Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Agradecemos a Shannon M. Lefler pela ajuda com os números e a Tabela de Materiais. A pesquisa relatada nesta publicação contou com o apoio do Instituto Nacional de Surdez e Outros Transtornos da Comunicação dos Institutos Nacionais de Saúde, por meio da bolsa de formação "Desenvolvimento de Clínico/Pesquisadores em Ent Acadêmico", prêmio número T32DC000022 (C.V.V.) e R01 DC014997 (J.T.L). O conteúdo é de responsabilidade exclusiva dos autores e não representa necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde.

Todos os procedimentos listados imediatamente abaixo na seção Protocolo foram conduzidos conforme descrito nos protocolos aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Washington em St. Louis.
1. Indução anestésico e monitoramento de sinais vitais
NOTA: Este estudo utilizou cobaias pigmentadas de CEPA NIH obtidas de uma colônia de reprodução interna.
<ol><li>Use cobaias de ambos os sexos, pesando pelo...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

O método extradural apresentado teve uma taxa de sucesso de 86% na obtenção de hidrops endoglifáticos histologicamente confirmados e perda auditiva de baixa frequência. O método alcançou de forma confiável evidências histológicas de hidrops endoglifáticos até o dia 30 pós-operatório, consistente com estudos anteriores que utilizaram uma abordagem intradural2. A significância do método em relação aos métodos existentes é que não é necessário um vazamento de CSF, removendo ass...

Hidrops endoglicêmicos é um alargamento da mídia scala. A presença de hidrops endoglifáticos pode ser medida utilizando-se a área transversal da mídia scala. Acredita-se que hidrops endoglifáticos clínicos podem estar associados à perda auditiva sensorial de baixa frequência, como a vista na doença de Meniere. Mas a origem da perda auditiva ainda não está clara. Para estudar adequadamente as origens da perda auditiva de baixa frequência associada aos hidrops endoglifáticos, é necessário um modelo confiável.
Em 1965, Kimura e Schuknecht descreveram como induzir hidrops endolímfaticos na cobaia usando uma abordagem intradural1. Sua técnica envolveu o uso de uma abordagem fossa craniana posterior para acessar o operculum e fossa subarcuada. As etapas envolveram a incisiva da dura, retraindo o cerebelo com uma solução de Ringer embebido em algodão, e perfuração através do ducto endoglifático e da porção intermediária do saco endoglifático. A cera óssea foi então colocada no operculum para separar o ducto endoglifático do sac endoglicêtico distal. O defeito da craniotomia foi fechado colocando gelatina absorvível em pó (por exemplo, Gelfoam) e reaproximando os músculos sobrelados. Evidências histológicas de hidrops endoglifáticos foram consistentemente encontradas nos dias pós-operatórios 1, 3, 7, 14, 21 e 30, demonstrando que a abordagem intradural era um método confiável para induzir hidrops endoglifáticos histologicamente confirmados. Usando a mesma abordagem intradural que Kimura e Schuknecht, mas com diferentes pontos de tempo, Salt e DeMott confirmaram que a mídia scala na segunda volta da cóclea foi significativamente ampliada no dia 4 e alémde 2. Embora a morbidade real de induzir um vazamento de fluido cefalorraquidiano (CSF) usando a abordagem intradural de Kimura e Schuknecht não tenha sido relatada no estudo original, a presença de um vazamento de CSF poderia aumentar o risco de meningite. Foi sugerido que a perda de CSF poderia levar a uma saída de perilímph, resultando em uma expansão temporária simultânea do volume endoglifático na cobaia3. Uma abordagem extradural para induzir hidrops endoglifáticos seria uma opção mais segura.
Em 1989, Andrews e Bohmer descreveram duas abordagens cirúrgicas extradural para alcançar o sac e ducto endoglifático, através de uma abordagem fossa craniana média ou abordagem fossa craniana posterior, para obliterar o sac endoglicêtico4. Eles descreveram a remoção do operculum com uma broca de diamante, e, em seguida, perfurando a porção intermediária do sac endoglicêtico ou usando uma picareta fina para interromper o sac endoglifático e o ducto. Em 1993, Lee, Wright e Meyerhoff descreveram uma abordagem semelhante, que incluía perfuração através do sac e ducto endolítico, mas diferia na qual eles também simultaneamente obstruíram o aqueduto coclear5. Eles demonstraram a presença de hidrops endoglifáticos, conforme avaliado via histologia, quatro semanas após obliterar o sac endolítico e obstruir o aqueduto coclear. Megerian et al. foram os primeiros a publicar um artigo em vídeo demonstrando uma obliteração extradural do sac e ducto endoglicêtico que envolvia perfuração diretamente na porção medial do operculum para entrar no sac e ducto endoglicêtico6. Eles demonstraram evidências histológicas de hidrops endoglifáticos em uma cobaia sacrificada às 28 semanas após a cirurgia, bem como perda auditiva na região de 16 kHz6. Não se sabe se era possível induzir hidrops endoglifáticos histologicamente confirmados e perda auditiva de baixa frequência em um momento inicial usando abordagens extradural.
O objetivo geral deste relatório é demonstrar uma abordagem extradural para induzir hidrops endoglifáticos experimentais a 30 dias após obstruindo o sac endoglifático e ferindo o ducto endoglimático com uma picareta fina. A lógica por trás do uso desta técnica é a vantagem de evitar a necessidade de perfurar o osso temporal petroso, removendo assim o risco de ferir acidentalmente a dura dura e causar um vazamento de CSF, mitigando a possibilidade de ferir o canal semicircular posterior, e reduzindo o risco de lesão ao sinusino sigmoide.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Hidrops endoglicêmicos é um alargamento da mídia scala que é mais frequentemente associado à doença de Meniere, embora o mecanismo fisiophysiológico permaneça incerto. Para estudar adequadamente os atributos dos hidrops endoglifáticos, como as origens da perda auditiva de baixa frequência, é necessário um modelo confiável. A cobaia é um bom modelo porque ouve nas regiões de baixa frequência que são putativamente afetadas por hidrops endoglifáticos. Pesquisas anteriores demonstraram que hidrops endoglimáticos podem ser induzidos cirurgicamente através de abordagens intradural ou extradural que envolvem perfuração no ducto endoglifático e sac. No entanto, se era possível criar um modelo de hidrops endoglifático usando uma abordagem extradural que evitasse perfurações perigosas no ducto endoglifático e no saco era desconhecido. O objetivo deste estudo foi demonstrar uma abordagem extradural revisada para induzir hidrops endoglifáticos experimentais aos 30 dias pós-operatórios, obliterando o sac endoglifático e ferindo o ducto endoglimático com uma picareta fina. O tamanho da amostra consistia de sete cobaias. Foram feitas medições funcionais de audição e posteriormente colhidas ossos temporais para análise histológica. A abordagem teve uma taxa de sucesso de 86% na obtenção de hidrops endoglifáticos. O risco de vazamento de fluido cefalorraquidiano era mínimo. Não ocorreram óbitos ou lesões perioperatórias no canal semicircular posterior. O método apresentado demonstra uma maneira segura e confiável de induzir hidrops endoglifáticos em um ponto de tempo relativamente rápido de 30 dias. As implicações clínicas são que o método apresentado fornece um modelo confiável para explorar ainda mais as origens da perda auditiva de baixa frequência que podem ser associadas a hidrops endolímfas.

O método apresentado utilizou uma abordagem extradural para obliterar o sac endoglifático e ferir o ducto endolímfa com uma picareta fina em sete cobaias composta por dois machos e cinco fêmeas. A duração média da cirurgia foi de 2 horas, da incisão ao fechamento. O tempo total da broca variou de 5 a 10 minutos. Até 4 horas era necessário para que a cobaia emergisse totalmente da anestesia. Não houve mortes intraoperatórias ou pós-operatórias na amostra. Não houve ferimento...

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A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Este artigo demonstra uma abordagem extradural para obliterar o saco endoglifático da cobaia e ferir o ducto endoglicêtico com uma picareta fina, a fim de induzir hidrops endolímfaticos experimentais.

Uma abordagem cirúrgica revisada para induzir hidrops endoglicêsticos na Cobaia

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Usando este procedimento, hidrops endoglifáticos podem ser induzidos relativamente rapidamente em cobaias com uma taxa de sucesso adequada. A principal vantagem desta técnica é que hidrops endoglifáticos podem ser induzidos com risco mínimo de vazamento de CSF ou lesão no canal semicircular posterior. Depois de confirmar a falta de resposta ao reflexo do pedal, injete um bolus de fluido subcutâneo de 12 mililitros da solução de Ringer lactado na parte de trás da cobaia anestesiada e coloque o cobaia na posição supina em uma almofada de aquecimento.Coloque uma agulha de borboleta de calibre 27,5 intraperitoneal confirmando uma colocação correta pela presença de ar apenas dentro da ponta da agulha e coloque o cobaia na posição propensa. Fixar a cabeça em um suporte estereotático e fixar um oxímetro de pulso em um pé não espigmentado. Use uma sonda retal e uma manta de aquecimento para manter a temperatura corporal a 38 graus Celsius e aplique pomada nos olhos do animal.Coloque um pedaço de fita adesiva sobre a parte de trás para fornecer tensão adequada ao longo da pele sobreposta ao occiput e fixar as extremidades da fita ao suporte estereotático. Em seguida, prepare liberalmente a pele sobreposta sobre o occiput e o pescoço posterior com três esfregões consecutivos de iodo e 70% de álcool e coloque uma cortina estéril sobre o animal. Inicie o procedimento cirúrgico usando uma lâmina número 15 para fazer uma pequena incisão de linha média ao longo da occiput posterior estendendo-se até o pescoço posterior.Uma vez sob a pele, use a tesoura de íris para desprender os músculos cervicais posteriores direito do osso occipital, controlando qualquer sangramento com pressão de uma bola de algodão estéril. Usando um microscópio dissecando e uma combinação de um número três, dois e um milímetro de rebarbas de diamante com uma sucção 5-0 e irrigação estéril, realize uma craniectomia que é limitada até a crista occipital externa lateralmente, a cordilheira lambdoidal superiormente, a linha de sutura occipitomastóida medialmente, e a margem dorsal do foramen magnum inferiormente. E use uma rebarba de diamante de 0,5 milímetros para esqueleto do sinusino sigmoide.Coloque suavemente um pequeno pedaço de algodão salino umedecido sob o osso enquanto separa o osso occipital da dura. Remova cuidadosamente o osso sobreobre o seio e use uma bola de algodão para retrair suavemente o sinusino sigmoide mediadamente. Retraia cuidadosamente o sinuso sigmoide e identifique o operculum como uma estrutura semelhante à fenda localizada dentro do osso temporal petroso.A porção extraóssea do sac endolífa pode ser visualizada como uma conexão clara entre o operculum e a dura sobreposta ao sinusino sigmoide. Aplique uma leve retração medial ao seio sigmoide para visualizar claramente a porção extraósma do sac endolífa e aumentar a tensão entre as porções extraósias e intraósseas do saco. Usando uma picareta em ângulo fino, expurgue suavemente a porção intermediária do saco endogliático e raspe amplamente uma picareta fina dentro do operculum ao longo do interior do osso.É fundamental para o sucesso deste procedimento que nenhuma conexão visível entre a dura dura e o operculum permaneça. Use uma pequena curette para raspar ao longo do osso temporal para obter lascas ósseas e generosamente embalar o operculum com os lascas ósseas. Sele o operículo com cera óssea tomando cuidado para que não haja excesso de cera desalojada no crânio e use cera óssea para cobrir o defeito de craniectomia.Em seguida, aproxime-se dos músculos cervicais posteriores com suturas absorvíveis trançadas 4-0 de forma interrompida e realize um fechamento de duas camadas aproximando a camada profunda com suturas simples interrompidas e a camada epidérmica usando um fechamento subcuticular com uma sutura absorvível trançada 4-0. Neste experimento representativo, a análise histológica dos ossos temporais revelou hidrops endolímpicos em toda a cóclea direita em comparação com a cóclea esquerda em seis dos sete cobaias. A quantificação da área transversal da mídia scala em cada curva indicou que a área transversal era geralmente maior nos ouvidos dos animais que sobreviveram 30 dias após a obliteração do sac endoglicêtico em comparação com o observado em animais de controle.Os limiares de forma de onda sobrepostos ao nervo auditivo foram aumentados em animais com hidrops endoglifáticos demonstrando a presença de perda auditiva de baixa frequência, enquanto a maioria dos limiares potenciais de ação composto coclear de alta frequência entre oito e 20 quilohertz estavam dentro da faixa normal. Se a área entre a dura e o operculum estiver seca depois de expurgar o saco, tente colocar retração adicional no seio sigmoide para ter certeza de que não há conexão visível entre ele e o operculum. Após esse procedimento, estudos adicionais sobre anatomia coclear e fisiologia podem ser realizados para abordar questões importantes de pesquisa sobre hidrops endoglifáticos.

Research

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Neurociência

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Usando uma abordagem comparativa de espécies para investigar o Neurobiology of Responses Paternal

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Rápido Micro-iontoforese de glutamato e GABA: uma ferramenta útil para investigar Integração Synaptic

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Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

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A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

Uma abordagem benchtop para a abertura da barreira cerebral de sangue específica do local usando ultrassom focado em um modelo de rato

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Combinando Comportamento e EEG para Estudar os Efeitos da Meditação Mindfulness na Memória Episódica

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Extração e Dissecção do Cérebro de Suínos Domesticados

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Pré-quiasmática, injeção única de sangue autólogo para induzir hemorragia subaracnóidea experimental em modelo de rato

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...