Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Wir danken Shannon M. Lefler für die Unterstützung bei den Zahlen und dem Tisch der Materialien. Die in dieser Publikation berichtete Forschung wurde vom National Institute of Deafness and Other Communication Disorders innerhalb der National Institutes of Health durch das Ausbildungsstipendium "Development of Clinician/Researchers in Academic ENT" mit der Vergabenummer T32DC000022 (C.V.V.) und von R01 DC014997 (J.T.L.) unterstützt. Der Inhalt liegt allein in der Verantwortung der Autoren und stellt nicht unbedingt die offizielle Meinung der National Institutes of Health dar.

Alle unmittelbar unten im Abschnitt Protokoll aufgeführten Verfahren wurden wie in Protokollen beschrieben durchgeführt, die von der Washington University im St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee genehmigt wurden.
1. Anästhesie induktion und Überwachung von Vitalzeichen
HINWEIS: Diese Studie verwendete pigmentierte NIH-Stamm-Meerschweinchen, die aus einer hauseigenen Zuchtkolonie gewonnen wurden.
<ol><li>Verwenden Sie Meerschwe...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

Die vorgestellte extradurale Methode hatte eine Erfolgsrate von 86% bei der Erreichung histologisch bestätigter endolymphatischer Hydrops und niederfrequenter Hörverluste. Die Methode erreichte zuverlässig histologischen Nachweis der endolymphatischen Hydrops bis zum postoperativen Tag 30, im Einklang mit früheren Studien, die einen intraduralen Ansatz2verwendeten. Die Bedeutung der Methode im Vergleich zu bestehenden Methoden besteht darin, dass kein CSF-Leck erforderlich ist, wodurch eine po...

Endolymphatic hydrops ist eine Erweiterung der scala-Medien. Das Vorhandensein von endolymphatischen Hydrops kann mit dem Querschnittsbereich von Scala-Medien gemessen werden. Es wird angenommen, dass klinische endolymphatische Hydrops mit niederfrequenten sensorischen Hörverlust in Verbindung gebracht werden können, wie bei Meniere-Krankheit gesehen. Die Herkunft(en) des Hörverlusts bleibt jedoch unklar. Um die Ursprünge des niederfrequenten Hörverlusts im Zusammenhang mit endolymphatischen Hydrops angemessen zu untersuchen, ist ein zuverlässiges Modell erforderlich.
1965 beschrieben Kimura und Schuknecht, wie man endolymphatische Hydrops im Meerschweinchen mit einem intraduralen Ansatz induzieren kann1. Ihre Technik beinhaltete die Verwendung eines hinteren Cranial Fossa-Ansatzes, um auf das Operculum zuzugreifen und Fossa zu subarcuate. Die Schritte beinhalteten das Einschneiden von Dura, das Zurückziehen des Kleinhirns mit einem Ringer-Lösung getränkt E-Wattepad, und Bohren über den Endolymphatic Kanal und den Zwischenteil des endolymphatischen Sack. Knochenwachs wurde dann in das Operculum gelegt, um den endolymphatischen Kanal vom distalen Endolymphatischen Sack zu trennen. Der Craniotomie-Defekt wurde durch die Platzierung von resorbierbarem Gelatinpulver (z.B. Gelschaum) und die Neuanadierung der darüber liegenden Muskeln geschlossen. Histologische Beweise für endolymphatische Hydrops wurden an den postoperativen Tagen 1, 3, 7, 14, 21 und 30 konsequent gefunden, was zeigt, dass der intradurale Ansatz eine zuverlässige Methode war, histologisch-bestätigte Endolymphatic Hydrops zu induzieren. Mit dem gleichen intraduralen Ansatz wie Kimura und Schuknecht, aber mit unterschiedlichen Zeitpunkten, bestätigten Salt und DeMott, dass die scala-Medien in der zweiten Runde der Cochlea an Tag 4 unddarüberhinaus signifikant vergrößert wurden. Während die tatsächliche Morbidität der Induktion eines Zerebrospinalflüssigkeitslecks (CSF) mit Kimura und Schuknechts intraduralem Ansatz in der ursprünglichen Studie nicht berichtet wurde, könnte das Vorhandensein eines CSF-Lecks das Risiko einer Meningitis erhöhen. Es wurde vermutet, dass der Verlust von CSF zu einem Abfluss von Perilymphe führen könnte, was zu einer gleichzeitigen vorübergehenden Ausdehnung des endolymphatischen Volumens im Meerschweinchen3führen könnte. Ein extraduraler Ansatz zur Induktion von endolymphatischen Hydrops wäre eine sicherere Option.
1989 beschrieben Andrews und Bohmer zwei extradurale chirurgische Ansätze, um den endolymphatischen Sack und Kanal zu erreichen, entweder über einen mittleren Schädelfossa-Ansatz oder einen hinteren Cranial-Fossa-Ansatz, um den endolymphatischen Sack4auszulöschen. Sie beschrieben, wie das Operculum mit einem Diamantbohrer entfernt wird und dann entweder den Zwischenteil des Endolymphatic-Sacs abbohrt oder mit einer feinen Pick den Endolymphatischen Sack und den Kanal gestört wird. 1993 beschrieben Lee, Wright und Meyerhoff einen ähnlichen Ansatz, der Bohrungen durch den endolymphatischen Sack und Kanal beinhaltete, sich aber dadurch unterschied, dass sie gleichzeitig das Cochlea-Aquädukt5behinderten. Sie zeigten das Vorhandensein von endolymphatischen Hydrops, wie durch Histologie beurteilt, vier Wochen nach dem Auslöschen des Endolymphatischen Sacks und der Behinderung des Cochlea-Aquädukts. Megerian et al. war der erste, der einen Videoartikel veröffentlichte, der eine aussatorische Auslöschung des endolymphatischen Sacks und Kanals zeigte, der Bohrungen direkt auf den medialen Teil des Operculums beinhaltete, um in den endolymphatischen Sack und Kanal6einzutreten. Sie zeigten histologische Beweise für endolymphatische Hydrops in einem Meerschweinchen, das 28 Wochen nach der Operation geopfert wurde, sowie Hörverlust im 16-kHz-Bereich6. Ob es möglich war, histologisch bestätigte endolymphatische Hydrops und niederfrequenten Hörverlust zu einem frühen Zeitpunkt mit extraduralen Ansätzen zu induzieren, war nicht bekannt.
Das übergeordnete Ziel dieses Berichts ist es, einen außerduralen Ansatz zu demonstrieren, um experimentelle endolymphatische Hydrops nach 30 Tagen postoperativ zu induzieren, indem der endolymphatische Sack ausgelöscht und der Endolymphatic-Kanal mit einem feinen Pick verletzt wird. Die Begründung für die Verwendung dieser Technik ist der Vorteil, die Notwendigkeit zu vermeiden, auf den petrous temporalen Knochen zu bohren, wodurch das Risiko einer versehentlichen Verletzung der Dura und verursacht ein CSF Leck, die Verringerung der Möglichkeit der Verletzung der hinteren halbkreisförmigen Kanal, und verringerung des Risikos der Verletzung der Sigmoid Sinus.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Endolymphatic hydrops ist eine Erweiterung von scala Medien, die am häufigsten mit Meniere-Krankheit verbunden ist, obwohl die pathophysiologischen Mechanismus(e) unklar bleiben. Um die Eigenschaften von endolymphatischen Hydrops, wie z. B. die Ursprünge von niederfrequenten Hörverlusten, angemessen zu untersuchen, ist ein zuverlässiges Modell erforderlich. Das Meerschweinchen ist ein gutes Modell, weil es in den niederfrequenten Regionen hört, die angeblich von endolymphatischen Hydrops betroffen sind. Frühere Forschungen haben gezeigt, dass endolymphatische Hydrops chirurgisch über intradurale oder extradurale Ansätze induziert werden können, die Bohrungen auf dem Endolymphatischen Kanal und Sack beinhalten. Ob es jedoch möglich war, ein endolymphatisches Hydrops-Modell mit einem extraduralen Ansatz zu erstellen, der gefährliche Bohrungen auf dem Endolymphatic-Kanal und Sac verhinderte, war nicht bekannt. Das Ziel dieser Studie war es, einen überarbeiteten extraduralen Ansatz zu demonstrieren, um experimentelle endolymphatische Hydrops nach 30 Tagen postoperativ zu induzieren, indem der endolymphatische Sack ausgelöscht und der Endolymphatic-Kanal mit einem feinen Pick verletzt wurde. Der Stichprobenumfang bestand aus sieben Meerschweinchen. Funktionelle Messungen des Hörens wurden durchgeführt und zeitliche Knochen wurden anschließend für die histologische Analyse geerntet. Der Ansatz hatte eine Erfolgsquote von 86% bei der Erreichung endolymphatic hydrops. Das Risiko eines Austritts von Zerebrospinalflüssigkeit war minimal. In der Probe traten keine perioperativen Todesfälle oder Verletzungen des hinteren halbkreisförmigen Kanals auf. Die vorgestellte Methode zeigt einen sicheren und zuverlässigen Weg, um endolymphatische Hydrops zu einem relativ schnellen Zeitpunkt von 30 Tagen zu induzieren. Die klinischen Implikationen sind, dass die vorgestellte Methode ein zuverlässiges Modell bietet, um die Ursprünge von niederfrequenten Hörverlusten, die mit endolymphatischen Hydrops assoziiert werden können, weiter zu erforschen.

Die vorgestellte Methode nutzte einen extraduralen Ansatz, um den endolymphatischen Sack auszulöschen und den Endolymphatic-Kanal mit einem feinen Pick in sieben Meerschweinchen, bestehend aus zwei Männchen und fünf Weibchen, zu verletzen. Die durchschnittliche Dauer der Operation betrug 2 Stunden vom Einschnitt bis zum Abschluss. Die Gesamtbohrzeit reichte von 5-10 Minuten. Bis zu 4 Stunden war nötig, damit das Meerschweinchen vollständig aus der Anästhesie hervorging. Es gab keine...

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A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Dieser Artikel zeigt einen außerduralen Ansatz, um den Meerschweinchen-Endolymphatic-Sac auszulöschen und den endolymphatischen Kanal mit einem feinen Pick zu verletzen, um experimentelle endolymphatische Hydrops zu induzieren.

Ein überarbeiteter chirurgischer Ansatz zur Induzieren von endolymphatischen Hydrops im Meerschweinchen

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Mit diesem Verfahren können endolymphatische Hydrops relativ schnell bei Meerschweinchen mit einer angemessenen Erfolgsrate induziert werden. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass endolymphatische Hydrops mit minimalem Risiko für CSF-Leck oder Verletzungen des hinteren halbkreisförmigen Kanals induziert werden können. Nach Bestätigung eines Mangels an Reaktion auf Pedalreflex, injizieren Sie einen 12 Milliliter subkutanen Flüssigkeitsbolus von laktierter Ringerlösung in den Rücken des anästhesierten Meerschweinchens und legen Sie das Meerschweinchen in die Rückenlage auf ein wärmendes Pad.Legen Sie eine 27,5 Gauge Schmetterlingsnadel intraperitoneally bestätigen eine korrekte Platzierung durch das Vorhandensein von Luft nur innerhalb der Nadelspitze und legen Sie das Meerschweinchen in die anfällige Position. Sichern Sie den Kopf in einem stereotaktischen Halter und sichern Sie ein Pulsoximeter auf einem unpigmentierten Fuß. Verwenden Sie eine rektale Sonde und eine wärmende Decke, um die Körpertemperatur bei 38 Grad Celsius zu halten und Salbe auf die Augen des Tieres aufzutragen.Legen Sie ein Stück Klebeband über den Rücken, um eine ausreichende Spannung entlang der Haut über dem Okziput zu bieten und fixieren Sie die Enden des Bandes an der stereotaktischen Halterung. Dann die Haut, die den Okziput und den hinteren Hals überlagert, mit drei aufeinanderfolgenden Jodpeelings und 70% Alkohol großzügig präparieren und einen sterilen Drapieren über das Tier legen. Beginnen Sie den chirurgischen Eingriff mit einer Klinge der Zahl 15, um einen kleinen Mittellinienschnitt entlang des hinteren Okziputs zu machen, der sich bis zum hinteren Hals erstreckt.Einmal unter der Haut, verwenden Sie Irisschere, um die rechten hinteren Zervixmuskeln vom okzipitalen Knochen zu lösen, jede Blutung mit Druck von einem sterilen Baumwollball zu kontrollieren. Führen Sie mit einem Sezierendes Mikroskop und einer Kombination aus einer Nummer drei, zwei und einem Millimeter Diamantgrate mit einer 5-0-Saug- und sterilen Bewässerung eine Kraniektomie durch, die seitlich bis zum äußeren okzipitalen Kamm, Lambdoidalgrat, der okiptitomastoiden Nahtlinie medial und der dorsale Rand des Foramens begrenzt ist. Und verwenden Sie einen 0,5-Millimeter-Diamantgrat, um den Sigmoid-Sinus zu skelettieren.Legen Sie vorsichtig ein kleines Stück saline befeuchtete Baumwolle unter den Knochen, während Sie den okzipitalen Knochen von der Dura trennen. Entfernen Sie vorsichtig den Knochen, der den Sinus überlagert, und verwenden Sie eine Baumwollkugel, um den Sigmoid-Sinus vorsichtig zwischendurch zurückzuziehen. Ziehen Sie den Sigmoidsinus vorsichtig zurück und identifizieren Sie das Operculum als eine spaltartige Struktur, die sich innerhalb des petrous temporalen Knochens befindet.Der extraosseartige Teil des Endolymphatischen Sacks kann als eine klare, sackartige Verbindung zwischen dem Operculum und dem Dura über dem Sigmoidsinus visualisiert werden. Wenden Sie sanfte mediale Retraktion auf die Sigmoid-Sinus an, um den extraosseösen Teil des endolymphatischen Sacks klar zu visualisieren und die Spannung zwischen den extraosseösen und intraosseösen Teilen des Sacks zu erhöhen. Mit einem feinen abgewinkelten Pick, vorsichtig den Zwischenteil des endolymphatischen Sacks ausheben und einen feinen Pick im Inneren des Operculums entlang der Innenseite des Knochens breit kratzen.Für den Erfolg dieses Verfahrens ist entscheidend, dass keine sichtbare Verbindung zwischen Dura und Operculum bestehen bleibt. Verwenden Sie eine kleine Kurette, um entlang des temporalen Knochens zu kratzen, um Knochenchips zu erhalten und das Operculum großzügig mit den Knochenchips zu verpacken. Versiegeln Sie das Operculum mit Knochenwachs und achten Sie darauf, dass kein überschüssiges Wachs in den Schädel entfernt wird, und verwenden Sie Knochenwachs, um den Bruch der Kraniektomie zu bedecken.Dann nähern Sie sich die hinteren Zervixmuskeln mit 4-0 geflochtenen resorbierbaren Nähten in einer unterbrochenen Weise und führen Sie einen zweilagigen Verschluss durch Annäherung der tiefen Schicht mit einfachen unterbrochenen Nähten und die epidermale Schicht mit einem subcuticularen Verschluss mit einer 4-0 geflochtenen resorbierbaren Naht. In diesem repräsentativen Experiment ergab die histologische Analyse der temporalen Knochen endolymphatische Hydrops in der rechten Cochlea im Vergleich zur linken Cochlea bei sechs von sieben Meerschweinchen. Die Quantifizierung des Querschnittsbereichs der Scala-Medien in jeder Kurve zeigte, dass der Querschnittsbereich in den Ohren von Tieren, die 30 Tage nach der Auslöschung des Endolymphatischen Sacks überlebten, im Vergleich zu dem bei Kontrolltieren beobachteten bereichgrößten Bereich im Allgemeinen größer war.Auditory Nerv überlappende Wellenform Schwellen wurden bei Tieren mit endolymphatischen Hydrops, die das Vorhandensein von niederfrequenten Hörverlust gezeigt, während die meisten hochfrequenten Cochlea-Verbindung Aktion Potenzialschwellen zwischen acht und 20 Kilohertz waren innerhalb des normalen Bereichs erhöht. Wenn der Bereich zwischen Dura und Operculum nach dem Auslöschen des Sacks trocken ist, versuchen Sie, zusätzliche sezernende Weise auf den Sigmoid-Sinus zu legen, um sicherzustellen, dass es keine sichtbare Verbindung zwischen ihm und dem Operculum gibt. Im Anschluss an dieses Verfahren können zusätzliche Studien zur Cochlea-Anatomie und Physiologie durchgeführt werden, um wichtige Forschungsfragen zu endolymphatischen Hydrops zu beantworten.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Rapid Approach to High-Resolution Fluorescence Imaging in Semi-Thick Brain Slices

Eine schnelle Annäherung an High-Resolution Fluoreszenz-Imaging in Semi-Thick Hirnschnitten

A fundamental goal to both basic and clinical neuroscience is to better understand the identities, molecular makeup, and patterns of connectivity that are ...

Forschung

Neurowissenschaften

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

Mit einem vergleichenden Arten Ansatz zur Neurobiologie der väterlichen Responses Untersuchen

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Schnelle Micro-Iontophorese von Glutamat und GABA: Ein nützliches Tool, um Synaptic Integration Untersuchen

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Ein neuer Ansatz, die Handhabung für ein Studium Aggression Eliminiert und die &quot;Loser&quot; Effect in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

Ein einfacher Ansatz, experimentelle Autoimmune Neuritis bei C57BL/6 Mäusen für funktionale und neuropathologische Bewertungen zu induzieren

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

Ein alternativer Ansatz zur primären Ereignissen in Neurodegeneration mit Ex Vivo Ratte Gehirnscheiben studieren

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

Ein Benchtop-Ansatz zur standortspezifischen Blut-Hirn-Barriere-Öffnung mit fokussiertem Ultraschall in einem Rattenmodell

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Kombination von Verhalten und EEG, um die Auswirkungen von Achtsamkeitsmeditation auf das episodische Gedächtnis zu untersuchen

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Extraktion und Zerlegung des domestizierenden Schweinehirns

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Prächiasmatische, einmalige Injektion von Eigenblut zur Induktion einer experimentellen Subarachnoidalblutung in einem Rattenmodell

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...