Name: in vivo mouse model of spinal implant infection
Uploaded: 2020-06-23T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection at JoVE.com

Авторы хотели бы выразить признательность за получение гранта Biomet Spine Общества педиатрического ортопедического общества Северной Америки и гранта KL2 Института клинических и трансляционных наук Национального института здравоохранения, а также гранта HH Lee Surgical Research Grant в качестве основных источников финансирования этих экспериментов.

Со всеми животными обращались в строгом соответствии с надлежащей ветеринарной практикой, как это определено в федеральных правилах, изложенных в Законе о благополучии животных (AWA), Руководстве по уходу и использованию лабораторных животных 1996 года, Политике PHS по гуманному уходу и ис?...

<ol>
	<li>Verdrengh, M., Tarkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+neutrophils+in+experimental+septicemia+and+septic+arthritis+induced+by+Staphylococcus+aureus.">Role of neutrophils in experimental septicemia and septic arthritis induced by Staphylococcus aureus.</a> Infection and Immunity. 65 (7), 2517-2521 (1997).</li><li>Fang, A., Hu, S. S., Endres, N., Bradford, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+infection+after+spinal+surgery.">Risk factors for infection after spinal surgery.</a> Spine. 30 (12), 1460-1465 (2005).</li><li>Levi, A. D., Dickman, C. A., Sonntag, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+postoperative+infections+after+spinal+instrumentation.">Management of postoperative infections after spinal instrumentation.</a> Journal of Neurosurgery. 86 (6), 975-980 (1997).</li><li>Weinstein, M. A., McCabe, J. P., Cammisa, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postoperative+spinal+wound+infection:+a+review+of+2,391+consecutive+index+procedures.">Postoperative spinal wound infection: a review of 2,391 consecutive index procedures.</a> Journal of Spinal Disorders. 13 (5), 422-426 (2000).</li><li>Picada, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postoperative+deep+wound+infection+in+adults+after+posterior+lumbosacral+spine+fusion+with+instrumentation:+incidence+and+management.">Postoperative deep wound infection in adults after posterior lumbosacral spine fusion with instrumentation: incidence and management.</a> Journal of Spinal Disorders. 13 (1), 42-45 (2000).</li><li>Smith, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rates+of+infection+after+spine+surgery+based+on+108,419+procedures:+a+report+from+the+Scoliosis+Research+Society+Morbidity+and+Mortality+Committee.">Rates of infection after spine surgery based on 108,419 procedures: a report from the Scoliosis Research Society Morbidity and Mortality Committee.</a> Spine. 36 (7), 556-563 (2011).</li><li>Abbey, D. M., Turner, D. M., Warson, J. S., Wirt, T. C., Scalley, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+postoperative+wound+infections+following+spinal+fusion+with+instrumentation.">Treatment of postoperative wound infections following spinal fusion with instrumentation.</a> Journal of Spinal Disorders. 8 (4), 278-283 (1995).</li><li>Silber, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+postprocedural+discitis.">Management of postprocedural discitis.</a> Spine Journal. 2 (4), 279-287 (2002).</li><li>Pappou, I. P., Papadopoulos, E. C., Sama, A. A., Girardi, F. P., Cammisa, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postoperative+infections+in+interbody+fusion+for+degenerative+spinal+disease.">Postoperative infections in interbody fusion for degenerative spinal disease.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 444, 120-128 (2006).</li><li>Sampedro, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biofilm+approach+to+detect+bacteria+on+removed+spinal+implants.">A biofilm approach to detect bacteria on removed spinal implants.</a> Spine. 35 (12), 1218-1224 (2010).</li><li>Pull ter Gunne, A. F., Mohamed, A. S., Skolasky, R. L., van Laarhoven, C. J., Cohen, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+presentation,+incidence,+etiology,+and+treatment+of+surgical+site+infections+after+spinal+surgery.">The presentation, incidence, etiology, and treatment of surgical site infections after spinal surgery.</a> Spine. 35 (13), 1323-1328 (2010).</li><li>Olsen, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+surgical+site+infection+in+spinal+surgery.">Risk factors for surgical site infection in spinal surgery.</a> Journal of Neurosurgery. 98, 149-155 (2003).</li><li>Ofluoglu, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implant-related+infection+model+in+rat+spine.">Implant-related infection model in rat spine.</a> Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 127 (5), 391-396 (2007).</li><li>Guiboux, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+prophylactic+antibiotics+in+spinal+instrumentation.+A+rabbit+model.">The role of prophylactic antibiotics in spinal instrumentation. A rabbit model.</a> Spine. 23 (6), 653-656 (1998).</li><li>Stavrakis, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Animal+Models+of+Postoperative+Spine+Infection+and+Potential+Future+Advances.">Current Animal Models of Postoperative Spine Infection and Potential Future Advances.</a> Frontiers in Medicine (Lausanne). 2, 34 (2015).</li><li>Pribaz, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+chronic+post-arthroplasty+infection:+noninvasive+in+vivo+bioluminescence+imaging+to+monitor+bacterial+burden+for+long-term+study.">Mouse model of chronic post-arthroplasty infection: noninvasive in vivo bioluminescence imaging to monitor bacterial burden for long-term study.</a> Journal of Orthopaedic Research. 30 (3), 335-340 (2012).</li><li>Bernthal, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+post-arthroplasty+Staphylococcus+aureus+joint+infection+to+evaluate+in+vivo+the+efficacy+of+antimicrobial+implant+coatings.">A mouse model of post-arthroplasty Staphylococcus aureus joint infection to evaluate in vivo the efficacy of antimicrobial implant coatings.</a> PLoS One. 5 (9), 12580 (2010).</li><li>Niska, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+bacterial+burden,+inflammation+and+bone+damage+longitudinally+using+optical+and+muCT+imaging+in+an+orthopaedic+implant+infection+in+mice.">Monitoring bacterial burden, inflammation and bone damage longitudinally using optical and muCT imaging in an orthopaedic implant infection in mice.</a> PLoS One. 7 (10), 47397 (2012).</li><li>Francis, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+bioluminescent+Staphylococcus+aureus+infections+in+living+mice+using+a+novel+luxABCDE+construct.">Monitoring bioluminescent Staphylococcus aureus infections in living mice using a novel luxABCDE construct.</a> Infection and Immunity. 68 (6), 3594-3600 (2000).</li><li>Dworsky, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+in+vivo+mouse+model+of+implant+related+spine+infection.">Novel in vivo mouse model of implant related spine infection.</a> Journal of Orthopaedic Research. 35 (1), 193-199 (2017).</li><li>Hegde, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity+of+telavancin+against+heterogeneous+vancomycin-intermediate+Staphylococcus+aureus+(hVISA)+in+vitro+and+in+an+in+vivo+mouse+model+of+bacteraemia.">Activity of telavancin against heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus (hVISA) in vitro and in an in vivo mouse model of bacteraemia.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 65 (4), 725-728 (2010).</li><li>Crandon, J. L., Kuti, J. L., Nicolau, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+efficacies+of+human+simulated+exposures+of+telavancin+and+vancomycin+against+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+with+a+range+of+vancomycin+MICs+in+a+murine+pneumonia+model.">Comparative efficacies of human simulated exposures of telavancin and vancomycin against methicillin-resistant Staphylococcus aureus with a range of vancomycin MICs in a murine pneumonia model.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 54 (12), 5115-5119 (2010).</li><li>Reyes, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+telavancin+in+a+murine+model+of+bacteraemia+induced+by+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus.">Efficacy of telavancin in a murine model of bacteraemia induced by methicillin-resistant Staphylococcus aureus.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 58 (2), 462-465 (2006).</li><li>Sakoulas, G., Eliopoulos, G. M., Alder, J., Eliopoulos, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+daptomycin+in+experimental+endocarditis+due+to+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus.">Efficacy of daptomycin in experimental endocarditis due to methicillin-resistant Staphylococcus aureus.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 47 (5), 1714-1718 (2003).</li><li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatory+antibiotic+therapy+increases+rate+of+bacterial+kill+but+not+final+outcome+in+a+novel+mouse+model+of+Staphylococcus+aureus+spinal+implant+infection.">Combinatory antibiotic therapy increases rate of bacterial kill but not final outcome in a novel mouse model of Staphylococcus aureus spinal implant infection.</a> PLoS One. 12 (2), 0173019 (2017).</li><li>Poelstra, K. A., Barekzi, N. A., Grainger, D. W., Gristina, A. G., Schuler, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+spinal+implant+infection+model+in+rabbits.">A novel spinal implant infection model in rabbits.</a> Spine. 25 (4), 406-410 (2000).</li></ol>

Инфекции позвоночника, связанные с имплантатами, предвещают неблагоприятные исходы для пациентов 1,2,3,4,5. В отличие от многих других областей тела, инфицированное оборудование в позвоночнике часто ...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60560">In vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection</a>. The Authors section was updated from:
Benjamin V. Kelley1 
Stephen D. Zoller1 
Danielle Greig1 
Kellyn Hori1 
Nicolas Cevallos1 
Chad Ishmael1 
Peter Hsiue1 
Rishi Trikha1 
Troy Sekimura2 
Thomas Olson2 
Ameen Chaudry2 
Michael M. Le2 
Anthony A. Scaduto1 
Kevin P. Francis1 
Nicholas M. Bernthal1 
1Department of Orthopaedic Surgery, University of California Los Angeles 
2David Geffen School of Medicine, University of California Los Angeles
to:
Benjamin V. Kelley1 
Christopher Hamad1 
Stephen D. Zoller1 
Danielle Greig1 
Zeinab Mamouei1 
Rene Chun1 
Kellyn Hori1 
Nicolas Cevallos1 
Chad Ishmael1 
Peter Hsiue1 
Rishi Trikha1 
Troy Sekimura2 
Brandon Gettleman3 
Autreen Golzar2 
Adrian Lin2 
Thomas Olson2 
Ameen Chaudry2 
Michael M. Le2 
Anthony A. Scaduto1 
Kevin P. Francis1 
Nicholas M. Bernthal1 
1Department of Orthopaedic Surgery, University of California Los Angeles 
2David Geffen School of Medicine, University of California Los Angeles 
3University of South Carolina School of Medicine, University of South Carolina

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60560">In vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection</a>. The Authors section was updated.

Erratum: In vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection

Целью данного метода является описание новой мышиной модели инфекции спинальных имплантатов (SII). Эта модель была разработана, чтобы предоставить недорогой и точный инструмент для гибкой оценки влияния переменных хозяина, патогена и/или имплантата in vivo. Тестирование потенциальных терапевтических средств и стратегий лечения инфекций спинномозговых имплантатов в этой модели направлено на руководство развитием исследований перед их применением на более крупных животных моделях и клинических испытаниях.
Инфекция, связанная с имплантатами, после операции на позвоночнике является разрушительным осложнением и, к сожалению, встречается примерно у 3–8% пациентов, перенесших плановую операцию на позвоночнике 1,2,3,4,5, и у 65% пациентов, перенесших многоуровневую или ревизионную операцию6. Лечение инфекций спинномозговых имплантатов часто требует многократных госпитализаций, множественных операций и длительной антибиотикотерапии. СИИ предвещают неблагоприятные исходы для пациентов, включая неврологические нарушения, инвалидность и повышенный риск смертности. Лечение ИИМ является чрезвычайно дорогостоящим и обходится более чем в 900 000 долларов США на одного пациента7.
Золотистый стафилококк является наиболее распространенным вирулентным возбудителем SII 8,9,10,11. Бактерии могут проникать в аппаратное обеспечение непосредственно во время операции, через рану в послеоперационном периоде или позже путем гематогенного распространения. При наличии металлических имплантатов золотистый стафилокк образует биопленку, которая защищает бактерии от антибиотикотерапии и иммунные клетки. Несмотря на то, что удаление инфицированного аппаратного обеспечения может помочь эффективно искоренить инфекцию, это часто неосуществимо в позвоночнике, не вызывая дестабилизации и риска неврологических нарушений12.
При отсутствии эксплейтации зараженного оборудования необходимы новые подходы к профилактике, выявлению и лечению ИИИ. Исторически сложилось так, что существовало ограниченное количество моделей SII на животных для эффективной оценки безопасности и эффективности новых методов лечения. Предыдущие модели SII на животных требовали большого количества животных и сбора данных, требующих эвтаназии, включая подсчет колоний, гистологию и культивирование13,14,15. Из-за отсутствия продольного мониторинга in vivo эти модели предоставляют только одну точку данных для каждого животного и, следовательно, являются дорогостоящими и неэффективными.
Предыдущая работа по изучению мышиной модели инфекции эндопротезирования коленного сустава установила ценность и точность неинвазивной оптической визуализации in vivo для лонгитюдного мониторинга бремени инфекции16. Обнаружение биолюминесценции позволяет гуманно, точно и эффективно количественно определять бактериальную нагрузку в течение длительного периода времени у одного животного. Более того, предыдущие исследования продемонстрировали высокую корреляцию между биолюминесценцией in vivo и КОЕ, адгезивными к имплантатам17. Способность отслеживать инфекцию с течением времени привела к более тонкому пониманию инфекций, связанных с имплантатами. Кроме того, мониторинг лонгитюдной инфекции таким образом позволил точно оценить эффективность антибиотикотерапии и новых противомикробных препаратов16,17,18.
Используя эти инструменты, мы разработали и валидировали модель послеоперационной инфекции спинальных имплантатов. В представленном методе мы используем посевной материал биолюминесцентного S. aureus Xen36 для создания мышиной модели SII in vivo для лонгитюдного мониторинга бактериальной нагрузки16,17,18. Эта новая модель представляет собой ценный инструмент для эффективного тестирования потенциальных стратегий обнаружения, профилактики и лечения SII перед их применением на более крупных животных моделях и клинических испытаниях.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Analytical Balance ME104</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>30029067</td>
			<td>120 g capacity, 0.1 mg readability, backlit LCD, internal adjustment, metal base</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Bacto Tryptic Soy Broth</td>
			<td>Becton Dickinson (BD)</td>
			<td>BD 211825</td>
			<td>BD Bacto Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomate 3S UV-VIS Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>840-208300</td>
			<td>Spectrophotometer; Thermo Scientific; BioMate 3S; Six-position cell holder; Spectral bandwidth: 1.8nm; Long-life xenon lamp; Store up to 40 test methods; 16L x 13W x 9 in. H; 19 lb.; 100/240V US line cord</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioshield 720+ swinging bucket rotor</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75003183</td>
			<td>Rotor, Swinging bucket; Thermo Scientific; BIOShield 720 high speed; Capacity: 4 x 180mL (0.72L); Angle: 90 deg. ; Max. speed/RCF: 6300rpm/7188 x g; Max. radius: 16.2cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Branson Ultrasonics 2510R-MTH (Sonicator)</td>
			<td>Branson Ultrasonics</td>
			<td>CPX952217R</td>
			<td>*similar model, our model is discontinued* Branson Ultrasonics MH Series Heated Ultrasonic Cleaning Bath, 120V, 0.75 gal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bullet Blender Storm Homogenizer</td>
			<td>Next Advance</td>
			<td>BBY24M</td>
			<td>The Bullet Blender Storm is the most powerful member of the Bullet Blender family. Homogenize up to 24 of your toughest samples (mouse femur, skin, cartilage, tumor, etc.) in just minutes. Air cooling&#8482; minimizes sample heat up. Uses 1.5ml screw-cap RINO&#174; tubes or snap-cap Eppendorf&#174; Safe-lock&#8482; tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>66118-10</td>
			<td>The Germinator 500 is designed to decontaminate metal micro-dissecting instruments only. It is to be 
			used exclusively for research purposes. The Germinator 500 should not be used as a substitute for 
			traditional methods of terminal sterilization. Effective sterilization cannot be assured due to lack of routine 
			sterilization-efficacy monitoring methods for glass bead sterilization. The Germinator 500 has been 
			designed and built to pass the Validation of Dry Sterilizer Spore Suspension Test: USP XXIII, Part 1211.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heracell 150i CO2 Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51026282</td>
			<td>Single 150L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Lumina X5 Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>CLS148590</td>
			<td>The IVIS Lumina X5 high-throughput 2D optical imaging system combines high-sensitivity bioluminescence and fluorescence with high-resolution x-ray into a compact system that fits on your benchtop. With an expanded 5 mouse field of view for 2D optical imaging plus our unique line of accessories to accelerate setup and labeling, it has never been easier or faster to get robust data&#8212;and answers&#8212;on anatomical and molecular aspects of disease.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MAXQ 4450 Digtial Incubating Bench Shaker</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>SHKE4450</td>
			<td>Shaker, Incubated; Thermo Scientific; Digital; MaxQ 4450; Speed 15 to 500rpm +/-1rpm; 5 deg. C above ambient to 80 deg. C; 120V 50/60Hz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS, Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP24384</td>
			<td>PBS, Phosphate Buffered Saline, 1X Solution, pH 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend Micro 21 Centrifuge, Ventilated</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75002436</td>
			<td>24 x 1.5/2.0mL rotor with ClickSeal biocontainment lid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SORVALL LEGEND X1R 120V Centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75004261</td>
			<td>Centrifuge, Benchtop; Thermo Scientific; Sorvall Legend X1R (Refrigerated), 1L capacity; Max. Speed/RCF 15,200rpm/25,830 x g; CFC-free cooling -10C to +40C; 120V 60Hz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus aureus - Xen36</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>119243</td>
			<td>Staphylococcus aureus - Xen36 bioluminescent pathogenic bacteria for in vivo and in vitro drug discovery. This product was derived from a parental strain from the American Type Culture Collection, used under license. Staph. aureus-Xen36 possesses a stable copy of the Photorhabdus luminescens lux operon on the native plasmid.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUTTNAUER AUTOCLAVE 2540E 120V</td>
			<td>Heidolph Tuttnauer</td>
			<td>23210401</td>
			<td>Sterilizer, Benchtop; Heidolph; Tuttnauer; Model 2540E; Self-contained design with refillable reservoir controls water purity for sterilization; 120V 50/60Hz; 1400w. With electronic controls</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 80</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP338-500</td>
			<td>Tween 80, Fisher BioReagents, Non-ionic detergent for selective protein extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer VX-200</td>
			<td>Labnet Internation</td>
			<td>S0200</td>
			<td>120V touch or continuous mixer, 230V: 0 - 2,850 rpm,120V: 0 - 3,400 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Pfizer Injectables/Hospira</td>
			<td>00409-4888-10</td>
			<td>0.9% Sodium Chloride Injection, USP</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo mouse model of spinal implant infection

Инфекции спинальных имплантатов предвещают неблагоприятные исходы, поскольку диагностика затруднена, а хирургическая эрадикация противоречит механической стабильности позвоночника. Целью этого метода является описание новой мышиной модели инфекции спинальных имплантатов (SII), которая была создана для предоставления недорогого, быстрого и точного инструмента in vivo для тестирования потенциальных терапевтических средств и стратегий лечения инфекций спинальных имплантатов.
В этом методе мы представляем модель хирургии позвоночника с задним доступом, при которой проволока из нержавеющей стали закрепляется в остистый отросток L4 12-недельных мышей дикого типа C57BL/6J и инокулируется 1 x10,3 КОЕ биолюминесцентного штамма бактерий Staphylococcus aureus Xen36. Затем мышей проводят продольную визуализацию для биолюминесценции in vivo на послеоперационные дни 0, 1, 3, 5, 7, 10, 14, 18, 21, 25, 28 и 35. Сигналы биолюминесцентной визуализации (BLI) из стандартизированного поля зрения количественно оцениваются для измерения бактериальной нагрузки in vivo.
Для количественного определения бактерий, прилипающих к имплантатам и околоимплантным тканям, мышей усыпляют, а имплантат и окружающие мягкие ткани собирают. Бактерии отделяются от имплантата с помощью ультразвука, культивируются в течение ночи, а затем подсчитываются колониеобразующие единицы (КОЕ). Результаты, полученные с помощью этого метода, включают продольный подсчет бактерий, измеренный с помощью биолюминесценции in vivo S. aureus (средний максимальный поток) и подсчет КОЕ после эвтаназии.
В то время как предыдущие модели инструментальной инфекции позвоночника на животных включали инвазивный анализ тканей ex vivo, мышиная модель SII, представленная в этой статье, использует неинвазивную оптическую визуализацию биолюминесцентных бактерий in vivo в реальном времени для замены статического исследования тканей. Область применения модели широка и может включать в себя использование альтернативных биолюминесцентных штаммов бактерий, включение других типов генетически модифицированных мышей для одновременного изучения иммунного ответа хозяина, а также оценку существующих или изучение новых диагностических и терапевтических методов, таких как антибиотики или покрытия имплантатов.

Представленная здесь процедура была использована для оценки эффективности схем антибиотикотерапии на мышиной модели ИИМ in vivo. В частности, эффективность комбинированной антибиотикотерапии ванкомицином и рифампицином сравнивали с монотерапией ванкомицином и нелеченной инфицирован...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection at JoVE.com

In Vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection

Протокол описывает новую мышиную модель инфекции спинальных имплантатов in vivo, в которой имплантат из нержавеющей стали с проволокой инфицируется биолюминесцентным золотистым стафилококком Xen36. Бактериальная нагрузка контролируется в продольном направлении с помощью биолюминесцентной визуализации и подтверждается подсчетом колониеобразующих единиц после эвтаназии.

Мышиная модель инфекции спинальных имплантатов in vivo

Spine implant infections portend poor outcomes as diagnosis is challenging and surgical eradication is at odds with mechanical spinal stability. The ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

В естественных условиях Биолюминесценция изображения опухоли Гипоксия Динамика груди метастазы рака мозга у мышей

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Продольные Оценка Мышь Задние потери костной массы конечности после Травма спинного мозга с использованием новых, В естественных условиях Методология

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis ALS

Клинические испытания и удаления спинного мозга у мышей на боковой амиотрофический склероз (ALS)

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Контузия Модель тяжелого повреждения спинного мозга у крыс

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined In vivo Optical and Ãƒâ€šÃ‚ÂµCT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Комбинированные<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Оптические и μCT изображений на монитор инфекции, воспаления, и кости Анатомия в инфекции Ортопедическая Implant у мышей

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Контролируемая Кортикальная Модель воздействия для черепно-мозговой травмой

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Внутриматочная телеметрии измерить мышь сократительной давления<em&gt; В Vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Неонатальной спинного мозга мыши Сжатие Травма Модель

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Stem-cell Based Engineered Immunity Against HIV Infection in the Humanized Mouse Model

Стволовых клеток На основе Engineered иммунитет против ВИЧ-инфекции в модели Гуманизированные мыши

With the rapid development of stem cell-based gene therapies against HIV, there is pressing requirement for an animal model to study the hematopoietic ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

Истощение мышиных клеток из ксенотрансплантатов опухолей человека значительно улучшает Downstream Анализ клеток-мишеней

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...