Name: generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture
Uploaded: 2019-10-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

Эта работа была поддержана NIH/NICHD HD091068-01 доктору Ине Добрински.

ПРИМЕЧАНИЕ: Тесты из 1-недельных поросят были получены из коммерческой свинофермы в качестве побочного продукта от кастрации коммерческих свиней. Поиск яичек был одобрен Комитетом по уходу за животными в Университете Калгари.
1. Подготовка ферментных растворов для пищева...

<ol>
	<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lgr5(+ve)+stem+cells+drive+self-renewal+in+the+stomach+and+build+long-lived+gastric+units+in+vitro.">Lgr5(+ve) stem cells drive self-renewal in the stomach and build long-lived gastric units in vitro.</a> Cell Stem Cell. 6 (1), 25-36 (2010).</li><li>Huch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unlimited+in+vitro+expansion+of+adult+bi-potent+pancreas+progenitors+through+the+Lgr5/R-spondin+axis.">Unlimited in vitro expansion of adult bi-potent pancreas progenitors through the Lgr5/R-spondin axis.</a> Embo Journal. 32 (20), 2708-2721 (2013).</li><li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer.">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li><li>Takebe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+and+functional+human+liver+from+an+iPSC-derived+organ+bud+transplant.">Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant.</a> Nature. 499 (7459), 481-484 (2013).</li><li>Quadrato, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+diversity+and+network+dynamics+in+photosensitive+human+brain+organoids.">Cell diversity and network dynamics in photosensitive human brain organoids.</a> Nature. 545 (7652), 48-53 (2017).</li><li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture:+biology's+new+dimension.">Cell culture: biology's new dimension.</a> Nature. 424 (6951), 870-872 (2003).</li><li>Pendergraft, S. S., Sadri-Ardekani, H., Atala, A., Bishop, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+testicular+organoid:+a+novel+tool+for+the+study+of+human+spermatogenesis+and+gonadotoxicity+in+vitrodagger.">Three-dimensional testicular organoid: a novel tool for the study of human spermatogenesis and gonadotoxicity in vitrodagger.</a> Biology of Reproduction. 96 (3), 720-732 (2017).</li><li>Strange, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+testicular+organoid+system+as+a+novel+tool+to+study+Zika+virus+pathogenesis.">Human testicular organoid system as a novel tool to study Zika virus pathogenesis.</a> Emerging Microbes &amp; Infections. 7 (1), 82-82 (2018).</li><li>Alves-Lopes, J. P., Soder, O., Stukenborg, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testicular+organoid+generation+by+a+novel+in+vitro+three-layer+gradient+system.">Testicular organoid generation by a novel in vitro three-layer gradient system.</a> Biomaterials. 130, 76-89 (2017).</li><li>Baert, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Human+Testicular+Cells+Self-Organize+into+Organoids+with+Testicular+Properties.">Primary Human Testicular Cells Self-Organize into Organoids with Testicular Properties.</a> Stem Cell Reports. 8 (1), 30-38 (2017).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. , (2019).</li><li>Razian, G., Yu, Y., Ungrin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+Large+Numbers+of+Size-controlled+Tumor+Spheroids+Using+Microwell+Plates.">Production of Large Numbers of Size-controlled Tumor Spheroids Using Microwell Plates.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), 50665 (2013).</li><li>Sakib, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+organotypic+testicular+organoids+in+microwell+culture.">Formation of organotypic testicular organoids in microwell culture.</a> Biology of Reproduction. 100 (6), 1648-1660 (2019).</li><li>Gonz&#225;lez, R., Dobrinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+the+Mouse+Monopoly:+Studying+the+Male+Germ+Line+in+Domestic+Animal+Models.">Beyond the Mouse Monopoly: Studying the Male Germ Line in Domestic Animal Models.</a> ILAR Journal. 56 (1), 83-98 (2015).</li><li>Oatley, J. M., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+germline+stem+cell+niche+unit+in+mammalian+testes.">The germline stem cell niche unit in mammalian testes.</a> Physiological Reviews. 92 (2), 577-595 (2012).</li><li>Chen, L. Y., Willis, W. D., Eddy, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Gdnf+Gene+in+peritubular+myoid+cells+disrupts+undifferentiated+spermatogonial+cell+development.">Targeting the Gdnf Gene in peritubular myoid cells disrupts undifferentiated spermatogonial cell development.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 113 (7), 1829-1834 (2016).</li></ol>

Мы создали простой метод, который позволяет последовательное, повторяемое поколение большого количества яичек органоидов с архитектурой тканей, которая похожа на testis in vivo12. Хотя подход был разработан с использованием свиных яичек клеток, это более широко применимо также ?...

В последние годы наблюдается возрождение интереса к трехмерным (3D) органоидам. Различные органы, такие как кишечник1,желудок2,поджелудочная железа3,4,печень5,и мозг6 были успешно выведены в 3D органоидных систем. Эти органоиды имеют архитектурное и функциональное сходство с органами in vivo и более биологически актуальны для изучения микроокружения тканей, чем монослойные системы культуры7. В результате, органоиды яичек начали набирать интерес, а также8,9,10,11,12. Большинство методов сообщили до сих пор являются сложными, невысокой пропускной записи10 и требуют добавления ECM белков8,10. Эта сложность также приводит к проблемам с воспроизводимостью. Необходим простой и воспроизводимый метод, позволяющий выравлить органоиды яичек с клеточными ассоциациями, которые подобны яичкам in vivo.
Недавно мы сообщили о системе для удовлетворения этихтребований 12. Используя свинью в качестве модели, мы использовали центробежный подход к принудительной агрегации в системе микроколодцов. В системе микроколодцов, каждый из скважин содержит большое количество одинаковых небольших микровелл13. Это позволяет для генерации многочисленных сфероидов равномерного размера. Система микроскважин позволила пообразить большое количество однородных органоидов с архитектурой, специфичной для яичек. Система проста и не требует добавления белков ECM.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm ultra low attachment tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#CLS3262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm tissue culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#353803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aggrwell 400</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#34411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Adherence Rinsing Solution</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>#07010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#C5138</td>
			<td>referred as Collagenase IV S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IV Worthington</td>
			<td>Worthington-Biochem</td>
			<td>#LS004189</td>
			<td>referred as Collagenase IV W</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#DN25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#11330-032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - high glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D6429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal Growth Factor</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>#236-EG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 70 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainers 40 &#181;m</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>#352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>#12483-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin-Transferrin-Selenium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#41400-045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>#P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porcine testicular tissue</td>
			<td>Sunterra Farms Ltd (Alberta, Canada)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip-GP Sterile Centrifuge Tube Top Filter Unit</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>#SCGP00525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of porcine testicular organoids with testis specific architecture using microwell culture

Органоиды представляют трехмерные структуры, состоящие из нескольких типов клеток, которые способны переопределять архитектуру тканей и функции органов in vivo. Формирование органоидов открыло различные возможности фундаментальных и трансляционных исследований. В последние годы органоиды яичек заинтересовались мужской репродуктивной биологией. Личикулярные органоиды позволяют изучать клеточные взаимодействия, развитие тканей и микросреду нишу зародышевых клеток и облегчают высокую пропускную способность наркотиков и скрининга токсичности. Метод необходим для надежного и воспроизводимого генерации яичек органоидов с testis специфической архитектуры тканей. Система культуры микроколодцев содержит плотный массив микроколодцев в форме пирамиды. Яичек клетки, полученные из допубертатных яичек центрифугируются в эти микроуэллы и культивируется для создания яичек органоидов с яичка конкретных архитектуры тканей и клеточных ассоциаций. Тысячи однородных органоидов могут быть созданы с помощью этого процесса. Протокол, представленный здесь, будет представлять широкий интерес для исследователей, изучающих мужское размножение.

Изолированные клетки из 1-недельных старых свиных яичек, которые культивировались в микроуэллах, самоорганизованных в сфероиды(рисунок 1A, Рисунок 2),с разграниченной и четкой внешности (семиниферный эпителий) и внутренних отсе...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture at JoVE.com

Generation of Porcine Testicular Organoids with Testis Specific Architecture using Microwell Culture

Здесь мы представляем протокол для воспроизводимого поколения свиных яичек органоидов с тестом специфической архитектуры тканей с использованием коммерчески доступной системы культуры микроколодцев.

Поколение свиных яичек органоидов с Testis Специфическая архитектура с использованием Microwell культуры

Organoids are three dimensional structures composed of multiple cell types that are capable of recapitulating tissue architecture and functions of organs ...

Этот протокол имеет важное значение, поскольку он позволяет генерации органоидов яичка, которые могут быть использованы в качестве платформы для изучения морфогенеза яичка и для высоких tropo наркотиков и токсичности скринингов. Основным преимуществом этой техники является то, что она очень воспроизводится, требует относительно небольшого количества клеток и может быть использована для создания большого количества органоидов яичек с конкретной архитектурой яичка. Этот метод может быть применен для изучения других систем, таких как плюрипотентные стволовые клетки или островков поджелудочной железы с необходимой оптимизацией.Демонстрацией процедуры энзиматической пищеварения ткани яичка будет Анна Фойгт, аспирантка из моей лаборатории. Соберите яички в стерильный стакан и мыть с PBS, содержащий 1%пенициллин стрептомицин. После мытья перенесите яички на 100-миллиметровую культурную тарелку с PBS, содержащую 1%пенициллин стрептомицин.Используйте автоматические ножницы и типсы, чтобы удалить туника vaginalis и epididymis. Перенесите изолированный яички в новое 100-миллиметровое блюдо и тщательно промойте PBS, содержащим 1%пенициллин стрептомицин. Вырезать яичка вдоль продольной оси прямо под туника.Затем очистить яички из туники с помощью двух типсов и поместить его в новый 100-миллиметровый блюдо, содержащее 1 миллилитр DMEM с 1%пенициллин стрептомицин. Измельчите очищенный яички стерильными ножницами на кусочки ткани от одного до двух миллиметров. После измельчения используйте стерильные типсы для удаления белых фрагментов соединительной ткани.Передача кусочков рубленой ткани в раствор А в 50 миллилитровую трубку и пополнить его до 50 миллилитров с DMEM, чтобы получить концентрацию 0,4 миллиграмма на миллилитр для колагеназы 4S и концентрации 0,8 миллиграмма на миллилитр для колагеназы 4W. Поместите трубку, содержащую кусочки ткани, в водяную баню 37 градусов по Цельсию в течение 30 минут. Аккуратно инвертировать трубку каждые пять минут.Через 30 минут центрифуга трубки в 90 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение 1,5 минут. Отбросьте супернатант, объявление 40 миллилитров раствора B, и пополнить до 50 миллилитров с DMEM, чтобы получить концентрацию 1,2 миллиграмма на миллилитр колагеназы 4W. Поместите трубку в 37 градусов по Цельсию водяной бане в течение 30 минут и осторожно инвертировать трубку каждые пять минут.Центрифуга трубки при 90 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение 1,5 минут. После этого отбросить супернатант, и мыть один раз с PBS с 1%пенициллин стрептомицин. Тщательно соберите трубочку сверху и поместите в новую 50-миллилитровую трубку.Пополнить трубку с PBS до 50 миллилитров. Центрифуга труб труб при 90 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение 1,5 минут. Откажитесь от супернатанта и добавьте свежий PBS, чтобы вымыть еще два раза.После последней стирки PBS удалить супернатант и повторно приостановить семенные трубочки в пять миллилитров PBS. Затем добавьте 15 миллилитров 0,25%Трипсина EDTA в трубоубивания. Поместите трубку в 37 градусов по Цельсию водяной бане и осторожно инвертировать каждые две минуты.Через пять минут оцените энзиматическое переваривание трубок до одиночных клеток под микроскопом с помощью 10 микролитров образца на пластине культуры тканей. Каждые две минуты поместите образец под микроскоп для наблюдения. Если в основном одиночные клетки могут быть обнаружены остановить реакцию с пятью миллилитров FBS и фильтр через 70 микрон сетки, а затем через 40 микрон сетки.Центрифуга одиночных клеток при 500 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение пяти минут. Повторно приостановить в 50 миллилитров обогащения среды, и подсчитать количество жизнеспособных клеток с помощью гемоцитометра. Передача 20 миллионов этой стартовой популяции клеток в каждую из двух сверхнизких вложений 100 миллиметров чаш Петри и инкубации в инкубаторе культуры тканей при 37 градусах по Цельсию, 5%углекислого газа и 21% кислорода в течение двух дней.Уступить от 20 до 25 миллионов клеток оставшейся популяции стартовых клеток на 100 миллиметров ткани культуры блюдо в общем объеме восемь миллилитров обогащения среды. Поместите блюдо в инкубатор и через 1,5 часа убедитесь, что большинство клеток Сертоли прикреплены к пластине. Слегка наклоните две пластины, чтобы собрать и объединить супернатанты в одну новую 100-миллиметровую пластину и поместить ее обратно в инкубатор.Через час снова объедините супернатанты из двух пластин в новую 100-миллиметровую пластину. Поместите тарелки обратно в инкубатор на ночь. Затем соберите обогащенные зародышевые клетки в две фракции, непритягатые фракции и слегка приверженные фракции.Соберите супернатант в качестве неприядаемой фракции. Для слегка придерживаться фракции мыть пластины осторожно с PBS и лечить с двумя миллилитров от одного до 20 разбавления 0,25%Trypsin EDTA в течение пяти минут при комнатной температуре. Остановите реакцию, добавив два миллилитров среды обогащения и соберите в непритятаемой фракционной трубке.Объедините препарат стартовых клеток и обогащенные зародышевые клетки в трубке, чтобы получить препарат рабочей клетки, содержащий 25%зародышевые клетки. Центрифуга при 500 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение пяти минут. Отбросьте супернатант и повторно приостановьте клетки в 20 миллилитров среды органоидного образования, чтобы достичь концентрации 2,4 миллиона клеток на миллилитр.В новую трубку добавить один миллилитр раствора, содержащего клетки. Добавьте 0,5 миллилитров раствора для полоскания сурфактантов к каждой колодец в микро-пластине. Убедитесь, что пузырьки воздуха не попали в колодец.Для удаления пузырьков воздуха центрифуга пластины на 2000 раз G с перерывами при 25 градусов по Цельсию в течение двух минут. Наблюдайте за пластиной под перевернутым микроскопом с низким увеличением, чтобы убедиться, что пузырьки были удалены из микро скважин. Накройте тарелку крышкой и инкубировать в течение 30 минут при комнатной температуре.После завершения процедуры удалите промывку раствора и немедленно промойте тарелку стерильной водой или PBS. Добавьте 0,5 миллилитров органоидной среды образования к каждой хорошо и центрифуги при 2000 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение двух минут, чтобы удалить любые захваченные пузырьки воздуха. Наблюдайте хорошо под низким увеличением перевернутый микроскоп, чтобы убедиться, что пузырьки воздуха были удалены.Добавьте 0,5 миллилитров подвески рабочей ячейки и аккуратно перемешайте с помощью трубок вверх и вниз. Центрифуга при 500 раз G с перерывами при 25 градусах по Цельсию в течение пяти минут. Используйте перевернутый микроскоп, чтобы убедиться, что клетки сгруппированы внутри микро скважин.Перенесите пластину в инкубатор клеточной культуры и культуры в течение пяти дней. Изменение половины среды через день. Для восстановления органоидов использовать широко ртом пипетки мягко пипетки среды вверх и вниз.Это позволяет органоидам выходить из микро скважин. Соберите органоиды, исправить и выполнить иммуноцитохимии для маркера зародышевых клеток, маркер клеток Сертоли, перитубулярный маркер миоидных клеток и маркер клеток Лейдиг и визуализировать под конфокальный микроскоп. В этом исследовании изолированные клетки из недельного свиного яичка, которые были откололись в микро-колодцах, самоорганизованных в сфероиды с очерченными и отчетливыми внешними и внутренними отсеками.Два отсека были разделены коллагеном IV положительной мембраны подвала. GATA4 положительные клетки Sertoli и UCHL1 положительные зародышевые клетки были во внешнем отсеке на мембране подвала. ASMA положительные пери-трубчатые миоидные клетки были локализованы вдоль внутренней части мембраны подвала в то время как CYP450 положительные клетки Leydig были в центре интерстиция.Эта структура похожа на условия In Situ, где клетки Лейдига, пери-трубчатые миоидные клетки, расположены в интерстициуме, в интерстициальных отсеках и зародышевых клетках, клетки Сертоли расположены в семенном эпителии. Важно обеспечить, чтобы клетки, используемые для генерации органоидов, были оптимального качества. Тщательное внимание следует уделить на этапе трипсинизации энзиматической пищеварения.После этой процедуры органоиды могут быть выучаты в долгосрочной перспективе для изучения дифференциации зародышевых клеток или анализа экспрессии генов и секретируемых белков или гормонов. Способность создавать органоиды с помощью ассоциаций клеток, специфичных для яичка, обеспечивает новую систему in-vitro для изучения клеточно-клеточных взаимодействий, важных для развития яичка и функции зародышевых клеток.

Research

JoVE Journal

Medicine

Teratoma Generation in the Testis Capsule

Тератомы поколения в капсулу яичка

Pluripotent stem cells (PSCs) have the unique characteristic that they can differentiate into cells from all three germ layers.  This makes them a ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Методика свиной печени закупок и Ортотопическая трансплантации с использованием активного Порто-Caval шунт

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Isolation and Culture Expansion of Tumor-specific Endothelial Cells

Выделение и культура Расширение опухоли конкретных эндотелиальных клеток

Freshly isolated tumor-specific endothelial cells (TEC) can be used to explore molecular mechanisms of tumor angiogenesis and serve as an in vitro model ...

A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

Модель культивирования органотипической кусочки глиобластомы человека для изучения миграции опухолевых клеток и специфических для пациента эффектов антиинвазивных препаратов

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...

Generation of Microtumors Using 3D Human Biogel Culture System and Patient-derived Glioblastoma Cells for Kinomic Profiling and Drug Response Testing

Генерация Microtumors Использование 3D человека биогель системы культуры и терпеливый происхождения клеток глиобластомы для Kinomic профилирование и тестирования реагирования на наркотики

The use of patient-derived xenografts for modeling cancers has provided important insight into cancer biology and drug responsiveness. However, they are ...

Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior

Поколение Органосохраняющие условных СМИ и приложений для изучения органоспецифической Влияния на рак молочной железы метастатическое поведение

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

Генерация гуманизированное печени мышей с помощью печени человека стволовые клетки

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the "RE:fine Drugs" System

Drug перепрофилирования Гипотезы Generation Использование &quot;RE: тонкие наркотики&quot; Система

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The ...

Muscle Imbalances: Testing and Training Functional Eccentric Hamstring Strength in Athletic Populations

Мышечной дисбаланс: Тестирование и обучение функциональной эксцентричный подколенного сухожилия прочность спортивная(ый) популяции

Many hamstring injuries that occur during physical activity occur while the muscles are lengthening, during eccentric hamstring muscle actions. Opposite ...