Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Nous remercions Shannon M. Lefler pour l’aide aux chiffres et à la Table des matériaux. Les recherches rapportées dans cette publication ont été soutenues par le National Institute of Deafness and Other Communication Disorders au sein des National Institutes of Health, grâce à la subvention de formation « Développement des cliniciens/chercheurs en ORL académique », numéro de prix T32DC000022 (C.V.V.) et par R01 DC014997 (J.T.L). Le contenu est uniquement la responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement les vues officielles des National Institutes of Health.

Toutes les procédures énumérées immédiatement ci-dessous dans la section du Protocole ont été menées comme décrit dans les protocoles approuvés par l’Université de Washington à St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Induction anesthésique et surveillance des signes vitaux
REMARQUE: Cette étude a utilisé des cobayes pigmentés à souche NIH obtenus d’une colonie de reproduction interne.
<ol><li>Utilisez des cob...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

La méthode extradurale présentée a eu un taux de réussite de 86% en réalisant des hydrops endolymphatiques confirmés histologically et la perte auditive à basse fréquence. La méthode a réalisé de façon fiable des preuves histologiques des hydrops endolymphatiques par le jour postopératoire 30, compatible avec des études antérieures qui ont employé une approche intradurale2. L’importance de la méthode par rapport aux méthodes existantes est qu’une fuite de FSC n’est pas néc...

Les hydrops endolymphatiques sont un élargissement des médias scala. La présence d’hydrops endolymphatiques peut être mesurée à l’aide de la zone transversale des médias scala. On pense que les hydrops endolymphatiques cliniques peuvent être associés à la perte d’audition neurosensorielle à basse fréquence, comme celle vue dans La maladie de Meniere. Mais l’origine de la perte auditive reste incertaine. Pour étudier adéquatement les origines de la perte auditive à basse fréquence associée aux hydrops endolymphatiques, un modèle fiable est nécessaire.
En 1965, Kimura et Schuknecht ont décrit comment induire des hydrops endolymphatiques dans le cobaye à l’aide d’une approche intradurale1. Leur technique impliquait l’utilisation d’une approche crânienne postérieure fossa pour accéder à l’operculum et subarcuate fossa. Les étapes consistaient à incister dura, à rétracter le cervelet avec la plaque de coton imbibée de solution d’une sonnerie, et à forer le conduit endolymphatique et la partie intermédiaire du sac endolymphatique. La cire d’os a été alors placée dans l’opéculum pour séparer le conduit endolymphatique du sac endolymphatique distal. Le défaut de craniottomie a été fermé en plaçant la poudre absorbable de gélatine (p. ex. Gelfoam) et en récoltant les muscles qui levaient. L’évidence histologic des hydrops endolymphatiques a été uniformément trouvée aux jours postopératoires 1, 3, 7, 14, 21, et 30, démontrant que l’approche intradurale était une méthode fiable pour induire des hydrops endolymphatiques histologically-confirmé. Utilisant la même approche intradurale que Kimura et Schuknecht, mais avec des points de temps différents, Salt et DeMott ont confirmé que les médias scala dans le deuxième tour de la cochlée a été considérablement agrandi au jour 4 et au-delàde 2. Bien que la morbidité réelle d’induire une fuite de liquide phébrospinal (CSF) utilisant l’approche intradurale de Kimura et Schuknecht n’ait pas été rapportée dans l’étude originale, la présence d’une fuite de CSF pourrait augmenter le risque de méningite. Il a été suggéré que la perte de CSF pourrait conduire à une sortie de perilymph, résultant en une expansion temporaire simultanée du volume endolymphatique dans le cobaye3. Une approche extradurale pour induire des hydrops endolymphatiques serait une option plus sûre.
En 1989, Andrews et Bohmer ont décrit deux approches chirurgicales extradurales pour atteindre le sac et le conduit endolymphatiques, par l’intermédiaire d’une approche de fossa crânienne moyenne ou d’approche crânienne postérieure de fossa, pour effacer le sac endolymphatique4. Ils ont décrit l’enlèvement de l’opéculum avec une perceuse au diamant, puis soit le forage de la partie intermédiaire du sac endolymphatique ou en utilisant un pic fin pour perturber le sac et le conduit endolymphatiques. En 1993, Lee, Wright et Meyerhoff ont décrit une approche similaire, qui comprenait le forage à travers le sac et le conduit endolymphatiques, mais différé en ce qu’ils ont également simultanément obstrué l’aqueduc cochléaire5. Ils ont démontré la présence d’hydrops endolymphatiques, tel qu’évalué par l’histologie, à quatre semaines après avoir effacé le sac endolymphatique et obstruant l’aqueduc cochléaire. Megerian et coll. ont été les premiers à publier un article vidéo démontrant une oblitération extradurale du sac et du conduit endolymphatique qui impliquaient le forage directement sur la partie médiale de l’operculum pour entrer dans le sac et le conduit endolymphatique6. Ils ont démontré des preuves histologic des hydrops endolymphatiques dans un cobaye sacrifié à 28 semaines après la chirurgie, aussi bien que la perte d’audition dans la région de 16 kHz6. On ignorait s’il était possible d’induire des hydrops endolymphatiques confirmés histologiquement confirmés et une perte auditive à basse fréquence à un point de temps précoce utilisant des approches extradurales.
L’objectif global de ce rapport est de démontrer une approche extradurale pour induire des hydrops endolymphatiques expérimentaux à 30 jours post-opératoirement en effaçant le sac endolymphatique et en blessant le conduit endolymphatique avec une belle pioche. La raison d’être derrière l’utilisation de cette technique est l’avantage d’éviter la nécessité de forer sur l’os temporel pétrous, éliminant ainsi le risque de blesser accidentellement le dura et de causer une fuite de CSF, atténuant la possibilité de blesser le canal semi-circulaire postérieur, et réduisant le risque de blessure au sinus sigmoïde.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Les hydrops endolymphatiques sont un élargissement des médias scala qui est le plus souvent associé à la maladie de Meniere, bien que le mécanisme pathophysiologic(s) reste peu clair. Afin d’étudier adéquatement les attributs des hydropes endolymphatiques, tels que les origines de la perte auditive à basse fréquence, un modèle fiable est nécessaire. Le cobaye est un bon modèle parce qu’il entend dans les régions à basse fréquence qui sont putativement touchés par les hydrops endolymphatiques. Des recherches antérieures ont démontré que les hydrops endolymphatiques peuvent être induits chirurgicalement par des approches intradurales ou extradurales qui impliquent le forage sur le conduit et le sac endolymphatiques. Cependant, s’il était possible de créer un modèle d’hydrops endolymphatique utilisant une approche extradurale qui a évité le forage dangereux sur le conduit et le sac endolymphatiques était inconnu. L’objectif de cette étude était de démontrer une approche extradurale révisée pour induire des hydrops endolymphatiques expérimentaux à 30 jours post-opératoirement en effaçant le sac endolymphatique et en blessant le conduit endolymphatique avec une belle pioche. La taille de l’échantillon se composait de sept cobayes. Des mesures fonctionnelles de l’ouïe ont été faites et des os temporels ont été plus tard récoltés pour l’analyse histologic. L’approche a eu un taux de réussite de 86% dans la réalisation des hydrops endolymphatiques. Le risque de fuite de liquide rébrospinal était minime. Aucun décès ou blessure périopératoire au canal semi-circulaire postérieur ne s’est produit dans l’échantillon. La méthode présentée démontre un moyen sûr et fiable d’induire des hydrops endolymphatiques à un point de temps relativement rapide de 30 jours. Les implications cliniques sont que la méthode présentée fournit un modèle fiable pour explorer davantage les origines de la perte auditive à basse fréquence qui peut être associée hydrops endolymphatiques.

La méthode présentée a employé une approche extradurale pour effacer le sac endolymphatique et blesser le conduit endolymphatique avec une pioche fine dans sept cobayes composées de deux mâles et cinq femelles. La durée moyenne de la chirurgie était de 2 heures de l’incision à la fermeture. Le temps total de forage variait de 5 à 10 minutes. Jusqu’à 4 heures ont été nécessaires pour que le cobaye émerge entièrement de l’anesthésie. Il n’y a pas eu de décès intra...

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A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Cet article démontre une approche extradurale pour effacer le sac endolymphatique de cobaye et blesser le conduit endolymphatique avec un pic fin afin d’induire des hydrops endolymphatiques expérimentaux.

Une approche chirurgicale révisée pour induire des hydrops endolymphatiques dans le cochon de Guinée

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

En utilisant cette procédure, les hydrops endolymphatiques peuvent être induits relativement rapidement chez les cobayes avec un taux de réussite adéquat. Le principal avantage de cette technique est que les hydrops endolymphatiques peuvent être induits avec un risque minimal de fuite de CSF ou de blessure au canal semi-circulaire postérieur. Après avoir confirmé un manque de réponse au réflexe de la pédale, injectez un bolus liquide sous-cutané de 12 millilitres de la solution lactée de Ringer à l’arrière du cobaye anesthésié et placez le cobaye en position supinée sur un coussin chauffant.Placez une aiguille papillon de calibre 27,5 confirmant intraperitoneally un placement correct par la présence d’air seulement dans la pointe de l’aiguille et placez le cobaye dans la position couchée. Fixez la tête dans un support stéréotaxique et fixez un oxymètre d’impulsion sur un pied non pigmenté. Utilisez une sonde rectale et une couverture chauffante pour maintenir la température corporelle à 38 degrés Celsius et appliquez de la pommade sur les yeux de l’animal.Placez un morceau de ruban masquant sur le dos pour fournir une tension adéquate le long de la peau en survolant l’occiput et fixer les extrémités de la bande au support stéréotaxique. Ensuite, préparer généreusement la peau en survolant l’occiput et le cou postérieur avec trois gommages consécutifs d’iode et 70% d’alcool et placer un drapé stérile sur l’animal. Commencez l’intervention chirurgicale en utilisant une lame numéro 15 pour faire une petite incision médiane le long de l’occiput postérieur s’étendant jusqu’au cou postérieur.Une fois sous la peau, utilisez des ciseaux d’iris pour détacher les muscles cervicaux postérieurs droit de l’os occipital, contrôlant tout saignement sous la pression d’une boule de coton stérile. À l’aide d’un microscope disséquant et d’une combinaison de bavures diamantées numéro trois, deux et un millimètres avec aspiration 5-0 et irrigation stérile, effectuez une craniectomy qui est délimitée jusqu’à la crête occipitale externe latéralement, crête lambdoidal supérieure, la ligne occipitomastoid de suture médiocrement, et la marge dorsale du magnum de foramen inférieur. Et utilisez une bavure en diamant de 0,5 millimètre pour skeletoner le sinus sigmoïde.Placez délicatement un petit morceau de coton salin humidifié sous l’os tout en séparant l’os occipital du dura. Retirez soigneusement l’os en survolant le sinus et utilisez une boule de coton pour rétracter doucement le sinus sigmoïde. Rétractez soigneusement le sinus sigmoïde et identifiez l’operculum comme une structure en forme de fente située dans l’os temporel de petrous.La partie extraosseous du sac endolymphatic peut être visualisée comme connexion sac-like claire entre l’operculum et le dura overlying le sinus sigmoïde. Appliquez une douce rétractation médiale sur le sinus sigmoïde pour visualiser clairement la partie extraosseuse du sac endolymphatique et augmenter la tension entre les parties extraosseous et intraosseous du sac. À l’aide d’une pioche à angle fin, éliminer délicatement la partie intermédiaire du sac endolymphatique et gratter largement une fine pioche à l’intérieur de l’operculum le long de l’intérieur de l’os.Il est essentiel au succès de cette procédure qu’aucun lien visible entre la dura et l’operculum ne subsiste. Utilisez une petite curette pour gratter le long de l’os temporal pour obtenir des copeaux d’os et emballer généreusement l’operculum avec les copeaux d’os. Sceller l’operculum avec de la cire osseuse en prenant soin qu’il n’y a pas d’excès de cire délogée dans le crâne et utiliser de la cire osseuse pour couvrir le défaut craniectomy.Puis se rapprocher des muscles cervicaux postérieurs avec 4-0 sutures absorbables tressées d’une manière interrompue et effectuer une fermeture à deux couches en rapprochant la couche profonde avec de simples sutures interrompues et la couche épidermique en utilisant une fermeture sous-cuticulaire avec une suture absorbable tressée 4-0. Dans cette expérience représentative, l’analyse histologique des os temporels a indiqué des hydrops endolymphatic dans tout la cochlée droite comparée à la cochlée gauche dans six des sept cobayes. La quantification de la zone transversale du média scala à chaque tour a indiqué que la zone transversale était généralement plus grande dans les oreilles des animaux qui ont survécu 30 jours après l’effacement du sac endolymphatique par rapport à celui observé chez les animaux témoins.Des seuils de forme d’onde superposés de nerf auditif ont été augmentés chez les animaux avec des hydrops endolymphatic démontrant la présence de la perte d’audition de basse fréquence tandis que la plupart des seuils cochléaires de potentiel d’action cochléaires à haute fréquence entre huit et 20 kilohertz étaient dans la gamme normale. Si la zone entre la dura et l’operculum est sèche après avoir effacé le sac, essayez de placer une rétractation supplémentaire sur le sinus sigmoïde pour vous assurer qu’il n’y a pas de connexion visible entre lui et l’operculum. À la suite de cette procédure, des études supplémentaires sur l’anatomie et la physiologie cochléaires peuvent être réalisées pour répondre à d’importantes questions de recherche sur les hydrops endolymphatiques.

Research

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Neuroscience

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Recherche

Neurosciences

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A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Une nouvelle approche qui élimine la manipulation pour l&#39;étude de l&#39;agression et le «perdant» dans Effet<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

Une approche Simple pour induire une névrite auto-immune expérimentale chez la souris C57BL/6 pour les évaluations fonctionnelles et neuropathologiques

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

Une autre approche pour étudier les événements primaires dans la neurodégénérescence utilisant des coupes de cerveau de Rat Ex Vivo

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

Une approche benchtop à l’ouverture spécifique de barrière de cerveau de sang d’emplacement utilisant l’ultrason focal dans un modèle de rat

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Combiner le comportement et l’EEG pour étudier les effets de la méditation de pleine conscience sur la mémoire épisodique

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Extraction et dissection du cerveau de porc domestiqué

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Injection unique pré-chiasmatique de sang autologue pour induire une hémorragie sous-arachnoïdienne expérimentale chez un rat

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...