udvalg af pyramideformede mikrobrønde. Testikel celler afledt af præ-pubertale testiklerne centrifugeres ind i disse mikrobrønde og dyrkes for at generere testikel organoider med testis-specifikke væv arkitektur og celle foreninger. Tusindvis af homogene organoider kan genereres via denne proces. Den protokol, der rapporteres her, vil være af bred interesse for forskere, som studerer mandlig reproduktion.

Isolated cells from 1-week old porcine testes that were cultured in the microwells self-organized into spheroids (Figure 1A, Figure 2), with delineated and distinct exterior (seminiferous epithelium) and interior compartments (interstitium) (Figure 1B, Figure 2). The two compartments were separated by a collagen IV+ve basement...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture

Here, we present a protocol for the reproducible generation of porcine testicular organoids with testis specific tissue architecture using the commercially available microwell culture system.

Generation af svin testikel Organoider med testis specifik arkitektur ved hjælp af Microwell Culture

Organoids are three dimensional structures composed of multiple cell types that are capable of recapitulating tissue architecture and functions of organs ...

Denne protokol er signifikant, fordi den tillader generering af testikelorganoider, som kan bruges som platform for undersøgelse af testikelmorgenese og for screeninger med høj tropo- og toksicitet. Den største fordel ved denne teknik er, at den er meget reproducerbar, kræver et relativt lavt antal celler og kan bruges til at generere et stort antal testikelorganoider med testisspecifik arkitektur. Denne metode kan anvendes til at studere andre systemer, såsom pluripotente stamceller eller pancreas ø-celler med de nødvendige optimeringer.Demonstration af testikelvæv enzymatisk fordøjelse procedure vil være Anna Voigt, en ph.d.-studerende fra mit laboratorium. Testikerne opsamls i et sterilt bægerglas, og pibes med PBS indeholdende 1%penicillin streptomycin. Efter vask overføre testikerne til en 100 millimeter væv kultur fad med PBS indeholder 1% penicillin streptomycin.Brug autoklavede saks og kraftvipper til at fjerne tunica vaginalis og epididymis. Overfør de isolerede testikler til en ny 100 millimeter skål og vask grundigt med PBS indeholdende 1% penicillin streptomycin. Skær testis langs længdeaksen direkte under tunica.Derefter skal du skrælle testikerne ud af tunicapen ved hjælp af to pincet og placere den i en ny 100 millimeter skål indeholdende 1 milliliter DMEM med 1% penicillin streptomycin. Hakke de skrællede testikler med steril saks i en til to millimeter væv stykker. Efter snitning bruge sterile kraftker til at fjerne de hvide fragmenter af bindevæv.De hakkede vævsstykker overføres til opløsning A i et 50 milliliterrør, og det er op til 50 milliliter og DMEM for at opnå en koncentration på 0,4 mg pr. milliliter for colagenase 4S og en koncentration på 0,8 mg pr. milliliter for colagenase 4W. Placer røret, der indeholder væv stykker i en 37 grader Celsius vandbad i 30 minutter. Inverter forsigtigt røret hvert femte minut.Efter 30 minutter centrifugerøret ved 90 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Supernatanten, ad 40 milliliter opløsning B, kasseres, og der tilælds op til 50 milliliter med DMEM for at opnå en koncentration på 1,2 mg pr. milliliter colagenase 4W. Placer røret i en 37 grader Celsius vandbad i 30 minutter og forsigtigt vende røret hvert femte minut.Centrifuge røret ved 90 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Derefter kasseres supernatanten, og vaskes én gang med PBS med 1%penicillin streptomycin. Opsaml forsigtigt tubullerne fra toppen og læg dem i et nyt 50 milliliterrør.Topn røret med PBS op til 50 milliliter. Centrifuge tubuli på 90 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Kassér supernatanten og tilsæt frisk PBS for at vaske to ekstra gange.Efter den sidste PBS vask fjernes supernatanten og re-suspendere seminiferous tubuli i fem milliliter PBS. Derefter tilsættes 15 milliliter 0,25%Trypsin EDTA til tubuli. Placer røret i en 37 grader Celsius vandbad og forsigtigt vende hvert andet minut.Efter fem minutter evaluere enzymatisk fordøjelse af tubuli til enkelte celler under mikroskopet med 10 mikroliter af prøve på et væv kultur plade. Hvert andet minut anbringes prøven under mikroskopet for at observere. Hvis det meste enkelte celler kan påvises stoppe reaktionen med fem milliliter FBS og filtrere gennem en 70 mikron mesh og derefter gennem en 40 mikron mesh.Centrifuge de enkelte celler på 500 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Re-suspendere i 50 milliliter berigelse medium, og tælle antallet af levedygtige celler ved hjælp af et hæmocytometer. Overfør 20 millioner af denne startcellepopulation til hver af to ultralave fastgørelse 100 millimeter petriskåle og inkuberes i en vævskulturinkubator ved 37 grader Celsius, 5 % kuldioxid og 21 % ilt i to dage.Cede 20 til 25 millioner celler i den resterende startcellepopulation pr. 100 millimeter vævskulturskål i et samlet volumen på otte milliliter berigelsesmedium. Skålen hældes i en kuvøse, og sørg for, at størstedelen af Sertolicellerne er fastgjort til pladen efter 1,5 timer. Let vippe to plader til at indsamle og kombinere supernatants i en ny 100 millimeter plade og læg den tilbage i rugemaskinen.Efter en time, igen kombinere supernatants af to plader til en ny 100 millimeter plade. Anbring pladerne tilbage i inkubatoren natten over. Derefter opsamler de berigede kimceller i to fraktioner, ikke-klæbende fraktion og let klæbende fraktion.Opsaml supernatanten som den ikke-klæbende brøk. For den let klæbende fraktion vaskes pladerne forsigtigt med PBS og behandles med to milliliter af en 1 til 20 fortynding på 0,25%Trypsin EDTA i fem minutter ved stuetemperatur. Reaktionen standses ved at tilsætte to milliliter berigelsesmedium og opsaml i det ikke-klæbende fraktionsrør.Kombiner startcellepræparatet og de berigede kimceller i et rør for at opnå et fungerende cellepræparat, der indeholder 25% kimceller. Centrifuge ved 500 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Supernatanten kasseres, og cellerne suspenderes igen i 20 milliliter organoiddannelsesmedium for at nå en koncentration på 2,4 millioner celler pr. milliliter.I et nyt rør tilsættes en milliliter af opløsningen, der indeholder celler. Der tilsættes 0,5 milliliter overfladeaktiv skylleopløsning til hver brønd i en mikrobodeplade. Sørg for, at der ikke er luftbobler fanget i brønden.For at fjerne luftbobler centrifuge pladen ved 2, 000 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i to minutter. Overhold pladen under et lavt forstørrelsesvist inverteret mikroskop for at kontrollere, at boblerne er blevet fjernet fra mikrobænderne. Pladen dækkes med låg og inkuberes i 30 minutter ved stuetemperatur.Efter behandlingen er afsluttet fjerne skylleopløsningen og straks vaske pladen med sterilt vand eller PBS. Tilsæt 0,5 milliliter organoid dannelse medium til hver brønd og centrifuge ved 2, 000 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i to minutter for at fjerne eventuelle fanget luftbobler. Overhold brønden under en lav forstørrelse inverteret mikroskop for at kontrollere, at luftboblerne er blevet fjernet.Der tilsættes 0,5 milliliter af arbejdscelleaffjedringen, og bland forsigtigt ved at pipettere op og ned. Centrifuge ved 500 gange G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Brug et omvendt mikroskop til at kontrollere, at cellerne har grupperet i mikrobederne.Overfør pladen til en cellekultur inkubator og kultur i fem dage. Skift halvdelen af mediet hver anden dag. For at inddrive organoids bruge en bred mund pipette til forsigtigt pipette mediet op og ned.Dette gør det muligt for organoids at komme ud af mikro brønde. Indsamle organoider, fastsætte og udføre immuno cytokemi for kim celle markør, Sertoli celle markør, peritubular myoid celle markør og Leydig celle markør og visualisere under en konfokal mikroskop. I denne undersøgelse isolerede celler fra en uge gamle svin testikler, der blev dyrket i mikro brønde selvorganiseret i sfæroider med afgrænsede og forskellige udvendige og indvendige rum.De to rum blev adskilt af en kollagen IV positiv kældermembran. GATA4 positive Sertoli celler og UCHL1 positive kimceller var i det udvendige rum på kældermembranen. aSMA positive peri-tubulære myoid celler blev lokaliseret langs indersiden af kælderen membran, mens CYP450 positive Leydig celler var i midten af interstitium.Denne struktur svarer til In Situ betingelser, hvor Leydig celler, peri-tubulære myoid celler, er placeret i interstitium, i det interstitielle rum og kimceller, Sertoli celler er placeret på seminiferous epitel. Det er vigtigt at sikre, at celler, der anvendes til at generere organoider har optimal kvalitet. Omhyggelig opmærksomhed bør rettes i løbet af trypsinisering fase af enzymatisk fordøjelse.Efter denne procedure organoider kan dyrkes på lang sigt at studere kim-celle differentiering eller analysere for genekspression og udskilles proteiner eller hormoner. Evnen til at skabe organoider med testis-specifikke celle foreninger giver en ny in-vitro system til at studere celle-celle interaktioner vigtigt for testis udvikling og kimcellefunktion.

Research

JoVE Journal

Medicine

Teratoma Generation in the Testis Capsule

Teratom Generation i testiklerne Capsule

Pluripotent stem cells (PSCs) have the unique characteristic that they can differentiate into cells from all three germ layers.  This makes them a ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Teknik af porcin Liver Indkøb og ortotopisk Transplantation ved hjælp af en Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Isolation and Culture Expansion of Tumor-specific Endothelial Cells

Isolering og dyrkning Udvidelse af Tumorspecifikke endotelceller

Freshly isolated tumor-specific endothelial cells (TEC) can be used to explore molecular mechanisms of tumor angiogenesis and serve as an in vitro model ...

A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

En humant glioblastom organotypisk skivekulturmodel til undersøgelse af tumorcellemigration og patientspecifikke virkninger af antiinvasive stoffer

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...

Generation of Microtumors Using 3D Human Biogel Culture System and Patient-derived Glioblastoma Cells for Kinomic Profiling and Drug Response Testing

Generation af Microtumors Brug 3D Menneskelig Biogel Kultur System og Patient-afledte glioblastomaceller for Kinomic Profilering and Drug respons Testing

The use of patient-derived xenografts for modeling cancers has provided important insight into cancer biology and drug responsiveness. However, they are ...

Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior

Generation af Organ aircondition Medier og applikationer for at studere Organspecifikke påvirkninger på brystkræft Metastatisk Behavior

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

Generering af en humaniseret Mouse Lever Brug humane lever Stamceller

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the "RE:fine Drugs" System

Drug nyorientering Hypotese Generation Brug af &quot;RE: fine Drugs&quot; System

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The ...

Muscle Imbalances: Testing and Training Functional Eccentric Hamstring Strength in Athletic Populations

Muskel ubalancer: Test og uddannelse funktionelle excentrisk forstrækning styrke i Athletic populationer

Many hamstring injuries that occur during physical activity occur while the muscles are lengthening, during eccentric hamstring muscle actions. Opposite ...