Name: chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats
Uploaded: 2020-01-21T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Dette prosjektet ble sponset av National Natural Science Foundation i Kina (81873365 og 81603676), Zhejiang Provincial Natural Science midler for Distinguished Young Scholars (LR17H270001) og forskningsmidler fra Zhejiang Chinese Medical University ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).

Dyret protokollene ble godkjent av Zhejiang Chinese Medical University Animal etikk Committee.
1. dyr
<ol><li>Skaffe mannlig Sprague-Dawley () rotter (280 – 320 g, 8-10 ukens av alderen) fra Shanghai laboratorium dyr senter. Husdyrene i Zhejiang kinesisk Medical University Laboratory Animal Center. Merk at avl forholdene bør omfatte 12 h/2h lys/mørke sykluser og holde temperaturen konstant ved 24 ° c. Gi vann og mat Ad lib. Merk at totalt 48 rotter brukes i denne studien. Ett n...

<ol>
	<li>Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+recent+update.">Complex regional pain syndrome: a recent update.</a> Burns, Trauma. 5 (1), 2 (2017).</li><li>Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome+-+phenotypic+characteristics+and+potential+biomarkers.">Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers.</a> Nature Reviews Neurology. 14 (5), (2018).</li><li>Shim, H., Rose, J., Halle, S., Shekane, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+narrative+review+for+the+practising+clinician.">Complex regional pain syndrome: a narrative review for the practising clinician.</a> British Journal of Anaesthesia. , (2019).</li><li>Urits, I., Shen, A. H., Jones, M. R., Viswanath, O., Kaye, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+Regional+Pain+Syndrome,+Current+Concepts+and+Treatment+Options.">Complex Regional Pain Syndrome, Current Concepts and Treatment Options.</a> Current Pain, Headache Reports. 22 (2), 10 (2018).</li><li>Helyes, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+complex+regional+pain+syndrome+to+mice+via+human+autoantibodies+is+mediated+by+interleukin-1-induced+mechanisms.">Transfer of complex regional pain syndrome to mice via human autoantibodies is mediated by interleukin-1-induced mechanisms.</a> Proceedings of National Academy Sciences of the United States of America. 116 (26), 13067-13076 (2019).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-Type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-Type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1), 94-105 (2004).</li><li>Coderre, T. J., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hypothesis+for+the+cause+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(reflex+sympathetic+dystrophy):+pain+due+to+deep-tissue+microvascular+pathology.">A hypothesis for the cause of complex regional pain syndrome-type I (reflex sympathetic dystrophy): pain due to deep-tissue microvascular pathology.</a> Pain Medicine. 11 (8), 1224-1238 (2010).</li><li>Klafke, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+chronic+nociceptive+phases+observed+in+a+rat+hind+paw+ischemia/reperfusion+model+depend+on+different+mechanisms.">Acute and chronic nociceptive phases observed in a rat hind paw ischemia/reperfusion model depend on different mechanisms.</a> Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 468 (2), 229-241 (2015).</li><li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+astrocytic+colony+stimulating+factor+and+its+receptor+on+microglia+mediates+central+sensitization+and+behavioral+hypersensitivity+in+chronic+post+ischemic+pain+model.">Interaction between astrocytic colony stimulating factor and its receptor on microglia mediates central sensitization and behavioral hypersensitivity in chronic post ischemic pain model.</a> Brain Behavioral Immunology. 68, 248-260 (2018).</li><li>Kim, J. H., Kim, Y. C., Nahm, F. S., Lee, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Therapeutic+Effect+of+Vitamin+C+in+an+Animal+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Produced+by+Prolonged+Hindpaw+Ischemia-Reperfusion+in+Rats.">The Therapeutic Effect of Vitamin C in an Animal Model of Complex Regional Pain Syndrome Produced by Prolonged Hindpaw Ischemia-Reperfusion in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 14 (1), 97-101 (2017).</li><li>Yin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+profiling+of+dorsal+root+ganglia+in+a+rat+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type-I+reveals+potential+mechanisms+involved+in+pain.">Transcriptome profiling of dorsal root ganglia in a rat model of complex regional pain syndrome type-I reveals potential mechanisms involved in pain.</a> Journal of Pain Research. 12, 1201-1216 (2019).</li><li>Hu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+Channel+Contributes+to+the+Behavioral+Hypersensitivity+in+a+Rat+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Type+1.">TRPV1 Channel Contributes to the Behavioral Hypersensitivity in a Rat Model of Complex Regional Pain Syndrome Type 1.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 453 (2019).</li><li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+analysis+of+experimental+observations.">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20, 441-462 (1980).</li><li>Chai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroacupuncture+Alleviates+Pain+Responses+and+Inflammation+in+a+Rat+Model+of+Acute+Gout+Arthritis.">Electroacupuncture Alleviates Pain Responses and Inflammation in a Rat Model of Acute Gout Arthritis.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2018, 2598975 (2018).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Fang, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parameter-specific+analgesic+effects+of+electroacupuncture+mediated+by+degree+of+regulation+TRPV1+and+P2X3+in+inflammatory+pain+in+rats.">Parameter-specific analgesic effects of electroacupuncture mediated by degree of regulation TRPV1 and P2X3 in inflammatory pain in rats.</a> Life Sciences. 200, 69-80 (2018).</li><li>Tai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+Transient+Receptor+Potential+Cation+Channel+Member+A1+activation+in+the+irritation+and+pain+response+elicited+by+skin-lightening+reagent+hydroquinone.">Involvement of Transient Receptor Potential Cation Channel Member A1 activation in the irritation and pain response elicited by skin-lightening reagent hydroquinone.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7532 (2017).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPM8+is+the+principal+mediator+of+menthol-induced+analgesia+of+acute+and+inflammatory+pain.">TRPM8 is the principal mediator of menthol-induced analgesia of acute and inflammatory pain.</a> Pain. 154 (10), 2169-2177 (2013).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+Phospholipid+OxPAPC+Activates+TRPA1+and+Contributes+to+Chronic+Inflammatory+Pain+in+Mice.">Oxidized Phospholipid OxPAPC Activates TRPA1 and Contributes to Chronic Inflammatory Pain in Mice.</a> PLoS One. 11 (11), 0165200 (2016).</li><li>Terkelsen, A. J., Gierthmuhlen, J., Finnerup, N. B., Hojlund, A. P., Jensen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+hypersensitivity+to+capsaicin,+thermal,+and+mechanical+stimuli+in+unilateral+complex+regional+pain+syndrome.">Bilateral hypersensitivity to capsaicin, thermal, and mechanical stimuli in unilateral complex regional pain syndrome.</a> Anesthesiology. 120 (5), 1225-1236 (2014).</li><li>Drummond, P. D., Morellini, N., Finch, P. M., Birklein, F., Knudsen, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+intradermal+injection+of+phenylephrine+evokes+pain+and+hyperalgesia+in+a+subgroup+of+patients+with+upregulated+alpha1-adrenoceptors+on+dermal+nerves.">Complex regional pain syndrome: intradermal injection of phenylephrine evokes pain and hyperalgesia in a subgroup of patients with upregulated alpha1-adrenoceptors on dermal nerves.</a> Pain. 159 (11), 2296-2305 (2018).</li><li>Minert, A., Gabay, E., Dominguez, C., Wiesenfeld-Hallin, Z., Devor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pain+following+spinal+nerve+injury+in+mice.">Spontaneous pain following spinal nerve injury in mice.</a> Experimental Neurology. 206 (2), 220-230 (2007).</li><li>Kingery, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsaicin+sensitive+afferents+mediate+the+development+of+heat+hyperalgesia+and+hindpaw+edema+after+sciatic+section+in+rats.">Capsaicin sensitive afferents mediate the development of heat hyperalgesia and hindpaw edema after sciatic section in rats.</a> Neuroscience Letters. 318 (1), 39-43 (2002).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cannabinoid+receptor+2+attenuates+mechanical+allodynia+and+neuroinflammatory+responses+in+a+chronic+post-ischemic+pain+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type+I+in+rats.">Activation of cannabinoid receptor 2 attenuates mechanical allodynia and neuroinflammatory responses in a chronic post-ischemic pain model of complex regional pain syndrome type I in rats.</a> European Journal of Neuroscience. 44 (12), 3046-3055 (2016).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1-2), 94-105 (2004).</li><li>Weissmann, R., Uziel, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pediatric+complex+regional+pain+syndrome:+a+review.">Pediatric complex regional pain syndrome: a review.</a> Pediatric Rheumatology Online Journal. 14 (1), 29 (2016).</li><li>Kim, H., Lee, C. H., Kim, S. H., Kim, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+complex+regional+pain+syndrome+in+Korea:+An+electronic+population+health+data+study.">Epidemiology of complex regional pain syndrome in Korea: An electronic population health data study.</a> PLoS One. 13 (6), 0198147 (2018).</li><li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+complex+regional+pain+syndrome+type+I+(CRPS-I)+in+mice.">Sex differences in complex regional pain syndrome type I (CRPS-I) in mice.</a> Journal of Pain Research. 10, 1811-1819 (2017).</li></ol>

Denne protokollen beskriver detaljerte metoder for å etablere en rotte CPIP modell ved å bruke iskemi/reperfusion til hind lemmer av rottene. Det innebærer evaluering av hind lem utseende, ødem, mekaniske/termisk hypersensitivities, og akutt nocifensive atferd som svar på capsaicin injeksjon.
Lem iskemi/reperfusion er en felles faktor som bidrar til CRPS-i menneskelige pasienter12. Denne protokollen beskriver hvordan å etablere rotte CPIP modellen, som er en vanli...

Complex Regional Pain syndrom (CRPS) reprents komplekse og kroniske smerter symptomer som følge av brudd, traumer, kirurgi, iskemi eller nerveskade1,2,3. CRPS er klassifisert i 2 under Kategorier: CRPS type-I og type-II (CRPS-I og CRPS-II)4. Epidemiologiske studier avslørte at utbredelsen av CRPS var ca 1:20005. CRPS-I, som viser ingen åpenbar nerveskader, kan resultere i kroniske smerter og dramatisk påvirker livskvaliteten til pasientene. Gjeldende tilgjengelige behandlinger viser utilstrekkelige terapeutiske effekter. Derfor er CRPS-jeg fortsatt en viktig og utfordrende klinisk problem som må tas opp.
Etablering av en prekliniske dyr modell etterligne CRPS-I er avgjørende for å utforske mekanismene underliggende CRPS-I. For å løse dette problemet, Coderre et al. designet en rotte modell ved å bruke forlenget iskemi og reperfusion til bakdelen lem til recapitulate CRPS-I6. Det er kjent at iskemi/reperfusion skade er blant en av de viktigste årsakene til CRPS-I7. Rotte CPIP modellen utstillinger mange CRPS-i-lignende symptomer, som inkluderer hind lem ødem og hyperemia i tidlig stadium etter modell etablering, etterfulgt med vedvarende termisk og mekanisk hypersensitivities6. Med hjelp fra denne modellen, er det foreslått at sentrale smerte allergi, perifer TRPA1 kanal aktivering og reaktiv oksygen arter generasjon, etc. bidra til CRPS-I8,9,10. Vi har nylig etablert CPIP rotte modellen og utført RNA-sekvensering av rygg roten ganglia (DRGs) som innervate de berørte hind Paw11. Vi oppdaget noen potensielle mekanismer som er muligens involvert i formidling smerten hypersensitivities av CRPS-I11. Vi identifiserte videre forbigående reseptor potensial vanilloid 1 (TRPV1) kanal i DRG neurons som en viktig bidragsyter til den mekaniske og termiske hypersensitivities av CRPS-I12.
I denne studien, beskrev vi de detaljerte prosedyrene som er involvert i etableringen av rotte modellen av CPIP. Vi videre vurdert rotte CPIP modellen ved å måle den mekaniske og termiske hypersensitivities så vel som sin respons til akutt capsaicin utfordring. Vi foreslår at rotte CPIP modellen kan være en pålitelig dyr modell for videre etterforskning av mekanismene som er involvert i CRPS-I.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 ml Eppendorf tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22431021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D1435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capsaicin</td>
			<td>APEXBIO</td>
			<td>A3278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital caliper</td>
			<td>Meinaite</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring</td>
			<td>O-Rings West</td>
			<td>Nitrile 70 Durometer</td>
			<td>7/32 in. 
			internal diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plantar Test Apparatus</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>37370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey filaments</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>NC12775</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats

Komplekse regionale smerte syndrom type-I (CRPS-I) er en nevrologisk sykdom som forårsaker sterke smerter blant pasienter og er fortsatt en uløst medisinsk tilstand. Men de underliggende mekanismene for CRPS-jeg har ennå ikke avslørt. Det er kjent at iskemi/reperfusion er en av de ledende faktorene som forårsaker CRPS-I. Ved hjelp av forlenget iskemi og reperfusion av bakben lem, den rotte kroniske post-iskemi smerte (CPIP) modellen er etablert for å etterligne CRPS-I. Den CPIP modellen har blitt en godt anerkjent dyr modell for å studere mekanismene for CRPS-I. Denne protokollen beskriver detaljerte prosedyrer som er involvert i etableringen av rotte modellen av CPIP, inkludert anestesi, etterfulgt av iskemi/reperfusion av bakben lem. Kjennetegn på rotte CPIP modellen er ytterligere vurdert ved å måle den mekaniske og termiske hypersensitivities av bakdelen, samt nocifensive reaksjoner på akutt capsaicin injeksjon. Rotte CPIP modellen utstillinger flere CRPS-i-lignende manifestasjoner, inkludert hind lem ødem og hyperemia i tidlig stadium etter etablering, vedvarende termisk og mekanisk hypersensitivities, og økt nocifensive reaksjoner på akutt capsaicin injeksjon. Disse egenskapene gjør det til en passende dyremodell for videre etterforskning av mekanismene som er involvert i CRPS-i.

Etter å plassere O-ringen på ankelen, den ipsilateral hind pote huden viste cyanose, en indikasjon på vev hypoksi (figur 1A). Etter å ha kuttet O-ringen begynte ipsilateral hind å fylles med blod og viste robust hevelse, som viste et intenst tegn på hyperemia (figur 1A). Den pote hevelse gradvis redusert og tilbake til normal 48 h etter iskemiske/reperfusion prosedyre (to-veis ANOVA med Sidak post-hoc test, <strong class="...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats (Video) | JoVE

Forutsatt her er en protokoll som detaljer skritt for å etablere et dyr modell av kroniske post-iskemi smerte (CPIP). Dette er en godt anerkjent modell etterligne menneskelige komplekse regionale smerte syndrom type-I. Mekaniske og termiske hypersensitivities er videre evaluert, samt capsaicin-indusert nocifensive atferd observert i CPIP rotte modellen.

Kronisk post-ischemia Pain modell for Complex Regional Pain syndrom type-jeg i rotter

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical ...

Mekanismen underliggende CRPS jeg fortsatt uklart. Etablere en preklinisk dyremodell etterligne CRPS Jeg vil være avgjørende for å utforske mekanismene underliggende CRPS I.Rotte CPIP modellen viser mange CRPS jeg liker simitance, som inkluderer hindlimb ødem og hyperemi i tidlig stadium. Etter modell etablering, etterfulgt av vedvarende termiske og mekaniske overfølsomheter.Begynn med å bedøve alle rotter med natriumfenobarbital. Pass på at rottene er riktig bedøvet ved å klemme bakpoten eller halen med tang. Og legg veterinær salve på øynene.Hold rotten på en 37 graders Celsius oppvarmet pute under prosedyren. Smør høyre bakpote og ankel med glyserol. Skyv deretter en nitril 70 durometer O-ring inn i den større siden av et ett punkt fem milliliter rør med snap cap kuttet av.Sett forsiktig bakpoten inn i det hule røret til den når bunnen. Skyv gradvis O-ringen fra røret til høyre baklimb nær ankelleddet. Og la den være der i tre timer.Påfør samme behandling på sham-gruppen av rotter, unntatt med en ødelagt O-ring som ikke skal indusere iskemi. Etter tre timer, kutt av O-ringen og overvåk rotten til den gjenvinner nok bevissthet til å opprettholde sternal recumbency. Ikke plasser rotten i selskap med andre rotter før den er fullstendig gjenopprettet fra anestesi.Legg rotten i et gjennomsiktig plexiglasskammer på et nettinggulv, og bebo rotten til miljøet i 30 minutter før noen atferdstesting. Bruk von frey filamenter for å teste rotten for mekaniske allodynia. Begynn testen fra midten filament ved vertikalt å bruke den til midten plantar overflaten av bakpoten.Påfør egnet kraft for å bøye filamentet i opptil fem sekunder. En plutselig tilbaketrekking av poten regnes som en nocifensiv oppførsel. Utuk den mekaniske allodyniatesten på dag tre, to, en og annenhver dag til dag 13.Bruk metoden opp ned testing for å teste terskelen og en dickson metode for beregning av 50 prosent pote tilbaketrekking terskelen. For å teste for termisk hyperalgesi, bruk hargreaves-metoden ved å direkte sikte lysstrålen som slippes ut fra en 50 watt pære til bakpoten. Mål poteuttaksventetiden, og angi 20 sekunder som cutoff terskel for å unngå overdreven skade.Gjenta hver test tre ganger i fem minutters intervaller for hver bakpote, og ta gjennomsnittet som poteuttaksventetid. Utuk den termiske hyperalgesiatesten på dag tre, to, en og annenhver dag til dag 13. For å teste for capsaicin indusert akutt nocifensiv atferd, forberede 200 millimolar capsaicin lagerløsning med DMSO, og ytterligere fortynne den en til 1000 i PBS til injeksjon.Capsaicin er et reagens, som kan forårsake leddirritasjon av hud, øyne og åndedrett. Det er viktig å bruke maske og vernebriller når du forbereder capsaicin løsning. Injiser deretter 50 mikroliter av capsaicin eller et kjøretøy i bakpoten ved hjelp av en 30 gauge nål festet til en en milliliter sprøyte.Ta opp nocifensiv oppførsel, for eksempel slikking, biting eller flinching av den injiserte poten ved hjelp av et videokamera i 10 minutter etter injeksjonen. Evaluer hind poteødem ved å måle økningen i potediameteren ved 15 minutter, 24 timer, 48 timer og 72 timer etter modelletablering. Etter å ha plassert O-ringen på ankelen, viste den ipsilaterale bakpotehuden cyanose, en indikasjon på vevhypoksi.Etter å ha kuttet O-ringen begynte poten å fylle med blod og viste robust hevelse, noe som indikerer intens hyperemi. Hevelsen ble gradvis redusert og gikk tilbake til normal 48 timer etter prosedyren. En dag etter modelletableringen viste cpip-gruppens ipsilaterale bakpote åpenbare mekaniske allodynia som vedvarte i 13 dager av observasjonstidsrammen.Den kontralaterale bakpoten til CPIP-gruppen viste også mekanisk hyperalgesi i 13 dager. Når termisk hyperalgesi ble målt, viste bilaterale bakpoter av CPIP-rotter betydelig redusert tilbaketrekkingsventetid som svar på skadelige termiske stimuli, sammenlignet med sham-grupperotter. Den termiske hyperalgesien i den ipsilaterale bakpoten vedvarte til slutten av observasjonstidsrammen, mens den termiske hyperalgesien til den kontralaterale bakpoten varte i syv dager.Sham- og CPIP-gruppene ble testet for nocifensiv atferd med capsaicininjeksjonen. Når et kjøretøy ble injisert, viste sham gruppen en liten nocifensive respons og CPIP-gruppen viste en betydelig høyere respons. Enda viktigere, CPIP rotter viste betydelig høyere respons på capsaicin injeksjon enn sham gruppen, noe som tyder på at CPIP rotter viser et fenomen som ligner på menneskelige pasienter med CRPS I.By denne prosedyren, rotter er bedøvet før og under modell etablering.CPIP rottemodellen beskrevet i denne protokollen etablert av iskemi og Human CRPS Jeg liker simitance. Familier av disse modellene, mer mekanisme om CRPS jeg kan utforskes.

Research

JoVE Journal

Behavior

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device OPAD to Measure Changes in Nociceptive Behavior (Video) | JoVE

Bruk av Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) for å måle endringer i Nociceptive Behavior

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Determining Pain Detection and Tolerance Thresholds Using an Integrated, Multi-Modal Pain Task Battery

Determining Pain Detection and Tolerance Thresholds Using an Integrated, Multi-Modal Pain Task Battery (Video) | JoVE

Fastsettelse Pain Detection og toleransegrenser ved hjelp av en integrert, multimodal Pain Task Battery

Human pain models are useful in the assessing the analgesic effect of drugs, providing information about a drug&#39;s pharmacology and identify ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans (Video) | JoVE

En protokoll av manuelle tester for å måle Sensation og smerte hos mennesker

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

Psychophysically-anchored, Robust Thresholding in Studying Pain-related Lateralization of Oscillatory Prestimulus Activity

Psychophysically-anchored, Robust Thresholding in Studying Pain-related Lateralization of Oscillatory Prestimulus Activity (Video) | JoVE

Psychophysically-forankret, Robust Terskelverdier i å studere Pain relaterte lateralization svingnings Prestimulus aktivitet

In perceptual studies, it is often important to objectively assess the equality of delivered stimulation across participants or to quantify the ...

Treating Low Back Pain in Failed Back Surgery Patients with Multicolumn-lead Spinal Cord Stimulation

Treating Low Back Pain in Failed Back Surgery Patients with Multicolumn-lead Spinal Cord Stimulation (Video) | JoVE

Behandling av korsryggsmerter i mislykkede tilbake kirurgi pasienter med fleirkolonnar-bly ryggmargen stimulering

Failed back surgery syndrome (FBSS) refers to persistent, chronic pain following spinal surgery. Spinal cord stimulation with dorsal epidural leads can be ...

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats (Video) | JoVE

Samtidig opptak av kortikale lokale feltet potensialer og Electrocorticograms svar på Nociceptive Laser Stimuli fra fritt flytte rotter

Electrocortical responses, elicited by laser heat pulses that selectively activate nociceptive free nerve endings, are widely used in many animal and ...

Multi-Modal Signals for Analyzing Pain Responses to Thermal and Electrical Stimuli

Multi-Modal Signals for Analyzing Pain Responses to Thermal and Electrical Stimuli (Video) | JoVE

Multimodal signaler for å analysere smerte svar på termisk og elektriske Stimuli

The assessment of pain relies mostly on methods that require a person to communicate. However, for people with cognitive and verbal impairments, existing ...

Investigating Pain-Related Avoidance Behavior using a Robotic Arm-Reaching Paradigm

Investigating Pain-Related Avoidance Behavior using a Robotic Arm-Reaching Paradigm (Video) | JoVE

Undersøke smerterelatert unngåelsesatferd ved hjelp av et robotisert arm-reaching paradigme

Avoidance behavior is a key contributor to the transition from acute pain to chronic pain disability. Yet, there has been a lack of ecologically valid ...

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats (Video) | JoVE

En kompleks dykking-for-mat oppgave å undersøke sosial organisasjon og interaksjoner i rotter

For many species, where status is a vital motivator that can affect health, social hierarchies influence behavior. Social hierarchies that include ...

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model (CDM)

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model CDM (Video) | JoVE

Dyremodeller av depresjon - Kronisk fortvilelsesmodell (CDM)

Major depressive disorder is one of the most prevalent forms of mental illnesses and causes tremendous individual suffering and socioeconomic burden. ...