Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Wij danken Shannon M. Lefler voor hulp bij cijfers en de Tabel van materialen. Onderzoek gemeld in deze publicatie werd ondersteund door het National Institute of Doofness and Other Communication Disorders binnen de National Institutes of Health, door de "Development of Clinician / Researchers in Academic ENT" opleiding subsidie, award nummer T32DC000022 (C.V.V.) en door R01 DC014997 (J.T.L). De inhoud valt uitsluitend onder de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijkerwijs de officiële standpunten van de National Institutes of Health.

Alle procedures die onmiddellijk hieronder in het protocol sectie werden uitgevoerd zoals beschreven in protocollen goedgekeurd door de Washington University in St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Verdoving en bewaking van vitale tekens
LET OP: Deze studie gebruikte gepigmenteerde NIH-stam cavia's verkregen uit een eigen fokkolonie.
<ol><li>Gebruik cavia's van beide geslachten, met een gewicht van ten minste 350 g.</li>
	<li>...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

De gepresenteerde extradurale methode had een slagingspercentage van 86% bij het bereiken van histologisch bevestigde endolymfatische hydrops en laagfrequente gehoorverlies. De methode bereikte betrouwbaar histologisch bewijs van endolymphatische hydrops op postoperatieve dag 30, in overeenstemming met eerdere studies die een intradurale benaderinggebruikten 2. Het belang van de methode met betrekking tot bestaande methoden is dat een CSF-lek niet nodig is, waardoor een potentiële verstorende var...

Endolymphatische hydrops is een uitbreiding van scala media. De aanwezigheid van endolymfatische hydrops kan worden gemeten met behulp van het dwarsdoorsnedegebied van scalamedia. Er wordt gedacht dat klinische endolymphatische hydrops kunnen worden geassocieerd met laagfrequente sensorineural gehoorverlies, zoals die gezien bij de ziekte van Meniere. Maar de oorsprong(en) van het gehoorverlies blijven onduidelijk. Om de oorsprong van laagfrequente gehoorverlies in verband met endolymphatische hydrops adequaat te bestuderen, is een betrouwbaar model nodig.
In 1965 beschreven Kimura en Schuknecht hoe endolymphatische hydrops in het cavia te induceren met behulp van een intradurale benadering1. Hun techniek betrof het gebruik van een achterste craniale fossa benadering van toegang tot het operculum en subarcuate fossa. De stappen betrokken insnijden dura, het intrekken van de cerebellum met een Ringer oplossing doorweekt wattenschijfje, en boren over de endolymphatische buis en het tussengedeelte van de endolymphatische zak. Botwas werd vervolgens geplaatst in het operculum om de endolymphatische kanaal te scheiden van de distale endolymphatische zak. Het craniotomiedefect werd gedicht door het plaatsen van opneembaar gelatinepoeder (bijvoorbeeld Gelschuim) en het oogsten van de bovenlyserende spieren. Histologisch bewijs van endolymphatische hydrops werd consequent gevonden op postoperatieve dagen 1, 3, 7, 14, 21 en 30, waaruit bleek dat de intradurale benadering een betrouwbare methode was om histologisch bevestigde endolymfatische hydrops te induceren. Met dezelfde intradurale benadering als Kimura en Schuknecht, maar met verschillende tijdspunten, Salt en DeMott bevestigd dat scala media in de tweede beurt van het slakkenkastje aanzienlijk werd vergroot op dag 4 en na2. Hoewel de werkelijke morbiditeit van het induceren van een cerebrospinale vloeistof (CSF) lek met behulp van Kimura en Schuknecht's intradurale benadering niet werd gemeld in de oorspronkelijke studie, de aanwezigheid van een CSF lek kan het risico op meningitis verhogen. Er is gesuggereerd dat verlies van CSF zou kunnen leiden tot een uitstroom van perilymph, wat resulteert in een gelijktijdige tijdelijke uitbreiding van het endolymphatische volume in het cavia3. Een extradurale benadering van het opwekken van endolymphatische hydrops zou een veiligere optie zijn.
In 1989 beschreven Andrews en Bohmer twee extradurale chirurgische benaderingen om de endolymphatische zak en kanaal te bereiken, via een midden craniale fossa-benadering of achterste schedelfossa-benadering, om de endolymfatische zak 4 uit teroeien. Ze beschreven het verwijderen van het operculum met een diamant boor, en vervolgens ofwel boren uit het tussengedeelte van de endolymphatische zak of met behulp van een fijne pick om de endolymphatische zak en kanaal te verstoren. In 1993 beschreven Lee, Wright en Meyerhoff een soortgelijke aanpak, waaronder boren door de endolymphatische zak en buis, maar verschilden in die tijd dat ze tegelijkertijd het cochleair aquaduct5belemmerden. Ze toonden de aanwezigheid aan van endolymfatische hydrops, zoals beoordeeld via histologie, vier weken na het uitwrijveeren van de endolymphatische zak en het belemmeren van het cochleair aquaduct. Megerian et al. was de eerste die een videoartikel publiceerde waaruit een extradurale vernietiging van de endolymphatische zak en kanaal demonstreert die betrekking vigeerde om rechtstreeks op het mediale gedeelte van het operculum te boren om de endolymphatische zak en kanaal6binnen te gaan. Ze toonden histologisch bewijs van endolymphatische hydrops in een cavia geofferd op 28 weken na de operatie, evenals gehoorverlies in de 16 kHz regio6. Of het mogelijk was om histologisch bevestigde endolymfatische hydrops en laagfrequente gehoorverlies te induceren op een vroeg moment met behulp van extradurale benaderingen was onbekend.
Het algemene doel van dit rapport is om een extradurale aanpak aan te tonen om experimentele endolymftische hydrops te induceren na 30 dagen postoperatief door de endolymphatische zak uit te roeien en het endolymfphatische kanaal te verwonden met een fijne pick. De reden achter het gebruik van deze techniek is het voordeel van het vermijden van de noodzaak om te boren op de petrous temporele bot, waardoor het risico van per ongeluk verwonden van de dura en het veroorzaken van een CSF lek, het verminderen van de mogelijkheid van het verwonden van de achterste halfronde kanaal, en het verminderen van het risico van letsel aan de sigmoïde sinus.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Endolymphatische hydrops is een uitbreiding van scala media die meestal wordt geassocieerd met de ziekte van Meniere, hoewel de pathofysiologic mechanisme (s) onduidelijk blijven. Om de eigenschappen van endolymphatische hydrops, zoals de oorsprong van laagfrequente gehoorverlies, adequaat te bestuderen, is een betrouwbaar model nodig. De cavia is een goed model omdat het hoort in de laagfrequente gebieden die putatief worden beïnvloed door endolymphatische hydrops. Eerder onderzoek heeft aangetoond dat endolymphatische hydrops chirurgisch kunnen worden geïnduceerd via intradurale of extradurale benaderingen die boren op de endolymphatische buis en zak omvatten. Echter, of het mogelijk was om een endolymphatische hydrops model te creëren met behulp van een extradurale aanpak die gevaarlijke boringen op de endolymphatische buis en zak vermeden was onbekend. Het doel van deze studie was om een herziene extradurale benadering aan te tonen om experimentele endolymftische hydropen te induceren na 30 dagen postoperatief door de endolymphatische zak uit te roeien en het endolymfphatische kanaal te verwonden met een fijne pick. De steekproefgrootte bestond uit zeven cavia's. Functionele metingen van het gehoor werden gemaakt en temporele botten werden vervolgens geoogst voor histologische analyse. De aanpak had een slagingspercentage van 86% in het bereiken van endolymphatische hydrops. Het risico op hersenvochtlekkage was minimaal. Geen perioperatieve sterfgevallen of verwondingen aan het achterste halfronde kanaal opgetreden in het monster. De gepresenteerde methode toont een veilige en betrouwbare manier om endolymphatische hydrops te induceren op een relatief snel tijdstip van 30 dagen. De klinische implicaties zijn dat de gepresenteerde methode een betrouwbaar model biedt om de oorsprong van laagfrequente gehoorverlies dat kan worden geassocieerd endolymphatische hydrops verder te onderzoeken.

De gepresenteerde methode gebruikte een extradurale benadering om de endolymphatische zak uit te wissen en het endolymphatische kanaal te verwonden met een fijne pick in zeven cavia's bestaande uit twee mannetjes en vijf vrouwtjes. De gemiddelde duur van de operatie was 2 uur van incisie tot sluiting. De totale boortijd varieerde van 5-10 minuten. Tot 4 uur was nodig voor de cavia volledig te voorschijn komen uit anesthesie. Er waren geen intraoperatieve of postoperatieve sterfgevallen in...

Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Dit artikel toont een extradurale benadering aan om de cavia endolymphatische zak uit te wissen en het endolymphatische kanaal te verwonden met een fijne pick om experimentele endolymphatische hydrops te induceren.

Een herziene chirurgische aanpak om endolymphatische hydrops in het cavia te induceren

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Met behulp van deze procedure kunnen endolymfatische hydrops relatief snel worden geïnduceerd bij cavia's met een adequaat slagingspercentage. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat endolymphatische hydrops kunnen worden geïnduceerd met een minimaal risico op CSF-lek of letsel aan het achterste halfronde kanaal. Na bevestiging van een gebrek aan reactie op pedaalreflex, injecteer een 12 milliliter onderhuidse vloeistof bolus van lactated Ringer's oplossing in de rug van de verdoofde cavia en plaats de cavia in de supine positie op een opwarming pad.Plaats een 27,5-meter vlindernaald intraperitoneally bevestigt een juiste plaatsing door de aanwezigheid van lucht alleen in de naaldpunt en plaats de cavia in de gevoelige positie. Zet het hoofd in een stereotactische houder en zet een pulsoximeter vast op een niet-gepigmenteerde voet. Gebruik een rectale sonde en een verwarmende deken om de lichaamstemperatuur op 38 graden Celsius te houden en zalf op de ogen van het dier aan te brengen.Plaats een stuk plakband over de rug om voldoende spanning langs de huid te bieden die de occiput overstijgt en bevestig de uiteinden van de tape aan de stereotactische houder. Dan royaal prep de huid bovenlying de occiput en achterste nek met drie opeenvolgende jodium scrubs en 70% alcohol en plaats een steriele gordijnen over het dier. Begin de chirurgische ingreep met behulp van een nummer 15 mes om een kleine middellijn incisie langs de achterste occiput uit te breiden tot aan de achterste nek te maken.Eenmaal onder de huid, gebruik iris schaar om de rechter achterste cervicale spieren los te maken van de occipital bot, het beheersen van een bloeden met druk van een steriele katoenen bal. Met behulp van een ontledende microscoop en een combinatie van een nummer drie, twee en een millimeter diamantboeren met een 5-0 zuiging en steriele irrigatie, voeren een craniectomie die wordt begrensd zo ver als de externe occipital crest lateraal, lambdoïdale nok superieur, de occipitomastoïde hechting lijn mediaal, en de dorsale marge van de foramen magnum inferieur. En gebruik een 0,5 millimeter diamant braam om de sigmoïde sinus te skeletten.Plaats voorzichtig een klein stukje zout bevochtigd katoen onder het bot terwijl je het occipitale bot scheidt van de dura. Verwijder voorzichtig het bot boven de sinus en gebruik een katoenen bal om de sigmoïde sinus medially voorzichtig in te trekken. Trek de sigmoïde sinus voorzichtig in en identificeer het operculum als een spleetachtige structuur in het petrous temporale bot.Het extraosseous gedeelte van de endolymphatische zak kan worden gevisualiseerd als een duidelijke sac-achtige verbinding tussen het operculum en de dura die de sigmoïde sinus overdrijft. Breng zachte mediale intrekking aan op de sigmoïde sinus om het extraosseous gedeelte van de endolymphatische zak duidelijk te visualiseren en de spanning tussen de extraosseous en intraosseous gedeelten van de zak te verhogen. Met behulp van een fijne schuine pick, voorzichtig expunge het tussenliggende gedeelte van de endolymphatische zak en in grote lijnen schraap een fijne pick in het operculum langs de binnenkant van het bot.Het is van cruciaal belang voor het succes van deze procedure dat er geen zichtbare verbinding tussen de dura en het operculum blijven. Gebruik een kleine curette te schrapen langs het tijdelijke bot om botchips te verkrijgen en royaal pak het operculum met de botschips. Verzegel het operculum met beenwax en zorg ervoor dat er geen overtollige was in de schedel wordt losgemaakt en gebruik botwax om het craniectomiedefect te bedekken.Dan benaderen de achterste cervicale spieren met 4-0 gevlochten absorbe absorbable hechtingen in een onderbroken manier en het uitvoeren van een twee-laags sluiting door het benaderen van de diepe laag met eenvoudige onderbroken hechtingen en de epidermale laag met behulp van een subcuticulaire sluiting met een 4-0 gevlochten absorbe absorbes absorbeerbare hechting. In dit representatieve experiment, histologische analyse van de temporale botten bleek endolymphatische hydrops in het juiste slakkenbeen in vergelijking met de linker slakkenmoeder in zes van de zeven cavia's. De kwantificering van het dwarsdoorsnedegebied van de scalamedia over elke bocht gaf aan dat het doorsnedegebied over het algemeen groter was in de oren van dieren die 30 dagen na de vernietiging van de endolymphatische zak overleefden in vergelijking met die waargenomen bij controledieren.Auditieve zenuw overlapte golfvorm drempels werden verhoogd bij dieren met endolymphatische hydrops waaruit de aanwezigheid van laagfrequente gehoorverlies aantoonde, terwijl de meeste hoogfrequente cochleaire samengestelde actie potentiële drempels tussen acht en 20 kilohertz binnen het normale bereik lagen. Als het gebied tussen de dura en het operculum droog is na het uitgraven van de zak, probeer dan extra intrekking op de sigmoïde sinus te plaatsen om ervoor te zorgen dat er geen zichtbare verbinding is tussen het en het operculum. Na deze procedure kunnen aanvullende studies over cochleaire anatomie en fysiologie worden uitgevoerd om belangrijke onderzoeksvragen over endolymfatische hydrops aan te pakken.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Rapid Approach to High-Resolution Fluorescence Imaging in Semi-Thick Brain Slices

Een snelle aanpak van High-Resolution Imaging fluorescentie in Semi-Dik Brain Slices

A fundamental goal to both basic and clinical neuroscience is to better understand the identities, molecular makeup, and patterns of connectivity that are ...

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

Met behulp van een vergelijkende Soorten aanpak van de neurobiologie van Paternal antwoorden Onderzoek

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Snel Micro-iontoforese van glutamaat en GABA: een nuttig instrument om Synaptic Integratie Onderzoek

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Een nieuwe aanpak die Elimineert Handling voor het bestuderen van agressie en de &quot;verliezer&quot; Effect in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

Een eenvoudige benadering voor het opwekken van experimentele Autoimmune Neuritis in C57BL/6 muizen voor functionele en neuropathologische evaluaties

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

Een alternatieve benadering te bestuderen van primaire gebeurtenissen in neurodegeneratie Ex Vivo Rat hersenen segmenten gebruiken

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

Een benchtop benadering van de locatie specifieke bloed hersenbarrière opening met behulp van gerichte echografie in een rat model

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Gedrag en EEG combineren om de effecten van Mindfulness-meditatie op episodisch geheugen te bestuderen

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Extractie en dissectie van het gedomesticeerde varkensbrein

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Pre-chiasmatische, enkele injectie van autoloog bloed om experimentele subarachnoïdale bloeding in een rattenmodel te induceren

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...