Name: a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig
Uploaded: 2020-06-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

Vi tackar Shannon M. Lefler för hjälp med siffror och tabellen över material. Forskning som rapporterats i denna publikation stöddes av National Institute of Deafness and Other Communication Disorders inom National Institutes of Health, genom "Development of Clinician / Researchers in Academic ENT" utbildningsbidrag, tilldelning nummer T32DC000022 (C.V.V.) och av R01 DC014997 (J.T.L). Innehållet är enbart författarnas ansvar och representerar inte nödvändigtvis de officiella åsikterna hos National Institutes of Health.

Alla förfaranden som anges omedelbart nedan i protokollet avsnitt genomfördes som beskrivs i protokoll som godkänts av Washington University i St Louis Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Bedövningsinduktion och övervakning av vitala tecken
OBS: Denna studie använde pigmenterade NIH-stam marsvin som erhållits från en in-house avel koloni.
<ol><li>Använd marsvin av båda könen och väger minst 350 g.</li>
	<li>Placera marsvine...

<ol>
	<li>Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+Hydrops+in+the+Inner+Ear+of+the+Guinea+Pig+after+Obliteration+of+the+Endolymphatic+Sac.">Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac.</a> Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).</li><li>Salt, A. N., DeMott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+endolymph+volume+increase+in+experimental+hydrops+measured+in+vivo+with+an+ionic+volume+marker.">Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker.</a> Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).</li><li>Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+craniotomy+and+cerebrospinal+fluid+loss+on+the+inner+ear.+An+experimental+study.">Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study.</a> Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).</li><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).</li><li>Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+occipital+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+cochlear+aqueduct+of+the+guinea+pig.">Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig.</a> American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).</li><li>Megerian, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+induction+of+endolymphatic+hydrops+by+obliteration+of+the+endolymphatic+duct.">Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).</li><li>Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+auditory+threshold+estimation+technique+for+low+frequencies:+proof+of+concept.">A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept.</a> Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+delivery+into+the+cochlear+apex:+Improved+control+to+sequentially+affect+finely+spaced+regions+along+the+entire+length+of+the+cochlear+spiral.">Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral.</a> Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+nerve+overlapped+waveform+(ANOW)+originates+in+the+cochlear+apex.">The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).</li><li>Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+administration+of+2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin+into+guinea+pig+cochleae:+Effects+on+physiological+and+histological+measurements.">Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements.</a> PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li></ol>

Den presenterade extradural metoden hade en framgång på 86% för att uppnå histologiskt bekräftade endolymphatic hydrops och lågfrekvent hörselnedsättning. Metoden uppnådde tillförlitligt histologiska bevis på endolymphatic hydrops av postoperativ dag 30, överensstämmer med tidigare studier som använde en intradural metod2. Metodens betydelse för befintliga metoder är att det inte krävs en GSR-läcka, vilket undanröjer en potentiell förvirrande variabel som har föreslagits för ...

Endolymphatic hydrops är en utvidgning av scala media. Förekomsten av endolymphatic hydrops kan mätas med hjälp av tvärsnittsområdet scala media. Det är tänkt att kliniska endolymphatic hydrops kan associeras med lågfrekventa sensorineural hörselnedsättning, såsom den som ses i Meniere sjukdom. Men ursprunget (s) av hörselnedsättningen är fortfarande oklart. För att på ett adekvat sätt studera ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning i samband med endolymphatic hydrops, en tillförlitlig modell behövs.
År 1965 beskrev Kimura och Schuknecht hur man inducerar endolymphatic hydrops i marsvin med hjälp av en intradural strategi1. Deras teknik inblandade med hjälp av en bakre hjärnskålen fossa strategi för att komma åt operculum och subarcuate fossa. Stegen innebar att incising dura, dra in lillhjärnan med en Ringer lösning indränkt bomullstuss, och borrning över endolymphatic trumman och den mellanliggande delen av endolymphatic säcken. Ben vax placerades sedan i operculum att skilja endolymphatic trumman från distala endolymphatic säcken. Kraniotomy defekten stängdes genom att placera absorberbara gelatin pulver (t.ex. Gelfoam) och reapproximating överliggande muskler. Histologic bevis på endolymphatic hydrops hittades konsekvent på postoperativa dagar 1, 3, 7, 14, 21 och 30, visar att intradural metoden var en tillförlitlig metod för att inducera histologically-bekräftade endolymphatic hydrops. Med samma intradural strategi som Kimura och Schuknecht, men med olika tidpunkter, Salt och DeMott bekräftade att scala media i andra sväng av snäckan var betydligt utvidgas på dag 4 och därefter2. Medan den faktiska sjukligheten att inducera en cerebrospinalvätska (CSF) läcka med Kimura och Schuknecht s intradural strategi rapporterades inte i den ursprungliga studien, förekomsten av en CSF läcka kan öka risken för hjärnhinneinflammation. Det har föreslagits att förlust av CSF kan leda till ett utflöde av perilymph, vilket resulterar i en samtidig tillfällig expansion av den endolymphatic volymen i marsvin3. En extradural strategi för att inducera endolymphatic hydrops skulle vara ett säkrare alternativ.
I 1989, Andrews och Bohmer beskrev två extradural kirurgiska metoder för att nå endolymphatic säcken och kanalen, via antingen en mellersta hjärnskålen fossa strategi eller bakre hjärnskålen fossa strategi, att utplåna endolymphatic sac4. De beskrev att ta bort operculum med en diamant borr, och sedan antingen borra bort den mellanliggande delen av endolymphatic säcken eller använda en fin plocka för att störa endolymphatic säcken och trumman. I 1993, Lee, Wright, och Meyerhoff beskrev ett liknande tillvägagångssätt, som inkluderade borrning genom den endolymphatic säcken och kanalen, men skilde sig i att de också samtidigt blockerade cochlear akvedukten5. De visade förekomsten av endolymphatic hydrops, som bedöms via histologi, vid fyra veckor efter utplåna endolymphatic säcken och hindrar cochlear akvedukten. Megerian et al. var den första att publicera en video artikel som visar en extradural obliteration av endolymphatic säcken och kanal som innebar borrning direkt på den mediala delen av operculum att gå in i endolymphatic säcken och kanal6. De visade histologic bevis på endolymphatic hydrops i ett marsvin offras vid 28 veckor efter operationen, samt hörselnedsättning i 16 kHz region6. Huruvida det var möjligt att inducera histologiskt bekräftade endolymphatic hydrops och lågfrekvent hörselnedsättning vid en tidig tidpunkt med extradural metoder var okänd.
Det övergripande målet med denna rapport är att visa en extradural strategi för att inducera experimentella endolymphatic hydrops på 30 dagar postoperativt genom att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka. Logiken bakom användningen av denna teknik är fördelen med att undvika behovet av att borra på petrous tinningben, vilket tar bort risken för att oavsiktligt skada dura och orsakar en CSF läcka, mildra möjligheten att skada den bakre halvcirkelformade kanalen, och minska risken för skador på sigmoid sinus.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 mL syringe</td>
			<td>Henke-Sass Wolf</td>
			<td>5100-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL and 3 mL syringe</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td>14-826-87 15859152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27.5 butterfly gauge needle</td>
			<td>Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson)</td>
			<td>448407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1034507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 gauze sponges</td>
			<td>Dukal (Ordered form McKesson)</td>
			<td>374454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mL syringe</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>22-031-375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anspach otologic drill</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>SC2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atipamezole</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>107204-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Fisher sci</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-isotemp-general-purpose-heating-drying-ovens/151030508">15-103-0508</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave bags</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>524881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bayonet separator</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AL 130564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bupivicaine</td>
			<td>auro Medics Pharma</td>
			<td>555150-169-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear sterile drape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td>Fisherbrand (ordered from Fisher Sci)</td>
			<td>22-456-885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>508716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaper pad</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>945330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable 15 blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrofloxacin</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-4888-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epinephrine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td><a href="https://www.findacode.com/code.php?set=NDC&amp;c=63739-0456">63739-0456</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra Vet Products</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freer elevator</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>215100FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Pfizer (Ordered from McKesson)</td>
			<td>82830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair trimmers</td>
			<td>Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon)</td>
			<td>078400-020-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine scrub</td>
			<td>Purdue Pharma (ordered from mcKesson)</td>
			<td>521243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iris scissors</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CL-542114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>55853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lactated ringers</td>
			<td>B. Braun Medical (ordered from McKesson)</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lancet knife by Rosen</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>151100FX</td>
			<td>referred to as curette in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lubricant</td>
			<td>Milex (ordered from Cooper Surgical)</td>
			<td>MX5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>masking tape</td>
			<td>3M (ordered from fisher sci</td>
			<td>19047259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metal rectangle basin</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07NQDBC6T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>CR 213015-ENT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needles: 27 gage, 18 gauge</td>
			<td>BD Precision(Ordered from Fischer Sci)</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-precisionglide-hypodermic-needles-20/1482648">14-826-48 14-826-5D</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neonatal warming isollete</td>
			<td>Air Borne Life Support Systems</td>
			<td>731-1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>OPMI pico</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen tank</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse ox</td>
			<td>CapnoTrue (Ordered from Medacx)</td>
			<td>M-3090112001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rectal probe with heating blanket</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>red body holder</td>
			<td>Lichtenhan Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>right angle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BV-230337</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rosen needle</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>AM-130566</td>
			<td>customized, it is the instrument I use to tear the sac</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tubing for O2 administration</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>14-171-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saran wrap</td>
			<td>Fisher Sci</td>
			<td>NC9617977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotactic head holder</td>
			<td>WUSTL Instrument Machine Shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>In-house product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sterile drapes</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>7553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>suction tube by Baron</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>034903FX 034905FX</td>
			<td>#3 and #5 Suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue forceps adson brown</td>
			<td>Grace Medical</td>
			<td>325112FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlander retractor</td>
			<td>Olympus Grace Medical</td>
			<td>BL200011 100313FX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised surgical approach to induce endolymphatic hydrops in the guinea pig

Endolymphatic hydrops är en utvidgning av scala media som oftast förknippas med Menieres sjukdom, även om pathophysiologic mekanismen (s) fortfarande oklart. För att på lämpligt sätt studera attributen för endolymphatic hydrops, såsom ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning, behövs en tillförlitlig modell. Marsvinet är en bra modell eftersom det hör i lågfrekventa regioner som är förmodat påverkas av endolymphatic hydrops. Tidigare forskning har visat att endolymphatic hydrops kan induceras kirurgiskt via intradural eller extradural metoder som innebär borrning på endolymphatic trumman och säcken. Men om det var möjligt att skapa en endolymphatic hydrops modell med hjälp av en extradural strategi som undvek farliga borrning på endolymphatic trumman och säcken var okänd. Syftet med denna studie var att visa en reviderad extradural strategi för att inducera experimentella endolymphatic hydrops vid 30 dagar postoperativt genom att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka. Urvalet storlek bestod av sju marsvin. Funktionella mätningar av förhandlingen gjordes och tidsmässiga ben skördades därefter för histologic analys. Tillvägagångssättet hade en framgång på 86% för att uppnå endolymphatic hydrops. Risken för ryggmärgsvätska läcka var minimal. Inga perioperative dödsfall eller skador på den bakre halvcirkelformade kanalen inträffade i provet. Den presenterade metoden visar ett säkert och tillförlitligt sätt att inducera endolymphatic hydrops vid en relativt snabb tidpunkt på 30 dagar. De kliniska konsekvenserna är att den presenterade metoden ger en tillförlitlig modell för att ytterligare utforska ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning som kan associeras endolymphatic hydrops.

Den presenterade metoden används en extradural strategi för att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka i sju marsvin bestående av två hanar och fem honor. Den genomsnittliga varaktigheten av kirurgi var 2 timmar från snitt till stängning. Den totala borrtiden varierade från 5-10 minuter. Upp till 4 timmar behövdes för marsvinet att helt komma ut ur anestesi. Det fanns inga intraoperativa eller postoperativa dödsfall i provet. det fanns i...

Watch this Scientific Journal Video about A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig at JoVE.com

A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig

Denna artikel visar en extradural strategi för att utplåna marsvin endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka för att inducera experimentella endolymphatic hydrops.

En reviderad kirurgisk metod för att inducera endolymphatic hydrops i marsvin

Endolymphatic hydrops is an enlargement of scala media that is most often associated with Meniere&#39;s disease, though the pathophysiologic mechanism(s) ...

Med hjälp av detta förfarande, endolymphatic hydrops kan induceras relativt snabbt i marsvin med en tillräcklig framgång. Den största fördelen med denna teknik är att endolymphatic hydrops kan induceras med minimal risk för CSF läcka eller skada på den bakre halvcirkelformade kanalen. Efter att ha bekräftat en brist på svar på pedal reflex, injicera en 12 milliliter subkutan flytande bolus av laktat Ringers lösning i baksidan av den sövda marsvin och placera marsvin i ryggläge på en värmande pad.Placera en 27,5 gauge butterfly needle intraperitoneally bekräftar en korrekt placering genom förekomsten av luft endast inom nålspetsen och placera marsvin i benäget läge. Säkra huvudet i en stereotaktisk hållare och fäst en pulsoximeter på en opigmenterad fot. Använd en rektalsond och en värmande filt för att upprätthålla kroppstemperaturen vid 38 grader Celsius och applicera salva på djurets ögon.Placera en bit maskeringstejp över ryggen för att ge tillräcklig spänning längs huden överlydande occiput och fixera tejpens ändar till stereotaktisk hållare. Sedan frikostigt prep huden överlydning occiput och bakre hals med tre på varandra följande jod scrubs och 70%alkohol och placera en steril drapera över djuret. Börja det kirurgiska ingreppet genom att använda ett tal 15 blad för att göra en liten mittlinjen snitt längs den bakre occiput sträcker sig ner till den bakre halsen.En gång under huden, använd iris sax för att lossa rätt bakre livmoderhalscancer muskler från occipital ben, kontrollera någon blödning med tryck från en steril bomullstuss. Med hjälp av en dissekera mikroskop och en kombination av ett nummer tre, två, och en millimeter diamant grader med en 5-0 sug och steril bevattning, utföra en craniectomy som avgränsas så långt som den externa occipital krönet i laterled, lambdoidal åsen superiorly, occipitomastoid suture linje mediala, och dorsal marginalen av foramen sämre magnumly. Och använd en 0,5 millimeter diamant burr att skeletonize sigmoid sinus.Placera försiktigt en liten bit saltlösning fuktad bomull under benet samtidigt som occipital ben från dura. Försiktigt bort benet överlydande sinus och använda en bomullstuss för att försiktigt dra in sigmoid sinus mediala. Dra försiktigt tillbaka sigmoid sinus och identifiera operculum som en slit-liknande struktur som ligger inom petrous tinningben.Den extraosseous delen av endolymphatic säcken kan visualiseras som en tydlig sac-liknande samband mellan operculum och dura överliggande sigmoid sinus. Applicera mild medial upprullning på den sigmoid sinusen för att tydligt visualisera den ovidkommande delen av den endolymfatiska säcken och öka spänningen mellan de ovidkommande och intraosseous delarna av säcken. Med hjälp av en fin vinklad plocka, försiktigt utplåna den mellanliggande delen av endolymphatic säcken och i stort sett skrapa en fin plocka inuti operculum längs insidan av benet.Det är avgörande för framgången med detta förfarande att ingen synlig koppling mellan dura och operculum kvar. Använd en liten curette för att skrapa längs tinningbenet för att få benspån och generöst packa operculum med benchipsen. Försegla operculum med ben vax var noga med att det inte finns något överskott vax rubbas i skallen och använda ben vax för att täcka craniectomy defekten.Sedan approximera de bakre livmoderhalscancer muskler med 4-0 flätade absorberbara suturer i en avbruten mode och utföra en två-lagers stängning genom approximera det djupa lagret med enkla avbrutna suturer och det epidermala lagret med hjälp av en subkuulär stängning med en 4-0 flätad absorberas sutur. I detta representativa experiment, histologic analys av de tidsmässiga ben visade endolymphatic hydrops hela den högra cochlea jämfört med den vänstra cochlea i sex av sju marsvin. Kvantifiering av tvärsnittsområdet för scala media över varje tur anges att tvärsnittsytan var i allmänhet större i öronen på djur som överlevde 30 dagar efter utplåningen av endolymphatic säcken jämfört med den som observerats i kontroll djur.Auditiv nerv överlappade vågform tröskelvärden ökades i djur med endolymphatic hydrops visar förekomsten av lågfrekventa hörselnedsättning medan de flesta högfrekventa cochlear sammansatta åtgärder potentiella tröskelvärden mellan åtta och 20 kilohertz var inom det normala intervallet. Om området mellan dura och operculum är torrt efter expunging säcken, försök att placera ytterligare upprullning på sigmoid sinus att se till att det inte finns någon synlig koppling mellan den och operculum. Efter detta förfarande kan ytterligare studier på cochlear anatomi och fysiologi utföras för att ta itu med viktiga forskningsfrågor om endolymphatic hydrops.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Rapid Approach to High-Resolution Fluorescence Imaging in Semi-Thick Brain Slices

En snabb metod för högupplöst fluorescens avbildning i semi-Tjock hjärnan skivor

A fundamental goal to both basic and clinical neuroscience is to better understand the identities, molecular makeup, and patterns of connectivity that are ...

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

Med hjälp av en jämförande Arter metoden för att undersöka neurobiologi av Paternal svar

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Snabb Micro-iontophoresis av glutamat och GABA: Ett användbart verktyg för att undersöka Synaptic Integration

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

En ny metod som eliminerar Hantering för att studera aggression och &quot;förlorare&quot; Effect i<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

Ett enkelt sätt att framkalla experimentella autoimmuna neurit i C57BL/6 möss för funktionella och neuropatologiska bedömningar

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

En alternativ metod att studera primära händelser i Neurodegeneration använder Ex Vivo råtta hjärnan skivor

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En bänktop till den platsspecifika blodhjärnbarriäröppningen med fokuserat ultraljud i en råttmodell

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Kombinera beteende och EEG för att studera effekterna av mindfulnessmeditation på episodiskt minne

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Extraktion och dissekering av den domesticerade grishjärnan

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Pre-chiasmatisk, enstaka injektion av autologt blod för att inducera experimentell subaraknoidalblödning i en råttmodell

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...