Name: chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats
Uploaded: 2020-01-21T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Dit project werd gesponsord door National Natural Science Foundation of China (81873365 en 81603676), Zhejiang provinciale natuurwetenschappelijke fondsen voor eminente jonge geleerden (LR17H270001) en onderzoeksfondsen van de Zhejiang Chinese Medical University ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).

De dieren protocollen werden goedgekeurd door de Zhejiang Chinese Medical University dierenethiek Commissie.
1. dieren
<ol><li>Verkrijg mannelijke Sprague-Dawley (SD) ratten (280 – 320 g, 8-10 weken oud) uit Shanghai Laboratory Animal Center. Huis de dieren in Zhejiang Chinese medische universiteit laboratorium Animal Center. Houd er rekening mee dat de kweekomstandigheden 12 uur/2H licht/donker cycli moeten omvatten en de temperatuur constant moeten houden bij 24 °C. Geef water en voedse...

<ol>
	<li>Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+recent+update.">Complex regional pain syndrome: a recent update.</a> Burns, Trauma. 5 (1), 2 (2017).</li><li>Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome+-+phenotypic+characteristics+and+potential+biomarkers.">Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers.</a> Nature Reviews Neurology. 14 (5), (2018).</li><li>Shim, H., Rose, J., Halle, S., Shekane, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+narrative+review+for+the+practising+clinician.">Complex regional pain syndrome: a narrative review for the practising clinician.</a> British Journal of Anaesthesia. , (2019).</li><li>Urits, I., Shen, A. H., Jones, M. R., Viswanath, O., Kaye, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+Regional+Pain+Syndrome,+Current+Concepts+and+Treatment+Options.">Complex Regional Pain Syndrome, Current Concepts and Treatment Options.</a> Current Pain, Headache Reports. 22 (2), 10 (2018).</li><li>Helyes, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+complex+regional+pain+syndrome+to+mice+via+human+autoantibodies+is+mediated+by+interleukin-1-induced+mechanisms.">Transfer of complex regional pain syndrome to mice via human autoantibodies is mediated by interleukin-1-induced mechanisms.</a> Proceedings of National Academy Sciences of the United States of America. 116 (26), 13067-13076 (2019).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-Type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-Type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1), 94-105 (2004).</li><li>Coderre, T. J., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hypothesis+for+the+cause+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(reflex+sympathetic+dystrophy):+pain+due+to+deep-tissue+microvascular+pathology.">A hypothesis for the cause of complex regional pain syndrome-type I (reflex sympathetic dystrophy): pain due to deep-tissue microvascular pathology.</a> Pain Medicine. 11 (8), 1224-1238 (2010).</li><li>Klafke, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+chronic+nociceptive+phases+observed+in+a+rat+hind+paw+ischemia/reperfusion+model+depend+on+different+mechanisms.">Acute and chronic nociceptive phases observed in a rat hind paw ischemia/reperfusion model depend on different mechanisms.</a> Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 468 (2), 229-241 (2015).</li><li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+astrocytic+colony+stimulating+factor+and+its+receptor+on+microglia+mediates+central+sensitization+and+behavioral+hypersensitivity+in+chronic+post+ischemic+pain+model.">Interaction between astrocytic colony stimulating factor and its receptor on microglia mediates central sensitization and behavioral hypersensitivity in chronic post ischemic pain model.</a> Brain Behavioral Immunology. 68, 248-260 (2018).</li><li>Kim, J. H., Kim, Y. C., Nahm, F. S., Lee, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Therapeutic+Effect+of+Vitamin+C+in+an+Animal+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Produced+by+Prolonged+Hindpaw+Ischemia-Reperfusion+in+Rats.">The Therapeutic Effect of Vitamin C in an Animal Model of Complex Regional Pain Syndrome Produced by Prolonged Hindpaw Ischemia-Reperfusion in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 14 (1), 97-101 (2017).</li><li>Yin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+profiling+of+dorsal+root+ganglia+in+a+rat+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type-I+reveals+potential+mechanisms+involved+in+pain.">Transcriptome profiling of dorsal root ganglia in a rat model of complex regional pain syndrome type-I reveals potential mechanisms involved in pain.</a> Journal of Pain Research. 12, 1201-1216 (2019).</li><li>Hu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+Channel+Contributes+to+the+Behavioral+Hypersensitivity+in+a+Rat+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Type+1.">TRPV1 Channel Contributes to the Behavioral Hypersensitivity in a Rat Model of Complex Regional Pain Syndrome Type 1.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 453 (2019).</li><li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+analysis+of+experimental+observations.">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20, 441-462 (1980).</li><li>Chai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroacupuncture+Alleviates+Pain+Responses+and+Inflammation+in+a+Rat+Model+of+Acute+Gout+Arthritis.">Electroacupuncture Alleviates Pain Responses and Inflammation in a Rat Model of Acute Gout Arthritis.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2018, 2598975 (2018).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Fang, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parameter-specific+analgesic+effects+of+electroacupuncture+mediated+by+degree+of+regulation+TRPV1+and+P2X3+in+inflammatory+pain+in+rats.">Parameter-specific analgesic effects of electroacupuncture mediated by degree of regulation TRPV1 and P2X3 in inflammatory pain in rats.</a> Life Sciences. 200, 69-80 (2018).</li><li>Tai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+Transient+Receptor+Potential+Cation+Channel+Member+A1+activation+in+the+irritation+and+pain+response+elicited+by+skin-lightening+reagent+hydroquinone.">Involvement of Transient Receptor Potential Cation Channel Member A1 activation in the irritation and pain response elicited by skin-lightening reagent hydroquinone.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7532 (2017).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPM8+is+the+principal+mediator+of+menthol-induced+analgesia+of+acute+and+inflammatory+pain.">TRPM8 is the principal mediator of menthol-induced analgesia of acute and inflammatory pain.</a> Pain. 154 (10), 2169-2177 (2013).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+Phospholipid+OxPAPC+Activates+TRPA1+and+Contributes+to+Chronic+Inflammatory+Pain+in+Mice.">Oxidized Phospholipid OxPAPC Activates TRPA1 and Contributes to Chronic Inflammatory Pain in Mice.</a> PLoS One. 11 (11), 0165200 (2016).</li><li>Terkelsen, A. J., Gierthmuhlen, J., Finnerup, N. B., Hojlund, A. P., Jensen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+hypersensitivity+to+capsaicin,+thermal,+and+mechanical+stimuli+in+unilateral+complex+regional+pain+syndrome.">Bilateral hypersensitivity to capsaicin, thermal, and mechanical stimuli in unilateral complex regional pain syndrome.</a> Anesthesiology. 120 (5), 1225-1236 (2014).</li><li>Drummond, P. D., Morellini, N., Finch, P. M., Birklein, F., Knudsen, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+intradermal+injection+of+phenylephrine+evokes+pain+and+hyperalgesia+in+a+subgroup+of+patients+with+upregulated+alpha1-adrenoceptors+on+dermal+nerves.">Complex regional pain syndrome: intradermal injection of phenylephrine evokes pain and hyperalgesia in a subgroup of patients with upregulated alpha1-adrenoceptors on dermal nerves.</a> Pain. 159 (11), 2296-2305 (2018).</li><li>Minert, A., Gabay, E., Dominguez, C., Wiesenfeld-Hallin, Z., Devor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pain+following+spinal+nerve+injury+in+mice.">Spontaneous pain following spinal nerve injury in mice.</a> Experimental Neurology. 206 (2), 220-230 (2007).</li><li>Kingery, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsaicin+sensitive+afferents+mediate+the+development+of+heat+hyperalgesia+and+hindpaw+edema+after+sciatic+section+in+rats.">Capsaicin sensitive afferents mediate the development of heat hyperalgesia and hindpaw edema after sciatic section in rats.</a> Neuroscience Letters. 318 (1), 39-43 (2002).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cannabinoid+receptor+2+attenuates+mechanical+allodynia+and+neuroinflammatory+responses+in+a+chronic+post-ischemic+pain+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type+I+in+rats.">Activation of cannabinoid receptor 2 attenuates mechanical allodynia and neuroinflammatory responses in a chronic post-ischemic pain model of complex regional pain syndrome type I in rats.</a> European Journal of Neuroscience. 44 (12), 3046-3055 (2016).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1-2), 94-105 (2004).</li><li>Weissmann, R., Uziel, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pediatric+complex+regional+pain+syndrome:+a+review.">Pediatric complex regional pain syndrome: a review.</a> Pediatric Rheumatology Online Journal. 14 (1), 29 (2016).</li><li>Kim, H., Lee, C. H., Kim, S. H., Kim, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+complex+regional+pain+syndrome+in+Korea:+An+electronic+population+health+data+study.">Epidemiology of complex regional pain syndrome in Korea: An electronic population health data study.</a> PLoS One. 13 (6), 0198147 (2018).</li><li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+complex+regional+pain+syndrome+type+I+(CRPS-I)+in+mice.">Sex differences in complex regional pain syndrome type I (CRPS-I) in mice.</a> Journal of Pain Research. 10, 1811-1819 (2017).</li></ol>

Dit protocol beschrijft de gedetailleerde methoden voor het vaststellen van een rat CPIP-model door het toepassen van ischemie/reperfusie op achterpoten van de ratten. Het gaat om de evaluatie van het uiterlijk van de achterledematen, oedeem, mechanische/thermische overgevoeligheid en acuut nocifensief gedrag in reactie op capsaïcine injectie.
Ledemaat ischemie/reperfusie is een gemeenschappelijke factor die bijdraagt aan CRPS-I bij menselijke patiënten12. Dit protoco...

Complex regionaal pijnsyndroom (crp's) reprents complexe en chronische pijn symptomen als gevolg van fracturen, trauma, chirurgie, ischemie of zenuw letsel1,2,3. CRP'S is ingedeeld in 2 subcategorieën: CRPS type-I en type-II (CRPS-I en CRPS-II)4. Epidemiologische studies toonden aan dat de prevalentie van CRP'S ongeveer 1:20005was. CRPS-I, die geen duidelijke zenuwbeschadiging vertoont, kan resulteren in chronische pijn en heeft een dramatische invloed op de levenskwaliteit van de patiënten. Huidige beschikbare behandelingen vertonen ontoereikende therapeutische effecten. Daarom blijft CRPS-I nog steeds een belangrijk en uitdagend klinisch probleem dat moet worden aangepakt.
Vaststelling van een preklinische diermodel nabootsen van CRP'S-I is cruciaal voor het verkennen van de mechanismen die onderliggende CRP'S-I. Om dit probleem aan te pakken, ontwierp Coderre et al. een rat-model door langdurige ischemie en reperfusie toe te passen op het achterlijf om CRP'S-I6te recapituleren. Het is bekend dat ischemie/reperfusie letsel behoort tot een van de belangrijkste oorzaken van CRPS-I7. De rat CPIP model vertoont veel CRPS-I-achtige symptomen, waaronder Hind ledemaat oedeem en hyperemie in de vroege fase na de oprichting van het model, gevolgd door aanhoudende thermische en mechanische overgevoeligheid6. Met de hulp van dit model, wordt voorgesteld dat centrale pijn sensibilisatie, perifere TRPA1 kanaal activering en reactieve zuurstof soorten generatie, etc. bijdragen aan CRPS-I8,9,10. We hebben onlangs met succes de CPIP rat model en uitgevoerd RNA-sequencing van de dorsale wortel ganglia (Drg's) die innervate de aangetaste Hind paw11. We ontdekten een aantal mogelijke mechanismen die mogelijk betrokken zijn bij het bemiddelen van de pijn overgevoeligheden van CRPS-I11. We verder geïdentificeerd voorbijgaande receptor potentiële vanilloid 1 (TRPV1) kanaal in DRG neuronen als een belangrijke bijdrage aan de mechanische en thermische overgevoeligheden van CRPS-I12.
In deze studie, we beschreven de gedetailleerde procedures die betrokken zijn bij de oprichting van de rat model van CPIP. We evalueerden verder het Rat CPIP-model door het meten van de mechanische en thermische overgevoeligheid, alsmede de responsiviteit op acute capsaïcine Challenge. Wij stellen voor dat het Rat CPIP-model een betrouwbaar diermodel kan zijn voor verder onderzoek naar de mechanismen die betrokken zijn bij CRP'S-I.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 ml Eppendorf tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22431021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D1435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capsaicin</td>
			<td>APEXBIO</td>
			<td>A3278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital caliper</td>
			<td>Meinaite</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring</td>
			<td>O-Rings West</td>
			<td>Nitrile 70 Durometer</td>
			<td>7/32 in. 
			internal diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plantar Test Apparatus</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>37370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey filaments</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>NC12775</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats

Complex regionaal pijnsyndroom type-I (CRPS-I) is een neurologische aandoening die ernstige pijn bij patiënten veroorzaakt en blijft een onopgeloste medische aandoening. Echter, de onderliggende mechanismen van CRP'S-ik moet nog worden onthuld. Het is bekend dat ischemie/reperfusie een van de belangrijkste factoren is die CRP'S-I veroorzaakt. Door middel van langdurige ischemie en reperfusie van de Hind ledemaat, de rat chronische post-ischemie pijn (CPIP) model is opgericht om te imiteren CRPS-I. Het CPIP-model is uitgegroeid tot een goed herkend diermodel voor het bestuderen van de mechanismen van CRPS-I. Dit protocol beschrijft de gedetailleerde procedures die betrokken zijn bij de oprichting van het Rat model van CPIP, met inbegrip van anesthesie, gevolgd door ischemie/reperfusie van de achterledemaat. Kenmerken van het Rat CPIP-model worden verder geëvalueerd door het meten van de mechanische en thermische overgevoeligheden van de achterste ledemaat, alsmede de nocifensieve reacties op acute capsaïcine injectie. De rat CPIP model vertoont verschillende CRPS-I-achtige manifestaties, met inbegrip van Hind ledemaat oedeem en hyperemie in de vroege fase na de oprichting, aanhoudende thermische en mechanische overgevoeligheid, en verhoogde nocifensieve reacties op acute capsaïcine injectie. Deze kenmerken maken het een geschikt diermodel voor verder onderzoek van de mechanismen die betrokken zijn bij CRP'S-I.

Na het plaatsen van de O-ring op de enkel, toonde de ipsilaterale Hind paw huid cyanose, een indicatie van weefselhypoxie (Figuur 1A). Na het knippen van de O-ring begon de ipsilaterale Hind poot met bloed te vullen en toonde een robuuste zwelling, die een intens teken van hyperemie demonstreerde (Figuur 1A). De zwelling van de poot geleidelijk afgenomen en keerde terug naar normaal 48 h na de ischemische/reperfusie procedure (t...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats (Video) | JoVE

Verstrekt hier is een protocol dat details stappen om een diermodel van chronische post-ischemie pijn (CPIP) te vestigen. Dit is een goed herkend model nabootsen van humaan complex regionaal pijnsyndroom type-I. Mechanische en thermische overgevoeligheid worden verder geëvalueerd, evenals capsaïcine-geïnduceerde nocifensieve gedrag waargenomen in de CPIP rat model.

Chronische post-ischemie pijn model voor complexe regionale pijnsyndroom type-I bij ratten

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical ...

Het mechanisme dat ten grondslag ligt aan CRPS I nog steeds onduidelijk. Het opzetten van een preklinisch diermodel nabootsen CRPS Ik zal cruciaal zijn voor het verkennen van de mechanismen die ten grondslag liggen CRPS I.The rat CPIP model vertoont veel CRPS Ik hou van simitance, waaronder hindlimb oedeem en hyperemie in het vroege stadium. Na model vestiging, gevolgd door aanhoudende thermische en mechanische overgevoeligheid.Begin met het verdoven van alle ratten met natriumfenobarbital. Zorg ervoor dat de ratten goed verdoofd door knijpen hun achterpoot of staart met tangen. En plaats dierenarts zalf op de ogen.Houd de rat op een 37 graden Celsius verwarmd pad tijdens de procedure. Smeer de rechter achterpoot en enkel in met glycerol. Schuif vervolgens een nitril 70 durometer O ring in de grotere kant van een een punt vijf milliliter buis met de snap cap afgesneden.Steek de achterpoot voorzichtig in de holle buis totdat deze de bodem bereikt. Schuif de O-ring geleidelijk van de buis naar de rechter achterpoot in de buurt van het enkelgewricht. En laat het daar voor drie uur.Breng dezelfde behandeling aan op de schijngroep ratten, behalve met een gebroken O-ring die geen ischemie mag veroorzaken. Na drie uur, afgesneden van de O-ring en de monitor van de rat totdat het weer genoeg bewustzijn om sternale recumbency te handhaven. Plaats de rat niet in het gezelschap van andere ratten totdat deze volledig is hersteld van anesthesie.Plaats de rat in een transparante plexiglas kamer op een mesh vloer, en gewenning van de rat aan het milieu voor 30 minuten voor een gedragsmatige testen. Gebruik von frey filamenten om de rat te testen op mechanische allodynie. Begin de test vanaf de middelste gloeidraad door het verticaal toe te passen op het middenplantaroppervlak van de achterpoot.Breng de juiste kracht aan om de gloeidraad maximaal vijf seconden te buigen. Een plotselinge intrekking van de poot wordt beschouwd als een nocifensive gedrag. Voer de mechanische allodynia test uit op dag drie, twee, één en om de andere dag tot dag 13.Breng de up down testmethode om de drempel en een dickson methode voor de berekening van de 50 procent poot terugtrekking drempel te testen. Om te testen op thermische hyperalgesie, gebruik hargreaves methode door direct gericht op de lichtbundel uitgezonden van een 50 watt lamp naar de achterpoot. Meet de latentie van de pootontwenning en stel 20 seconden in als de cutoff-drempel om overmatige verwondingen te voorkomen.Herhaal elke test drie keer in vijf minuten intervallen voor elke achterpoot, en neem het gemiddelde als de poot terugtrekking latentie. Voer de thermische hyperalgesietest uit op dag drie, twee, één en om de andere dag tot dag 13. Om te testen op capsaïcine geïnduceerd acuut nocifensive gedrag, bereiden de 200 millimolar capsaïcine voorraad oplossing met DMSO, en verder verdunnen het een tot 1,000 in PBS voor injectie.Capsaïcine is een reagens, die kan leiden tot gewrichtsirritatie van de huid, ogen en ademhaling. Het is belangrijk om een masker en bril te dragen bij de voorbereiding capsaïcine oplossing. Injecteer vervolgens 50 microliter van de capsaïcine of een voertuig in de achterpoot met behulp van een 30-meter naald aan een spuit van één milliliter.Neem nocifensive gedrag op, zoals likken, bijten of terugdeinzen van de geïnjecteerde poot met behulp van een videocamera gedurende 10 minuten na de injectie. Evalueer het oedeem van achterpoot door de toename van de pootdiameter te meten op 15 minuten, 24 uur, 48 uur en 72 uur na de modelinrichting. Na het plaatsen van de O-ring op de enkel vertoonde de ipsilaterale achterpoothuid cyanose, een indicatie van weefselhypoxie.Na het snijden van de O-ring begon de poot zich te vullen met bloed en toonde een robuuste zwelling, wat duidt op intense hyperemie. De zwelling nam geleidelijk af en keerde 48 uur na de procedure terug naar normaal. Een dag na modelinrichting vertoonde de ipsilaterale achterpoot van de CPIP-groep duidelijke mechanische allodynia die 13 dagen van het observatietijdkader aanhield.De contralaterale achterpoot van de CPIP-groep vertoonde ook 13 dagen lang mechanische hyperalgesie. Toen thermische hyperalgesie werd gemeten, vertoonden bilaterale achterpoten van CPIP-ratten een aanzienlijk verminderde ontwenningslatentie in reactie op schadelijke thermische stimuli, in vergelijking met de sham group ratten. De thermische hyperalgesie van de ipsilaterale achterpoot hield aan tot het einde van het observatietijdkader, terwijl de thermische hyperalgesie van de contralaterale achterpoot zeven dagen duurde.De sham en CPIP groepen werden getest op nocifensive gedrag met de capsaïcine injectie. Toen een voertuig werd geïnjecteerd, toonde de sham-groep een lichte nocifensive respons en de CPIP-groep toonde een aanzienlijk hogere respons. Wat nog belangrijker is, CPIP ratten vertoonden aanzienlijk hogere reacties op capsaïcine injectie dan de sham groep, wat suggereert dat de CPIP ratten vertonen een fenomeen vergelijkbaar met menselijke patiënten met CRPS I.By deze procedure, de ratten zijn verdoofd voor en tijdens model inrichting.De CPIP rat model beschreven in dit protocol vastgesteld door ischemie en Human CRPS Ik hou van simitance. Families van deze modellen, meer mechanisme over CRPS Ik kan worden onderzocht.

Research

JoVE Journal

Behavior

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device OPAD to Measure Changes in Nociceptive Behavior (Video) | JoVE

Gebruik van de operante Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) om veranderingen in Nociceptieve Gedrag Meet

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Determining Pain Detection and Tolerance Thresholds Using an Integrated, Multi-Modal Pain Task Battery

Determining Pain Detection and Tolerance Thresholds Using an Integrated, Multi-Modal Pain Task Battery (Video) | JoVE

Het bepalen van Pain Detectie en tolerantiedrempels Met behulp van een geïntegreerde, multimodale Pain Task Battery

Human pain models are useful in the assessing the analgesic effect of drugs, providing information about a drug&#39;s pharmacology and identify ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans (Video) | JoVE

Een protocol van handmatige tests te Sensation en pijn meten bij mensen

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

Psychophysically-anchored, Robust Thresholding in Studying Pain-related Lateralization of Oscillatory Prestimulus Activity

Psychophysically-anchored, Robust Thresholding in Studying Pain-related Lateralization of Oscillatory Prestimulus Activity (Video) | JoVE

Psychofysisch verankerd, Robuust Thresholding in het bestuderen Pijngerelateerde Lateralisatie van oscillerende prestimulus Activity

In perceptual studies, it is often important to objectively assess the equality of delivered stimulation across participants or to quantify the ...

Treating Low Back Pain in Failed Back Surgery Patients with Multicolumn-lead Spinal Cord Stimulation

Treating Low Back Pain in Failed Back Surgery Patients with Multicolumn-lead Spinal Cord Stimulation (Video) | JoVE

Behandeling van lage rugpijn bij mislukte rugoperatie patiënten met Multicolumn-lead ruggenmerg stimulatie

Failed back surgery syndrome (FBSS) refers to persistent, chronic pain following spinal surgery. Spinal cord stimulation with dorsal epidural leads can be ...

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats (Video) | JoVE

Gelijktijdige opnamen van corticale lokale veld mogelijkheden en Electrocorticograms in reactie op Nociceptieve Laser Stimuli vrij bewegen ratten

Electrocortical responses, elicited by laser heat pulses that selectively activate nociceptive free nerve endings, are widely used in many animal and ...

Multi-Modal Signals for Analyzing Pain Responses to Thermal and Electrical Stimuli

Multi-Modal Signals for Analyzing Pain Responses to Thermal and Electrical Stimuli (Video) | JoVE

Multimodale signalen voor het analyseren van de pijn reacties op thermische en elektrische Stimuli

The assessment of pain relies mostly on methods that require a person to communicate. However, for people with cognitive and verbal impairments, existing ...

Investigating Pain-Related Avoidance Behavior using a Robotic Arm-Reaching Paradigm

Investigating Pain-Related Avoidance Behavior using a Robotic Arm-Reaching Paradigm (Video) | JoVE

Pijngerelateerd vermijdingsgedrag onderzoeken met behulp van een robotisch armbereikend paradigma

Avoidance behavior is a key contributor to the transition from acute pain to chronic pain disability. Yet, there has been a lack of ecologically valid ...

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats (Video) | JoVE

Een complexe duik-voor-voedsel taak om sociale organisatie en interacties bij ratten te onderzoeken

For many species, where status is a vital motivator that can affect health, social hierarchies influence behavior. Social hierarchies that include ...

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model (CDM)

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model CDM (Video) | JoVE

Diermodellen van depressie - Chronisch wanhoopsmodel (CDM)

Major depressive disorder is one of the most prevalent forms of mental illnesses and causes tremendous individual suffering and socioeconomic burden. ...