Name: chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats
Uploaded: 2020-01-21T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Detta projekt sponsrades av National Natural Science Foundation i Kina (81873365 och 81603676), Zhejiang Provincial Natural Science fonder för framstående unga akademiker (LR17H270001) och forskningsmedel från Zhejiang Chinese Medical University ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).

De djura protokollen godkändes av Zhejiang kinesiska medicinska universitet Animal etikkommittén.
1. djur
<ol><li>Få manliga Sprague-Dawley (SD) råttor (280-320 g, 8-10 veckors ålder) från Shanghai laboratorium Animal Center. Husdjuren i Zhejiang kinesisk medicinsk universitet laboratorium djur Center. Observera att avels förhållandena bör omfatta 12 h/2H-ljus/mörker-cykler och hålla temperaturkonstanten vid 24 ° c. Ge vatten och mat AD libitum. Observera att totalt 48 r...

<ol>
	<li>Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+recent+update.">Complex regional pain syndrome: a recent update.</a> Burns, Trauma. 5 (1), 2 (2017).</li><li>Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome+-+phenotypic+characteristics+and+potential+biomarkers.">Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers.</a> Nature Reviews Neurology. 14 (5), (2018).</li><li>Shim, H., Rose, J., Halle, S., Shekane, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+a+narrative+review+for+the+practising+clinician.">Complex regional pain syndrome: a narrative review for the practising clinician.</a> British Journal of Anaesthesia. , (2019).</li><li>Urits, I., Shen, A. H., Jones, M. R., Viswanath, O., Kaye, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+Regional+Pain+Syndrome,+Current+Concepts+and+Treatment+Options.">Complex Regional Pain Syndrome, Current Concepts and Treatment Options.</a> Current Pain, Headache Reports. 22 (2), 10 (2018).</li><li>Helyes, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+complex+regional+pain+syndrome+to+mice+via+human+autoantibodies+is+mediated+by+interleukin-1-induced+mechanisms.">Transfer of complex regional pain syndrome to mice via human autoantibodies is mediated by interleukin-1-induced mechanisms.</a> Proceedings of National Academy Sciences of the United States of America. 116 (26), 13067-13076 (2019).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-Type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-Type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1), 94-105 (2004).</li><li>Coderre, T. J., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hypothesis+for+the+cause+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(reflex+sympathetic+dystrophy):+pain+due+to+deep-tissue+microvascular+pathology.">A hypothesis for the cause of complex regional pain syndrome-type I (reflex sympathetic dystrophy): pain due to deep-tissue microvascular pathology.</a> Pain Medicine. 11 (8), 1224-1238 (2010).</li><li>Klafke, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+chronic+nociceptive+phases+observed+in+a+rat+hind+paw+ischemia/reperfusion+model+depend+on+different+mechanisms.">Acute and chronic nociceptive phases observed in a rat hind paw ischemia/reperfusion model depend on different mechanisms.</a> Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 468 (2), 229-241 (2015).</li><li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+astrocytic+colony+stimulating+factor+and+its+receptor+on+microglia+mediates+central+sensitization+and+behavioral+hypersensitivity+in+chronic+post+ischemic+pain+model.">Interaction between astrocytic colony stimulating factor and its receptor on microglia mediates central sensitization and behavioral hypersensitivity in chronic post ischemic pain model.</a> Brain Behavioral Immunology. 68, 248-260 (2018).</li><li>Kim, J. H., Kim, Y. C., Nahm, F. S., Lee, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Therapeutic+Effect+of+Vitamin+C+in+an+Animal+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Produced+by+Prolonged+Hindpaw+Ischemia-Reperfusion+in+Rats.">The Therapeutic Effect of Vitamin C in an Animal Model of Complex Regional Pain Syndrome Produced by Prolonged Hindpaw Ischemia-Reperfusion in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 14 (1), 97-101 (2017).</li><li>Yin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+profiling+of+dorsal+root+ganglia+in+a+rat+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type-I+reveals+potential+mechanisms+involved+in+pain.">Transcriptome profiling of dorsal root ganglia in a rat model of complex regional pain syndrome type-I reveals potential mechanisms involved in pain.</a> Journal of Pain Research. 12, 1201-1216 (2019).</li><li>Hu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+Channel+Contributes+to+the+Behavioral+Hypersensitivity+in+a+Rat+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Type+1.">TRPV1 Channel Contributes to the Behavioral Hypersensitivity in a Rat Model of Complex Regional Pain Syndrome Type 1.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 453 (2019).</li><li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+analysis+of+experimental+observations.">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20, 441-462 (1980).</li><li>Chai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroacupuncture+Alleviates+Pain+Responses+and+Inflammation+in+a+Rat+Model+of+Acute+Gout+Arthritis.">Electroacupuncture Alleviates Pain Responses and Inflammation in a Rat Model of Acute Gout Arthritis.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2018, 2598975 (2018).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Fang, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parameter-specific+analgesic+effects+of+electroacupuncture+mediated+by+degree+of+regulation+TRPV1+and+P2X3+in+inflammatory+pain+in+rats.">Parameter-specific analgesic effects of electroacupuncture mediated by degree of regulation TRPV1 and P2X3 in inflammatory pain in rats.</a> Life Sciences. 200, 69-80 (2018).</li><li>Tai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+Transient+Receptor+Potential+Cation+Channel+Member+A1+activation+in+the+irritation+and+pain+response+elicited+by+skin-lightening+reagent+hydroquinone.">Involvement of Transient Receptor Potential Cation Channel Member A1 activation in the irritation and pain response elicited by skin-lightening reagent hydroquinone.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7532 (2017).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPM8+is+the+principal+mediator+of+menthol-induced+analgesia+of+acute+and+inflammatory+pain.">TRPM8 is the principal mediator of menthol-induced analgesia of acute and inflammatory pain.</a> Pain. 154 (10), 2169-2177 (2013).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+Phospholipid+OxPAPC+Activates+TRPA1+and+Contributes+to+Chronic+Inflammatory+Pain+in+Mice.">Oxidized Phospholipid OxPAPC Activates TRPA1 and Contributes to Chronic Inflammatory Pain in Mice.</a> PLoS One. 11 (11), 0165200 (2016).</li><li>Terkelsen, A. J., Gierthmuhlen, J., Finnerup, N. B., Hojlund, A. P., Jensen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+hypersensitivity+to+capsaicin,+thermal,+and+mechanical+stimuli+in+unilateral+complex+regional+pain+syndrome.">Bilateral hypersensitivity to capsaicin, thermal, and mechanical stimuli in unilateral complex regional pain syndrome.</a> Anesthesiology. 120 (5), 1225-1236 (2014).</li><li>Drummond, P. D., Morellini, N., Finch, P. M., Birklein, F., Knudsen, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+regional+pain+syndrome:+intradermal+injection+of+phenylephrine+evokes+pain+and+hyperalgesia+in+a+subgroup+of+patients+with+upregulated+alpha1-adrenoceptors+on+dermal+nerves.">Complex regional pain syndrome: intradermal injection of phenylephrine evokes pain and hyperalgesia in a subgroup of patients with upregulated alpha1-adrenoceptors on dermal nerves.</a> Pain. 159 (11), 2296-2305 (2018).</li><li>Minert, A., Gabay, E., Dominguez, C., Wiesenfeld-Hallin, Z., Devor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pain+following+spinal+nerve+injury+in+mice.">Spontaneous pain following spinal nerve injury in mice.</a> Experimental Neurology. 206 (2), 220-230 (2007).</li><li>Kingery, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsaicin+sensitive+afferents+mediate+the+development+of+heat+hyperalgesia+and+hindpaw+edema+after+sciatic+section+in+rats.">Capsaicin sensitive afferents mediate the development of heat hyperalgesia and hindpaw edema after sciatic section in rats.</a> Neuroscience Letters. 318 (1), 39-43 (2002).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cannabinoid+receptor+2+attenuates+mechanical+allodynia+and+neuroinflammatory+responses+in+a+chronic+post-ischemic+pain+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type+I+in+rats.">Activation of cannabinoid receptor 2 attenuates mechanical allodynia and neuroinflammatory responses in a chronic post-ischemic pain model of complex regional pain syndrome type I in rats.</a> European Journal of Neuroscience. 44 (12), 3046-3055 (2016).</li><li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+post-ischemia+pain+(CPIP):+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+(CRPS-I;+reflex+sympathetic+dystrophy)+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat.">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1-2), 94-105 (2004).</li><li>Weissmann, R., Uziel, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pediatric+complex+regional+pain+syndrome:+a+review.">Pediatric complex regional pain syndrome: a review.</a> Pediatric Rheumatology Online Journal. 14 (1), 29 (2016).</li><li>Kim, H., Lee, C. H., Kim, S. H., Kim, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+complex+regional+pain+syndrome+in+Korea:+An+electronic+population+health+data+study.">Epidemiology of complex regional pain syndrome in Korea: An electronic population health data study.</a> PLoS One. 13 (6), 0198147 (2018).</li><li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+complex+regional+pain+syndrome+type+I+(CRPS-I)+in+mice.">Sex differences in complex regional pain syndrome type I (CRPS-I) in mice.</a> Journal of Pain Research. 10, 1811-1819 (2017).</li></ol>

Detta protokoll beskriver de detaljerade metoderna för att etablera en råtta CPIP-modell genom att tillämpa ischemia/reperfusion att bakben av råttor. Det innebär en utvärdering av hind lem utseende, ödem, mekanisk/termisk överkänslighet, och akuta nociftäckande beteenden som svar på capsaicin injektion.
Lem ischemia/reperfusion är en vanlig faktor som bidrar till CRPS-i hos patienter12. Detta protokoll beskriver hur man etablerar råtta CPIP-modellen, som ?...

Komplexa regionala smärtsyndrom (CRPS) reprents komplexa och kroniska smärtsymptom till följd av frakturer, trauma, kirurgi, ischemi eller nervskada1,2,3. CRPS klassificeras i 2 underkategorier: CRPS typ-I och typ-II (CRPS-I och CRPS-II)4. Epidemiologiska studier visade att prevalensen av CRPS var cirka 1:20005. CRPS-I, som visar inga uppenbara nervskador, kan resultera i kronisk smärta och dramatiskt påverkar livskvaliteten hos patienterna. Nuvarande tillgängliga behandlingar uppvisar otillräckliga terapeutiska effekter. Därför är CRPS-jag fortfarande ett viktigt och utmanande kliniskt problem som måste åtgärdas.
Inrättande av en preklinisk djurmodell imitera CRPS-jag är avgörande för att utforska mekanismerna bakom CRPS-I. För att ta itu med denna fråga, coderre et al. utformat en råtta modell genom att tillämpa långvarig ischemi och reperfusion till bakbenen till recapitulate CRPS-I6. Det är känt att ischemia/reperfusion skada är bland en av de viktigaste orsakerna till CRPS-I7. Den råtta cpip modellen uppvisar många CRPS-I-liknande symtom, som inkluderar Hind lem ödem och hyperemi i det tidiga skedet efter modell etablering, följt med ihållande termisk och mekanisk överkänslighet6. Med hjälp av denna modell, det föreslås att centrala smärt sensibilisering, perifer TRPA1 kanal aktivering och reaktiva syreradikaler generation, etc. bidra till CRPS-I8,9,10. Vi har nyligen framgångsrikt etablerat CPIP råtta modell och utfört RNA-sekvensering av dorsala root ganglier (DRGs) som innerverar den drabbade Hind Paw11. Vi upptäckte några potentiella mekanismer som möjligen är involverade i att förmedla smärtan överkänsligheter CRPS-I11. Vi identifierade ytterligare övergående receptor potentiell Vanilloid 1 (TRPV1) kanal i DRG nervceller som en viktig bidragande orsak till den mekaniska och termiska hypersensitivitet av CRPS-I12.
I denna studie beskrev vi de detaljerade förfaranden som ingår i inrättandet av råtta modell av CPIP. Vi utvärderade vidare råtta CPIP-modellen genom att mäta de mekaniska och termiska hypersensitiviteten samt dess lyhördhet för akut capsaicin Challenge. Vi föreslår att råtta CPIP-modellen kan vara en tillförlitlig djurmodell för vidare utredning av de mekanismer som deltar i CRPS-I.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 ml Eppendorf tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22431021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D1435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capsaicin</td>
			<td>APEXBIO</td>
			<td>A3278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital caliper</td>
			<td>Meinaite</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring</td>
			<td>O-Rings West</td>
			<td>Nitrile 70 Durometer</td>
			<td>7/32 in. 
			internal diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plantar Test Apparatus</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>37370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey filaments</td>
			<td>UGO Basile, Italy</td>
			<td>NC12775</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic post-ischemia pain model for complex regional pain syndrome type-i in rats

Komplext regionalt smärtsyndrom typ-I (CRPS-I) är en neurologisk sjukdom som orsakar svår smärta bland patienter och förblir en olösta sjukdomstillstånd. Men de bakomliggande mekanismerna för CRPS-jag har ännu inte avslöjats. Det är känt att ischemia/reperfusion är en av de ledande faktorerna som orsakar CRPS-I. Med hjälp av långvarig ischemi och reperfusion av bakbenen, råtta kronisk post-ischemi Pain (cpip) modell har upprättats för att efterlikna CRPS-I. Den CPIP-modellen har blivit en välkänd djurmodell för att studera mekanismerna för CRPS-I. Detta protokoll beskriver de detaljerade förfaranden som är involverade i inrättandet av råtta modell av CPIP, inklusive anestesi, följt av ischemia/reperfusion av bakbenen. Egenskaperna hos råtta CPIP-modellen utvärderas ytterligare genom mätning av den mekaniska och termiska hypersensitivitet i bakbenen samt de nociferade svaren på akut kapsaicin injektion. Den råtta CPIP modellen uppvisar flera CRPS-I-liknande manifestationer, inklusive bakben ödem och hyperemi i det tidiga stadiet efter etableringen, ihållande termisk och mekanisk överkänslighet, och ökad nociffasade svar på akut capsaicin injektion. Dessa kännetecken gör det ett passande djur modellerar för mer ytterligare utredning av mekanismerna som är involverade i CRPS-I.

Efter att ha placerat O-ringen på fotleden, visade ipsilaterala Hind Paw Skin cyanos, en indikation på vävnad hypoxi (figur 1A). Efter kapning av O-ringen, den ipsilaterala Hind Paw började fylla med blod och visade robust svullnad, som visade ett intensivt tecken på hyperemi (figur 1A). Paw svullnad gradvis minskat och återvände till det normala 48 h efter den ischemiska/reperfusion förfarande (två-vägs ANOVA med Sida...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats at JoVE.com

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats

Förutsatt att här är ett protokoll som specificerar steg för att upprätta en djurmodell av kronisk post-ischemia Pain (CPIP). Detta är en väl erkänd modell imitera mänskliga komplexa regionala smärtsyndrom typ-I. Mekaniska och termiska hypersensitivitet utvärderas ytterligare, liksom capsaicin-inducerad nociftäckande beteenden som observerats i CPIP råtta modell.

Kronisk post-ischemia smärt modell för komplext regionalt smärtsyndrom typ-i hos råttor

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical ...

Den mekanism som ligger bakom CRPS jag fortfarande oklart. Upprättande av en preklinisk djurmodell härma CRPS Jag kommer att vara avgörande för att utforska de mekanismer som ligger bakom CRPS I.The råttan CPIP modell uppvisar många CRPS Jag gillar simitance, som inkluderar hindlimb ödem och hyperemia i ett tidigt skede. Efter modell etablering, följt av ihållande termiska och mekaniska hypersensitivities.Börja med att bedöva alla råttor med natrium fenobarbital. Se till att råttorna är ordentligt sövda genom att nypa deras baktass eller svans med tövråkar. Och placera vet salva på ögonen.Håll råttan på en 37 grader Celsius uppvärmd pad under förfarandet. Smörj höger baktass och vristen med glycerol. Skjut sedan en nitril 70 durometer O-ring i den större sidan av en punkt fem milliliter rör med snaplocket avskurna.För försiktigt in baktassen i det ihåliga röret tills det når botten. Skjut gradvis O-ringen från röret till höger baklimb nära fotleden. Och lämna den där i tre timmar.Applicera samma behandling på skengruppen av råttor, utom med en bruten O-ring som inte bör framkalla ischemi. Efter tre timmar, skär av O-ringen och övervaka råttan tills den återfår tillräckligt med medvetande för att upprätthålla sternal recumbency. Placera inte råttan i sällskap med andra råttor förrän den är helt återställd från anestesi.Placera råttan i en genomskinlig plexiglaskammare på ett nätgolv, och vaneför van råttan till miljön i 30 minuter före alla beteendetester. Använd von frey glödtrådar för att testa råttan för mekanisk allodynia. Påbörja testet från mitten glödtråden genom att vertikalt tillämpa den på den mellersta plantar ytan av baktassen.Applicera lämplig kraft för att böja glödtråden i upp till fem sekunder. En plötslig upprullning av tassen anses vara ett nocifensivt beteende. Genomför det mekaniska allodyniatestet på dag tre, två, ett, och varannan dag fram till dag 13.Tillämpa upp ner testmetod för att testa tröskelvärdet och en metod för att beräkna 50 procent paw uttagströskeln. För att testa för termisk hyperalgesia, använd Hargreaves metod genom att direkt sikta ljusstrålen som avges från en 50 watts glödlampa till baktassen. Mät tassentagets svarstid, inställning 20 sekunder som cutoff tröskeln för att undvika alltför stor skada.Upprepa varje test tre gånger i fem minuters intervall för varje baktass, och ta genomsnittet som svarstiden för tassuttag. Genomföra den termiska hyperalgesi testet på dag tre, två, en, och varannan dag fram till dag 13. För att testa för capsaicin inducerad akut nocifensiv beteende, förbereda 200 millimolar capsaicin stamlösning med DMSO, och ytterligare späda ut det en till 1, 000 i PBS för injektion.Capsaicin är ett reagens, vilket kan orsaka ledirritation på hud, ögon, och andning. Det är viktigt att bära en mask och goggle när du förbereder capsaicin lösning. Injicera sedan 50 mikroliter av capsaicin eller ett fordon i baktassen med hjälp av en 30 gauge nål fäst vid en en milliliter spruta.Spela in nocifensivt beteende, såsom slickning, bitning eller flinande av den injicerade tassen med hjälp av en videokamera i 10 minuter efter injektionen. Utvärdera baktassödem genom att mäta ökningen av tassdiametern vid 15 minuter, 24 timmar, 48 timmar och 72 timmar efter modelletablissemang. Efter placering av O-ringen på fotleden visade ipsilateral hind paw huden cyanos, en indikation på vävnad hypoxi.Efter styckning O-ringen, började tassen att fylla med blod och visade robust svullnad, vilket indikerar intensiv hyperemi. Svullnaden minskade gradvis och åter gick tillbaka till det normala 48 timmar efter ingreppet. En dag efter modell etablering, uppvisade ipsilateral hind tass av CPIP gruppen uppenbara mekaniska allodynia som kvarstod i 13 dagar av observation tidsram.Den kontralaterala baktassen av CPIP-gruppen visade också mekanisk hyperalgesi i 13 dagar. När termisk hyperalgesia mättes, uppvisade bilaterala hind tassar av CPIP råttor betydligt minskad tillbakadragande latens som svar på skadliga termiska stimuli, jämfört med den skengrupp råttor. Termisk hyperalgesia av ipsilateral hind tass kvarstod fram till slutet av observationstidsrymden, medan den termiska hyperalgesia av kontralateral hind tass varade i sju dagar.Den bluff och CPIP grupper testades för nocifensive beteende med capsaicin injektion. När ett fordon injicerades visade skengruppen ett litet nocifensivt svar och CPIP-gruppen visade ett betydligt högre svar. Mer viktigt, CPIP råtta viste betydande höger svaren till capsaicin injektionen än den sham grupp, vilken antyder sår den CPIP råtta utställning en fenomen lik till mänsklig patienten med CRPS I.By den här procedur, den råtta de/vi/du/ni är söva före och under modell etableringen.CPIP råtta modell som beskrivs i detta protokoll som fastställts av ischemi och Human CRPS Jag gillar simitance. Familjer av dessa modeller, mer mekanism om CRPS jag kan utforskas.

Research

JoVE Journal

Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device OPAD to Measure Changes in Nociceptive Behavior

Användning av Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) för att mäta förändringar i Nociceptive Behavior

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Determining Pain Detection and Tolerance Thresholds Using an Integrated, Multi-Modal Pain Task Battery

Fastställande Smärta Detection och toleranströsklar hjälp av en integrerad, multimodal Pain Task Batteri

Human pain models are useful in the assessing the analgesic effect of drugs, providing information about a drug&#39;s pharmacology and identify ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

Ett protokoll manuella test för att mäta Sensation och smärtsamma för människor

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

Psychophysically-anchored, Robust Thresholding in Studying Pain-related Lateralization of Oscillatory Prestimulus Activity

Psykofysiskt förankrad, Robust Tröskling att studera smärta relaterade Later av oscillerande Prestimulus aktivitet

In perceptual studies, it is often important to objectively assess the equality of delivered stimulation across participants or to quantify the ...

Treating Low Back Pain in Failed Back Surgery Patients with Multicolumn-lead Spinal Cord Stimulation

Behandling av ländryggsbesvär misslyckad ryggkirurgi hos Multicolumn-bly ryggmärgsstimulering

Failed back surgery syndrome (FBSS) refers to persistent, chronic pain following spinal surgery. Spinal cord stimulation with dorsal epidural leads can be ...

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats

Samtidiga inspelningar av kortikala lokala fältet potentialer och Electrocorticograms svar på nociceptiva Laser Stimuli från fritt rörliga råttor

Electrocortical responses, elicited by laser heat pulses that selectively activate nociceptive free nerve endings, are widely used in many animal and ...

Multi-Modal Signals for Analyzing Pain Responses to Thermal and Electrical Stimuli

Multimodala signaler för att analysera smärta Svaren till termisk och elektrisk Stimuli

The assessment of pain relies mostly on methods that require a person to communicate. However, for people with cognitive and verbal impairments, existing ...

Investigating Pain-Related Avoidance Behavior using a Robotic Arm-Reaching Paradigm

Undersöka smärtrelaterat undvikande beteende med hjälp av ett robotarms-nå paradigm

Avoidance behavior is a key contributor to the transition from acute pain to chronic pain disability. Yet, there has been a lack of ecologically valid ...

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats

En komplex dyk-för-mat uppgift för att undersöka social organisation och interaktioner hos råttor

For many species, where status is a vital motivator that can affect health, social hierarchies influence behavior. Social hierarchies that include ...

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model (CDM)

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model CDM

Djur modeller av depression - Kronisk förtvivlan modell (CDM)

Major depressive disorder is one of the most prevalent forms of mental illnesses and causes tremendous individual suffering and socioeconomic burden. ...