Name: generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture
Uploaded: 2019-10-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av NIH/NICHD HD091068-01 til Dr. Ina Dobrinski.

Merk: testiklene fra 1-uke-gamle grisunger ble innhentet fra en kommersiell gris gård som biprodukt fra kastrering av kommersielle griser. Sourcing av testiklene ble godkjent av Animal Care Committee ved University of Calgary.
1. utarbeidelse av enzym løsninger for fordøyelsen av vev
Merk: tre ulike enzymatisk løsninger er nødvendig, som inkluderer to forskjellige kollagenase IV løsninger (løsning A, B) og en deoxyribonuclease I (DNase I) løsning.
<ol><li>...

<ol>
	<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lgr5(+ve)+stem+cells+drive+self-renewal+in+the+stomach+and+build+long-lived+gastric+units+in+vitro.">Lgr5(+ve) stem cells drive self-renewal in the stomach and build long-lived gastric units in vitro.</a> Cell Stem Cell. 6 (1), 25-36 (2010).</li><li>Huch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unlimited+in+vitro+expansion+of+adult+bi-potent+pancreas+progenitors+through+the+Lgr5/R-spondin+axis.">Unlimited in vitro expansion of adult bi-potent pancreas progenitors through the Lgr5/R-spondin axis.</a> Embo Journal. 32 (20), 2708-2721 (2013).</li><li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer.">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li><li>Takebe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+and+functional+human+liver+from+an+iPSC-derived+organ+bud+transplant.">Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant.</a> Nature. 499 (7459), 481-484 (2013).</li><li>Quadrato, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+diversity+and+network+dynamics+in+photosensitive+human+brain+organoids.">Cell diversity and network dynamics in photosensitive human brain organoids.</a> Nature. 545 (7652), 48-53 (2017).</li><li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture:+biology's+new+dimension.">Cell culture: biology's new dimension.</a> Nature. 424 (6951), 870-872 (2003).</li><li>Pendergraft, S. S., Sadri-Ardekani, H., Atala, A., Bishop, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+testicular+organoid:+a+novel+tool+for+the+study+of+human+spermatogenesis+and+gonadotoxicity+in+vitrodagger.">Three-dimensional testicular organoid: a novel tool for the study of human spermatogenesis and gonadotoxicity in vitrodagger.</a> Biology of Reproduction. 96 (3), 720-732 (2017).</li><li>Strange, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+testicular+organoid+system+as+a+novel+tool+to+study+Zika+virus+pathogenesis.">Human testicular organoid system as a novel tool to study Zika virus pathogenesis.</a> Emerging Microbes &amp; Infections. 7 (1), 82-82 (2018).</li><li>Alves-Lopes, J. P., Soder, O., Stukenborg, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testicular+organoid+generation+by+a+novel+in+vitro+three-layer+gradient+system.">Testicular organoid generation by a novel in vitro three-layer gradient system.</a> Biomaterials. 130, 76-89 (2017).</li><li>Baert, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Human+Testicular+Cells+Self-Organize+into+Organoids+with+Testicular+Properties.">Primary Human Testicular Cells Self-Organize into Organoids with Testicular Properties.</a> Stem Cell Reports. 8 (1), 30-38 (2017).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. , (2019).</li><li>Razian, G., Yu, Y., Ungrin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+Large+Numbers+of+Size-controlled+Tumor+Spheroids+Using+Microwell+Plates.">Production of Large Numbers of Size-controlled Tumor Spheroids Using Microwell Plates.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), 50665 (2013).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. 100 (6), 1648-1660 (2019).</li><li>Gonz&#225;lez, R., Dobrinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+the+Mouse+Monopoly:+Studying+the+Male+Germ+Line+in+Domestic+Animal+Models.">Beyond the Mouse Monopoly: Studying the Male Germ Line in Domestic Animal Models.</a> ILAR Journal. 56 (1), 83-98 (2015).</li><li>Oatley, J. M., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+germline+stem+cell+niche+unit+in+mammalian+testes.">The germline stem cell niche unit in mammalian testes.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 577-595 (2012).</li><li>Chen, L. Y., Willis, W. D., Eddy, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Gdnf+Gene+in+peritubular+myoid+cells+disrupts+undifferentiated+spermatogonial+cell+development.">Targeting the Gdnf Gene in peritubular myoid cells disrupts undifferentiated spermatogonial cell development.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 113 (7), 1829-1834 (2016).</li></ol>

Vi har etablert en enkel metode som tillater konsekvent, repeterbar generering av et stort antall testikkel organoids med vevs arkitektur som ligner testikkel in vivo12. Mens tilnærmingen ble utviklet ved hjelp svin testikkel celler, er det mer generelt gjelder også for mus, ikke-menneskelige primater og menneskelig testikkel12. En rekke ulike metoder har blitt rapportert for å produsere testicular organoids8,9<s...

I de senere årene har det vært en renessanse av interesse i tredimensjonale (3D) organoids. Forskjellige organer som tarmen1, mage2, bukspyttkjertel3,4, Liver5, og Brain6 er vellykket avledet til 3D organoid systemer. Disse organoids har arkitektoniske og funksjonelle likheter med organene i vivo og er mer biologisk relevante for studier av vev mikromiljøet enn monolag kultur systemer7. Som et resultat, testicular organoids har begynt å samle renter så vel8,9,10,11,12. De fleste metodene som rapporteres så langt er komplekse, ikke-høy gjennomstrømming10 og krever tillegg av ECM proteiner8,10. Denne kompleksiteten fører også til problemer med reproduserbarhet. En enkel og reproduserbar metode er nødvendig som gjør det mulig for generering av testicular organoids med celle-assosiasjoner som er som testikkel in vivo.
Vi har nylig rapportert et system for å løse disse kravene12. Ved hjelp av grisen som modell, brukte vi en sentrifugal tvungen aggregering tilnærming i mikrotiterplateleser systemet. I mikrotiterplateleser-systemet inneholder hver brønn et stort antall identiske mindre microwells13. Dette gir mulighet for generering av mange spheroids av uniform størrelse. Den mikrotiterplateleser system aktiverte generasjonen av et stort antall ensartede organoids med en testikkel-spesifikk arkitektur. Systemet er enkelt og krever ikke tillegg av ECM-proteiner.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm ultra low attachment tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#CLS3262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#353803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aggrwell 400</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#34411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Adherence Rinsing Solution</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#07010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#C5138</td>
			<td>referred as Collagenase IV S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV Worthington</td>
			<td>Worthington-Biochem</td>
			<td>#LS004189</td>
			<td>referred as Collagenase IV W</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#DN25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#11330-032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - high glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D6429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal Growth Factor</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>#236-EG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 70 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 40 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>#12483-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin-Transferrin-Selenium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#41400-045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porcine testicular tissue</td>
			<td>Sunterra Farms Ltd (Alberta, Canada)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip-GP Sterile Centrifuge Tube Top Filter Unit</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>#SCGP00525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture

Organoids er tredimensjonale strukturer sammensatt av flere celletyper som er i stand til recapitulating vev arkitektur og funksjoner av organer in vivo. Dannelse av organoids har åpnet opp ulike muligheter for grunnleggende og translational forskning. I de senere årene har testikkel organoids fått interesse innen mannlig reproduksjons biologi. Testicular organoids tillate for studiet av celle-celle interaksjoner, vev utvikling, og bakteriecellen nisje mikromiljøet og tilrettelegge for høy gjennomstrømming narkotika og toksisitet screening. En metode er nødvendig for å pålitelig og reproduserbar generere testicular organoids med testikkel bestemt vev arkitektur. Mikrotiterplateleser kultur system inneholder et tett utvalg av pyramide-formede microwells. Testicular celler avledet fra pre-pubertale testiklene er sentrifugert inn i disse microwells og kultivert å generere testicular organoids med testikkel-spesifikke vev arkitektur og celle foreninger. Tusenvis av homogene organoids kan genereres via denne prosessen. Protokollen som rapporteres her vil være av bred interesse for forskere som studerer mannlig reproduksjon.

Isolerte celler fra 1-ukers gamle svin testiklene som ble kultivert i microwells selv-organisert i spheroids (figur 1A, figur 2), med avgrenset og distinkt utvendig (sæd epitel) og innvendige rom ( interstitium) (figur 1B, figur 2). De to seksjonene ble separert av en kollagen IV+ har kjeller membran. UCH-L1+ ve ba...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture

Her presenterer vi en protokoll for reproduserbar generering av svin testikkel organoids med testikkel bestemt vevs arkitektur ved hjelp av det kommersielt tilgjengelige mikrotiterplateleser kultur systemet.

Generasjon av svin testikkel Organoids med testikkel spesifikk arkitekturen benytter Mikrotiterplateleser kulturen

Organoids are three dimensional structures composed of multiple cell types that are capable of recapitulating tissue architecture and functions of organs ...

Denne protokollen er betydelig fordi den tillater generering av testikkel organoider, som kan brukes som en plattform for å studere testikkel morfogenese og for høy tropo narkotika og toksisitet screenings. Den største fordelen med denne teknikken er at den er svært reproduserbar, krever et relativt lavt antall celler og kan brukes til å generere et stort antall testikkelorganoider med testisspesifikk arkitektur. Denne metoden kan brukes til å studere andre systemer, for eksempel pluripotente stamceller eller bukspyttkjerteløyeceller med de nødvendige optimaliseringene.Viser testicular vev enzymatisk fordøyelse prosedyren vil være Anna Voigt, en ph.d.-student fra laboratoriet mitt. Samle testis i et sterilt beger og vask med PBS som inneholder 1% penicillin streptomycin. Etter vask overføre testis til en 100 millimeter vev kultur rett med PBS inneholder 1% penicillin streptomycin.Bruk autoklavet saks og tang for å fjerne tunika vaginalis og epididymis. Overfør den isolerte testisen til en ny 100 millimeter rett og vask grundig med PBS som inneholder 1% penicillin streptomycin. Klipp testene langs langsgående aksen rett under tunikaen.Deretter skreller testis ut av tunikaen ved hjelp av to tang og legg den i en ny 100 millimeter tallerken som inneholder 1 milliliter DMEM med 1% penicillin streptomycin. Hakke de skrelles testis med steril saks i en til to millimeter vev stykker. Etter hakking bruk sterile tang for å fjerne de hvite fragmentene av bindevev.Overfør hakket vev stykker i løsning A i en 50 milliliter rør og topp den opp til 50 milliliter med DMEM å få en konsentrasjon på 0,4 milligram per milliliter for colagenase 4S og en konsentrasjon på 0,8 milligram per milliliter for colagenase 4W. Plasser røret som inneholder vevsbitene i et 37 graders Celsius vannbad i 30 minutter. Snu forsiktig røret hvert femte minutt.Etter 30 minutter sentrifuger røret ved 90 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Kast supernatant, annonse 40 milliliter løsning B, og topp opp til 50 milliliter med DMEM for å oppnå en konsentrasjon på 1,2 milligram per milliliter colagenase 4W. Plasser røret i et 37 graders Celsius vannbad i 30 minutter og snu forsiktig røret hvert femte minutt.Sentrifuger røret ved 90 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Deretter kast supernatanten, og vask en gang med PBS med 1% penicillin streptomycin. Samle forsiktig tubuli fra toppen og legg i et nytt 50 milliliter rør.Topp opp røret med PBS opptil 50 milliliter. Sentrifuge tubuli på 90 ganger G med pauser på 25 grader Celsius i 1,5 minutter. Kast det overnaturlige og tilsett fersk PBS for å vaske to ekstra ganger.Etter den siste PBS vask fjerne overnatant og re-suspendere seminiferous tubuli i fem milliliter pbs. Deretter legger du til 15 milliliter med 0,25% Trypsin EDTA til tubuli. Plasser røret i et 37 graders Celsius vannbad og forsiktig inverter annethvert minutt.Etter fem minutter evaluere enzymatisk fordøyelse av tubuli til enkeltceller under mikroskopet med 10 mikroliter prøve på en vev kultur plate. Hvert annet minutt plasserer du prøven under mikroskopet for å observere. Hvis det meste enkeltceller kan oppdages stoppe reaksjonen med fem milliliter FBS og filtrere gjennom en 70 mikron mesh og deretter gjennom en 40 micron mesh.Sentrifuger enkeltcellene ved 500 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Re-suspendere i 50 milliliter berikelse medium, og telle antall levedyktige celler ved hjelp av et hemocytometer. Overfør 20 millioner av denne startcellepopulasjonen til hver av to ultralave vedlegg 100 millimeter Petri retter og inkubere i en vev-kultur inkubator ved 37 grader Celsius, 5% karbondioksid og 21% oksygen i to dager.Cede 20 til 25 millioner celler av den gjenværende startcellepopulasjonen per 100 millimeter vevskulturrett i et totalt volum på åtte milliliter berikelsesmedium. Plasser parabolen i en inkubator og sørg etter 1,5 timer for å sikre at de fleste Sertoli-cellene er festet til platen. Vipp litt to plater for å samle og kombinere supernativa i en ny 100 millimeter plate og plasser den tilbake i inkubatoren.Etter en time kombinerer du igjen supernativa av to plater til en ny 100 millimeter plate. Plasser platene tilbake i inkubatoren over natten. Deretter samler de berikede bakteriecellene i to fraksjoner, ikke-tilhengerfraksjon og litt tilhengerfraksjon.Samle supernatant som ikke-tilhengerfraksjon. For den litt tilkblende fraksjonen vask platene forsiktig med PBS og behandle med to milliliter av en til 20 fortynning av 0,25% Trypsin EDTA i fem minutter ved romtemperatur. Stopp reaksjonen ved å legge til to milliliter berikelsesmedium og samle i det ikke-tilhengerfraksjonsrøret.Kombiner startcellepreparatet og de berikede bakteriecellene i et rør for å oppnå et fungerende cellepreparat som inneholder 25% bakterieceller. Sentrifuge ved 500 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Kast de overnaturante og re-suspendere cellene i 20 milliliter organoid formasjon medium for å nå en konsentrasjon på 2,4 millioner celler per milliliter.I et nytt rør legger du til en milliliter av løsningen som inneholder celler. Tilsett 0,5 milliliter overflateaktivt skyllemiddel til hver brønn i en mikrobrønnplate. Sørg for at ingen luftbobler er fanget i brønnen.For å fjerne luftbobler sentrifuge platen på 2000 ganger G med pauser på 25 grader Celsius i to minutter. Vær oppmerksom på platen under et lavt forstørrelsesforstørrelsesforede mikroskop for å kontrollere at boblene er fjernet fra mikrobrønnene. Dekk platen med et lokk og inkuber i 30 minutter ved romtemperatur.Etter at behandlingen er fullført, fjern skylleoppløsningen og vask platen umiddelbart med sterilt vann eller PBS. Tilsett 0,5 milliliter organoidformasjonsmedium til hver brønn og sentrifuge ved 2000 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i to minutter for å fjerne eventuelle fanget luftbobler. Vær oppmerksom på brønnen under et lavt forstørrelsesforstørrelsesforedutskop for å kontrollere at luftboblene er fjernet.Tilsett 0,5 milliliter av arbeidscelleopphenget og bland forsiktig ved å pipetter opp og ned. Sentrifuge ved 500 ganger G med pauser ved 25 grader Celsius i fem minutter. Bruk et omvendt mikroskop for å kontrollere at cellene har gruppert i mikrobrønnene.Overfør platen til en cellekultur inkubator og kultur i fem dager. Bytt halvparten av mediet annenhver dag. For å gjenopprette organoider bruk en bredmunn pipette for å forsiktig pipette mediet opp og ned.Dette gjør at organoidene kan komme ut av mikrobrønnene. Samle organoider, fikse og utføre immuno cytokjemi for bakteriecellemarkør, Sertoli cellemarkør, peritubular myoid cellemarkør og Leydig cellemarkør og visualisere under et konfokal mikroskop. I denne studien isolerte celler fra en uke gamle svinetestis som ble dyrket i mikrobrønner selvorganisert i sfæroider med avgrensede og distinkte utvendige og innvendige rom.De to rommene ble separert av en kollagen IV positiv kjellermembran. GATA4 positive Sertoli-celler og UCHL1 positive bakterieceller var i det utvendige rommet på kjellermembranen. aSMA positive peri-rørformede myoidceller ble lokalisert langs innsiden av kjellermembranen mens CYP450 positive Leydig-celler var i midten av interstitiumet.Denne strukturen ligner på In Situ forhold, hvor Leydig celler, peri-rørformede myoidceller, ligger i interstitium, i interstitiell rom og bakterieceller, Sertoli celler er plassert på seminiferøse epitel. Det er viktig å sikre at celler som brukes til å generere organoider har optimal kvalitet. Nøye oppmerksomhet bør gis under trypsiniseringsstadiet av den enzymatiske fordøyelsen.Etter denne prosedyren kan organoider dyrkes på lang sikt for å studere bakteriecelledilatering eller analysere for genuttrykk og utskilles proteiner eller hormoner. Evnen til å lage organoider med testisspesifikke celleforeninger gir et nytt in-vitro-system for å studere cellecelleinteraksjoner som er viktige for testisutvikling og bakteriecellefunksjon.

Research

JoVE Journal

Medicine

Teratoma Generation in the Testis Capsule

Teratom Generation i testis Capsule

Pluripotent stem cells (PSCs) have the unique characteristic that they can differentiate into cells from all three germ layers.  This makes them a ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Teknikken med svinekjøtt Liver anskaffelser og ortotopiske Transplantasjon ved hjelp av en Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Isolation and Culture Expansion of Tumor-specific Endothelial Cells

Isolation and Culture Utvidelse av tumor-spesifikke endotelceller

Freshly isolated tumor-specific endothelial cells (TEC) can be used to explore molecular mechanisms of tumor angiogenesis and serve as an in vitro model ...

A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

En humant glioblastom organotypisk skivekulturmodell for studier av tumorcellemigrasjon og pasientspesifikke effekter av antiinvasjonsmidler

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...

Generation of Microtumors Using 3D Human Biogel Culture System and Patient-derived Glioblastoma Cells for Kinomic Profiling and Drug Response Testing

Generering av Microtumors Bruke 3D Menneskelig Biogel Kultur System og pasient-avledet glioblastom celler for Kinomic Profilering and Drug Response Testing

The use of patient-derived xenografts for modeling cancers has provided important insight into cancer biology and drug responsiveness. However, they are ...

Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior

Generering av Organ med klimaanlegg Media og programmer for å studere organspesifikk Influences på Breast Cancer Metastatisk Behavior

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

Generering av en humanisert muselever med humane lever stamceller

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the "RE:fine Drugs" System

Drug gjenbruk Hypotese Generation Bruke &quot;RE: Fine Drugs&quot; System

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The ...

Muscle Imbalances: Testing and Training Functional Eccentric Hamstring Strength in Athletic Populations

Muskelen ubalansene: Testing og opplæring funksjonelle eksentriske Hamstring styrke atletisk bestander

Many hamstring injuries that occur during physical activity occur while the muscles are lengthening, during eccentric hamstring muscle actions. Opposite ...