Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Vi takker Shannon M. Lefler for hjelp med tall og Table of Materials. Forskning rapportert i denne publikasjonen ble støttet av National Institute of Døvhet og andre kommunikasjonsforstyrrelser i National Institutes of Health, gjennom "Utvikling av kliniker / forskere i akademisk ENT" opplæring stipend, prisnummer T32DC000022 (C.V.V.) og av R01 DC014997 (J.T.L). Innholdet er utelukkende forfatternes ansvar og representerer ikke nødvendigvis de offisielle synspunktene til National Institutes of Health.

Alle prosedyrer som er oppført nedenfor i protokollseksjonen ble utført som beskrevet i protokoller godkjent av Washington University i St. Louis Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Bedøvelse induksjon og overvåking av vitale tegn
MERK: Denne studien brukte pigmenterte NIH-stamme marsvin hentet fra en in-house avlskoloni.
<ol><li>Bruk marsvin av begge kjønn, veier minst 350 g.</li>
	<li>Plasser marsvinet i en neonatal oppvarming i...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

Den presenterte ekstradurale metoden hadde en suksessrate på 86% i å oppnå histologisk bekreftet endolymphatic hydrops og lavfrekvent hørselstap. Metoden oppnådde pålitelig histologisk bevis på endostatiske hydropper etter postoperativ dag 30, i samsvar med tidligere studier som brukte en intradural tilnærming2. Betydningen av metoden med hensyn til eksisterende metoder er at en CSF-lekkasje ikke er nødvendig, og dermed fjerne en potensiell forvirrende variabel som har blitt foreslått å...

Endolymphatic hydrops er en utvidelse av scala media. Tilstedeværelsen av endolymphatic hydrops kan måles ved hjelp av tverrsnittsområdet av scala media. Det antas at kliniske endolymphatic hydrops kan være forbundet med lavfrekvent sensorineuralt hørselstap, slik som det sett i Menieres sykdom. Men opprinnelsen(e) av hørselstapet er fortsatt uklart. For å tilstrekkelig studere opprinnelsen til lavfrekvente hørselstap forbundet med endolymphatic hydrops, er det nødvendig med en pålitelig modell.
I 1965 beskrev Kimura og Schuknecht hvordan man induserer endolymphatic hydrops i marsvin ved hjelp av en intradural tilnærming1. Deres teknikk involverte å bruke en bakre kranial fossa tilnærming for å få tilgang til operculum og subarcuate fossa. Trinnene innebar å øke dura, trekke tilbake lillehjernen med en Ringers løsning gjennomvåt bomullsdott, og bore over den endolymphatic kanalen og den mellomliggende delen av endolymphatic sac. Benvoks ble deretter plassert i operculum for å skille endolymphatic kanalen fra distal endolymphatic sac. Kraniotomidefekten ble lukket ved å plassere absorberbart gelatinpulver (f.eks. Gelfoam) og reapproksimatere de overliggende musklene. Histologiske bevis på endolymphatic hydrops ble konsekvent funnet på postoperative dager 1, 3, 7, 14, 21 og 30, viser at intradural tilnærming var en pålitelig metode for å indusere histologisk bekreftet endolymphatic hydrops. Ved hjelp av samme intradural tilnærming som Kimura og Schuknecht, men med forskjellige tidspunkter bekreftet Salt og DeMott at skalarmedia i andre sving av sneglehuset ble betydelig forstørret på dag 4 og utover2. Mens den faktiske sykeligheten av å indusere en cerebrospinalvæske (CSF) lekkasje ved hjelp av Kimura og Schuknechts intradural tilnærming ikke ble rapportert i den opprinnelige studien, kan tilstedeværelsen av en CSF-lekkasje øke risikoen for meningitt. Det har blitt foreslått at tap av CSF kan føre til en utstrømning av perilymph, noe som resulterer i en samtidig midlertidig utvidelse av endolymphatic volum i marsvin3. En ekstradural tilnærming til å indusere endolymphatic hydrops ville være et tryggere alternativ.
I 1989 beskrev Andrews og Bohmer to utenomjordiske kirurgiske tilnærminger for å nå endolymphatic sac og kanal, via enten en mellomkranial fossa tilnærming eller bakre kranial fossa tilnærming, å utslette endolymphatic sac4. De beskrev fjerning av operculum med en diamant drill, og deretter enten bore av den mellomliggende delen av endolymphatic sac eller bruke en fin plukke for å forstyrre endolymphatic sac og kanal. I 1993 beskrev Lee, Wright og Meyerhoff en lignende tilnærming, som inkluderte boring gjennom endolymphatic sac og kanal, men skilte seg ved at de også samtidig hindret cochlea akvedukten5. De demonstrerte tilstedeværelsen av endolymphatic hydrops, som vurdert via histologi, fire uker etter å ha endolymphatic sac og hindrer cochlea akvedukten. Megerian et al. var den første til å publisere en videoartikkel som viste en utenomjordisk utslettelse av endolymphatic sac og kanal som involverte boring direkte på den mediale delen av operculum å gå inn i endolymphatic sac og kanal6. De demonstrerte histologiske bevis på endolymphatic hydrops i en marsvin ofret på 28 uker etter operasjonen, samt hørselstap i 16 kHz regionen6. Om det var mulig å indusere histologisk bekreftet endolymphatic hydrops og lavfrekvente hørselstap på et tidlig tidspunkt ved hjelp av ekstradural tilnærminger var ukjent.
Det overordnede målet med denne rapporten er å demonstrere en ekstradural tilnærming til å indusere eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dager postoperativt ved å utslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanal med en fin plukke. Begrunnelsen bak bruken av denne teknikken er fordelen med å unngå behovet for å bore på petrous temporal bein, og dermed fjerne risikoen for å skade duraen ved et uhell og forårsake en CSF-lekkasje, noe som reduserer muligheten for å skade den bakre halvsirkelformede kanalen, og redusere risikoen for skade på sigmoid sinus.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Endolymphatic hydrops er en utvidelse av scala media som oftest er forbundet med Menieres sykdom, selv om patofysiologiske mekanisme(er) forblir uklar. For å tilstrekkelig studere egenskapene til endolymphatic hydrops, for eksempel opprinnelsen til lavfrekvente hørselstap, er det nødvendig med en pålitelig modell. Marsvinet er en god modell fordi den hører i lavfrekvente regioner som er antatt påvirket av endolymphatic hydrops. Tidligere forskning har vist at endolymphatic hydrops kan induseres kirurgisk via intradural eller ekstradural tilnærminger som involverer boring på endolymphatic kanal og sac. Men om det var mulig å lage en endolymphatic hydrops modell ved hjelp av en ekstradural tilnærming som unngikk farlig boring på endolymphatic kanal og sac var ukjent. Målet med denne studien var å demonstrere en revidert ekstradural tilnærming til å indusere eksperimentelle endolymphatic hydrops på 30 dager postoperativt ved å utslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanal med en fin plukke. Prøvestørrelsen besto av syv marsvin. Funksjonelle målinger av hørsel ble gjort og temporale bein ble senere høstet for histologic analyse. Tilnærmingen hadde en suksessrate på 86% i å oppnå endolymphatic hydrops. Risikoen for cerebrospinalvæskelekkasje var minimal. Ingen perioperative dødsfall eller skader på den bakre halvsirkelformede kanalen skjedde i prøven. Den presenterte metoden viser en sikker og pålitelig måte å indusere endolymphatic hydrops på et relativt raskt tidspunkt på 30 dager. De kliniske implikasjonene er at den presenterte metoden gir en pålitelig modell for å utforske opprinnelsen til lavfrekvente hørselstap som kan knyttes endolymphatic hydrops.

Den presenterte metoden brukte en ekstradural tilnærming til å utslette endolymphatic sac og skade endolymphatic kanal med en fin plukke i syv marsvin bestående av to menn og fem kvinner. Gjennomsnittlig varighet av operasjonen var 2 timer fra snitt til nedleggelse. Den totale boretiden varierte fra 5-10 minutter. Opptil 4 timer var nødvendig for marsvin å fullt ut dukke opp fra anestesi. Det var ingen intraoperative eller postoperative dødsfall i prøven. Det var ingen skader på d...

Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Denne artikkelen viser en ekstradural tilnærming til å utslette marsvin endolymphatic sac og skade endolymphatic kanal med en fin plukke for å indusere eksperimentelle endolymphatic hydrops.

En revidert kirurgisk tilnærming til indusere endolymphatic hydrops i Marsvin

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Ved hjelp av denne prosedyren kan endolymphatic hydrops induseres relativt raskt hos marsvin med en tilstrekkelig suksessrate. Den største fordelen med denne teknikken er at endolymphatic hydrops kan induseres med minimal risiko for CSF lekkasje eller skade på bakre halvsirkelformet kanal. Etter å ha bekreftet mangel på respons på pedalrefleks, injisere en 12 milliliter subkutan væske bolus av laktated Ringer løsning på baksiden av bedøvet marsvin og plassere marsvin i liggende stilling på en oppvarming pad.Plasser en 27,5 gauge butterfly nål intraperitoneally bekrefter en riktig plassering ved tilstedeværelse av luft bare innenfor nålespissen og plasser marsvin i utsatt stilling. Fest hodet i en stereotaktisk holder og fest et pulsoksymeter på en uovertrmt fot. Bruk en rektal sonde og et varmeteppe for å opprettholde kroppstemperaturen ved 38 grader Celsius og påfør salve på dyrets øyne.Plasser et stykke maskeringstape over ryggen for å gi tilstrekkelig spenning langs huden som overlying av nakkestøtten og fest endene av båndet til den stereotaktiske holderen. Deretter liberalt forberede huden overlying nakke og bakre nakke med tre påfølgende jod scrubs og 70% alkohol og plassere en steril drapering over dyret. Start den kirurgiske prosedyren ved hjelp av et nummer 15 blad for å lage et lite midtlinjet snitt langs den bakre nakkespennen som strekker seg ned til den bakre halsen.En gang under huden, bruk iris saks for å løsne høyre bakre cervical muskler fra occipital bein, kontrollere eventuelle blødninger med trykk fra en steril bomullsdott. Ved hjelp av et dissekeringmikroskop og en kombinasjon av en nummer tre, to og en millimeter diamantgrader med en 5-0 suge- og steril vanning, utfør en kraniektomi som er avgrenset så langt som den eksterne occipital crest lateralt, lambdoidal ridge overlegent, occipitomastoid sugelinje medially, og dorsal margin av foramen magnum dårligere. Og bruk en 0,5 millimeter diamantgrad for å skjelettisere sigmoid sinus.Legg forsiktig et lite stykke saltvann fuktet bomull under beinet mens du skiller occipital beinet fra dura. Fjern forsiktig beinet over sinus og bruk en bomullsdott til å forsiktig trekke tilbake sigmoid sinus medially. Trekk forsiktig tilbake sigmoid sinus og identifiser operculum som en spaltelignende struktur som ligger innenfor petrous temporalbenet.Den ekstraosseøse delen av den endolymphatic sac kan visualiseres som en klar sac-lignende forbindelse mellom operculum og dura overlying sigmoid sinus. Påfør mild medial tilbaketrekking til sigmoid sinus for å tydelig visualisere den ekstraosseøse delen av den endolymphatic sac og øke spenningen mellom de ekstraosseøse og intravenøse delene av sac. Bruk en fin vinklet plukking, forsiktig expunge den mellomliggende delen av endolymphatic sac og bredt skrape en fin plukke inne i operculum langs innsiden av beinet.Det er avgjørende for suksessen til denne prosedyren at ingen synlig forbindelse mellom dura og operculum forblir. Bruk en liten curette til å skrape langs det timelige beinet for å oppnå beinchips og sjenerøst pakke operculum med beinchips. Forsegle operculum med beinvoks, vær forsiktig med at det ikke er overflødig voks løsnet i skallen og bruk beinvoks for å dekke kraniektomidefekten.Deretter omtrentlig bakre cervical muskler med 4-0 flettet absorberbare suturer på en avbrutt måte og utføre en to-lags lukking ved å tilnærme det dype laget med enkle avbrutte suturer og epidermal lag ved hjelp av en subcuticular nedleggelse med en 4-0 flettet absorberbar sutur. I dette representative eksperimentet avslørte histologisk analyse av de timelige beinene endolymphatic hydrops gjennom høyre cochlea sammenlignet med venstre sneglehuset i seks av syv marsvin. Kvantifisering av tverrsnittsområdet av scalamediene over hver sving indikerte at tverrsnittsområdet generelt var større i ørene til dyr som overlevde 30 dager etter utslettelse av endolymphatic sac sammenlignet med det som ble observert i kontrolldyr.Auditiv nerve overlappet bølgeform terskler ble økt hos dyr med endolymphatic hydrops som viser tilstedeværelsen av lavfrekvent hørselstap mens de fleste høyfrekvente cochlea sammensatte virkning potensielle terskler mellom åtte og 20 kilohertz var innenfor normalområdet. Hvis området mellom dura og operculum er tørt etter expunging sac, prøv å plassere ekstra tilbaketrekking på sigmoid sinus for å sikre at det ikke er noen synlig forbindelse mellom den og operculum. Etter denne prosedyren kan ytterligere studier på cochleaanatomi og fysiologi utføres for å løse viktige forskningsspørsmål om endolymphatic hydrops.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Rapid Approach to High-Resolution Fluorescence Imaging in Semi-Thick Brain Slices

A fundamental goal to both basic and clinical neuroscience is to better understand the identities, molecular makeup, and patterns of connectivity that are ...

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Fast Micro-iontoforese av glutamat og GABA: Et nyttig verktøy for å etterforske Synaptic Integration

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

En ny tilnærming som eliminerer Håndtering for Studerer Aggresjon og &quot;Loser&quot; Effect i<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

En enkel tilnærming til å indusere eksperimentelle Autoimmune nevritt i C57BL/6 mus for funksjonell og Neuropathological vurderinger

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

En alternativ tilnærming til studere primære hendelser i Neurodegeneration bruker Ex Vivo rotte hjernen skiver

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En benchtop tilnærming til plasseringen spesifikke blod hjernebarriere åpning ved hjelp av fokusert ultralyd i en rotte modell

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Kombinere atferd og EEG for å studere effekten av mindfulness meditasjon på episodisk minne

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Ekstraksjon og disseksjon av den tamme grishjernen

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Pre-chiasmatisk, enkelt injeksjon av autologt blod for å indusere eksperimentell subaraknoid blødning i en rottemodell

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...