Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Vi takker Shannon M. Lefler for hjælp med tal og materialetabellen. Forskning rapporteret i denne publikation blev støttet af National Institute of Døvhed og andre kommunikationsforstyrrelser inden for National Institutes of Health, gennem "Udvikling af kliniker / forskere i akademisk ENT" uddannelse tilskud, tildeling nummer T32DC000022 (C.V.V.) og ved R01 DC014997 (J.T.L). Indholdet er alene forfatternes ansvar og repræsenterer ikke nødvendigvis de nationale sundhedsinstitutters officielle synspunkter.

Alle procedurer, der er anført umiddelbart nedenfor i protokollen afsnit blev gennemført som beskrevet i protokoller godkendt af Washington University i St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Anæstesiinduktion og overvågning af vitale tegn
BEMÆRK: Denne undersøgelse anvendes pigmenteret NIH-stamme marsvin fremstillet af en in-house avl koloni.
<ol><li>Brug marsvin af begge køn, der vejer mindst 350 g.</li>
	<li>Marsvinet ...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

Den præsenterede ekstradurale metode havde en succesrate på 86% i at opnå histologisk bekræftet endolymphatic hydrops og lavfrekvente høretab. Metoden opnåede pålideligt histologiske beviser for endolymphatic hydrops efter postoperativ dag 30, i overensstemmelse med tidligere undersøgelser, der anvendte en intradural tilgang2. Metodens betydning med hensyn til eksisterende metoder er, at der ikke er behov for en csf-lækage, hvorved en potentiel konfunderende variabel, der er blevet foresl...

Endolymphatic hydrops er en udvidelse af scala medier. Tilstedeværelsen af endolymphatic hydrops kan måles ved hjælp af tværsnittet område af scala medier. Det menes, at kliniske endolymphatic hydrops kan være forbundet med lavfrekvente sensorineuralt høretab, som det ses i Menirekes sygdom. Men oprindelsen (e) af høretabet er fortsat uklar. For at kunne undersøge oprindelsen af lavfrekvent høretab i forbindelse med endolymphatic hydrops er der behov for en pålidelig model.
I 1965 beskrev Kimura og Schuknecht, hvordan man kan fremkalde endolymphatic hydrops i marsvin ved hjælp af en intradural tilgang1. Deres teknik involveret ved hjælp af en posterior kraniel fossa tilgang til at få adgang til operculum og subarcuate fossa. Trinene involverede incising dura, tilbagetrækning af lillehjernen med en Ringer løsning gennemblødt vatrondel, og boring på tværs af endolymphatic kanalen og den mellemliggende del af endolymphatic sac. Bone voks blev derefter placeret i operculum at adskille endolymphatic kanalen fra distale endolymphatic sac. Kraniotomi defekten blev lukket ved at placere absorberbart gelatine pulver (f.eks Gelfoam) og reapproximating de overlydende muskler. Histologisk evidens for endolymphatic hydrops blev konsekvent fundet på postoperative dage 1, 3, 7, 14, 21 og 30, viser, at den intradurale tilgang var en pålidelig metode til at fremkalde histologisk bekræftet endolymphatic hydrops. Ved hjælp af samme intradural tilgang som Kimura og Schuknecht, men med forskellige tidspunkter, Bekræftede Salt og DeMott, at scala medier i anden omgang af cochlea blev væsentligt udvidet på dag 4 og udover 2. Mens den faktiske sygelighed at fremkalde en cerebrospinalvæske (CSF) lækage ved hjælp af Kimura og Schuknecht's intradural tilgang ikke blev rapporteret i den oprindelige undersøgelse, tilstedeværelsen af en CSF lækage kunne øge risikoen for meningitis. Det er blevet foreslået, at tab af CSF kan føre til en udstrømning af perilymph, hvilket resulterer i en samtidig midlertidig udvidelse af endolymphatic volumen i marsvin3. En ekstradural tilgang til inducerende endolymphatic hydrops ville være en sikrere løsning.
I 1989, Andrews og Bohmer beskrevet to ekstradural kirurgiske tilgange til at nå endolymphatic sac og kanal, via enten en midt kraniel fossa tilgang eller posterior kraniel fossa tilgang, at udslette endolymphatic sac4. De beskrev fjernelse af operculum med en diamant boremaskine, og derefter enten bore ud den mellemliggende del af endolymphatic sac eller ved hjælp af en fin pick at forstyrre endolymphatic sac og kanal. I 1993 beskrev Lee, Wright og Meyerhoff en lignende tilgang, som omfattede boring gennem endolymphatic sac og kanal, men afveg i, at de også samtidig blokeret cochlear akvædukten5. De viste tilstedeværelsen af endolymphatic hydrops, som vurderes via histologi, på fire uger efter udslettelse af endolymphatic sac og obstruktion af cochlear akvædukt. Megerian et al. var den første til at offentliggøre en video artikel, der viser en ekstradural udslettelse af endolymphatic sac og kanal, der involverede boring direkte på den mediale del af operculum at indgå i endolymphatic sac og kanal6. De viste histologiske beviser for endolymphatic hydrops i et marsvin ofret på 28 uger efter operationen, samt høretab i 16 kHz regionen6. Hvorvidt det var muligt at fremkalde histologisk bekræftet endolymphatic hydrops og lavfrekvente høretab på et tidligt tidspunkt ved hjælp af ekstradurale tilgange var ukendt.
Det overordnede mål med denne rapport er at demonstrere en ekstradural tilgang til at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dage postoperativt ved at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick. Begrundelsen for brugen af denne teknik er fordelen ved at undgå behovet for at bore på den petrous tidsmæssige knogle, hvorved risikoen for utilsigtet at skade dura og forårsage en CSF lækage, afbøde muligheden for at skade den bageste halvcirkelformede kanalen, og reducere risikoen for skade på sigmoid sinus.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Endolymphatic hydrops er en udvidelse af scala medier, der oftest er forbundet med Meniries sygdom, selv om patofysilogiske mekanisme (r) forbliver uklar. For i tilstrækkelig grad at undersøge egenskaberne ved endolymphatic hydrops, såsom oprindelsen af lavfrekvente høretab, en pålidelig model er nødvendig. Marsvinet er en god model, fordi det hører i de lavfrekvente regioner, der er angiveligt påvirket af endolymphatic hydrops. Tidligere forskning har vist, at endolymphatic hydrops kan induceres kirurgisk via intradural eller ekstradural tilgange, der involverer boring på endolymphatic kanalen og sac. Men om det var muligt at skabe en endolymphatic hydrops model ved hjælp af en ekstradural tilgang, der undgik farlige boring på endolymphatic kanalen og sac var ukendt. Formålet med denne undersøgelse var at demonstrere en revideret ekstradural tilgang til at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dage postoperativt ved at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick. Prøvestørrelsen bestod af syv marsvin. Der blev foretaget funktionelle målinger af hørelsen, og der blev efterfølgende høstet tidsmæssige knogler til histologisk analyse. Tilgangen havde en succesrate på 86% i at opnå endolymphatic hydrops. Risikoen for cerebrospinalvæskelækage var minimal. Der forekom ingen perioperative dødsfald eller skader på den bageste halvcirkelformede kanal i prøven. Den præsenterede metode viser en sikker og pålidelig måde at fremkalde endolymphatic hydrops på et relativt hurtigt tidspunkt på 30 dage. De kliniske implikationer er, at den præsenterede metode giver en pålidelig model til yderligere at udforske oprindelsen af lavfrekvente høretab, der kan være forbundet endolymphatic hydrops.

Den præsenterede metode anvendes en ekstradural tilgang til at udslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick i syv marsvin bestående af to hanner og fem hunner. Den gennemsnitlige varighed af kirurgi var 2 timer fra snit til lukning. Den samlede boretid varierede fra 5-10 minutter. Op til 4 timer var nødvendig for marsvin til fuldt ud at komme ud af anæstesi. Der var ingen intraoperative eller postoperative dødsfald i stikprøven. Der var ingen skader på ...

Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Denne artikel viser en ekstradural tilgang til at udslette marsvin endolymphatic sac og skade endolymphatic kanalen med en fin pick for at fremkalde eksperimentelle endolymphatic hydrops.

En revideret kirurgisk tilgang til at fremkalde endolymphatic hydrops i MarsVin

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Ved hjælp af denne procedure, endolymphatic hydrops kan induceres relativt hurtigt i marsvin med en tilstrækkelig succesrate. Den største fordel ved denne teknik er, at endolymphatic hydrops kan induceres med minimal risiko for CSF lækage eller skade på den bageste halvcirkelformede kanal. Efter at have bekræftet manglende reaktion på pedalrefleks, injicere en 12 milliliter subkutan væske bolus af lakteret Ringer opløsning i bagsiden af bedøvet marsvin og placere marsvin i liggende position på en opvarmning pad.Anlål på 27,5 gauge butterfly intraperitoneally bekræfter en korrekt placering ved tilstedeværelse af luft kun i nålespidsen, og forsøgskaninen anbringes i den udsatte position. Fastgør hovedet i en stereotaktisk holder og fastgør et pulsoximeter på en ikke-pigmenteret fod. Brug en rektal sonde og en opvarmning tæppe til at opretholde kropstemperaturen ved 38 grader Celsius og anvende salve til dyrets øjne.Placer et stykke afdækningstape over ryggen for at give tilstrækkelig spænding langs huden overliggende occiput og fastgør enderne af båndet til stereotaktiske holderen. Derefter liberalt prep huden overliggende occiput og posterior hals med tre på hinanden følgende jod scrubs og 70% alkohol og placere en steril drapere over dyret. Begynd den kirurgiske procedure ved hjælp af en række 15 klinge til at gøre en lille midterlinjen snit langs den bageste occiput strækker sig ned til den bageste hals.Når under huden, bruge iris saks til at frigøre den højre posterior livmoderhalskræft muskler fra occipital knoglen, kontrollere enhver blødning med tryk fra en steril vat. Ved hjælp af en dissekere mikroskop og en kombination af et nummer tre, to, og en millimeter diamant grater med en 5-0 suge og steril kunstvanding, udføre en kranieektomi, der er afgrænset så langt som den eksterne occipital kam lateral, lambdoidal ridge overlegent, occipitomastoid sutur linje medialt, og dorsale margin af foramen magnum ringere. Og brug en 0,5 millimeter diamant burr til at skeletonisere sigmoid sinus.Forsigtigt placere et lille stykke saltvand fugtet bomuld under knoglen, mens adskille occipital knoglen fra dura. Fjern forsigtigt knoglen overliggende sinus og bruge en vat til forsigtigt at trække sigmoid sinus medialt. Træk forsigtigt sigmoid sinus og identificere operculum som en slids-lignende struktur placeret i petrous tidsmæssige knogle.Den ekstraosseous del af endolymphatic sac kan visualiseres som en klar sæk-lignende forbindelse mellem operculum og dura overliggende sigmoid sinus. Påfør blid mediale tilbagetrækning til sigmoid sinus til klart at visualisere den ekstraosseøse del af endolymphatic sac og øge spændingen mellem de ekstraossøse og intraosseous dele af sæk. Ved hjælp af en fin vinklet pick, forsigtigt expunge den mellemliggende del af endolymphatic sac og bredt skrabe en fin pick inde i operculum langs indersiden af knoglen.Det er afgørende for succesen af denne procedure, at ingen synlig forbindelse mellem dura og operculum tilbage. Brug en lille curette til at skrabe langs den tidsmæssige knogle for at opnå knoglechips og generøst pakke operculum med knoglechips. Forsegle operculum med knoglevoks at passe på, at der ikke er overskydende voks forrykket ind i kraniet og bruge knoglevoks til at dække kraniectomy defekt.Derefter tilnærme den bageste livmoderhalskræft muskler med 4-0 flettet absorberbare suturer i en afbrudt måde og udføre en to-lags lukning ved at tilnærme det dybe lag med enkle afbrudte suturer og epidermale lag ved hjælp af en subcuticular lukning med en 4-0 flettet absorberbar sutur. I dette repræsentative eksperiment afslørede histologisk analyse af de tidsmæssige knogler endolymphatic hydrops i hele højre cochlea sammenlignet med venstre cochlea i seks ud af syv marsvin. Kvantificering af tværsnitsområdet i scalamediet på tværs af hver tur viste, at tværsnittet generelt var større for ørerne på dyr, der overlevede 30 dage efter udslettelse af endolymphatic sac sammenlignet med det, der blev observeret hos kontroldyr.Auditive nerve overlappende bølgeform tærskler blev øget hos dyr med endolymphatic hydrops demonstrere tilstedeværelsen af lavfrekvent høretab, mens de fleste højfrekvente cochlear sammensatte virkning potentielle tærskler mellem otte og 20 kilohertz var inden for normalområdet. Hvis området mellem dura og operculum er tørt efter expunging sæk, så prøv at placere yderligere tilbagetrækning på sigmoid sinus for at sikre, at der ikke er nogen synlig forbindelse mellem det og operculum. Efter denne procedure, yderligere undersøgelser af cochlear anatomi og fysiologi kan udføres for at løse vigtige forskningsspørgsmål om endolymphatic hydrops.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Hurtig Mikro-iontophoresis af glutamat og GABA: et nyttigt redskab til Undersøge Synaptic Integration

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

En ny metode, der eliminerer Håndtering for at studere Aggression og &quot;Loser&quot; Effekt i<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

En enkel metode til at fremkalde eksperimentelle Autoimmune Neuritis i C57BL/6 mus for funktionelle og neuropatologiske vurderinger

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

En alternativ metode til at studere primære begivenheder i Neurodegeneration ved hjælp af Ex Vivo rotte hjernen skiver

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En benchtop tilgang til placeringsspecifik blodhjernebarriereåbning ved hjælp af fokuseret ultralyd i en rottemodel

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Kombination af adfærd og EEG for at studere virkningerne af mindfulness meditation på episodisk hukommelse

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Udvinding og dissektion af den tamme svinehjerne

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Pre-chiasmatisk, enkelt injektion af autologt blod for at inducere eksperimentel subaraknoid blødning i en rottemodel

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

Stereotaksisk kirurgisk tilgang til mikroinjektion af den kaudale hjernestamme og øvre cervikale rygmarv via cisterna magna hos mus

Stereotaxic surgery to target brain sites in mice is commonly guided by skull landmarks. Access is then obtained via burr holes drilled through the skull. ...